一种从肉苁蓉中制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法

一种从肉苁蓉中制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法
【专利摘要】本发明涉及一种从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法，包括如下步骤：采用乙醇水溶液提取肉苁蓉中的单糖、低聚糖及苯乙醇苷，然后大孔吸附树脂柱分离苯乙醇苷类和糖类，洗脱得到的苯乙醇苷溶液经浓缩干燥成产品，糖类经减压浓缩，常温析晶，分离低聚糖类和甘露醇，甘露醇重结晶得高纯度甘露醇，离心清液为低聚糖浆。残渣采用纯水提取多糖，醇沉收集多糖。本发明提高了肉苁蓉资源的综合利用率，简化了生产工艺，一次性开发苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆和多糖等4种产品，增加了肉苁蓉产品的经济附加值，具有良好的工业化生产及市场开发前景。
【专利说明】一种从肉苁蓉中制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法

【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法，属于生化分离【技术领域】。

【背景技术】
[0002]肉灰蓉是一种属于列当科(Orobanchaceae)肉灰蓉属(Cistanche Hoffmg.etLink)的多年生植物，专性寄生于梭梭类植物的根部，全世界约有22种。中国境内共有4种I变种，主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海以及新疆等地。肉苁蓉长久以来作为一类名贵中药，又名大芸、甜大芸、苁蓉、甜苁蓉、地精等，始载于《神农本草经》，历代药书对其均有详尽记载，被列为上品药材，具有温补肾阳、益精血、润肠通便的功效，在临床上广泛使用于肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力和肠燥便秘。我国内蒙古西部为主产区的荒漠肉苁蓉及管花肉苁蓉为中药肉苁蓉正品。
[0003]肉苁蓉的化学成分非常复杂，最主要为糖类和苯乙醇苷类。糖类有不同聚合度的多糖、寡糖，以及不同的单糖和双糖。到目前为止，发现了 50多种苯乙醇苷类物质，其中含量最多是松果菊苷和毛蕊花糖苷。除了糖类和苯乙醇苷外，还发现了 4种苯甲醇苷、I种苯丙醇、10多种环烯醚萜类成分、7种单萜类成分、6种苯丙烯酰寡糖类物质、6种木脂素和25种微量元素。
[0004]苯乙醇苷对神经细胞具有保护作用，通过动物实验初步推断，肉苁蓉中的苷类物质有改善记忆的作用。肉苁蓉主要提取物苯乙醇苷类物质，具有抗疲劳活性，保护肝组织的作用，以及抗骨质疏松、消炎止疼作用及改善视力的功能，增强心肌活力的功能；肉苁蓉可以改善生育能力，多数人认为是苷类物质起作用。苯乙醇苷中的松果菊苷可以促进肠道上皮细胞增殖，阻止细胞凋亡。松果菊苷具有血管舒张作用，松果菊苷还具有延缓衰老作用。
[0005]肉苁蓉多糖及寡糖类具有提高免疫力、润肠通便和治疗2型糖尿病等功效。
[0006]甘露醇是国家基本药物，收录于《中国药典》。甘露醇的性质相对稳定，不易被空气中的氧所氧化，对稀酸、稀碱及热的稳定性好。甘露醇在人体内代谢途径与体内胰岛素不相关，不适合作为口腔微生物的营养源，因而不致龋齿，故而甘露醇广泛用于食品行业、医药行业。甘露醇可作为渗透性利尿药和脱水药，其注射液可用于降低颅内压、眼内压，利尿及防治早期急性肾功能不全，还可与氨基酸配制成复合输液用于醒酒药、口中清凉剂等咀嚼片及糖尿病患者、肥胖者以及防龋齿的甜味剂，同时还可进一步深加工合成药用衍生物等。目前国内甘露醇的供应量与需要量之间还存在较大差距。
[0007]在以肉苁蓉为原料制备苯乙醇苷和多糖的过程中，含量丰富的甘露醇经常因难以得到纯品无法回收利用，寡糖也因难以制成干品丢弃。


【发明内容】

[0008]针对已有技术中存在的问题，本发明目的在于提供一种从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法，所述方法实现了肉苁蓉资源的综合利用，提高了肉苁蓉的商品附加值，拓宽了肉苁蓉的应用领域。
[0009]为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案:
[0010]一种从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法，所述方法包括如下步骤:
[0011](I)取肉苁蓉干燥的肉质茎，粉碎，然后加乙醇溶液提取并进行浓缩，得到浓缩液I和残渣II，其中，浓缩液I中主要含有单糖、低聚糖及苯乙醇苷；
[0012](2)将步骤⑴得到的浓缩液加入到大孔吸附树脂柱中，首先以去离子水洗脱并收集水洗脱液，即为单糖以及低聚糖的溶液，浓缩得到浓缩液III，然后用乙醇洗脱并收集洗脱液IV，即为苯乙醇苷溶液；
[0013](3)将步骤⑵得到的浓缩液III在O?25°C之间静置，得到有结晶物析出的液体V，其中，结晶物主要为甘露醇，液流体为低聚糖浆；
[0014](4)将有结晶物析出的液体V固液分离，得到固体VI和上清液体VII，其中，固体VI主要为低纯度甘露醇，上清液体VII为低聚糖浆；
[0015](5)将残渣II用纯水提取多糖，固液分离，得到多糖溶液。
[0016]单糖和低聚糖及苯乙醇苷可以在乙醇溶液中溶出，而多糖则需要在纯水中溶出。利用这一特点，可先后将肉苁蓉中的单糖和低聚糖及苯乙醇苷与肉苁蓉中的多糖分开提取出来；单糖及低聚类与苯乙醇苷在大孔吸附树脂中吸附特性不同，通过这一特点，可用层析法分开苯乙醇苷和肉苁蓉单糖及低聚类。单糖及低聚糖中，甘露醇含量较高，甘露醇溶解度随着溶液中水活度的变化而有较大的变化。利用这一特点，可以通过改变溶液中水的活度使甘露醇结晶析出，然后用固液分离的方式使低聚糖浆和粗甘露醇分离开来，再通过重结晶制备高纯度甘露醇。该方法一次性制备肉苁蓉中苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖4种产品，工艺简单，所需设备为常规设备，试剂仅用乙醇，可操作性强，降低了肉苁蓉生产成本，缩短了生产周期，提高了肉苁蓉中主要成分的利用率，增加了肉苁蓉的商品附加值，拓宽了肉苁蓉利用领域。
[0017]优选地，所述肉苁蓉为荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉、白花肉苁蓉或沙苁蓉的肉质茎中的一种或至少两种的组合。
[0018]优选地，步骤(I)为加乙醇溶液提取，然后固液分离，并将清液合并，再减压浓缩并干燥残渣，得到浓缩液I和残渣II。
[0019]优选地，步骤⑴中肉苁蓉粉碎度为10?60目。
[0020]优选地，步骤(I)的乙醇溶液为乙醇含量为20?70%的乙醇溶液，优选为乙醇含量为40?60%的乙醇溶液，进一步优选乙醇含量为50%的乙醇溶液。乙醇含量例如为25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%或65%。该乙醇含量是指乙醇的质量占乙醇溶液的体积百分比。
[0021]优选地，步骤(I)乙醇溶液与肉苁蓉的液固比为8:1?40:1，例如10:1、14: 1、18:1、22:1、26:1、30:1、34:1 或 38:1，优选 10:1 ?20:1，进一步优选 15:1。
[0022]优选地，步骤(I)提取温度为20?801:，例如251:、301:、351:、401:、451:、501:、55°C、60°C、65°C、70°C或 75°C，优选 30 ?70°C，进一步优选 55°C。
[0023]优选地，步骤(I)提取时间为30 ?180min,例如 40min、50min、60min、70min、80min、90min、lOOmin、llOmin、120min、130min、140min、150min、160min 或 170min,优选90 ?120min,进一步优选 lOOmin。
[0024]优选地，步骤(I)提取方式为常规加热搅拌提取或者超声强化提取。
[0025]优选地，超声强化提取条件为:功率100?1000W，例如200W、300W、400W、500W、600W、700W、800W或900W，优选200-500W，进一步优选300W，提取次数为I?3次。
[0026]优选地，步骤⑵大孔吸附树脂为非极性或者弱极性的大孔吸附树脂，优选AB-8、DA-201、HPD-700、HPD-722、HPD-300、HPD-200A、HPD-200B 或 HPD-100 中的任意一种，进一步优选HPD-300。
[0027]优选地，大孔吸附树脂柱层析介质的高径比为5:1?8:1，例如5.3:1、5.6:1、5.9:1,6.2:1,6.5:1,6.8:1,7.1:1,7.4:1 或 7.7:1，上样体积为 I ?2 倍柱体积，例如 1.1倍、1.2 倍、1.3 倍、1.4 倍、1.5 倍、1.6 倍、1.7 倍、1.8 倍或 1.9 倍。
[0028]优选地，采用大孔吸附树脂柱进行层析分离过程中，单糖以及低聚糖的解吸过程采用2?10倍(例如3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍或9倍)柱体积的去离子水，流速控制在每小时0.2?1.5倍(例如0.3倍、0.5倍、0.7倍、0.9倍、1.1倍或1.3倍)柱体积。
[0029]优选地，采用大孔吸附树脂柱进行层析分离过程中苯乙醇苷类的解吸过程，采用2?6倍(例如2.3倍、2.6倍、2.9倍、3.2倍、3.5倍、3.8倍、4.1倍、4.5倍、5倍、5.4倍或5.8倍)柱体乙醇溶液，乙醇含量在20?70%之间，流速控制在每小时0.2?1.5倍(例如0.3倍、0.5倍、0.7倍、0.9倍、1.1倍或1.3倍)柱体积。所述乙醇含量是指乙醇的质量占乙醇溶液的体积百分比，例如为25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%或65%。
[0030]优选地，浓缩液III 的密度为 1.05 ?1.30kg/L,例如 1.08kg/L、l.llkg/L、1.14kg/L、1.17kg/L、1.20kg/L、1.23kg/L、1.26kg/L 或 1.29kg/L,优选 1.15 ?1.25Kg/L,进一步优选L 20Kg/L。
[0031]优选地，将步骤⑵得到的苯乙醇苷溶液浓减压浓缩，干燥，得到苯乙醇苷产品。
[0032]优选地，所述苯乙醇苷溶液减压浓缩的温度为40?80°C，例如42°C、45°C、48°C、52°C、56°C、60°C、64°C、68°C、72°C或 76 V，优选 50 ?70°C，进一步优选 55°C，浓缩真空度为 0.6 ?1.0MPa,例如 0.64MPa、0.68MPa、0.72MPa、0.76MPa、0.8MPa、0.84MPa、0.88MPa、
0.92MPa 或 0.96MPa。
[0033]步骤(3)在0?25°C静置，例如 l°C、4°C、7°C、10°C、13°C、16°C、19°C*22°CMtit地，步骤(3)在5°C静置。
[0034]优选地，步骤(3)静置时间为I?7天，例如1.5天、2天、2.5天、3天、3.5天、4天、4.5天、5天、5.5天、6天或6.5天。
[0035]优选地，将步骤(4)得到的固体VI重结晶，得到高纯度甘露醇。
[0036]优选地，所述重结晶方法为:将固体VI溶解于乙醇溶液中，完全溶解后，降温结晶，固液分离，并将过滤得到的晶体用乙醇溶液洗涤，干燥，即得到高纯度甘露醇产品。
[0037]优选地，将固体VI溶解于乙醇溶液中，乙醇溶液的浓度为65?95%，例如68%、71%、74%、78%、82%、86%、90%或 94%，液固比为 10:1 ?50:1，例如 14:1、18:1、22: 1、26:1、30:1、34:1、38:1、42:1、46:1 或 49:1，溶解温度为 40 ?80。。，例如 44°C、48°C、52°C、56 V、60°C、64°C、68°C、72°C或76 V，溶解过程以50?150rpm的转速搅拌，选用低压头和高剪切力的搅拌器。
[0038]所述乙醇溶液的浓度指，乙醇的质量占乙醇溶液的体积百分比，例如68%、72%、76%、80%、84%、88% 或 92%。
[0039]优选地，待固体VI完全溶解后，以10?30rpm的转速慢速搅拌，以5?15°C /h的速率缓慢降温，待有结晶析出时，慢速搅拌并保温养晶30?150min(例如35min、40min、50min、70min、90min、IlOmin或130min)，然后以10?30rpm的转速慢速揽拌，并以5?
15。。/h(例如 6°C /h、7。。/h、8。。/h、9。。/h、l(TC /hUl°C /hU2°C /hU3°C /h 或 14。。/h)的降温速率继续降温至-5°C?5°C，然后静置养晶30?150min (例如35min、40min、50min、70min、90min、IlOmin 或 130min)，固液分离。
[0040]优选地，选用乙醇含量为75?95% (例如78%、81%、84%、87%、90%或93%的乙醇溶液洗涤，优选采用乙醇含量为85?90%的乙醇溶液洗涤I?3次。
[0041]所述乙醇含量为75?95%的乙醇溶液，是指乙醇的质量占乙醇溶液的体积百分比为75?95%的乙醇溶液。
[0042]优选地，步骤(5)为:将残渣II用纯水提取多糖，然后固液分离，并将清液合并以及减压浓缩，得浓缩液VIII ;然后将浓缩液VIII醇沉，固液分离，将得到的多糖固体用乙醇溶液洗涤，干燥，即得多糖产品。
[0043]优选地，所述提取方式为超声波辅助提取或者常规加热提取，液固比为5:1?20:1，例如 7:1、9: 1、11: 1、13: 1、15: 1、17:1 或 19:1，提取温度为 20 ?80。。，例如 25°C、30°C、35°〇、401:、451:、501:、551:、601:、651:、701:或751:，提取时间为1?1211，例如 2h、3h、4h、511、611、711、811、911、1011或1111，提取次数为 I ?3 次。
[0044]优选地，所述提取时间为2h。
[0045]优选地，采用乙醇溶液进行醇沉，乙醇浓度为50?90% (即，乙醇的质量占乙醇溶液的体积百分比为50?90% )，例如55%,60%,65%,70%,75%,80%,85%,醇沉时间为30 ?120min,例如 35min、40min、50min、70min、90min、llOmin。
[0046]优选地，醇沉后多糖与乙醇溶液固液分离，将得到的多糖固体采用乙醇含量(即乙醇的质量占乙醇溶液的体积百分比)为85?95%的乙醇溶液洗涤2?5遍，液固比为2:1?10:1，例如3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1或9:1，洗至洗涤液颜色为浅色或者无色。
[0047]优选地，固液分离采用过滤或者离心中的一种，过滤目数300?500目，离心转速为2000?5000rpm ;所述的干燥方式为真空加热干燥、真空冷冻干燥或自然风干中的一种；真空加热干燥的温度为40°C?80°C，优选50°C?70°C，更优选60°C，真空度为0.6?
1.0MPa ;真空冷冻干燥的冷冻温度_50°C?0°C ;真空度为0.9?1.0MPa0
[0048]与已有技术相比，本发明具有如下有益效果:
[0049]首先，本发明所述方法可以同时制备出4种肉苁蓉主要产品:本发明所述方法通过大孔吸附树脂层析分离苯乙醇苷与肉苁蓉中单糖及低聚糖，生产纯度较高、品质较好的苯乙醇苷(其中松果菊苷含量在6.5%及以上，苯乙醇总苷含量在60%以上)；本工艺用水溶液中水的活度变化，制备出低纯度甘露醇(纯度在50%?80%之间)晶体，并生产肉苁蓉低聚糖浆；再通过乙醇温度变化，重结晶制备出高纯度甘露醇晶体(纯度在95%以上)，该方法比其它方法从天然产物获取甘露醇成本低，产品纯度高。
[0050]此外，本发明所述方法中多糖的提取原料为生产苯乙醇苷及单糖及低聚糖的残渣，原料利用率高，设备简单，方法易行，物耗低，且可回收重复利用。
[0051]而且，本发明制备4种产品的过程中，不使用任何有毒有害的试剂，因此产品安全。

【专利附图】

【附图说明】
[0052]图1是本发明的从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法的工艺流程图。

【具体实施方式】
[0053]下面结合附图并通过【具体实施方式】来进一步说明本发明的技术方案。
[0054]实施例1
[0055]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过40目筛，加入1.5m3的50%的乙醇溶液，55°C下超声波强化提取(超声功率为300W) 10min，提取I次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共340L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析介质体积170L，高径比8:1，以10倍柱体积去离子水洗脱，收集水洗脱液，流速为每小时1.5倍柱体积；然后6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.5倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0056]乙醇洗脱液55°C减压浓缩，浓缩真空度0.6MPa，浓缩液在60°C下真空干燥，干燥真空度0.6MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品5千克。
[0057]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L，5°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0058]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤3次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:l,50rpm的搅拌速度搅拌，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为15°C /h，待有晶体析出后。保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤5遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。风干，得甘露醇产品I千克。
[0059]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为常规加热搅拌提取，液固比为20:1，提取温度为80°C，提取时间为lh，提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体95%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品3千克。
[0060]实施例2
[0061]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过10目筛，加入2m3的70%的乙醇溶液，20°C下超声波强化提取(超声功率为3W/L)60min，提取I次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共340L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以10倍柱体积去离子水洗脱，收集水洗脱液，流速为每小时1.5倍柱体积，6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.5倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0062]乙醇洗脱液70°C减压浓缩，浓缩真空度0.6MPa，浓缩液在70°C下真空干燥，干燥真空度0.6MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4千克。
[0063]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.30Kg/L, 25°C温度下，静置7天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm,清出液体即为肉灰蓉低聚糖楽；。
[0064]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤3次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:l,50rpm的搅拌速度搅拌，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为15°C /h，待有晶体析出后。保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤5遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品I千克。
[0065]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20 提取温度为20°C,提取时间为2h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体95%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品1.5千克。
[0066]实施例3
[0067]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过60目筛，加入0.8m3的20%的乙醇溶液，20°C下超声波强化提取(超声功率为1000W)60min，提取3次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共170L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以10倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集水洗脱液，6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0068]乙醇洗脱液60°C减压浓缩，浓缩真空度0.7MPa ;浓缩液在60°C下真空加热干燥，干燥真空度0.7MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品5千克。
[0069]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.30Kg/L, 20°C温度下，静置7天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm,清出液体即为肉灰蓉低聚糖楽；。
[0070]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤3次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，并以150rpm的搅拌速度缓慢搅拌，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为15°C /h，待有晶体析出后。保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤3遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品1.1千克。
[0071]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20 提取温度为40°C,提取时间为2h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品2千克。
[0072]实施例4
[0073]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过40目筛，加入1.0m3的30%的乙醇溶液，30°C下超声波强化提取(超声功率为500W)30min，提取3次，提取液300目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共300L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积150L，高径比7:1，以8倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.2倍柱体积，收集水洗脱液，2倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0074]乙醇洗脱60°C减压浓缩，浓缩液在55°C下真空加热干燥，干燥真空度0.7MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品6千克。
[0075]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.15Kg/L，15°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm,清出液体即为肉灰蓉低聚糖楽；。
[0076]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤3次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为15°C/h，待有晶体析出后。保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，85%乙醇洗涤2遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品1.1千克。
[0077]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20:1，提取温度为80°C,提取时间为Ih,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为50%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为3:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品2.5千克。
[0078]实施例5
[0079]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过60目筛，加入1.2m3的40%的乙醇溶液，40°C下超声波强化提取(超声功率为500W)30min，提取3次，提取液300目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共260L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-200A柱中，层析柱介质体积130L，高径比6:1，以6倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时0.8倍柱体积，收集水洗脱液,4倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.8倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0080]乙醇洗脱50°C减压浓缩，浓缩液在50°C下真空加热干燥，干燥真空度0.8MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4.6千克。
[0081]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L, 20°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速3000rpm,清出液体即为肉灰蓉低聚糖楽；。
[0082]离心所得到的甘露醇固体用90%的乙醇溶液洗涤3次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C/h，待有晶体析出后。保温60min，并以20rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温60min，并以20rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤3遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品0.6千克。
[0083]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20 提取温度为20°C,提取时间为3h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.02Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为30min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品I千克。
[0084]实施例6
[0085]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过60目筛，加入1.5m3的50%的乙醇溶液，55°C下超声波强化提取(超声功率为200W)60min，提取2次，提取液300目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共200L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-200B层析柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以2倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集水洗脱液，6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.2倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0086]乙醇洗脱50°C减压浓缩，浓缩液在50°C下真空干燥，干燥真空度0.9MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4.5千克。
[0087]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.25Kg/L，15°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速3000rpm,清出液体即为肉灰蓉低聚糖楽；。
[0088]离心所得到的甘露醇固体用85%的乙醇溶液洗涤2次，然后在70°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到80%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为40:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为15°C/h，待有晶体析出后。保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤3遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品I千克。
[0089]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为15 提取温度为30°C,提取时间为Ih,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为30min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品I千克。
[0090]实施例7
[0091]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过60目筛，加入1.5m3的60%的乙醇溶液，70°C加热提取180min，提取2次，提取液300目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共150L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积110L，高径比5:1，以10倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.5倍柱体积，收集水洗脱液，2倍柱体积的60%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0092]乙醇洗脱40°C减压浓缩，浓缩液在40°C下真空干燥，干燥真空度1.0MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4.4千克。
[0093]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.25Kg/L，0°C温度下，静置I天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速4000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0094]离心所得到的甘露醇固体用85%的乙醇溶液洗涤2次，然后在60°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到75%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为30:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为5°C /h，待有晶体析出后。保温30min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以5°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温30min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌。300目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤2遍，乙醇质量为晶体质量的8倍。自然风干，得甘露醇产品I千克。
[0095]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为常规回加热提取，液固比为15 提取温度为80°C,提取时间为Ih,提取次数为I次。300目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.02Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为30min，醇沉后多糖300目滤布过滤，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤3遍，液固比为5:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品2千克。
[0096]实施例8
[0097]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过40目筛，加入1.8m3的70%的乙醇溶液，70°C加热提取90min，提取I次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共170L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂AB-8柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以2倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集水洗脱液，4倍柱体积的70%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.8倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0098]乙醇洗脱45°C减压浓缩，浓缩真空度1.0MPa0浓缩液在70°C下真空干燥，干燥真空度1.0MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4千克。
[0099]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.30Kg/L, 10°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm,清出液体即为肉灰蓉低聚糖楽；。
[0100]离心所得到的甘露醇固体用85%的乙醇溶液洗涤2次，然后在60°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到65%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为10:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为5°C /h，待有晶体析出后。保温180min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以5°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温180min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤2遍，乙醇质量为晶体质量的10倍。自然风干，得甘露醇产品0.9千克。
[0101]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为常规回加热提取，液固比为20:1,提取温度为80°C,提取时间为2h,提取次数为I次。离心分离,转速为2000rpm，清液减压浓缩到密度为1.02Kg/L，用浓度为80%乙醇醇沉，醇沉时间为60min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体用85%的乙醇溶液洗涤I遍，液固比为10:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品3千克。
[0102]实施例9
[0103]取荒漠肉苁蓉50kg，粉碎过40目筛，加入2.0m3的50%的乙醇溶液，80°C加热提取90min，提取I次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共170L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-722柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以2倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集水洗脱液,4倍柱体积的70%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.6倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0104]乙醇洗脱45°C减压浓缩，浓缩真空度1.0MPa，浓缩液在80°C下真空干燥，干燥真空度1.0MPa，干燥时间12h，即得苯乙醇苷产品4.5千克。
[0105]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.30Kg/L，5°C温度下，静置2天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0106]离心所得到的甘露醇固体用85%的乙醇溶液洗涤2次，然后在40°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到65%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为20:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温120min，并以20rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以5°C /h的速度缓慢降温，降至_5°C，保温120min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的10倍。自然风干，得甘露醇产品I千克。
[0107]取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为常规加热提取，液固比为5:1，提取温度为80°C，提取时间为2h，提取次数为3次。离心分离，离心转速5000rpm，清液减压浓缩到密度为1.05Kg/L，用浓度为50%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖离心分离，离心转速2000rpm，固体85%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空冷冻干燥即得多糖产品3千克。
[0108]实施例10
[0109]取荒漠肉苁蓉50kg，粉碎过40目筛，加入2.0m3的70%的乙醇溶液，70°C加热提取40min，提取3次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共110L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积110L，高径比5:1，以5倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集水洗脱液，2倍柱体积的70%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0110]乙醇洗脱80°C减压浓缩，浓缩真空度0.6MPa，浓缩液在70°C下真空干燥，干燥真空度1.0MPa0干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4千克。
[0111]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L，(TC温度下，静置2天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速3000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0112]离心所得到的甘露醇固体用75%的乙醇溶液洗涤I次，然后在60°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到75%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为30:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温90min，并以20rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以5°C /h的速度缓慢降温，降至0°C，保温90min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的8倍。自然风干，得甘露醇产品0.9千克。
[0113]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为常规加热提取，液固比为10:1，提取温度为80°C,提取时间为Ih,提取次数为2次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.03Kg/L，用浓度为75%乙醇醇沉，醇沉时间为90min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体85%的乙醇溶液洗涤2遍，液固比为5:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品2.8千克。
[0114]实施例11:
[0115]取荒漠肉苁蓉100kg，粉碎过40目筛，加入2.0m3的70%的乙醇溶液，70°C加热提取90min，提取2次，提取液300目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共300L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-100柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以2倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时0.8倍柱体积，收集水洗脱液，2倍柱体积的70%乙醇溶液洗脱，流速为每小时0.2倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0116]乙醇洗脱45°C减压浓缩，浓缩液在_20°C下真空冷冻干燥，干燥真空度1.0MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4千克。
[0117]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.05Kg/L，(TC温度下，静置7天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速2000rpm，清出液即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0118]离心所得到的甘露醇固体用85%的乙醇溶液洗涤2次，然后在60°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到85%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为40:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为15°C/h，待有晶体析出后。保温30min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温30min，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，95%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的8倍。自然风干，得甘露醇产品0.9千克。
[0119]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为常规加热提取，液固比为15 提取温度为60°C,提取时间为2h,提取次数为I次。300目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.02Kg/L，用浓度为85%乙醇醇沉，醇沉时间为60min，醇沉后多糖离心分离，离心转速为2000rpm，固体90%的乙醇溶液洗涤3遍，液固比为5:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空冷冻干燥即得多糖产品2.5千克。
[0120]实施例12
[0121]取管花肉苁蓉100kg，粉碎过20目筛，加入1.8m3的70%的乙醇溶液，70°C下超声波强化提取(超声功率为100W) 120min，提取I次，提取液300目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共300L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-722柱中，层析柱介质体积170L，高径比8:1，以10倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.5倍柱体积，收集水洗脱液，6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0122]乙醇洗脱70°C减压浓缩，浓缩真空度1.0MPa浓缩液在70°C下真空干燥，干燥真空度0.6MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4千克。
[0123]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.15Kg/L，0°C温度下，静置2天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速2000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0124]离心所得到的甘露醇固体用90%的乙醇溶液洗涤2次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，以150rpm的搅拌速度搅拌，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5?,保温150min,并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。离心分离，转速5000rpm,取晶体,90%乙醇洗涤2遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。冷冻干燥，得甘露醇产品0.9千克。
[0125]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20 提取温度为20°C,提取时间为1h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为40min，醇沉后多糖离心分离，离心转速5000rpm，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品I千克。
[0126]实施例13
[0127]取管花肉苁蓉100kg，粉碎过60目筛，加入0.8m3的70%的乙醇溶液，20°C下超声波强化提取(超声功率为1000) 30min，提取3次，提取液500目滤布过滤，滤液减压浓缩，得浓缩液I共200L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-700柱中，层析柱介质体积150L，高径比7:1，以6倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集水洗脱液,6倍柱体积的20%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0128]乙醇洗脱70°C减压浓缩，浓缩真空度0.9MPa。浓缩液在70°C下真空干燥，干燥真空度0.9MPa，干燥时间24h，即得苯乙醇苷产品4千克。
[0129]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.15Kg/L，5°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速2000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0130]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤2次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°c /h，待有晶体析出后。保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，85%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品I千克。
[0131]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20:1，提取温度为20°C,提取时间为12h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖500目滤布过滤，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空冷冻干燥即得多糖产品I千克。
[0132]实施例14
[0133]取管花肉苁蓉10kg，粉碎过60目筛，加入80L的70%的乙醇溶液，40°C下超声波强化提取(超声功率为500W) 30min,提取3次，提取液2000rpm的转速下离心分离，滤液减压浓缩，得浓缩液I共30L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂DA-201柱中，层析柱介质体积20L，高径比7:1，以6倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集水洗脱液，6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0134]乙醇洗脱70°C减压浓缩，浓缩真空度为1.0MPa，浓缩液在_50°C真空冷冻干燥，干燥真空度为1.0MPa,即得苯乙醇苷产品0.4千克。
[0135]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L，5°C温度下，静置3天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速5000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0136]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤2次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，85%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品0.09千克。
[0137]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20 提取温度为60°C,提取时间为2h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖离心，离心转速为3000rpm，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤5遍，液固比为2:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品0.25千克。
[0138]实施例15
[0139]取白花肉苁蓉lkg，粉碎过40目筛，加入20L的50%的乙醇溶液，60°C下超声波强化提取(超声功率为300W) 120min,提取I次，提取液5000rpm的转速下离心，滤液减压浓缩，得浓缩液I共3L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积2L，高径比8:1，以6倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集水洗脱液,6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0140]乙醇洗脱70°C减压浓缩，浓缩真空度为0.9MPa，浓缩液在_30°C真空冷冻干燥，真空度为0.9MPa，即得苯乙醇苷产品0.05千克。
[0141]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L，5°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速3000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0142]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤2次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到95%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为50:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至0°C，保温150min，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。2000rpm离心固液分离，取晶体，85%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。自然风干，得甘露醇产品0.009千克。
[0143]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为20 提取温度为60°C,提取时间为2h,提取次数为I次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为60%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖离心，离心转速为3000rpm，过滤固体90%的乙醇溶液洗涤2遍，液固比为8:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空加热干燥即得多糖产品0.05千克。
[0144]实施例16
[0145]取沙苁蓉lkg，粉碎过40目筛，加入20L的50%的乙醇溶液，60°C下超声波强化提取(超声功率为100W) 30min,提取3次，提取液5000rpm的转速下离心，滤液减压浓缩，得浓缩液I共3L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积2L，高径比8:1，以6倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集水洗脱液,6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.0倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0146]乙醇洗脱70°C减压浓缩，浓缩真空度为0.9MPa，浓缩液在-(TC真空冷冻干燥，真空度为1.0MPa,即得苯乙醇苷产品0.05千克。
[0147]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L，4°C温度下，静置2天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速4000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0148]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤2次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到85%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为40:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温lOOmin，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温lOOmin，并以30rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，85%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。真空加热干燥，得甘露醇产品0.009千克。
[0149]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为5:1，提取温度为80°C,提取时间为2h,提取次数为3次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖离心分离，离心转速5000rpm，固体90%的乙醇溶液洗涤2遍，液固比为8:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空冷冻干燥即得多糖产品0.025千克。
[0150]实施例17
[0151]取盐生肉苁蓉与管花肉苁蓉共lkg，混合粉碎过40目筛，加入20L的50%的乙醇溶液，60°C下超声波强化提取(超声功率为300W)30min，提取I次，提取液2000rpm的转速下离心，滤液减压浓缩，得浓缩液I共3L。其中，浓缩液I加到大孔吸附树脂HPD-300柱中，层析柱介质体积2L，高径比8:1，以6倍柱体积去离子水洗脱，流速为每小时1.5倍柱体积，收集水洗脱液，6倍柱体积的50 %乙醇溶液洗脱，流速为每小时1.5倍柱体积，收集洗脱液留用。
[0152]乙醇洗脱60°C减压浓缩，浓缩真空度为0.9MPa，浓缩液在0°C真空冷冻干燥，真空度为1.0MPa,即得苯乙醇苷产品0.05千克。
[0153]层析水洗脱液减压浓缩，至溶液密度为1.20Kg/L，0°C温度下，静置5天，将带有结晶颗粒的粘稠状液体离心，离心转速4000rpm，清出液体即为肉苁蓉低聚糖浆。
[0154]离心所得到的甘露醇固体用95%的乙醇溶液洗涤2次，然后在80°C的温度下，将洗涤过的甘露醇溶于到85%的乙醇溶液中，乙醇体积与甘露醇的液固比为40:1，待全部溶解后，溶液开始缓慢降温，降温速度为10°C /h，待有晶体析出后。保温lOOmin，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌，然后以15°C /h的速度缓慢降温，降至5°C，保温lOOmin，并以1rpm的搅拌速度缓慢搅拌。500目滤布过滤，取晶体，85%乙醇洗涤I遍，乙醇质量为晶体质量的5倍。真空加热干燥，得甘露醇产品0.009千克。
[0155]提取苯乙醇苷和单糖及低聚的残渣用纯化水提取多糖，提取方式为超声波辅助提取，液固比为5 提取温度为80°C,提取时间为5h,提取次数为2次。500目的滤布过滤，清液减压浓缩到密度为1.01Kg/L，用浓度为90%乙醇醇沉，醇沉时间为120min，醇沉后多糖离心分离，离心转速3000rpm，固体90%的乙醇溶液洗涤2遍，液固比为8:1，洗涤至洗涤液呈无色；所得固体真空冷冻干燥即得多糖产品0.03千克。
[0156] 申请人:声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属【技术领域】的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
【权利要求】
1.一种从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤: (1)取肉苁蓉干燥的肉质茎，粉碎，然后加乙醇溶液提取并进行浓缩，得到浓缩液I和残渣II，其中，浓缩液I中主要含有单糖、低聚糖及苯乙醇苷； (2)将步骤(I)得到的浓缩液加入到大孔吸附树脂柱中，首先以去离子水洗脱并收集水洗脱液，减压浓缩，得到浓缩液III，然后用乙醇洗脱并收集洗脱液IV，即为苯乙醇苷溶液； (3)将步骤(2)得到的浓缩液III在O?25°C静置，得到有结晶物析出的液体V，其中，结晶物主要为甘露醇，液流体为低聚糖浆； (4)将有结晶物析出的液体V固液分离，得到固体VI和上清液体VII，其中，固体VI主要为纯度为50%?80%的甘露醇，上清液VII为低聚糖浆； (5)将残渣II用纯水提取多糖，固液分离，得到多糖溶液。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肉苁蓉为荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉、白花肉苁蓉或沙苁蓉的肉质茎中的一种或至少两种的组合。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(I)为加乙醇溶液提取，然后固液分离，并将清液合并，再减压浓缩并干燥残渣，得到浓缩液I和残渣II ; 优选地，步骤(I)中肉苁蓉粉碎度为10?60目； 优选地，步骤(I)的乙醇溶液为乙醇含量为20?70%的乙醇溶液，优选为乙醇含量为.40?60%的乙醇溶液，进一步优选乙醇含量为50%的乙醇溶液； 优选地，步骤(I)乙醇溶液与肉苁蓉的液固比为8:1?40:1，优选10:1?20:1，进一步优选15:1。
4.如权利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，步骤(I)提取温度为20?80°C，优选30?70°C，进一步优选55°C ； 优选地，步骤(I)提取时间为30?180min,优选90?120min,进一步优选10min ； 优选地，步骤(I)提取方式为加热搅拌提取或者超声强化提取； 优选地，超声强化提取条件为:功率100?1000W，优选200?500W，进一步优选300W，提取次数为I?3次。
5.如权利要求1-4之一所述的方法，其特征在于，步骤(2)大孔吸附树脂为非极性或者弱极性的大孔吸附树脂，优选 AB-8、DA-201、HPD-700、HPD-722、HPD-300、HPD-200A、HPD-200B或HPD-100中的任意一种，进一步优选HPD-300 ； 优选地,大孔吸附树脂柱层析介质的高径比为5:1?8:1，上样体积为I?2倍柱体积； 优选地，采用大孔吸附树脂柱进行层析分离过程中，单糖以及低聚糖的解吸过程采用.2?10倍柱体积的去离子水，流速控制在每小时0.2?1.5倍柱体积； 优选地，采用大孔吸附树脂柱进行层析分离过程中苯乙醇苷类的解吸过程，采用2?6倍柱体乙醇溶液，乙醇含量为20?70%，流速控制在每小时0.2?1.5倍柱体积。
6.如权利要求1-5之一所述的方法，其特征在于，浓缩液III的密度为1.05?1.30kg/L，优选 1.15 ?1.25kg/L，进一步优选 1.20kg/L ； 优选地，将步骤(2)得到的苯乙醇苷溶液浓减压浓缩，干燥，得到苯乙醇苷产品； 优选地，所述苯乙醇苷溶液减压浓缩的温度为40?80°C，优选50?70°C，进一步优选.55°C，浓缩真空度为0.6?1.0MPa0
7.如权利要求1-6之一所述的方法，其特征在于，步骤(3)在5°C静置； 优选地，步骤(3)静置时间为I?7天。
8.如权利要求1-7之一所述的方法，其特征在于，将步骤(4)得到的固体VI重结晶，得到纯度在95 %以上的甘露醇。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述重结晶方法为:将固体VI溶解于乙醇溶液中，完全溶解后，降温结晶，固液分离，并将得到的晶体用乙醇溶液洗涤，干燥，即得到高纯度甘露醇； 优选地，将固体VI溶解于乙醇溶液中，乙醇溶液的浓度为65?95%，液固比为10:1?.50:1，溶解温度为40?80°C，溶解过程以50?150rpm的转速搅拌，选用低压头和高剪切力的搅拌器； 优选地，待固体VI完全溶解后，以10?30rpm的转速慢速搅拌，以5?15°C /h的降温速率降温，待有结晶析出时，慢速搅拌并保温养晶30?150min，然后以继续以10?30rpm的转速慢速搅拌，并以5?15°C /h的降温速率继续降温至_5°C?5°C，然后静置养晶30?.150min,固液分离； 优选地，选用乙醇含量为75?95%的乙醇溶液洗涤，优选采用乙醇含量为85?90%的乙醇溶液洗涤I?3次。
10.如权利要求1-9之一所述的方法，其特征在于，步骤(5)为:将残渣II用纯水提取多糖，然后固液分离，并将清液合并以及减压浓缩，得浓缩液VIII ;然后将浓缩液VIII醇沉，固液分离，将得到的多糖固体用乙醇溶液洗涤，干燥，即得多糖产品； 优选地，所述提取方式为超声波辅助提取或者加热提取，液固比为5:1?20:1，提取温度为20，?80°C，提取时间为I?12h，提取次数为I?3次； 优选地，所述提取时间为2h; 优选地，采用乙醇溶液进行醇沉，乙醇浓度为50?90%，醇沉时间为30?120min ； 优选地，醇沉后多糖与乙醇溶液固液分离，将得到的多糖固体采用乙醇含量为85?.95%的乙醇溶液洗涤2?5遍，液固比为2:1?10:1，洗至洗涤液颜色为浅色或者无色； 优选地，固液分离采用过滤或者离心中的一种，过滤目数300?500目，离心转速为.2000 ?5000rpm ； 优选地，所述的干燥方式为真空加热干燥、真空冷冻干燥或自然风干中的一种； 优选地，真空加热干燥的温度为40°C?80°C，优选50°C?70°C，进一步优选60°C，真空度为 0.6 ?1.0MPa ； 优选地，真空冷冻干燥的冷冻温度_50°C?0°C ;真空度为0.9?1.0MPa0
【文档编号】C07C31/26GK104262414SQ201410475360
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月17日 优先权日:2014年9月17日
【发明者】赵兵, 郭元亨, 赵庆生 申请人:中国科学院过程工程研究所