专利名称：2－(3,5－二氟苯基)－3－(4－(甲磺酰)苯基)－2－环戊烯－1－酮用作cox－2的一种抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗环化加氧酶介导的疾病的方法以及用于该方法中的特定药物组合物。
大多数的非类固醇抗炎药物具有抗炎、止痛和解热作用，并且通过抑制前列腺素G/H合酶(又称作环化加氧酶)抑制荷尔蒙引起的子官收缩和某些类型的癌的生长。起初，只知道有一种形式的环化加氧酶，与环化加氧酶-1(COX-1)或组成酶相类似，这一点最早是在精囊中被证实的。最近，一种第二型诱导型环化加氧酶，环化加氧酶一2(COX-2)的基因已经被克隆、排序并且从鸡、鼠和人中被首次表征。此酶与已经被克隆、排序并从包括绵羊、鼠和人的各种来源中表征的COX-1不同。第二型环化加氧酶，COX-2容易被包括分裂素、内毒素、激素、细胞分裂素和生长因子在内的许多因子快速诱导。因为前列腺素具有生理和病理作用，所以我们得出结论组成酶(COX-1)在很大程度上导致前列腺素的内源基础释放，因比COX-1在前列腺素的生理作用方面具有重要意义，这些生理作用包括维持胃肠完整和肾脏血流。相反，我们已经推断出诱导型COX-2主要对前列腺素的病理起作用，作为对如炎性因子、激素、生长因子和细胞分裂素的因子应答，此酶被迅速激活。因而，COX-2的一种选择性抑制剂将具有与常规非类固醇抗炎药物相似的抗炎、解热和止痛作用，而且可以抑制由激素引起的子官收缩，并具有潜在的抗癌作用，所引起的基于机理的某些副作用减少。特别是，这样一种化合物对胃肠产生毒性的可能性减小，对肾脏产生副作用的可能性减小，对出血时间的影响减小，并且在诱导对阿斯匹林敏感具有哮喘倾向的个体发生哮喘发作方面的作用也可能减小。
而且，这样一种化合物还可以通过阻止收缩前列腺素类化合物的合成抑制由前列腺素类化合物诱导的平滑肌的收缩，因此可以用于治疗痛经、劳动早产、哮喘以及嗜酸性细胞相关性疾病。它还可以用于治疗阿尔茨海默病，以便减少骨损失，特别是绝经注后妇女的骨损失(即治疗骨质疏松症)和治疗青光眼。
在由John Vane所作一文Nature，Vol.367，pp.215-216，1994，和Drug News and Perspectives，Vol.7，pp.501-512，1994一文中简要描述了环化加氧酶-2抑制剂的潜在用途。
本发明包括新化合物2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮，药物组合物以及此化合物在制备治疗环化加氧酶-2介导疾病的药物中的应用。
第一方面，本发明包括化合物2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮
化合物A第二方面，本发明包括可用于治疗COX-2介导的疾病、含有2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮和一种药物可接受的载体的药物组合物。
第三方面，本发明包括含有2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮和一种药物可接受载体的药物组合物。
第四方面，本发明包括2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2)-环戊烯-1-酮在制备一种治疗COX-2介导疾病的药物中的应用。
另一方面，优选出组合物、治疗方法以及涉及到口服给药的用法。
另一方面优选出组合物、治疗方法以及涉及到一日给药一次或两次的用法。
下面的缩写具有所示含义AA＝花生四烯酸CHO＝中国仓鼠卵巢CMC＝1-环己基-3-(2-吗啉代乙基)碳化二亚胺N甲-对甲苯磺酸盐COX＝环化加氧酶DMF＝N，N-二甲基甲酰胺HBSS＝汉克斯平衡盐溶液HEPES＝N-〔2-羟乙基〕哌嗪-N’-〔2-乙烷磺酸〕HWB＝人全血LPS＝脂多糖mCPBA＝间氯过苯甲酸MMPP＝单过氧邻苯二甲酸镁NSAID＝非类固醇抗炎药物PDC＝重铬酸吡啶鎓r.t.＝室温THF＝四氢呋喃化合物A可用于解除多种疾病包括风湿热、与流感或其它病毒感染相关的征候群、普通感冒、轻度颈背痛、痛经、头痛、牙痛、拉伤和劳损、肌炎、神经痛、滑膜炎、关节炎，包括类风湿性关节炎、退行性关节疾病(骨关节)、痛风以及关节强硬性脊椎炎、滑囊炎、烧伤、外科和牙科术后损伤。另外，这样一种化合物可以抑制细胞新生物的转化和转移癌的生长。因此，它可用于治疗癌症，例如结肠癌。
化合物A还可用于治疗和/或预防环化加氧酶介导的增生性疾病，此增生性疾病可以在如糖尿病视网膜病和肿瘤血管生成等情形下发生。化合物A还可以通过阻止收缩前列腺素类化合物的合成，抑制前列腺素类化合物诱导的平滑肌收缩。因此，可用于治疗痛经、劳动早产、哮喘以及嗜酸性细胞相关性疾病。它还可以用于治疗阿尔茨海默病，以便减少骨损失，特别是绝经后妇女的骨损失(即治疗骨质疏松症)和治疗青光眼。
由于环化加氧酶-2(COX-2)的活性和特异性均超过环化加氧酶-1(COX-1)，已证实化合物A可用作常规非类固醇抗炎药物(NSAID’S)的一种替代剂，特别是在非类固醇抗炎药物被禁忌使用的情况下，例如患有消化道溃疡、胃炎、局限性肠炎。溃疡性结肠炎、室炎或有胃肠损害复发历史的患者，患有胃肠道出血、凝血疾病或其它出血疾病的患者，凝血病包括贫血(如血凝血酶原过少)、血友病；患有肾病患者；外科手术或使用抗凝剂之前。
同样，化合物A可以用作制剂中常规NSAID的部分或全部代用品。制剂中的NSAID是与其它药物或组分共同给药的。在另一方面，本发明包括用于治疗上述由环化加氧酶-2介导的疾病的药物组合物，它含有一种无毒、有效治疗量的上述式I化合物和一种或多种组分，例如另一种疼痛缓解剂包括acetominophen或非那西汀；一种增强剂包括咖啡因；一种H2拮抗剂，氢氧化铝或氢氧化镁，二甲硅油，一种减充血剂包括脱羟肾上腺素、盐酸去甲麻黄碱、假麻黄碱、羟间唑啉、ephinephrine、盐酸萘唑啉、木甲唑啉、六氢脱氧麻黄碱或左旋脱氧麻黄碱；一种镇咳剂包括可待因、二氢可待因酮、卡腊米芬、咳必清或右美沙芬；一种前列腺素包括米索前列醇、恩前列素利奥前列素、奥诺前列素或罗沙前列醇；一种利尿剂；一种具有镇静作用或不具有镇静作用的抗组胺药。另外，本发明包括一种治疗环化加氧酶介导的疾病的方法，此法包括给需要此治疗的患者使用一种无毒的、有效治疗量的化合物A，也可以与一种或多种上述组分联合使用。
治疗任何一种环化加氧酶介导的疾病，化合物A可以以单位剂量的制剂，经口腔、体表、肠胃外给药，雾化吸人给药或经直肠给药，制剂中含有常规的非毒性药物可接受的载体、佐剂或赋形剂。此处所用肠胃外一词包括皮下注射、静脉内、肌肉内、胸骨内注射或输注技术。本发明的化合物除有效治疗人的疾病外，还可治疗热血动物如小鼠、鼠、马、牛羊、狗、猫等的疾病。
如上所述，用于治疗环化加氧酶-2介导的疾病的上述药物组合物还可以包括一种或多种上述组分。
含此活性组分的药物组合物可以以一种适于口腔使用的形式存在，例如呈片剂、锭剂、糖锭、水状或油状悬浮液、可分散的粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂。可以按照本领域中生产药物组合物的任何已知方法制备用于口服的组合物，为了提供精致、口感好的药物制剂，此组合物中可以含有一种或多种组分，此组分从增甜剂、芳香剂、着色剂和防腐剂中选择。片剂中含有活性成分，此活性成分与适于生产片剂的无毒的药物可接受的赋形剂相混合，这些赋形剂可以是惰性稀释剂如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸，粘合剂如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂如硬脂酸镁。硬脂酸或滑石。此片剂可以没有包衣，也可以用已知的技术外被包衣，以推迟药片在胃肠道的崩解和吸收，从而使药片在一较长时间内具有持续作用。例如，可以使用一种时间延长物质如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们还可以用美国专利4,256,108；4,166,452和4265,874中所述的技术分被包衣，以形成可控制释放的渗透治疗片。
口服制剂还可以是硬明胶胶囊，其中活性成分与一种惰性固体稀释剂相混合，如碳酸钙、磷酸钙或陶土，也可以是软明胶胶囊，其中活性成分与水或混溶溶剂(例加丙二醇、PEGs和乙醇)或一种如花生油、液体石蜡或橄榄油的油介质相混合。
水悬浮液中含有与适于生产水悬浮液的赋形剂相混合的活性成分。赋形剂可以是如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素钠、羟丙基纤维素钠、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄著树胶和阿拉伯树胶的悬浮剂；分散剂或湿润剂可以是一种天然磷脂(例如卵磷脂)，烷基醚与来源于脂肪酸和一种己糖醇的偏酯的缩合产物(如聚氧乙烯山梨醇一油酸)，或烷基醚与来源于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚乙烯脱水山梨酸一油酸)。此水状悬浮液还可以含有一种或多种防腐剂(例如乙基、或正丙基、对羟基苯甲酸酯)，一种或多种着色剂，一种或多种芳香剂，和一种或多种增甜剂(例如蔗糖、糖精或糖精)。
可以将活性成分悬浮于一种如花生油、橄榄油、芝麻油或可可油的植物油中，或悬浮于如液体石蜡的矿物油中，制备油状悬浮液。油状悬浮液可以含有一种增稠剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。如上所述的增甜剂和芳香剂均可加入以获得一种口感好的口服制剂。这些组合物可以通过加入一种抗氧化剂如抗坏血酸来保存。
可分散的粉末和颗粒提供了混有一种分散或润湿剂、悬浮剂和一种或适合于通过加水制备一种水状悬浮液。适宜的分散或润湿剂和悬浮剂已在上文中举例说明。还可以合有如增甜剂、芳香剂和着色剂的其它赋形剂。本发明的药物组合物还可以呈一种水包油型乳状液的形式。油相可以是一种植物油如橄榄油或花生油，也可以是一种矿物油如液体石蜡或液体石销的混合物。适宜的乳化剂可以是天然的磷脂如大豆、卵磷脂，来源于脂肪酸和己糖醒研的酯或偏酯如山梨醇一油酸，上述偏酯与烷基醚的缩合产物如聚氧乙烯山梨醇一油酸。此乳剂还含有增甜剂和芳香剂。
糖浆剂和酏剂可以用如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖的增甜剂制备。此制剂还可含有一种湿润剂、一种防腐剂和芳香剂以及着色剂。此药物组合物可以呈一种无菌注射用水状或油状悬浮液形式。此悬浮夜可以用上述的适宜分散或润湿剂和悬浮剂，按照本领域中的已知技术制备。此无菌注射用制剂还可以是一种溶于一无毒的肠通外可接受的稀释剂或溶剂的溶液，或一种悬浮于一无毒的肠道外可接受的稀释剂或增剂的息浮液)制如一种溶于1，3-丁二醇的溶液。可以使用的可接受的载体和溶剂包括水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。共溶剂例如乙醇、丙二醇或聚丙二醇也可使用。另外，无菌固定油类被常规用作一种溶剂或悬浮介质。任何温和的固定油包括合成的单或二甘油酯均可用于此。另外，脂肪酸如油酸可用于注射剂的制备。
化合物A还可以以一种栓剂的形式直肠给药。通过将药物与一种适宜的无刺激性的赋形剂相混合来制备此组合物，这种赋形剂在常温下是固体，在直肠温度下是流体，并且能在直肠中融化释放出药物。这种材料是可可脂和聚乙二醇。
含有化合物A的乳膏、软膏、凝胶、溶液成悬浮夜均可用来外用。(外用还包括冲洗口腔和激口)。外用制剂通常由一种药物载体、共溶剂、乳化剂、渗透增强剂。防腐剂系统和软化剂。
美国专利5,474,995中列举了其它适宜的制剂。我们发现下列的口服制剂特别有用Rapidisc---考虑到上述的特性，2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮正好特别适用于一种快速溶解的舌下剂。例如，由于没有消化道的副作用，此药物不需要服用大量的水。适宜的Rapidisc和上述的生产方法公开于US 4,305,502，US 4,371,516，US 4,470,202、US 4,758,598、US 4,754,597、US 5,046,618和US 5,188,882中，所有这些均在此作为参考文献。
正如在此说明书其它地方提到的那样，我们已经发现2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰苯基)-2-环戊烯-1-酮具有一种令人惊奇的结合特性。有机化合物A不仅在每日10-250mg药物的适宜口服剂量下是有活性、安全有效的，而且化合物A在人体中的半衰期足够地长，以致于每日口服剂量为10-250mg的活性成分一次或两次，就可提供超过24小时的有效安全的抗炎治疗。此活性成分特别适用于治疗慢性的适应症如类风湿痛和骨关节炎以及阿尔茨海默病。
活性成分2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯1-酮的口服和静脉内给药的剂量水平为每人每次给药10-250mg一次或两次。
结合载体物质从产生一个单剂量的有效成分的量随治疗对象、尤其是给药方式而变化。例如、一种用于人体口服给药的制剂可以含有从10至250毫克的试剂与一种适量载体物质结合的活性成分，此活性或分占总组合物的百步比在5％-95％之间变化。一般，剂量单位含活性成分的量为10，20，30，40，50，60，70，80，90，100，125，250mg。
但是我们可以理解为对任何特殊病人所用的具体剂量随多种因素变化，这些因素包括年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食状况、给药时间、排泄率、所联合使用的药物和类型、以及正治疗的特殊疾病的严重程度。对于许多病人，每日给10-50mg或60-120mg一次或两次的剂量为优选剂量。
对于长期治疗，例如在治疗包括类风湿性关节炎、骨关节炎或阿尔茨海默病的慢性疾病时，优选剂量为每日给10-50mg或60-120mg一次或两次。更为特殊的是，治疗骨关节炎的优选剂量为每日给10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg一次或两次。就治疗类风湿性关节炎而言，优选剂量为每日给10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg一次或两次。对于头痛或术后肿胀和疼痛等非慢性适应症的治疗，优选剂量为每日给10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg一次或两次。
因此，一方面本发明指明了一种单位剂量的口服剂型，它含有10-250mg的环化加氧酶抑制剂，例如含有10-50mg或60-120mg的环化加氧酶抑制剂。
另一方面，本发明指明了一种用于治疗环化加氧酶-2介导的疾病的药物组合物，上述组合物适于每日一次或两次口服给药，并且上述组合物中含有10-250mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮和一种药物可接受的载体。
在这方面，有第一组组合物，它们含有10-50mg 2-(3，5-二氟苯基)-3(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
在这方面，有第二组组合物，它们含有60-120mg 2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
结合载体物质以产生一个单剂量的有效成分的量随治疗对象、尤其是给药方式而变化。例如，一种用于人体口服给药的制剂可以含有10-250mg与一种适量载体物质结合的活性成分，此活性成分占总组合物的百分比在5％-95％之间变化。剂量单位中一般含有一种约10mg-250mg的活性组分，典型的剂量单位中所含的活性组分为10mg，25mg，50mg，100mg，125mg或250mg。
但是我们可以理解为对任何特殊病人所用的具体剂量随多种因素变化，这些因素包括年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄率。药物组合以及正接受治疗的特殊疾的严重程度。确定生物活性的测定通过下列确定具有抑制环化加氧酶活性的测定，来证实化合物A。
抑制环化加氧酶的活性使用CHO转染的细胞系对COX-2和COX-1进行全细胞测定本测定所用的是经一种含有人COX-1或COX-2cDNA’s的真核生物的表达媒介物pCDNAIII稳定转染的中国仓鼠(CHO)细胞系。这些细胞系被相应称作CHO〔hCOX-1〕和CHO〔hCOX-2〕。为环化加氧酶的测定。通过离心(300×g，10分钟)收集来自悬浮培养的CHO〔hCOX-1〕细胞和通过粘着培养的受胰蛋白酶作用制备的CHO〔hCOX-2〕细胞。并用pH为7.4的含15mM HEPES的HBSS冲洗一次，并且以1.5×106细胞/毫升时细胞浓度再次悬浮于pH为7.4的含15mHEPES的HBSS中。将待测药物溶于DMSO中，达到最高试验药物浓度的66.7倍。一般，复制品中以8倍浓度测定化合物，此复制品在最高药物浓度的DMSO中使用了连续3倍的连续稀释液。在37℃下，用3ul的试验药物或DMSO载体对细胞(在200ul中的0.3×106个细胞)进行预培养15分钟。将一种AA缩乙醇溶液的10倍稀释液加入含15mMHEPES，pH为7.4的HBSS中，制备出无过氧化物的AA工作溶液，(5.5uM的AA和110uM的AA分别供测定CHO〔hCOX-1]和CHO[COX-2]。以AA/HBSS溶液于存在或不存在药物的情况下对细胞进行激发，以获得CHO〔hCOX-1]测定中的0.5uMAA的最终浓度和CHO〔hCO-2〕测定中的10uMAA的最终浓度。加入10ul 1NHcl以完成反应，然后用20ul 0.5N的NaOH中和。在4℃下以300×g离心样品10分钟，并将一等分的澄清上清液适当稀释，以便通过一钟PGE2结合酶的免疫测定确定PGE2水平(此免疫测定与PGE2酶免疫测定试剂盒，测定设计等相关)。将花生四烯酸激发的细胞的PGE2的水平与乙醇载体模仿激发的细胞的PGE2的水平之间的差别，确定为无试验化合物的环化加氧酶的活性。将试验化合物对PGE2合成的抑制计作一个百分数，即环化加氧酶在药物存在下的活性与在阳性对照样品中的活性之比。从U937细胞微粒体中测定COX-1活性以500×g离心5分钟使U937细胞成团，用磷酸盐缓的盐水冲洗一次并使其再次成团。将细胞再次悬浮于由0.1 M的Tris-HCl，pH 7.4，10mM EDTA，2ug/ml抗纤维蛋白溶酶制剂，2ug/ml大豆胰蛋白酶抑制剂，2ug/ml抑肽酶和1mM苯基甲基磺酰氟组成的均化缓冲液。将此细胞悬浮液超声处理4次10秒，并在4℃下，以10,000×g离心10分钟。此上清液在4℃下以100,000×g离心1小时。将此100,000×g微粒体团再次悬浮于0.1 MTris-HCl，pH 7.4，10mMEDTA中，达到每毫升接近7mg蛋白，并在-80℃下贮存。
在使用前立即将微粒体融化，并对其进行短暂的超声处理，然后在含有10mMEDTA，0.5mM苯酚，1mM还原谷胱甘肽和1uM羟高铁血红素，pH为7.4的0.1M Tris-HCl缓冲液稀释，达到125ug/ml的蛋白浓度。在一个最终容积为250ul的复制品中进行测定。起初在深井聚丙烯滴定平皿的井中，将5ul DMSO载体或DMSO中的药物加入20ul pH为7.4含10mM EDTA的0.1M Tris-HCl缓冲液中。然后加入200ul微粒体制剂并且在室温下预培养15分钟，然后加入25ul含1M花生四烯酸的0.1M Tris-HCl，和10mM EDTA，pH为7.4。样品在室温下培养40分钟，然后加入25ul 1NHCl以终止反应。在通过放射免疫测定(Dupont-NEN或Amersham测定试剂盒)对PGE2定量前，用25ul 1N NaOH中和样品。将花生四烯酸存在下培养的样品中的PGE2水平乙醇载体存在下培养的样品中的PGE2水平之间的差别，确定为环化加氧酶的活性。纯化的人COX-2的活性测定通过COX-2，PGG2还原为PGH2，使用一种基于此还原过程中N，N，N’，N’-四甲基对苯二胺氧化作用的显色测定，测此酶的活性(Copeland等(1994)Proc.Natl.Acad.Sci·91，11202-11206)。
如前所述，从sf9细胞中纯化重组人COX-2(Percival等(1994)Arch，Biochem.Biophys.15，111-118)。此测定混合物(180ul)含有100mM磷酸钠， pH 6.5，2mM烷基聚乙二醇X-100，1uM羟高铁血红素，1mg/ml明胶，80-100单位纯化酶和4ul DMSO中的试验化合物(将在610nm下产生一个0.001/分钟O.D.改变所需的酶的量定为酶的一个单位)。在室温(22℃)下将此混合物预培养15分钟，然后通过加入20ul的一种经超声处理的溶液使酶催反应开始，此经超声处理的溶液为含1mM花生四烯酸(AA)和1mM TMPD的测定缓冲液(无酶或羟高铁血红素)。通过对反应最初36秒钟内TMPD氧化的起初速度的评价来估计酶催的活性。在缺乏酶的情况下观察非特异性氧化率(0.007-0.010 O.D./分钟)，并在计算抑制百分数之前将其去除。从剂量对数与抑制百分数图4-参数最小二乘非线性回归分析中，导出IC50值。人全血测定基本原理人全血为研究抗炎化合物如选择性COX-2抑制剂的生化效力提供了一种蛋白和富含细胞的适宜环境。研究表明正常的人血中不含COX-2酶。这与COX-2抑制剂对正常血中产生PGE2没有作用是一致的这种抑制剂仅在将人全血与LPS培养之后才有活性。它诱导了COX-2的产生。此测定用于评价选择性COX-2抑制剂对产生PGE2的抑制作用。而且，全血中的血小板含有大量的COX-1酶。血凝后，血小板立即通过一个凝血酶介导的机制被激活。此反应通过激活COX-1，产生了凝血恶烷B2(TxB2)。因而，可以检查试验化合物对凝血后TxB2水平的影响并将其作为COX-1活性的一个指标。所以，可以以同样的测定测LPS诱导后的PEG2水平(COX-2)和血凝后的TxB2水平(COX-1)，并以此确定试验化合物的选择程度。方法A.COX-2(LPS诱导的PGE2的产生)
将通过男女志愿者静脉穿刺所获得的新鲜血液收集于经肝素处理的试管中。在采血前，这些志愿者无明显的炎症症状，并且至少在7天前没有接受过任何NSAID。将刚刚从2ml血样中获得血浆用作空白(PEG2的基础水平)。室温下用LPS培养剩余血液5分钟，LPS为Sigma Chem E.coli的#L-2630，最终浓度为100ug/ml，在0.1％BSA(磷酸盐缓冲的盐水)中稀释。在37℃下，500ul血样用2ul载体(DMSO)或最终浓度为10nM至30uM的2ul一种试验化合物培养24小时，培养结束后，12,000×g离心此血5分钟以获得血浆。将一份100ul血浆试样与400ul甲醇混合以产生蛋白沉淀。获得此上清液，并在PGE2转化为它的甲基肟盐衍生物后，按照厂家的方法使用一种放射性免疫测定试剂盒(Amersham，RPA#530)。
B.COX-1(血凝诱导的TxB2的产生)将新鲜血收集入不含抗凝剂的真空容器中。将500ul血样立即移入经硅化处理的微离心管中、此离心管以10nM至30uM最终浓度预装了2ul DMSO或一种试验化合物。对试管进行涡流处理并在37℃下培养一小时以使血液凝固。在培养结束，通过离心(12,000×g，5分钟)获得血清，将一份100ul的血清试样与400ul的甲醇混合从产生蛋白沉淀。获得此上清液，并按照厂家的说明，使用一种酶免疫测定试剂盒(Cayman#519031)对此上清液的TxB2进行测定。鼠爪水肿测定原始记录将雄性Sprague-Dawley鼠(150-200g)禁食一夜，并经口给予载体(1％methocel或5％Tween 80)或者试验化合物。1小时后，用一永久性标记器在一后爪踝上划一水平线，以确定所观测的围。用一基于水移位原理的体积描记器(Ugo-Basile，意大利)测量爪体积(V0)。然后用带有25号针头的胰岛素注射器给动物爪内跖下注射50μl的含1％爱兰苔胶溶液的盐水(FMCCorp，Maine)(即，每爪500μg爱兰苔胶)。3小时后，测量爪体积(V3)并计算爪体积的增长(V3-V0)。通过CO窒息处死动物，并记录胃损伤的存在与否。将数据与载体对照组值比较，并计算抑制百分率。将所有处理组编码以排除观察者的偏见。存鼠中NSAID诱导的胃病基本原理常规NSAID的主要副作用是其导致人的胃损伤。此作用被认为是由胃肠道中COX-1的抑制作用引起。鼠对NSAID的此作用特别敏感。事实上在过去通常应用鼠模型来评价常规NSAID的胃肠副作用。在本测定中，通过测量全身注射51Cr标记红细胞后的51Cr粪便排泄率，观察NSAID诱导的胃肠损害。51Cr粪便排泄率是一项检查动物和人胃肠完整性的建立完善而且敏感的技术。方法经口给予雄性Sprague Dawley鼠(150-200g)试验化合物一次(急性剂量给药)或者一日两次5天(慢性剂量给药)。在最后一剂给药后，立即经尾动脉给鼠注射0.5mL的51Cr标记供体鼠红细胞，将动物单独放入带有任意食物和水的代谢笼中。收集48小时期间的粪便，并按总注射量的百分数计算51Cr的粪便排泄量。用下面的方法制备51Cr标记红细胞。经供体鼠腔静脉采集10mL血液于肝素化的试管中。通过离心分离法除去血浆并用同等量的HBSS再装满。用400 Ci的51铬酸钠在37℃培养红细胞30分钟。在培养末，用20mL HBSS将红细胞冲洗两遍以除去游离51铬酸钠。最后在10mL HBSS中再构成红细胞，并且每只鼠注射此溶液0.5mL(约20Ci)。在鼠猴中蛋白丢失性胃病基本原理蛋白丢失性胃病(随着胃肠道中循环细胞和血浆蛋白的出现而证明)是一种对标准非类固醇抗炎药物(NSAIDs)具有显著而且剂量限制相反的反应。这可以通过51CrCl3溶液静脉内给药进行定量评价。此同位素离子可以亲和于细胞和血清珠蛋白以及细胞内质网。在此同位素给药后，所收集的24小时粪便中的放射性的测定可提供一个敏感而定量的蛋白丢失性胃病的指数。方法通过管饲法用含1％methocel1或5％Tween 80的H2O载体(3mL/kg b.i.d.)或者试验化合物以剂量1-100mg/kg b.i.d.处理多组雄性鼠猴(0.8至1.4kg)5天。在最后一剂药物/载体后1小时给予静脉内51Cr(1mL/kg磷酸盐缓冲剂盐水(PBS)含5Ci/kg)，并且在代谢笼中收集24小时粪便并通过γ计数器测定排泄的51Cr。在最后一剂药物后1小时和8小时抽取静脉血样，并通过RP-HPLC测定药物血浆浓度。在清醒鼠中LPS诱导的发热在应用前将一些雄性Sprague-Dawley鼠(150-200g)禁食16-18小时。在930am左右，将这些动物临时放入有机玻璃制动器内，并用连接数字温度计(08502型，Cole Parmer)的一个柔韧的温度探子(YSI系列400)记录它们的基准直肠温度。对所有的动物均使用同样的探子和温度计，以减小实验误差。测量温度以后将动物放回它们的笼内。在0时刻，给鼠腹膜内注射盐水或LPS(2mg/kg，Sigma Chem)，并在注射LPS后5，6和7小时再测量其直肠温度。在5小时的温度测量后，当温度的升高达到平顶时，向注射LPS的鼠经口给予载体(1％methocel)或试验化合物以确定此化合物可使发热逆转。利用对照组(载体处理的)中在7小时所获得的直肠温度作为参考点(0逆转)，以计算发热逆转百分率。将发热逆转完全达到LPS处理前的基准值确定为100％。在清醒鼠猴中LPS诱导的发热在一组鼠猴(Saimiri sciureus)(1.0-1.7kg)中，经手术将温度探子埋入腹部皮下。这样可以通过一种遥测感应系统(Data Sciences International，Minnesota)监测清醒，非制动的鼠猴的体温。在使用前将这些动物禁食并放入独特笼内以适应水土13-14小时。将电子接收器安装于笼子边上，它可以接收被埋入的温度探子的信号。在实验当天900 a.m.左右，将鼠猴临时制动于训练椅中并给予一团静脉注射LPS(6mg/kg，溶解于无菌盐水中)。将动物放回它们的笼内并每5分钟一次连续记录其体温。注射LPS后2小时，当其体温升高1.5-2℃时，经口给予鼠猴载体(1％methocel)或试验化合物(3mg/kg)。100分钟后，测定体温与基准值之差。将对照组中的值作为0％抑制，由此计算抑制百分率。在鼠中爱兰苔胶诱导的急性炎性痛觉过敏用雄性Sprague Dawley鼠(90-110g)进行实验。通过3小时前跖内注射爱兰苔胶(每个后爪内4.5mg)而诱导后爪对机械压迫的痛觉过敏。对照动物接受同等量的盐水(0.15mL在跖内)。在爱兰苔胶后2小时经口(2ml/kg)给予试验化合物(0.3-30mg/kg，悬浮于含0.5％methocel的蒸馏水中)或载体(0.5％methocel)。应用Ugo Basile痛觉计于1小时后测量对后爪压迫的发声反应。
应用单向ANOVA(BMDP Statistical Software Inc.)进行爱兰苔胶诱导的痛觉过敏的统计学分析。通过注射爱兰苔胶的动物的发声阈值减去注射盐水的动物的发声阈值以测定痛觉过敏。以此反应的百分率表达药物处理鼠的痛觉过敏分值。然后通过用GraFit(Erithacus software)进行平均数据的非线性最小二次方回归分析计算ID50值(药物产生50％的最大可观测反应)。在鼠中佐剂诱导的关节炎将70只，6.5-7.5周的雌性Lewis鼠(体重146-170g)称重，耳标，分配到各组中(反面对照组，未诱导关节炎；载体对照组；正面对照组，给予日总剂量为1mg/kg的消炎痛；4个组，给予日总剂量为0.10-3.0mg/kg的试验化合物)以便各组中其体重相等。给每组10只的6组鼠在后爪内注射含0.5mg的乳酪分支杆菌的0.1ml轻矿物油(佐剂)，而反面对照组的10只鼠不注射佐剂。在(第1天)之前和佐剂注射后21天测定体重，对侧爪体积(用水银位移体积描记器测定)和侧位放射片(在氯胺酮和甲苯噻嗪麻醉下获得)，并且在(第1天)之前和佐剂注射后第4和第21天测定原爪体积。用肌肉内注射0.03-0.1ml的氯胺酮(87mg/kg)和甲苯噻嗪(13mg/kg)的混合物注射液麻醉鼠以进行放射拍片和佐剂注射。应用Faxitron(45 kVp，30秒)Kodak X-OMAT TL胶片拍摄在0天和21天两个后爪的放射片，并且在一个自动处理器中冲洗。通过一个对实验处理不清楚的审片员来评价此放射片中软组织和硬组织的变化。按照严重程度用数字将注射后的放射片改变分级增大的软组织体积(0-4)，关节空隙的缩窄和增宽(0-5)，软骨下糜烂(0-3)，骨膜反应(0-4)，骨质溶解(0-4)，半脱位(0-3)，关节退形性变(0-3)。用特别的标准建立各放射片改变严重程度的数字分级。每个爪最大可能的得分为26。从佐剂注射后开始每骨一日两次给予试验化合物，以日总剂量为0.1，0.3，1和3 mg/kg/天；消炎痛，以日总剂量为1mg/kg/天；或载体(含0.5％methocel的无菌水)，并且持续21天。每周制备此化合物，在使用前冻藏于暗处，并且在给药前立即旋涡混合。
将用各″时间″重复测量的结果进行的二因素(″处理″和″时间″)方差分析运用于体重和爪体积的百分数变化以及放射片级别转化的总分。进行post hocDunnett试验以比较药物治疗与载体的结果。在Dunnett试验后，将单向方差分析运用于胸腺和脾的重量以比较药物治疗与载体的结果。应用非线性最小二次方回归分析，4参数逻辑函数符合在4，14和21天的爪体积抑制百分率的剂量反应曲线。将ID50确定为对应于载体50％缩减值的剂量，并通过插值法从所符合的4参数方程式中导出。典型的生物学数据本发明的化合物是COX-2的抑制剂，因此它可用于上面列举的COX-2介导疾病的治疗。在下表所示的典型结果中可以看到抗环化加氧酶的化合物A的活性。在分析中，通过测量推定抑制剂存在与缺失情况下所合成的前列腺素量而测定抑制率。IC50值代表与非抑制对照组比较使前列腺素合成下降至50％所需的推定抑制剂的浓度。在鼠爪水肿分析中的ED50值代表与载体对照组比较使水肿形成减少50％所需的化合物的剂量。同时还显示化合物B对应的生物学活性，此化合物公开于WO 95/00501，实施例7和US 5,536,752。表测定
化合物A 化合物BCOX-2CHO细胞 .03μM .02μM全血 .45μM .12μMCOX-1CHO细胞 ＞50μM 17全血 77μM4.4μMU937微粒体11uM 0.45uM鼠爪水肿(ED50) 2.6mg/kg 3.0mg/kg现在通过下面非限制的实施例举例说明本发明，在此实施例中，除另行说明外(i)所有操作均在室温或环境温度下完成，即，温度范围为18-25℃；(ii)在低压(600-4000帕斯卡4.5-30mmHg)及浴器温度最大60℃的情况下，应用旋转式汽化器进行溶剂的蒸发；(iii)反应过程以薄层色谱法(TLC)进行追踪，并且所给反应时间仅仅为了举例说明；(iv)熔点没有校正并且′d′表示分解；所给熔点是在按照所述制备材料时获得的；在某些制备中，同质多晶可导致具有不同熔点的材料的离析；(v)通过下面技术中至少一种以确定所有终产物的结构和纯度TLC，质谱分析，核磁共振(NMR)波谱法或微量分析数据；(vi)所给收率仅仅为了举例说明；(vii)当给定时，NMR数据以(δ)值的形式作为多数诊断的质子，它以百万分之一(ppm)与作为内部标准的四甲基硅烷(TMS)相关，并用所示溶剂在300MHz或400MHz测定；用作符号形式的习惯缩写为s.单；d.对；t.三；m.多；br.宽等等；另外″Ar″表示一个芳香的符号，(viii)化学符号具有其通常的含义；还使用了下面的缩写v(体积)，w(重量)，b.p.(沸点)，M.P.(熔点)，L(升)，mL(毫升)，g(克)，mg(毫克)，mol(摩尔)，mmol(毫摩尔)，eq(当量)。可按照下面的方法制备化合物A合成方法方法A可用溴或碘卤化环戊烯酮(II)，然后用碱处理得到III(见有机合成6165)。然后可加入3，5-二氟苯硼酸，通过钯催化的偶联反应而形成IV。可用nBuLi或镁金属化4-溴代苯硫基甲烷，然后用IV处理而得到醇V。然后用诸如PDC的氧化剂以完成带有烯丙基换位的氧化作用得到环戊烯酮VI。然后用诸如H2O2的氧化剂在钨酸盐催化剂MMPP或mCPBA的参与下进行硫化氧化作用，由此获得砜Ia。可供选择地，VI还可转变为氨磺酰Ib，它描述于美国专利US 5,474,995，方法A。
方法B将锂或镁代苯硫基甲烷加入溴代环戊烯酮IIIa，获得叔醇VII。然后用试剂诸如PDC进行氧化作用获得酮VIII。此刻可用诸如H2O2的氧化剂在钨酸盐催化剂MMPP或mCPBA参与下氧化此硫化物而获得砜IX。然后进得3，5-二氟苯硼酸的钯催化的偶联反应获得Ia。
方法C可将3-乙氧基环戊烯酮(X)溴化，然后用碱处理而获得XI(见有机合成6165)。将锂或镁代苯硫基甲烷加入溴代环戊烯酮XI，然后进行中间加成物的酸重排以获得VIII。此刻可用诸如H2O2的氧化剂在钨酸盐催化剂MMPP或mCPBA参与下氧化此硫化物而获得砜IX。然后进行3，5-二氟苯硼酸的钯催化的偶联反应获得Ia。
实施例12-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮(化合物A)步骤1 3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮以一定的速率将n-BuLi溶液(在己烷中2.3M，120mL)加入-65℃在THF(800mL)中的4-溴代苯硫基甲烷(61g，0.3mol)溶液以保持其内部温度低于-55℃。在-65℃搅拌所得脂膏2小时，然后用在THF(50mL)中的3-乙氧基-2-环戊烯-1-酮(35g，0.28mmol)的溶液处理。在-65℃下30分钟后，将此溶液加热至0℃并且用饱和含水NH4Cl(400mL)将其骤冷。用3×1L的EtOAc萃取此产物，通过MgSO4干燥此混合萃取液后并浓缩。将所得物料在200mL1∶1的EtOAc/己烷溶液中swish以获得45g为白色固体的标题化合物。步骤2 2-溴代-3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮向在CCl4(200mL)中的3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮(9.64g，47.2mmol)悬浮液中加入在CCl4(30mL)中20分钟的溴(5mL)的溶液。将所得橙色悬浮液搅拌1.5小时，然后在冰浴器中冷却，并且加入三乙胺(14mL，100mmol)。30分钟后，用1M HCl(300mL)将此混合物骤冷，并用CH2Cl2萃取。用盐水冲洗此有机相，通过棉花过滤并将其蒸发。通过硅胶色谱法提纯，并用90％CH2Cl2/己烷洗脱获得标题化合物(7.13g)。步骤3 2-溴代-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮将MMPP(19g，30.7mmol)加入CH2Cl2(100mL)和MeOH(50mL)中的2-溴代-3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮(5.73g，20.2mmol)的0℃溶液。将此混合物在室温下搅拌5小时，然后浓缩。在饱和NaHCO3水溶液和CH2Cl2之间将残余物分配。用盐水冲洗此有机相，通过棉花过滤并将其蒸发。将所得固体在CH2Cl2/己烷中swish以获得标题化合物(5.57g)。步骤4 2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮将40mL的3∶1∶1甲苯∶正-丙醇∶水加入2-溴代-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮(664mg，2.11mmol)，3，5-二氟苯基硼酸(832mg，5.27mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(83mg，0.09mmol)和三苯膦(96mg，0.36mmol)的混合物中，并用氮气清洗此混合物。搅拌10分钟后，加入二乙胺(1.1mL，10.6mmol)，并且将此溶液加热以回流4小时。冷却并在1MNaOH和EtoAc之间分配此混合物。用水，1M HCl和盐水冲洗此有机相，并通过Mg2SO4干燥。通过硅胶色谱法，用50％CH2Cl2/己烷洗脱而提纯，然后通过CH2Cl2/乙醚/己烷的结晶作用以获得标题化合物(223mg)。1H NMR(CD3COCD3)δ7.95(2H，d)，7.65(2H，d)，6.98(1H，m)，6.82(2H，m)，3.19(2h，m)，3.15(3H，s)，2.68(2H，m).实施例1A步骤1 2-溴-2-环戊烯-1-酮将含溴(269g，1.68mol)的CCl4(400mL)溶液经过4小时一滴滴地加入在带有架空搅拌器的三颈烧瓶中的0℃含2-环戊烯-1-酮(125g，1.52mol)的CCl4(1.2L)溶液，保持其内部温度＜2℃。然后经过1.5小时一滴滴地加入含Et3N(310mL，2.22mol)CCl4(200mL)溶液，保持其内部温度＜10℃。将所得悬浮液加热至室温1小时，然后冷却至0℃并过滤。用两个700mL的3M HCl和500mL盐水冲洗滤液，然后通过棉花过滤。浓缩后获得228g橙色油剂，将其通过150mL 2∶1的己烷∶乙醚的结晶作用而获得191g标题化合物。1H NMR(CD3COCD3)δ7.94(1H，t)，2.72(2H，m)，2.46(2H，m).步骤2 2-溴-3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮将nBuLi(在己烷中1.6M，107.5mL，172mmol)加入-78℃含4-溴代苯硫基甲烷(35.1g，173mmol)的THF(500mL)溶液。将此溶液搅拌45分钟，然后加入含2-溴-2-环戊烯-1-酮(25.4g，158mmol)的THF(150mL)溶液，并且将此混合物加热至0℃，并用饱和含水NH4Cl将其骤冷。在真空中除去大部分溶剂，将残余物悬浮于水中，并用两部分EtOAc进行萃取。用盐水冲洗有机层，通过MgSO4干燥，过滤并浓缩。将物料溶解于DMF(300mL)中，冷却至0℃，并用PDC(72.4g，192mmol)处理。将所得混合物加热至室温并搅拌2小时，然后倾注于水(1.2L)中并用两部分500mL的EtOAc萃取。用盐水冲洗有机层，通过MgSO4干燥，过滤并浓缩而获得标题化合物，它为浅褐色固体并直接在下一步中使用。步骤3 2-溴-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮将MMPP(100g)加入含2-溴-3-(4-(硫甲基)苯基)-2-环戊烯-1-酮的2∶1 CH2Cl2/MeOH(500mL)的0℃溶液中。在室温下搅拌此混合物一整夜，然后浓缩并在饱和NaHCO3，1M Na2S2O4和CH2Cl2之间分配。用CH2Cl2萃取其含水层，并用盐水冲洗其混合有机物，通过棉花过滤并蒸发，在CH2Cl2/乙醚中swish所得固体而获得23g标题化合物。1H NMR(CD3COCD3)δ8.12(4H，m)，3.22(2H，m)，3.20(3H，s)，2.69(2H，m).步骤4 3，5-二氟苯硼酸经过20分钟将nBuLi(在己烷中2.4M，108mL，0.26mol)一滴一滴地加入含1-溴-3，5-二氟代苯(50g，0.26mol)的乙醚溶液(860mL)中。搅拌所得溶液10分钟，然后用硼酸三异丙酯(61mL，0.27mol)处理。将反应混合物加热至0℃30分钟，然后用1M HCl骤冷。搅拌30分钟后，将此混合物在乙酸乙酯和水之间分配。用盐水冲洗有机层，通过MgSO4干燥，过滤并蒸发。在高度真空下干燥所得产物一整夜而获得38g标题化合物。1H N(CD3COCD3)δ7.50(2H，br s)，7.40(2H，m)，7.04(1H，m).步骤5 2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮将2-溴-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮(52.2，166mmol)，3，5-二氟苯硼酸(31.9g，202mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(3.3g，3.6mmol)和三苯膦(1.89g，7.2mmol)的混合物溶解于甲苯(800mL)和nPrOH(250mL)中并脱气。搅拌10分钟后，加入二乙胺(21mL，203mmol)和水(250mL)。再次将混合物脱气，加热以回流1小时，然后冷却并倾注于EtOAc(2L)。分离含水层，并用0.2N NaOH(500mL)，0.5N HCl(500mL)和盐水冲洗有机层。然后通过MgSO4干燥有机相，通过硅藻土过滤并蒸发。在热的EtOAc(250mL)中swish所得浅褐色固体，冷却并过滤而获得45.8g标题化合物，其熔点为174-175℃。H NMR(CD3COCD3)δ7.95(2H，m)，7.66(2H，m)，6.98(1H，m)，6.80(2H，m)，3.17(2H，m)，3.12(3H，s)，2.68(2H，m).B.如下所述为一种制备2-溴-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮(实施例1，步骤3)的替代方法步骤1 2-溴-3-乙氧基-2-环戊烯-1-酮经过1.5小时经滴液漏斗将含溴(219g，1.37mol)的CHCl3(200mL)溶液加入-15℃的含3-乙氧基-2-环戊烯-1-酮(165g，1.30mol)的1.8L CHCl3溶液中，从而获得一种稠黄淤浆。另外搅拌30分钟后，经过30分钟经滴液漏斗加入含Et3N(210mL，1.5mol)的CHCl3(300mL)溶液。浓缩所得混合物，在EtOAc中悬浮并且通过一个2cm硅藻土覆盖于1cm硅胶上的垫板过滤。浓缩滤液，经4∶1乙醚/己烷再结晶所得物料而获得245g标题化合物。H NMR(CD3COCD3)δ4.43(2H，q)，2.95(2H，m)，2.47(2H，m)，1.39(3H，t).步骤2 2-溴-3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮经过20分钟将nBuLi(在己烷中2.5M，500mL，1.25mol)加入-78℃的含4-溴代苯硫基甲烷(253g，125mol)的THF(5L)溶液而获得浓稠淤浆，将其在-78℃搅拌2小时。然后经套管加入含2-溴-2-环戊烯-1-酮(242g，1.18mol)的THF(1L)溶液，而且此混合物可加热至-10℃。然后加入6N HCl(430mL)，并将所得混合物搅拌20分钟。加入EtOAc(3L)，并分离含水相。浓缩有机层。将残余物悬浮于乙醚中并过滤，从而获得287g标题化合物。1H NMR(CD3COCD3)8.12(4H，m)，3.22(2H，m)，3.20(3H，s)，2.69(2H，m).步骤3 2-溴-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮将NaWO42H2O(3.1g，9mmol)和Aliquat336(12g，30mmol)加入含2-溴-3-(4-(甲硫基)苯基)-2-环戊烯-1-酮(67.4g，238mmol)的EtOAc(500mL)和CH2Cl2(100mL)的室温悬浮液中。加入10mL的30％H2O2，并且将此混合物加热至40℃引起氧化作用。然后经过20分钟一滴一滴地加入85mLH2O2，同时进行外部冷却以保持其内部温度在50℃左右。然后将此深色反应混合物保持于40℃1.5小时。分离含水层，并且用温水冲洗有机相两遍。然后将有机相浓缩至500mL，并且过滤沉淀物，用乙醚冲洗而获得52.2g白色固体的标题化合物。
下面实施例的药物配方为本发明的例证实施例2湿粒状片剂组合物含量/片 成分25mg COX-2抑制剂79.7mg 微晶纤维素79.7mg 一水合乳糖6mg羟丙基纤维素8mgCroscarmellose sodium1mg硬脂酸镁通过改变片剂的总重量和前三个成分的比例可以在5mg和125mg之间调节片剂的剂量。通常保持微晶纤维素一水合乳糖是1∶1为优选。如果需要黄色或橙色，可以将至多5mg的氧化铁加入这个或其它组合物中。实施例2a湿粒状片剂组合物含量/片 成分125mgCOX-2抑制剂425mg微晶纤维素425mg一水合乳糖10mg 羟丙基纤维素14mg Croscarmellose sodium1mg 硬脂酸镁实施例2b湿粒状片剂组合物含量/片 成 分10mg COX-2抑制剂87.2mg 微晶纤维素87.2mg 一水合乳糖6mg 羟丙基酰纤维素8mg Croscarmellose sodium1mg 硬脂酸镁实施例2c湿粒状片剂组合物含量/片成 分5mg COX-2抑制剂89.7mg 微晶纤维素89.7mg 一水合乳糖6mg 羟丙基纤维素8mg Croscarmellose sodium1mg 硬脂酸镁实施例3直接压片片剂组合物含量/片成 分25mgCOX-2抑制剂106.9mg 微晶纤维素106.9mg 一水合乳糖7.5mg Croscarmellose sodium3.7mg 硬脂酸镁通过改变片剂的总重量和前三个成分的比例可以在5mg和125mg之间调节片剂的剂量。通常保持微晶纤维素一水合乳糖是1∶1为优选。实施例3a直接压片片剂组合物含量/片 成分125mgCOX-2抑制剂425mg微晶纤维素425mg一水合乳糖15mg Croscarmellose sodium10mg 硬脂酸镁实施例3b直接压片片剂组合物含量/片 成分10mg COX-2抑制剂42.5mg微晶纤维素42.5mg一水合乳糖4mg Croscarmellose sodium1mg 硬脂酸镁实施例3c直接压片片剂组合物含量/片成分5mg COX-2抑制剂45mg 微晶纤维素45mg 一水合乳糖4mg Croscarmellose sodium1mg 硬脂酸镁实施例4硬质凝胶胶囊组合物含量/片 成 分25mg COX-2抑制剂37mg 微晶纤维素37mg 一水合乳糖1mg硬脂酸镁1个胶囊硬质凝胶胶囊通过改变装填物的总重量和前三个成分的比例可以在1mg和50mg之间调节胶囊的剂量。通常保持微晶纤维素一水合乳糖是1∶1为优选。实施例5口服溶液含量/5mL剂量 成分50mg COX-2抑制剂用聚环氧乙烷400加至5mL通过改变两个成分的比例可以在1和50mg/5mL之间调节溶液的剂量。实施例6口服悬浮液含量/5mL剂量 成分100mg COX-2抑制剂150mg 聚乙烯吡咯烷酮2.5mg 聚氧乙烯脱水山梨糖醇一月桂酸酯10mg 苯甲酸用山梨糖醇溶液(70％)加至5mL通过改变前两个成分的比例可以在1和50mg/5mL之间调节悬浮液的剂量。实施例7静脉内注射液含量/200mL剂量 成 分1mg COX-2抑制剂0.2mg 聚环氧乙烷4001.8mg 氯化钠用净化水加至200mL。
权利要求
1.一种用于治疗环化加氧酶-2介导的疾病的药物组合物，所述组合物含有一种可接受的药用载体和一种有效治疗量的化合物，此化合物为2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
2.一种药用组合物，它含有2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮和一种可接受的药用载体。
3.一种根据权利要求1或2所述的药物组合物，它含有10至250mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮和一种可接受的药用载体。
4.一种根据权利要求1或2所述的组合物，它含有10，20，30，40或50mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
5.一种根据权利要求1或2所述的组合物，它含有60，70，80，90，100，110或120mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
6.一种根据权利要求1或2所述的组合物，它含有60至120mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
7.一种根据权利要求1或2所述的组合物，它含有10至50mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
8.一种治疗一种炎性疾病的方法，此疾病对用一种非类固醇抗炎剂的治疗敏感，其方法包括向需要这种治疗的患者给予10至250mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
9.一种根据权利要求8所述的方法，它包括向需要这种治疗的患者给予10，20，30，40或50mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
10.一种根据权利要求8所述的方法，它包括向需要这种治疗的患者给予60，70，80，90，100，110或120mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
11.一种根据权利要求8所述的方法，它包括向需要这种治疗的患者给予60至120mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
12.一种根据权利要求8所述的方法，它包括向需要这种治疗的患者给予10至50mg的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
13.一种根据权利要求8所述的方法，它用于非慢性头痛，疼痛或肿胀的治疗。
14.一种根据权利要求8所述的方法，它用于骨关节炎的治疗。
15.一种根据权利要求8所述的方法，它用于类风湿性关节炎的治疗。
16.2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮在一种药物制造中的应用，此药物用于对非类固醇抗炎剂治疗敏感的炎性疾病的治疗。
17.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为10至250mg，此药物用于对非类固醇抗炎剂治疗敏感的炎性疾病的治疗。
18.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为10，20，30，40或50mg，此药物用于对非类固醇抗炎剂治疗敏感的炎性疾病的治疗。
19.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为60，70，80，90，100，110或120mg，此药物用于对非类固醇抗炎剂治疗敏感的炎性疾病的治疗。
20.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为10至50mg，此药物用于对非类固醇抗炎剂治疗敏感的炎性疾病的治疗。
21.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为60至120mg，此药物用于对非类固醇抗炎剂治疗敏感的炎性疾病的治疗。
22.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为10至50mg，此药物用于骨关节炎的治疗。
23.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为60至120mg，此药物用于骨关节炎的治疗。
24.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为10至50mg，此药物用于类风湿性关节炎的治疗。
25.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为60至120mg，此药物用于类风湿性关节炎的治疗。
26.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为10至50mg，此药物用于非慢性头痛，疼痛或肿胀的治疗。
27.根据权利要求16所述的2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮的应用，它在一种药物的一种剂型制造中所用的量为60至120mg，此药物用于非慢性头痛，疼痛或肿胀的治疗。
28.一种化合物2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
29.一种化合物2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮，它是用于治疗的。
30.结晶2-(3，5-二氟苯基)-3-(4-(甲磺酰)苯基)-2-环戊烯-1-酮。
全文摘要
本发明包括新的化合物A,2－(3,5－二氟苯基)－3－(4－(甲磺酰)苯基)－2－环戊烯－1－酮,药物组合物和此化合物在药物制备中的应用,此药物用于治疗环化加氧酶－2介导的疾病。
文档编号C07C315/06GK1192900SQ97113460
公开日1998年9月16日 申请日期1997年4月30日 优先权日1997年3月7日
发明者C·布莱克 申请人:麦克弗罗斯特(加拿大)有限公司