专利名称：：肉苁蓉总苷提取工艺及其制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及药物制剂领域，具体地说，涉及一种肉苁蓉有效成分(肉苁蓉总苷)的提取方法，还公开了该提取物制剂的制备方法。
背景技术：
：肉苁蓉，又名金笋、地精、习称大芸。主产于内蒙古、新疆、甘肃、宁夏等地。作为一种传统的补益中药，使用历史悠久，被历代药书所记载。始载于《神家本草经》，被列为上品，历代药书如《吴普本草》、《本草经集注》、《名医别录》、《图经本草》、《日华子本草》等对其都有记载。其味甘、咸、性温。有补肾阳、益精血、润燥滑肠之功效。肉苁蓉的活性成分主要包括苯乙醇苷、肉苁蓉多糖、甜菜碱、黄酮等物质，其中苯乙醇苷是其重要的活性成分之一。研究表明，苯乙醇苷具有以下几大药理作用。1.抗衰老和抗氧化作用。苯乙醇苷所含的酚羟基，是抗衰老和抗氧化的主要成分。肉苁蓉中的苯乙醇苷可清除体外氧自由基，对0H引起的DNA损伤有保护作用，能够缓解小鼠急性脑缺氧，对心肌损伤有保护作用。2.保护肝脏的作用。肉苁蓉中的麦角甾苷、2，-乙酰基麦角甾苷、异麦角甾苷和松果菊苷能显著抑制还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)-UTNAR诱导的肝细胞微粒体中的脂质过氧化，抑制细胞中的脂质过氧化，抑制细胞中天氨酸转氨酶释放并减轻肝细胞毒性；体内试验表明麦角甾苷能有效抑制丙氨酸转氨酶的释放，从而阻止其对肝脏的损害。3.保护心肌缺血的作用。采用结扎冠状动脉造成大鼠心肌缺血模型，研究了肉灰蓉中苯乙醇苷对缺血心肌的保护作用。结果表明它能提高小鼠缺血再灌注心肌SOD和硒谷胱甘肽过氧化酶的活性，降低了PLO含量，减轻心肌超微粒结构的损伤；明显改善心肌缺血大鼠的心电衅，减小心肌梗塞面积，提高心肌组织中的磷酸肌酸激酶省略，具有保护缺血心肌的作用。4.抗辐射作用。有报道，肉苁蓉射线照射后胸腺、脾、睾丸、生物膜及细胞器受到不同程度的损伤后的小鼠具有促进恢复作用，推断苯乙醇苷对受照小鼠敏感器官超微结构有保护作用，进一步研究发现盐生肉苁蓉中苯乙醇苷能明显促进受照射小鼠红细胞内S0D活性及脾脏中核酸含量的恢复，抑制肝脏LPO的形成，表明它的辐射防护作用与其防止自由基的损害和抗脂质过氧化作用也有必然联系。组织形态学也表明盐生肉苁蓉中苯乙醇苷可以使照射操作的肝脾组织结构得到恢复，并促进核酸的合成。5.增强性功能和调节神经系统的作用。肉苁蓉对人体神经内分泌系统的调节和控制中心——下丘脑的老化有调整作用，对阳虚患者有明显的强壮作用和治疗作用。苯乙醇苷能有效治疗因肾阳虚而导致的性功能障碍和健忘症。
发明内容本发明的目的是提供-种纯度高、工艺简单可行、适合工业化生产的肉苁蓉总苷的提取方法。采用本方法对活性成分进行提纯时，活性成分转移率高，有效成分损失少。本发明通过如下技术方案实现的。采用乙醇回流法提取，用有机溶剂进行萃取，用大孔树脂吸附层析法进行精制。其中，溶剂优选为乙酸乙酯和正丁醇。大孔树脂为DIOO，D3520,AB-8，优选为AB-8.提取工艺中优选提取条件为肉苁蓉粉碎后的粒度以20-60目为宜。提取温度为60度，乙醇浓为70%，料液比为1:11(g/ml)，时间为3.5h，提取次数为2次。提取工艺中大孔树脂吸附吸附时，先用水洗和10%乙酰洗脱后，直接选用40%乙醇作为洗脱液进行洗脱。优选工艺为粉碎成粗粉过40目筛，以70%的乙醇回流提取，提取液过滤后浓縮除去乙醇溶剂，至相对密度为1.10，制成浸膏后，加水悬浮，再加乙酰乙酯进行萃取。取水溶液层进行减压浓縮，再用正丁醇进行萃取，萃取液进行减压浓縮干燥，加少量水溶解，抽滤后，将滤液上大孔树脂，先以水洗和10%乙酰洗脱后，直接选用40%乙醇作为洗脱液进行洗脱。收集洗脱液，减压浓縮干燥得。同时，本发明还公开了利用该提取工艺提取的肉苁蓉总苷可制成片剂、胶囊、滴丸、分散片、泡腾片等制剂制备方法。下面结合具体实施方式进一步说明本发明。值得注意的是，实施例只用于说明本发明而不以任何方式限制本发明。实施例l:将肉苁蓉粉碎成粗粉过40目筛，以70%的乙醇回流提取，提取温度为60度，料液比为1:11(g/ml)，时间为3.5h，提取次数为2次。提取液减压浓縮除去乙醇溶剂，至相对密度为1.IO，制成浸膏后，加水溶解制成混悬液，加乙酰乙酯进行萃取。取水溶液层进行减压浓縮，再用正丁醇进行萃取，萃取液进行减压浓縮干燥，加少量水溶解，抽滤后，将滤液上大孔树脂，先以水洗和10%乙酰洗脱后，直接选用40%乙醇作为洗脱液进行洗脱。收集洗脱液，减压浓縮干燥得。利用本提取工艺获得的有益效果是1、肉苁蓉总苷得率高，得率5.63%。解析率为94.15%，洗脱峰窄，对称性好，无明显拖尾现象。2、提取工艺简单，有机溶剂成本低，易于工厂化提取。3、总苷中有效成分多。通过LC-MS对肉苁蓉总苷提取液分析，从中检测出6种苯乙醇苷类化合物，分别为松果菊苷、麦角甾苷、2，_乙酰基麦角甾苷、异麦角甾苷、管花苷A禾口OsmanthusideB。实施例2:肉苁蓉总苷片处方4<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>制备方法将肉苁蓉总苷、维晶纤维素分别过80目筛，混合均匀，30%乙醇溶液加入到混合粉中，制软材，24目筛，制粒、干燥，20目筛、整粒，加入微粉硅胶、CMS-Na。混合均匀后压片，即得。如果给上述片剂进行包衣，则得到包衣片剂，可为薄膜衣片、肠溶片等。实施例3:肉苁蓉总苷胶囊处方<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>制备方法将微晶纤维素、肉苁蓉总苷均过50目筛，合均匀后，加入硬脂酸镁，混合均匀，分装，即得。所用胶囊壳可为普通胶囊，也可为肠溶胶囊。实施例4:肉苁蓉总苷咀嚼片处方<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>制备方法将肉苁蓉总苷、木糖醇、甘露醇等原辅料分别过50目筛，采用等量递增法混合均匀，加入3XPVPk-30乙醇溶液，制软材，24目筛制粒，干燥，20目筛制粒，干燥，加入其他矫味剂、甜味剂、助流剂混合均匀，压片，即得。实施例5:肉苁蓉总苷分散片处方组分用量肉苁蓉总苷200gPPVP50g阿司巴甜3g牛奶香精5g75%乙醇溶液适量共制成1000片制备方法将肉苁蓉总苷等原料分别过80目筛，混合均匀，加入75%乙醇溶液，制软材，16目筛制粒，干燥，20目筛整粒，加入其他的矫味剂甜橙香精、甜味剂阿司巴甜、崩解剂PPVP混合均匀，压片，即得。实施例6:肉苁蓉总苷泡腾片处方组分肉灰蓉总苷200gPEG600020g柠檬酸200g碳酸氢钠850g草莓香精20g氯化钠10g共制成1000粒制备方法将肉苁蓉总苷过80目筛，混合均匀；取一半混合粉量，与柠檬酸混合均匀，用50%乙醇溶液制软材，24目制粒，干燥，16目整粒；再取余量混合粉，与碳酸氢钠混合，同前法制粒；所得两种颗粒混合，加入其他的辅料，如PEG6000、草莓香精、氯化钠等混合均匀，压片即得。实施例7:肉苁蓉总苷颗粒处方6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>制备方法将肉苁蓉总苷、甘露醇等过80目筛，混合均匀；用2%PVPk-30乙醇溶液制软材，16目制粒，干燥，12目整粒加入其他的辅料，如甜橙香精、阿斯巴甜等混合均匀，分装即得。实施例8:肉苁蓉总苷滴丸处方<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>制备方法取处方量的肉苁蓉总苷、PEG4000、PEG6000置水浴中加热融熔，搅拌均匀；置滴丸机中，以30-60转/min速度，滴入冷却至5_10度甲基硅油，取出滴丸，吸除冷却剂，干燥，即得。权利要求一种肉苁蓉总苷提取工艺，其特征在于采用乙醇回流法提取，用有机溶剂进行萃取，用大孔树脂吸附层析法进行精制。2.如权利要求1所述的提取工艺，溶剂优选为乙酸乙酯和正丁醇。3.如权利要求1所述的提取工艺，大孔树脂为D100，D3520,AB-8，优选为AB-8.4.如权利要求1所述的提取工艺，优选提取条件为肉苁蓉粉碎后的粒度以20-60目为宜。提取温度为60度，乙醇浓为70%，料液比为1:11(g/ml)，时间为3.5h，提取次数为2次。5.如权利要求1所述的提取工艺，大孔树脂吸附吸附时，先用水洗和10%乙酰洗脱后，直接选用40%乙醇作为洗脱液进行洗脱。6.优选工艺为粉碎成粗粉过40目筛，以70%的乙醇回流提取，提取液过滤后浓縮除去乙醇溶剂，至相对密度为1.IO，制成浸膏后，加水悬浮，再加乙酰乙酯进行萃取。取水溶液层进行减压浓縮，再用正丁醇进行萃取，萃取液进行减压浓縮干燥，加少量水溶解，抽滤后，将滤液上大孔树脂，先以水洗和10%乙酰洗脱后，直接选用40%乙醇作为洗脱液进行洗脱。收集洗脱液，减压浓縮干燥得。7.如权利要求1-6所述提取工艺获得的肉苁蓉总苷，可制成片剂、胶囊、滴丸、分散片、泡腾片等。全文摘要本发明公开了一种提取纯度高、工艺简单可行、适合工业化生产的肉苁蓉总苷的提取工艺。采用本方法对活性成分进行提纯时，活性成分转移率高，有效成分损失少。本发明还公开了肉苁蓉总苷制成片剂、胶囊、滴丸、分散片、泡腾片等制剂的制备方法。文档编号A61P15/08GK101766694SQ20081024088公开日2010年7月7日申请日期2008年12月26日优先权日2008年12月26日发明者王翰斌申请人:北京琥珀光华医药科技开发有限公司