专利名称：3′-氧-炔丙基-三氟胸苷的硫酯衍生物、它的制法及作为抗癌剂的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的具有抗癌性质的三氟胸苷衍生物。
三氟胸苷(在下文也称做“F3THd”)是一种核酸代谢拮抗剂，它最先由Heidel berger等(Journal of the American Chemical Society，84卷，3597页，1962)合成。此化合物的药理性质已有研究。已知它的抗病毒活性大于它的抗癌活性，并可有效地对抗例如由疱疹病毒和牛痘病毒引起的感染疾病。在抗肿瘤方面，有报导此化合物对肿瘤实验模型，如L1210白血病，腺癌-755(Cancer Research，24卷1979页，1964)显示优良的抗肿瘤活性。但由于此化合物口服给药时不能很好地被吸收并在体内很快代谢，所以临床应用时，它的抗肿瘤活性不如在体外应用肿瘤模型研究时显示的高。此外，此化合物有副作用，如对骨髓的抑制。
因此，需要一种具有比F3THd更高的体内抗肿瘤活性和较少的副作用的新F3THd衍生物。
具有抗肿瘤活性的F3THd衍生物在Japanese Laid-open patent application 58-152898，59-36696，60-56996和62-187482及Chemical Pharmaceutical Bulletin37卷2287页(1989)中有报导。但这些F3THd衍生物并不能很好地满足上述需要。特别是，这些已知的F3THd衍生物很快被代谢(结合及类似作用)和排泄，因此由F3THd
活性组份所产生的药理作用不能持续很长时间。所以还不知道有可用于临床应用的F3THd衍生物。
因此，本发明的目的是提供一种新的F3THd衍生物，它在口服给药时可更好地被吸收并且比F3THd及其已知的衍生物有较低的代谢(结合及类似作用)和排泄作用，这样就改善了药物的动力学并提高它在血液中的活性组份，从而使其体内的抗肿瘤活性有所提高并比普通的F3THd及其衍生物的副作用小。
本发明的另一个目的是提供一种抗癌剂，它含有本发明所述的新型F3THd衍生物作为有效成份。
本发明再一个目的是提供本发明所述新型F3THd衍生物的制备方法。
为了得到一种比F3THd及其已知衍生物口服给药吸收多、代谢少、排泄少及副作用小的化合物，本发明的发明人试图改进化合物在血液中的动力学同时保持F3Thd本身的抗肿瘤活性。更具体地说，本发明的发明人试图制备一种能在体内可逆性地释放F3THd的化合物，即F3THd的前体药物。为此，本发明的发明人在F3THd中脱氧核糖的3′位和5′位引入了各种取代基。结果很惊奇地发现了3′位被炔丙基取代的一组新型F3THd衍生物在口服给药时显示了较高的吸收度，并且比已知衍生物(共同未决的U.S.Patent application.07/894，608号和EP0517 262A1)有更高的抗肿瘤活性。这大概是因为炔丙基被一种酶缓慢地释放，这样活性部分F3Thd可缓慢释放很长时间，因此代谢的速度，如结合作用及排泄被减慢。此外，由于本发明中的F3THd衍生物缓慢释放F3THd，所以副作用，如对消化道的损伤大大减小。
根据上述发现，本发明的发明人进行了深入细致的研究以进一步改进三氟胸苷衍生物，即减少它的结合作用及排泄作用以保留三氟胸苷的体内缓释作用。结果，本发明的发明人发现5′位含硫原子取代基的3′-氧-炔丙基-三氟胸苷衍生物可缓慢进行化学分解及酶解，因而可达到使之连续持久地释放三氟胸苷，并具有较高抗癌活性。同时，3′-氧-炔丙基-三氟胸苷的硫酯衍生物可在体内连续持久地释放三氟胸苷，口服给药吸收很好，这些是不可能由它们的化学不稳定性实现的。此外，利用携带肿瘤的老鼠进行抗癌活性试验的结果，已证实硫酯衍生物比目前临床广泛应用的5-氟尿嘧啶具有更高的抗癌活性和更低的副作用。根据上述发现，本发明完成并提供了一种所需的新型抗癌剂。
也就是说，本发明提供一种式(1)的3′-氧-炔丙基-三氟胸苷的硫酯衍生物，它由式(1)代表
(其中R1代表苯基，1至5个卤原子取代的苯基，1至5个C1-C4烷基取代的苯基，1至5个C1-C4烷氧基取代的苯基，1至5个C1-C4烷硫基取代的苯式，1至5个C1-C5烷酰基氨基取代的苯基，1至5个三氟甲基取代的苯基，呋喃基，噻吩基或吡咯基)。
本发明还提供本发明制备硫酯衍生物的方法，包括式(3)的3′-氧-炔丙基-三氟胸苷衍生物
与式(4)的
(其中R1意义与在式(1)中相同，X代表一个卤原子)的化合物在碱存在下反应。
本发明还提供一种制备本发明硫酯衍生物的方法，包括式(3)的3′-氧-炔丙基三氟胸苷衍生物
与式(5)羧甲基二硫酯衍生物
(其中R1意义与在式(1)中相同)在碱存在下反应。
本发明还提供一种含本发明硫酯衍生物作为有效成份的抗癌剂。
本发明的三氟胸苷衍生物比F3THd口服给药时吸收多，在血液中保留较长时间，具有更小副作用及更高的抗癌活性。故而，本发明的三氟胸苷衍生物可望成为临床应用的优秀抗癌剂。
图1说明血浆中F3THd水平，F3THd由本发明化合物在老鼠体内分解产生。
本发明三氟胸苷衍生物详述如下上述式(1)中R1代表苯基;1至5个卤原子取代的苯基;1至5个C1-C4烷基取代的苯基，1至5个C1-C4烷氧基取代的苯基;1至5个C1-C4烷硫基取代的苯基;1至5个烷酰基氨基取代的苯基;1至5个三氟甲基取代的苯基;呋喃基;噻吩基或吡咯基)。
苯基中C1-C4烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等。苯基中C1-C4烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等。苯基中C1-C4烷硫基的实例包括甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、叔丁硫基等。苯基中C1-C5烷酰基氨基实例包括甲酰胺基，乙酰胺基，丙酰胺基，异丁酰胺基，新戊酰胺基，丁酰胺基等。卤原子包括氟，氯，溴，碘。
苯基R1上取代基的数目可为0至5，优选0至3。
在式(1)所示的三氟胸苷衍生物中，特别优选下述式(2)的化合物。
(其中R2代表氢原子、氯原子、甲基或硫代甲基)。
本发明中三氟胸苷衍生物的具体实例包括5′-氧-硫代苯甲酰基-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-氟-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-溴-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-碘-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3-二氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，4-二氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，6-二氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4-二氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3，4-三氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4，5-三氯-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3-二氟-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，4-二氟-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，6-二氟-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4-二氟-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3-二溴-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，4-二溴-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，6-二溴-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4-二溴-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-乙基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-丙基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-正丁基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-叔丁基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3-二甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，4-二甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，6-二甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4-二甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3，4-三甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4，5-三甲基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-乙氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-丙氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-正丁氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-叔丁氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3-二甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，4-二甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，6-二甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4-二甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3，5-三甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4，5-三甲氧基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-甲硫基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-乙硫基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-丙硫基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-正丁硫基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(4-叔丁硫基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，3-二甲硫基-硫代苯甲酰基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，4-双(甲硫基)-硫代苯甲酰基]-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(2，6-双(甲硫基)-硫代苯甲酰基]-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，5′-氧-(3，4-双(甲硫基)-硫代苯甲酰基]-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-乙酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-甲酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-丙酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-新戊酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-丁酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-异丁酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-三氟甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-噻吩羰基亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-呋喃羰基亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-吡咯羰基亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷本发明的三氟胸苷衍生物可由式(3)
的3′-氧-炔丙基-三氟胸苷衍生物与式(4)
(其中R1意义与在上述式(1)中相同，X代表卤原子)的化合物或与式(5)
的羧甲基二硫酯衍生物在碱存在下反应制得。
作为原料的式(3)的三氟胸苷衍生物可由三氟胸苷或三氟胸苷5′位保护的三氟胸苷衍生物，按EP 0517262A(共同未决的U.S.Patent application 07/894608)的方法获得。
也作为原料的式(4)化合物的大部分是已知的，并可根据例如R.Mayer和S.Scheithauer在Ber.，98 829(1964)中所述方法制备。
作为原料的式(5)化合物的大部分是已知的，并可根据A.Jensen和C.Pedersen在Acta，Chem.Scand.15，1087(1961)中所述方法制备。
在这两种反应中，只要是不影响反应的溶剂都可使用。这种溶剂的例子包括非质子传递溶剂，如二氯甲烷，氯仿，二氧六环，四氢呋喃，苯，甲苯，1，2-二甲氧基乙烷及二甲基甲酰胺。在分别采用式(4)和式(5)化合物的二个反应中，四氢呋喃是最优选的溶剂。
在这两种反应中可使用的碱包括有机碱，如三烷基胺类，吡啶，4-二甲基氨基吡啶，甲基吡啶，二甲基吡啶及咪唑;无机碱，如氢化钠，氢化钾，氢氧化钾，叔丁醇钾，氢氧化钠，碳酸钠和碳酸氢钠;以及两种碱的混合物。在采用式(4)化合物的反应中，三乙胺和4-二甲基氨基吡啶的混合物是这些碱中最优选的，在采用式(5)化合物的反应中，氢化钠和咪唑的混合碱是最优选的。
在这两个反应中，式(4)或(5)化合物的量是式(3)化合物的1至10倍摩尔量，优选1至5倍。碱的量是式(3)化合物的0.01到10倍摩尔量，优选1至5倍。
在这两个反应中，反应温度可从0℃(冰水冷却)到溶剂的沸点温度，优选4-60℃。反应时间通常为0.5-72小时。
本发明的化合物用作治疗肿瘤或抑制肿瘤生长的药物时，虽然化合物的剂量依化合物的性质及病人的体况而不同，但通常成人口服或非经肠给药时，剂量通常是每天50-100毫克。上述剂量可一次给药或分几次给药。
化合物可制成片剂、颗粒、粉末、悬浮液、及胶囊供口服给药，也可制成如栓剂供非经肠给药。这些药的组合物中包含有效量的本发明化合物及已知的药学上可接受的载体。例如，制片剂时，可用结晶纤维素，软质二氧化硅等作为吸收剂，用玉米淀粉，乳糖，磷酸钾，硬酸酸镁等作为载体。
如上所述，本发明的三氟胸苷衍生物对治疗癌症有效。它可治疗的癌症种类包括结肠直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、肉瘤、淋巴癌、白血病和黑瘤。
现将本发明以其实施例说明如下。应指出实施例只用于说明的目的，并不是以任何方式限制本发明。
下述实施例制备的化合物的物理性质总结在表1中。表1中，“R1”代表式(1)中的R1。
参考实施例15′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷(a)197毫克5′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-α，α，α-三氟胸苷，110毫克氯(叔丁基)二甲基甲硅烷，58.9毫克咪唑及3.9毫升二甲基甲酰胺(DMF)的混合物在室温下搅拌1小时。反应完毕，反应混合物浓缩后经柱色谱纯化得到5′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量220毫克(b)5′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷在室温下，在234毫升四氢呋喃(THF)中，溶解7.8克5′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-α，α，α-三氟胸苷并加入1.75克氢化钠(纯度60%(重量))。15分钟后，向混合物中滴加3.39克炔丙基溴，室温下反应5小时。反应完毕，反应液倾入冰水中并用乙酸乙酯萃取。萃取液浓缩并经柱色谱纯化，得到5′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷。
产量7.9克参考实施例23′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷在20毫升THF中，溶解0.93克3′-氧-炔丙基-5′-氧-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-α，α，α-三氟胸苷，并加入2.1毫升四(正丁基)氟化铵的1M THF溶液。混合物在室温下静置11小时后浓缩。残余物溶于乙酸乙酯并用冰水洗涤。生成物用乙酸乙酯萃取，萃取物浓缩，然后经柱色谱纯化得到3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷。
产量0.85克参考实施例3硫-(4-三氟甲基-硫代苯甲酰基)巯基乙酸在室温下30毫升四氢呋喃中悬浮1.5克金属镁，剧烈搅拌下向此悬浮液缓慢滴加5毫升4-溴代三氟甲苯。生成物室温下静置1小时，所得上层清液滴入3.5毫升冰水冷却的二硫化碳中。生成物在室温下静置过夜，反应混合物倾入水中。在得到的水层中加入4.19克氯乙酸钠并在室温下静置过夜。反应产物用浓盐酸酸化然后用乙醚萃取。乙醚层减压浓缩，经苯-己烷重结晶得4.1克4-三氟甲基二硫代苯甲酸羧甲酯。
实施例13′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在25毫升四氢呋喃中溶解3.3克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及1.35克咪唑。在此溶液中加入1.58克氢化钠，反应混合物室温搅拌15分钟。在反应液中加入2.3克硫-(4-甲基-硫代苯甲酰基)巯基乙酸，室温下反应1小时。反应混合物倾入5%氯化铵水溶液中，振摇后静置分层。所得水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤二次，然后用无水硫酸钠干燥。干燥剂经过滤除去，滤液减压浓缩。所得残余物经硅胶柱色谱纯化(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1(v/v))得淡黄色非结晶粉末状3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量3.12克实施例23′-氧-炔丙基-5′-氧-(2，4-二甲氧基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在4毫升四氢呋喃中溶解0.45克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及190毫克咪唑。在此溶液中加入0.15克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合物中加入0.37克硫-(2，4-二甲氧基硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非结晶粉末状3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2，4-二甲氧基二硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量0.36克实施例33′-氧-炔丙基-5′-氧-(3，5-二甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在4毫升四氢呋喃中溶解0.45克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及190毫克咪唑。在此溶液中加入0.15克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入0.36克硫-(3，5-二甲基-硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非结晶粉末状3′-氧-炔丙基-5′-氧-(3，5-二甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量0.44克实施例43′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-氯硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在25毫升四氢呋喃中溶解3.3克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及1.35克咪唑。在此溶液中加入1.58克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合物中加入2.51克硫-(4-氯硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非结晶粉末状3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-氯硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量2.93克实施例53′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-氟硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在25毫升四氢呋喃中溶解3.3克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及1.32克咪唑。往此溶液中加入1.38克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入2.4克硫-(4-氟硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非结晶粉末3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-氟硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量2.39克实施例63′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-三氟甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在5毫升四氢呋喃中溶解0.33克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及86毫克咪唑。往此溶液中加入76毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入294毫克硫-(4-三氟甲基-硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到非晶态3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-三氟甲基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量252毫克实施例73′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-甲氧基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在5毫升四氢呋喃中溶解0.4克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及104毫克咪唑。向此溶液中加入92毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入304毫克硫-(4-甲氧基硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到非晶态3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-甲氧基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量364毫克实施例8
3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-乙酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在6毫升四氢呋喃中溶解410毫克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及165毫克咪唑。向此溶液中加入144毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入365毫克硫-(4-乙酰胺基硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非晶态粉末3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-乙酰胺基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量334毫克实施例93′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-硫代甲基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在95毫升四氢呋喃中溶解5.4克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及2.32克咪唑。在此溶液中加入2.0克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入4.6克硫-(4-硫代甲基硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非晶态粉末3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-硫代甲基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷产量4.72克实施例103′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-叔丁基-硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷在6毫升四氢呋喃中溶解400毫克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及165毫克咪唑。在此溶液中加入144毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入350毫克硫-(4-叔丁基-硫代苯甲酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到非晶态3′-氧-炔丙基-5′-氧-(4-叔丁基硫代苯甲酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量242毫克实施例113′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-噻吩羰酰亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸革在5毫升四氢呋喃中溶解500毫克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及200毫克咪唑。在此溶液中加入240毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入342毫克硫-(2-噻吩羰酰亚硫酰基)巯基乙酸并在室温反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非晶态粉末3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-噻吩羰酰亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷产量505毫克实施例123′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-呋喃羰酰亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷在5毫升四氢呋喃中溶解500毫克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及200毫克咪唑。在此溶液中加入240毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入233毫克硫-(2-呋喃羰酰亚硫酰基)巯基乙酸并在室温反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非晶态粉末3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-呋喃羰酰亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷。
产量356毫克实施例133′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-吡咯羰酰亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷在5毫升四氢呋喃中溶解800毫克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及325毫克咪唑。在此溶液中加入430毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入722毫克硫-(2-吡咯羰酰亚硫酰基)巯基乙酸并在室温下反应1小时。用与实施例1同样方法得到淡黄色非晶态粉末3′-氧-炔丙基-5′-氧-(2-吡咯羰酰亚硫酰基)-α，α，α-三氟胸苷产量200毫克实施例143′-氧-炔丙基-5′-氧-硫代苯甲酰基-α，α，α-三氟胸苷在2毫升四氢呋喃中溶解54毫克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷及0.1克咪唑。在此溶液中加入50毫克氢化钠并搅拌15分钟。向反应混合液中加入64毫克硫代苯甲酰基巯基乙酸酯并在室温下反应1小时。反应混合物倾入5毫升饱和氯化铵水溶液中，用10毫升乙酸乙酯萃取二次。萃取液用无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除去溶剂得到淡黄色油状物，经硅胶柱色谱(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1(v/v))纯化得黄色油状3′-氧-炔丙基-5′-氧-硫代苯甲酰基-α，α，α-三氟胸苷。所得产品用己烷重结晶得到3′-氧-炔丙基-5′-(4-甲氧基四氢吡喃-4-基)-α，α，α-三氟胸苷产量83毫克实施例153′-氧-炔丙基-5′-氧-硫代苯甲酰基-α，α，α-三氟胸苷在4毫升四氢呋喃中溶解0.15克3′-氧-炔丙基-α，α，α-三氟胸苷，0.15毫升三乙胺及10毫克N，N-二甲基氨基吡啶。在此溶液中加入0.08毫升硫代苯甲酰氯并在室温搅拌1小时。反应混合物倾入5毫升冰水中，用10毫升乙酸乙酯萃取二次。萃取液用无水硫酸镁干燥后减压蒸馏除去溶剂得淡黄色油状物。如此得到的产物经硅胶柱色谱(己烷∶乙酸乙酯1∶1(v/v))纯化得到黄色油状3′-氧-炔丙基-5′-氧-硫代苯甲酰基-α，α，α-三氟胸苷。所得产物用己烷粉化得到3′-氧-炔丙基-5′-硫代苯甲酰基-α，α，α-三氟胸苷。
产量155毫克本发明所述化合物的抗癌活性及其血液动力学试验如下。
药理试验1(抗癌活性)抗肿瘤活性测定方法1)样品配制由实施例1，4，9或11所得化合物均匀悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中。由实施例14所得化合物均匀悬浮于含0.1%吐温80的0.5%甲基纤维素溶液中。
2)试验动物实施例1，4，9及11所得化合物用7周龄雌性CDF1鼠。实施例14所得化合物用6周龄雌性CDF1鼠。每组包括5或6只动物。
3)试验肿瘤
Meth A纤维肉瘤4)试验方法在每个小鼠右腹部皮下移值2×106肿瘤细胞，次日(第1天)将小鼠随机分组并用灌胃器(oral Sound)强迫给药，连续7天(第1天-第7天)。
5)抗肿瘤活性评价第14天将肿瘤取出并称重。肿瘤生长率(%)根据以下公式计算肿瘤生长率(%)＝T/C×100其中T表示治疗组肿瘤平均重量，C表示对照组肿瘤平均重量。由实施例1，4，9及11所得化合物的试验结果见表2，表2
表3
由实施例14所得化合物的试验结果见表3。在表2中，“CHFU”表示1-己基氨基甲酰基-5-氟尿嘧啶，即“Carmofur”。
药理实验2(血液动力学)1)给药及血液收集按照本发明实施例4及9所得化合物悬浮于0.5%羧甲基纤维素溶液中，将此悬浮剂用灌胃器对小鼠口服给药。服药后1，3，6及9小时将小鼠用氯仿麻醉，开腹，从腹部下腔静脉取5毫升血液。
2)萃取血液经离心分离，收集血浆。在200微升血浆中加入10微克/200微升5-氟尿嘧啶(用做高效液相色谱的内标物)及4毫升乙酸乙酯。混合物振摇后离心分离。取3毫升乙酸乙酯层置于另一试管中，通入氮气挥发至干。所得残余物中加入200微升50%乙腈/25毫摩尔磷酸钠(pH4.0)并经超声处理。不溶物离心分离后收集上层清液。
3)高效液相色谱分析如上所得上层清液50微升，用高效液相色谱法分析。使用硅胶渗透柱分析核酸(Asahipak GS-320H)。流速1.0毫升/分钟，检测波长254纳米。流动相为50%乙腈及25毫摩尔磷酸钠(pH4.0)。F3THd定量采用Chromatocorder 12按绝对校准法进行。
结果见图1
图1显示，给药1至6小时，甚至9小时后，在血液中仍可检测到本发明的化合物。
权利要求
1.3′-氧-炔丙基-三氟胸苷的硫酯衍生物，所述化合物由式(1)表示。
(其中R1代表苯基；1至5个卤原子取代的苯基；1至5个C1-C4烷基取代的苯基；1至5个C1-C4烷氧基取代的苯基；1至5个C1-C4烷硫基取代的苯基；1至5个C1-C5烷酰基氨基取代的苯基；1至5个三氟甲基取代的苯基；呋喃基；噻吩基或吡咯基)。
2.按权利要求1的硫酯衍生物，其中式(1)中R1是苯基。
3.按权利要求1的硫酯衍生物，其中式(1)中R1是1至5个卤原子取代的苯基;1至5个C1-C4烷基取代的苯基;1至5个C1-C4烷氧基取代的苯基;1至5个C1-C4烷硫基取代的苯基;1至5个C1-C5烷酰基氨基取代的苯基;1至5个三氟甲基取代的苯基;呋喃基;噻吩基或吡咯基。
4.按权利要求1的硫酯衍生物，所述化合物由式(2)表示。
(其中R2是氢原子，氯原子，甲基或硫代甲基)。
5.按权利要求1的硫酯衍生物的制备方法，包括使式(3)
的3′-氧-炔丙基-三氟胸苷衍生物与式(4)
化合物(其中R1意义与在式(1)中相同，X代表卤原子)在碱存在下反应。
6.按权利要求1的硫酯衍生物的制备方法，包括式(3)
的3′-氧-炔丙基-三氟胸苷衍生物与式(5)的羧甲基二硫酯衍生物
(其中R1意义与在式(1)中相同)在碱存在下反应。
7.一种包含按权利要求1的硫酯衍生物作为有效成份的抗癌剂。
8.一种抗癌组合物，所述组合物在一种药学上可接受的载体上含有效量的按权利要求1的硫酯衍生物。
9.按权利要求1的硫酯衍生物作为抗癌剂的用途。
全文摘要
3′-氧-炔丙基-三氟胸苷硫酯衍生物可作为一种抗癌剂。按本发明的硫酯衍生物由式(1)表示。(其中R
文档编号C07H19/073GK1094409SQ93120860
公开日1994年11月2日 申请日期1993年12月7日 优先权日1992年12月7日
发明者深泽信幸, 川内启也, 石桥大树, 岛田静雄, 岩田大二, 竹林伸夫, 枝次一, 傍岛健, 矢野理 申请人:三井东压化学株式会社