结合CD37蛋白的抗体药物偶联物(ADC)的制作方法

本申请要求2013年8月1日提交的美国临时专利申请号61/861,321的优先权。它们的公开内容通过引用全文纳入本文。以ASCII文本文件提交序列表下述以ASCII文本文件提交的内容通过引入全文纳入本文：序列表的计算机可读形式(CRF)(文件名：511582008940SeqList.txt，记录日期：30.07.14，大小：32,329字节)。发明领域本文一些方面所述发明涉及结合于称为CD37的蛋白的抗体、其抗原结合片段及其抗体药物偶联物(ADC)。本发明一些方面进一步涉及预后、预防和治疗方法以及用于治疗表达CD37的癌症的组合物。发明背景据估计，2013年有1,660,290名男性和女性(854,790名男性和805,500名女性)将会诊断患有全癌症，有580,350名男性和女性将会死于全癌症。从2006年到2010年，全癌症的诊断年龄中值为66岁。经过年龄加权调整的发病率为每年每100,000名男性和女性中有463.0名。这些比例基于来自18SEER地理区域的2006-2010中诊断的病例。从2006年到2010年，全癌症的死亡年龄中值为72岁。经过年龄加权调整的死亡率为每年每100,000名男性和女性中有176.4名。这些比例基于美国2006-2010年死亡的患者。来自18SEER地理区域的2003-2009年期间的总体5年相对存活为65.8％。非霍奇金淋巴瘤(NHL)可在任何年龄发作，并且常表现为淋巴结大于正常、发热和体重减少。有多种不同类型的非霍奇金淋巴瘤。这些类型可分为侵袭性(快速生长)和无痛性(慢速生长)，其可由B细胞或T细胞形成。B细胞型非霍奇金淋巴瘤包括伯基特淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤(CLL/SLL)、弥散性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、免疫母细胞性大细胞淋巴瘤、前体B淋巴母细胞淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。T细胞型非霍奇金淋巴瘤包括蕈样真菌病、间变性大细胞淋巴瘤和前体T淋巴母细胞淋巴瘤。骨髓或干细胞移植后发作的淋巴瘤通常是B细胞型非霍奇金淋巴瘤。预后和治疗取决于疾病的阶段和类型。据估计，2013年全球有69,740名男性和女性(37,600名男性和32,140名女性)将会诊断患非霍奇金淋巴瘤，有19,020名男性和女性将会死于非霍奇金淋巴瘤。从2006年到2010年，非霍奇金淋巴瘤的诊断年龄中值为66岁。经过年龄加权调整的发病率为每年每100,000名男性和女性中有19.7名。这些比例基于来自18SEER地理区域的2006-2010中诊断的病例。从2006年到2010年，非霍奇金淋巴瘤的死亡年龄中值为76岁。经过年龄加权调整的死亡率为每年每100,000名男性和女性中有6.4名。这些比例基于美国2006-2010年死亡的患者。来自18SEER地理区域的2003-2009年期间的总体5年相对存活为69.0％。白血病是源于血液形成组织例如骨髓的癌症，其产生大量血细胞并进入血流。主要的白血病包括：急性淋巴细胞性白血病(ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性骨髓产生性白血病(CML)和多毛细胞白血病(CLL)。对于白血病群体，据估计2013年有48,610名男性和女性(27,880名男性和20,730名女性)将会诊断患白血病，有23,720名男性和女性将会死于白血病。从2006年到2010年，白血病的诊断年龄中值为66岁。经过年龄加权调整的发病率为每年每100,000名男性和女性中有12.8名。这些比例基于来自18SEER地理区域的2006-2010中诊断的病例。从2006年到2010年，白血病的死亡年龄中值为75岁。经过年龄加权调整的死亡率为每年每100,000名男性和女性中有7.1名。这些比例基于美国2006-2010年死亡的患者。来自18SEER地理区域的2003-2009年期间的总体5年相对存活为56.0％。CLL是成人中第二常见类型的白血病，通常缓慢恶化。其通常在中年或之后发作，罕见发作于儿童。患有早期CLL的患者不进行化疗，直到其变为表现征候或表现出疾病快速发展的迹象。尽早开始化疗并没有对CLL表现出益处，甚至可能提高死亡率。开始化疗后，核苷类似物氟达拉滨是CLL的最常用一线治疗法。在某些临床实验中，组合方案显示出改善的响应率，包括下述：氟达拉滨、环磷酰胺和利妥昔单抗(FCR)；喷妥司汀、环磷酰胺和利妥昔单抗(PCR)；氟达拉滨、环磷酰胺和米托蒽醌(FCM)；环磷酰胺、长春新碱和泼尼松(CVP)；环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松(CHOP)。据估计，2013年有15,680名男性和女性(9,720名男性和5,960名女性)将会诊断患慢性淋巴性白血病，有4,580名男性和女性将会死于慢性淋巴性白血病。从2006年到2010年，慢性淋巴性白血病的诊断年龄中值为71岁。经过年龄加权调整的发病率为每年每100,000名男性和女性中有4.3名。这些比例基于来自18SEER地理区域的2006-2010中诊断的病例。从2006年到2010年，慢性淋巴性白血病的死亡年龄中值为79岁。经过年龄加权调整的死亡率为每年每100,000名男性和女性中有1.4名。这些比例基于美国2006-2010年死亡的患者。来自18SEER地理区域的2003-2009年期间的总体5年相对存活为79.2％。急性髓细胞性白血病(AML)是成人中最常见的急性白血病类型。当前AML的治疗需要有足够的侵略性以实现完全缓解(CR)，这是由于部分缓解无法提供显著的存活益处。成人AML的缓解率与年龄反相关，对于小于60岁的人来说预期的缓解率大于65％。数据表明一旦达到缓解，缓解的持续时间在年长患者中更短。表达祖细胞抗原CD34和/或P-糖蛋白(MDR1基因产物)的患者的结果较差。细胞遗传学分析提供了一些强有力的预后信息，可用于预测缓解诱导和缓解后治疗的结果。表明较好预后的细胞遗传学异常包括t(8；21),inv(16)或t(16；16)和t(15；17)。正常的细胞遗传学预示着平均风险的AML。具有如下特征的AML患者的化疗预后特别差：染色体5或7的长臂或单体的缺失；染色体3的移位或插入、t(6；9)、t(9；22)；或染色体11q23异常。据估计，2013年有14,590名男性和女性(7,820名男性和6,770名女性)将会诊断患急性髓细胞性白血病，有10,370名男性和女性将会死于急性髓细胞性白血病。从2006年到2010年，急性髓细胞性白血病的诊断年龄中值为67岁。经过年龄加权调整的发病率为每年每100,000名男性和女性中有3.7名。这些比例基于来自18SEER地理区域的2006-2010中诊断的病例。从2006年到2010年，急性髓细胞性白血病的死亡年龄中值为72岁。经过年龄加权调整的死亡率为每年每100,000名男性和女性中有2.8名。这些比例基于美国2006-2010年死亡的患者。来自18SEER地理区域的2003-2009年期间的总体5年相对存活为24.2％。应注意，所有一般癌症信息获自NCI网站(www.cancer.gov)并且所有统计基于SEER发生率并且NCHS致死统计获自：HowladerN.,等SEERCancerStatisticsReview(SEER癌症统计综述),1975-2010,国立癌症研究院，马里兰州贝塞斯达(Bethesda,MD),http://seer.cancer.gov/csr/1975_2010/,基于201211月的SEER数据提交，2013年公布于SEER网站。单克隆抗体(mAb)(G.Kohler和C.Milstein,Nature256:495-497(1975))的治疗实用性正在实现。单克隆抗体现已获批作为移植、癌症、传染病、心血管疾病和炎症的疗法。不同同种型具有不同的效应功能。该功能差异反映在各种免疫球蛋白同种型的不同三维结构中(P.M.Alzari等,AnnualRev.Immunol.,6:555-580(1988))。因为小鼠便于免疫并且识别大部分人抗原为外来物，有治疗潜力的抗人靶标mAb一般具有鼠来源。然而，鼠mAb作为人用疗法具有固有缺点。由于mAb在人中的循环半衰期比人抗体短，它们需要更高频率的给药。更严重的是，向人免疫系统重复给予鼠抗体会引起人免疫系统应答，该应答是通过识别小鼠蛋白为外来物并产生人抗小鼠抗体(HAMA)应答而造成。这类HAMA应答可导致变态反应并从系统中快速清除鼠抗体，从而使鼠抗体治疗无效。为避免该影响，已尝试在小鼠中建立人免疫系统。最初的尝试是希望建立转基因小鼠，该小鼠能以具有人序列的抗体对抗原产生应答(参见Bruggemann等,Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA86:6709-6713(1989))，但这受限于通过可由克隆载体稳定维持的DNA量。利用酵母人造染色体(YAC)克隆载体能够将人Ig基因座的大种系片段(germlinefragment)导入转基因哺乳动物。使用YAC将基本上大部分以人基因组中所见的相同间隔排列的人V、D和J区基因和人恒定区导入到小鼠中。一种这类转基因小鼠系称为小鼠并可从安进福利蒙特公司(AmgenFremont,Inc.)(加利福尼亚州福利蒙特)市售获得。此外，抗体还可使用VelocImmune转基因小鼠制备，该小鼠中携带内源性小鼠可变区段的基因组序列在免疫球蛋白重链(VH、DH和JH区段)和/或κ轻链(VK和JK)处已用携带人免疫球蛋白重链(VH、DH和JH)和/或κ轻链(VK和JK)基因座的未重排种系可变区段的人基因组序列完整或部分地代替(纽约州塔利镇的再生元公司(Regeneron))。参见例如美国专利6,586,251,6,596,541,7,105,348,6,528,313,6,638,768,和6,528,314。技术实现要素：本发明一些方面提供结合于CD37蛋白和CD37蛋白多肽片段的抗体、抗原结合片段及其抗体药物偶联物(ADC)。在一些实施方式中，本发明包括与治疗剂偶联的全人抗体。在某些实施方式中，前提是不编码图2中完整的核酸序列和/或不制备图3中完整的氨基酸序列。在某些实施方式中，编码图2中完整的核酸序列和/或制备图3中完整的氨基酸酸序列，两者中的任一种都采用相应的人单位剂型。本方一些方面还提供各种免疫原或治疗组合物，例如抗体药物偶联物，以及治疗表达CD37的癌症例如表I中所列的组织的癌症(例如AML、CLL、NHL和MM)的策略。附图说明图1.CD37的cDNA和氨基酸序列示于图1。起始甲硫氨酸用下划线表示。开放阅读框从核酸122延伸至967，包含终止密码子。图2.CD37抗体的核酸和氨基酸序列。图2A.HvCD37-6b15.1.1重链的cDNA和氨基酸序列。双下划线是重链可变区，下划线是重链可变区，且下划线是重链人IgG2恒定区。图2B.HvCD37-6b15.1.1轻链的cDNA和氨基酸序列。双下划线表示轻链可变区，下划线表示人κ恒定区。图3.CD37抗体的氨基酸序列。图3A.HvCD37-6b15.1.1重链的氨基酸序列。双下划线表示重链可变区，且下划线表示人IgG2恒定区。图3B.HvCD37-6b15.1.1轻链的氨基酸序列。双下划线表示轻链可变区，且下划线表示人κ恒定区。图4.HvCD37-6b15.1.1抗体与人Ig种系的比对。图4A.HvCD37-6b15.1.1重链与人Ig种系的比对。图4B.HvCD37-6b15.1.1轻链与人Ig种系的比对。图5.HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人滤泡B细胞淋巴瘤DoHH2中的效力研究。图6.HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人淋巴瘤Ramos-RR-XCL的异种移植模型中的效力研究。图7.HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人慢性淋巴细胞性白血病JVM3中的效力研究。图8.HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人急性髓细胞性白血病MV-4-11中的效力研究。图9.数种CD37ADC在移植入SCID小鼠的皮下建立的人利妥昔抗性淋巴瘤细胞系Ramos-RR-XCL中的效力研究。图10.通过IHC检测癌症患者试样中的CD37蛋白。图10(A)和10(B)显示NHL患者试样。图10(C)和10(D)显示MM患者试样。图11.HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE(a.k.a.AGS67E)和HvCD37-6b15.1.1MAb(a.k.a.AGS67C)在移植入SCID小鼠的皮下建立的人急性髓细胞性白血病细胞系MOLM-13的异种移植模型中的效力研究。发明详述章节概述I.)定义II.)CD37抗体III.)抗体-药物偶联物总述III(A).美登木素III(B).澳瑞他汀(Auristatin)和尾海兔素(dolostatin)III(C).卡奇霉素III(D).其它细胞毒剂IV.)结合CD37的抗体药物偶联物V.)接头单元VI.)延伸单元VII.)氨基酸单元VIII.)间隔单元IX.)药物单元X.)药物载量XI.)测定ADC细胞毒性作用的方法XII.)对表达CD37的癌症的治疗XIII.)将CD37作为靶标用于基于抗体的治疗XIV.)CD37ADC混合物XV.)联合治疗XVI.)试剂盒/制品定义：除非另外定义，本文使用的所有专业术语、符号和其它科学术语或专有词汇旨在具有本发明所属领域技术人员通常所理解的含义。在一些情况中，本文出于阐明和/或便于引用目的对具有常规理解含义的术语加以限定，本文中包括此类限定不应理解为表示与本领域常规理解的有显著差异。许多本文所述或所引用的技术和方法已由本领域技术人员充分了解并通常通过常规方法采用，例如，Sambrook等在MolecularCloning:ALaboratoryManual(《分子克隆：实验室手册》)第二版(1989),冷泉港实验室出版社(ColdSpringHarborLaboratoryPress)(纽约州冷泉港)中描述的广泛应用的分子克隆方法。适当时，除非另有说明，涉及使用市售可得试剂盒和试剂的过程通常按生产商给出的方案和/或参数进行。本文使用商标名时，除非另有说明，引用该商标名也指该商标名产品的产品制剂、通用名药和活性药物成分。术语“晚期癌症”、“局部晚期癌症”、“晚期疾病”和“局部晚期疾病”是指已通过相关组织囊扩展的癌症，并且包括美国泌尿协会(AmericanUrologicalAssociation)(AUA)系统下的C期疾病、Whitmore-Jewett系统下的C1-C2期疾病和TNM(肿瘤、淋巴结、转移)系统下的T3-T4期和N+疾病。总体而言，不推荐局部晚期疾病患者接受外科手术，而且与患有临床局部(器官限定的)癌症的患者相比，这些患者的结果明显较为不利。缩写“AFP”指二甲基缬氨酸-缬氨酸-海兔异亮氨酸(dolaisoleuine)-海兔脯氨酸(dolaproine)-苯丙氨酸-对苯二胺(参见下文式XVI)。缩写“MMAE”指单甲基澳瑞他汀E(参见下文式XI)。缩写“AEB”指澳瑞他汀E与对乙酰基苯甲酸反应生成的酯(参见下文式XX)。缩写“AEVB”指澳瑞他汀E与苯甲酰戊酸反应生成的酯(参见下文式XXI)。缩写“MMAF”指甲基缬氨酸-缬氨酸-海兔异亮氨酸-海兔脯氨酸-苯丙氨酸(dovaline-valine-dolaisoleunine-dolaproine-phenylalanine)(参见下文式XVIV)。除非另有说明，术语“烷基”指具有约1-20个碳原子(以及其间的碳原子范围和碳原子具体数目的所有组合和亚组合)，优选约1-8个碳原子的饱和直链或支链烃。烷基的示例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基和3,3-二甲基-2-丁基。单独或作为另一基团一部分的烷基可任选地被一个或多个基团，优选1-3个基团(以及选自卤素的任何额外取代基)取代，这些基团包括但不限于：-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R’、-OC(O)R’、-C(O)OR’、-C(O)NH2、-C(O)NHR’、-C(O)N(R’)2、-NHC(O)R’、-SR’、-SO3R’、-S(O)2R’、-S(O)R’、-OH、＝O、-N3、-NH2、-NH(R’)、-N(R’)2和-CN，其中R’各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基，其中所述-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、和-C2-C8炔基可任选进一步被一个或多个基团取代，这些基团包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R”、-OC(O)R”、-C(O)OR”、-C(O)NH2、-C(O)NHR”、-C(O)N(R”)2、-NHC(O)R”、-SR”、-SO3R”、-S(O)2R”、-S(O)R”、-OH、-N3、-NH2、-NH(R”)、-N(R”)2和-CN，其中R”各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基。除非另有说明，术语“烯基”和“炔基”指具有约2-20个碳原子(以及其间的碳原子范围和碳原子具体数目的所有组合和亚组合)，优选约2-8个碳原子的直链和支链碳链。烯基链的链中具有至少一个双键，炔基链的链中具有至少一个三键。烯基的示例包括但不限于：乙烯或乙烯基、烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基和-2、3-二甲基-2-丁烯基。炔基的示例包括但不限于：炔属、炔丙基、乙炔基、丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基、和-3-甲基-1-丁炔基。单独出现或作为另一基团一部分的烯基和炔基可选被一个或多个基团，优选1-3个基团(以及选自卤素的任何额外取代基)取代，这些基团包括但不限于：-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R’、-OC(O)R’、-C(O)OR’、-C(O)NH2、-C(O)NHR’、-C(O)N(R’)2、-NHC(O)R’、-SR’、-SO3R’、-S(O)2R’、-S(O)R’、-OH、＝O、-N3、-NH2、-NH(R')、-N(R’)2和-CN，其中R’各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基，其中所述-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基和-C2-C8炔基可以进一步被一个或多个取代基任选取代，这些取代基包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2C8炔基)、-芳基、-C(O)R”、-OC(O)R”、-C(O)OR”、-C(O)NH2、-C(O)NHR”、-C(O)N(R”)2、-NHC(O)R”、-SR”、-SO3R”、-S(O)2R”、-S(O)R”、-OH、-N3、-NH2、-NH(R”)、-N(R”)2和-CN，其中R”各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基。除非另有说明，术语“亚烷基”指某一饱和支链或直链烃基，所述饱和支链或直链烃基具有约1-20个碳原子(以及其间的碳原子范围和碳原子具体数目的所有组合和亚组合)，优选约1-8个碳原子，并具有通过除去母体烷的同一个或两个不同碳原子上两个氢原子而产生的两个单价游离基中心。典型的亚烷基包括但不限于：亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚庚基、亚辛基、亚壬基、亚癸基、1,4-亚环己基等。单独出现或作为另一基团一部分的亚烷基可选被一个或多个基团，优选1-3个基团(以及选自卤素的任何额外取代基)取代，这些基团包括但不限于：-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R’、-OC(O)R’、-C(O)OR’、-C(O)NH2、-C(O)NHR’、-C(O)N(R’)2、-NHC(O)R’、-SR’、-SO3R’、-S(O)2R’、-S(O)R’、-OH、＝O、-N3、-NH2、-NH(R’)、-N(R’)2和-CN，其中R’各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基，其中所述-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、和-C2-C8炔基可以进一步被一个或多个取代基任选取代，这些取代基包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R”、-OC(O)R”、-C(O)OR”、-C(O)NH2、-C(O)NHR”、-C(O)N(R”)2、-NHC(O)R”、-SR”、-SO3R”、-S(O)2R”、-S(O)R”、-OH、-N3、-NH2、-NH(R”)、-N(R”)2和-CN，其中R”各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基。除非另有说明，术语“亚烯基”指含有至少一个碳-碳双键的可选取代的亚烷基。示例性亚烯基包括例如，亚乙烯基(-CH＝CH-)和亚丙烯基(-CH＝CHCH2-)。除非另有说明，术语“亚炔基”指含有至少一个碳-碳三键的可选取代的亚烷基。示例性亚炔基包括例如，亚乙炔基(-C≡C-)、炔丙基(-CH2C≡C-)和4-戊炔基(-CH2CH2CH2C≡CH-)。除非另有说明，术语“芳基”指通过除去母体芳环系统中一个碳原子上的一个氢原子而获得的6-20个碳原子(以及其间的碳原子范围和碳原子具体数目的所有组合和亚组合)的单价芳族烃基。示例性结构中，某些芳基用“Ar”表示。典型的芳基包括但不限于：衍生自苯、取代的苯、苯基、萘、蒽、联苯基等的基团。单独出现或作为另一基团一部分的芳基可选被一个或多个基团，优选1-5个基团，或甚至是1-2个基团取代，这些基团包括但不限于：-卤素、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R’、-OC(O)R’、-C(O)OR’、-C(O)NH2、-C(O)NHR’、-C(O)N(R’)2、-NHC(O)R’、-SR’、-SO3R’、-S(O)2R’、-S(O)R’、-OH、-NO2、-N3、-NH2、-NH(R’)、-N(R’)2和-CN，其中R’各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基，其中所述-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、和-芳基可以进一步被一个或多个基团任选取代，这些基团包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R”、-OC(O)R”、-C(O)OR”、-C(O)NH2、-C(O)NHR”、-C(O)N(R”)2、-NHC(O)R”、-SR”、-SO3R”、-S(O)2R”、-S(O)R”、-OH、-N3、-NH2、-NH(R”)、-N(R”)2和-CN，其中R”各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基。除非另有说明，术语“亚芳基”指任选取代的二价芳基(即通过除去母体芳环系统的同一个或两个不同碳原子上的两个氢原子获得)，它可以是邻位、间位或对位构型，如以下结构所示(以苯基作为示范性芳基)。典型的“-(C1-C8亚烷基)芳基”、“-(C2-C8亚烯基)芳基”和“-(C2-C8亚炔基)芳基”包括但不限于：苄基、2-苯基乙-1-基、2-苯基乙烯-1-基、萘基甲基、2-萘基乙-1-基、2-萘基乙烯-1-基、萘并苄基、2-萘并苯基乙-1-基等。除非另有说明，术语“杂环”指具有3-14个环原子(也称为环成员)的单环、双环或多环系统，其中至少一个环中的至少一个环原子是选自N、O、P或S的杂原子(包括其间的碳原子和杂原子的范围和具体数目的所有组合和亚组合)。杂环可具有独立地选自N、O、P或S的1-4个环杂原子。杂环中的一个或多个N、C或S原子可以被氧化。单环杂环优选具有3-7个环原子(如2-6个碳原子和1-3个独立选自N、O、P或S的杂原子)，双环杂环优选具有5-10个环成员(如4-9个碳原子和1-3个独立选自N、O、P或S的杂原子)。包含杂原子的环可以是芳环或非芳环。除非另有说明，杂环在可产生稳定结构的任何杂原子或碳原子处连接于其侧基。杂环的描述参见Paquette，“PrinciplesofModernHeterocyclicChemistry”(《现代杂环化学原理》)(W.A.Benjamin，纽约，1968)，特别是第1、3、4、6、7和9章；TheChemistryofHeterocyclicCompounds,AseriesofMonographs(《杂环化合物的化学：专题论文集》)(约翰韦利森公司(JohnWiley&Sons)，纽约，1950年至今)，具体是第13、14、16、19和28卷；和J.Am.Chem.Soc.82:5566(1960)。“杂环”基团的示例包括例如但不限于，吡啶基、二氢吡啶基、四氢吡啶基(哌啶基)、噻唑基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、四唑基、苯并呋喃基、硫萘基、吲哚基、假吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、哌啶基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、吡咯啉基、四氢呋喃基、双四氢呋喃基、四氢吡喃基、双四氢吡喃基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢异喹啉基、吖辛因基、三嗪基、6H-1,2,5-噻二嗪基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、噻吩基、噻蒽基、吡喃基、异苯并呋喃基、色烯基、吨基、二苯并氧硫杂环己二烯基(phenoxathinyl)、2H-吡咯基、异噻唑基、异唑基、吡嗪基、哒嗪基、中氮茚基、异吲哚基、3H-吲哚基、1H-吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4H-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、嘧啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋咱基、吩嗪基、异色满基、色满基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌嗪基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、奎宁环基、吗啉基、唑烷基、苯并三唑基、苯并异唑基、羟吲哚基、苯并唑啉基和靛红酰基(isatinoyl)。优选的“杂环”基团包括但不限于：苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并吡唑基、香豆素基(coumarinyl)、异喹啉基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、喹啉基、嘧啶基、吡啶基、吡啶酮基、吡嗪基、哒嗪基、异噻唑基、异噁唑基和四唑基。单独或作为另一基团一部分的杂环基团可选被一个或多个基团，优选1-2个基团取代，这些基团包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R’、-OC(O)R’、-C(O)OR’、-C(O)NH2、-C(O)NHR’、-C(O)N(R’)2、-NHC(O)R’、-SR’、-SO3R’、-S(O)2R’、-S(O)R’、-OH、-N3、-NH2、-NH(R’)、-N(R’)2和-CN，其中R’各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基，其中所述-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基和-芳基可进一步被一个或多个取代基任选取代，这些取代基包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R”、-OC(O)R”、-C(O)OR”、-C(O)NH2、-C(O)NHR”、-C(O)N(R”)2、-NHC(O)R”、-SR”、-SO3R”、-S(O)2R”、-S(O)R”、-OH、-N3、-NH2、-NH(R”)、-N(R”)2和-CN，其中R”各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或芳基。示例但非限定地，碳-键合杂环可以在以下位置发生键合：吡啶的2、3、4、5或6位；哒嗪的3、4、5或6位；嘧啶的2、4、5或6位；吡嗪的2、3、5或6位；呋喃、四氢呋喃、硫代呋喃(thiofuran)、噻吩(thiophene)、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位；噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位；异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位；吖丙啶的2或3位；氮杂环丁烷的2、3或4位；喹啉的2、3、4、5、6、7或8位；或异喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。更典型地，碳键合杂环包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、5-吡啶基、6-吡啶基、3-哒嗪基、4-哒嗪基、5-哒嗪基、6-哒嗪基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-吡嗪基、6-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基。示例但非限定地，氮键合杂环可以在吖丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚或1H-吲唑的1位；异吲哚或异二氢吲哚的2位；吗啉的4位；和咔唑或β-咔啉的9位键合。更典型地，氮键合杂环包括1-吖丙啶基、1-吖丁啶基(1-azetedyl)、1-吡咯基、1-咪唑基、1-吡唑基和1-哌啶基。除非另有说明，术语“碳环”指具有3-14个环原子(以及其间的碳原子范围和碳原子具体数目的所有组合和亚组合)且所有环原子都是碳原子的饱和或不饱和的非芳族单环、双环或多环系统。单环碳环优选具有3-6个环原子，更优选具有5或6个环原子。双环碳环优选具有7-12个环原子，如排列为双环[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]系统，或具有9或10环原子，排列为双环[5,6]或[6,6]系统。术语“碳环”包括例如，与芳环稠合的单环碳环(如，与苯环稠合的单环碳环)。碳环优选具有3-8个碳环原子。单独出现或作为另一基团一部分的碳环基团可选被一个或多个基团，优选1-2个基团(以及选自卤素的任何额外取代基)取代，这些基团包括但不限于：-卤素、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R’、-OC(O)R’、-C(O)OR’、-C(O)NH2、-C(O)NHR’、-C(O)N(R’)2、-NHC(O)R’、-SR’、-SO3R’、-S(O)2R’、-S(O)R’、-OH、＝O、-N3、-NH2、-NH(R’)、-N(R’)2和-CN、其中R’各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基，其中所述-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)和-芳基可以进一步被一个或多个取代基任选取代，这些取代基包括但不限于：-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、-卤素、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C2-C8烯基)、-O-(C2-C8炔基)、-芳基、-C(O)R”、-OC(O)R”、-C(O)OR”、-C(O)NH2、-C(O)NHR”、-C(O)N(R”)2、-NHC(O)R”、-SR”、-SO3R”、-S(O)2R”、-S(O)R”、-OH、-N3、-NH2、-NH(R”)、-N(R”)2和-CN，其中R”各自独立地选自-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基或-芳基。单环碳环取代基的例子包括-环丙基、-环丁基、-环戊基、-1-环戊-1-烯基、-1-环戊-2-烯基、-1-环戊-3-烯基、环己基、-1-环己-1-烯基、-1-环己-2-烯基、-1-环己-3-烯基、-环庚基、-环辛基、-1,3-环己二烯基、-1,4-环己二烯基、-1,3-环庚二烯基、-1,3,5-环庚三烯基和–环辛二烯基。单独使用或作为另一基团一部分的术语“碳环基(carbocyclo)”指二价的可选取代的上述碳环基团(即通过除去母体碳环系统的同一个或两个不同碳原子上的两个氢原子获得)。除非文中另有说明，连字号(-)指侧链分子的连接点。因此，术语“-(C1-C8亚烷基)芳基”或“-C1-C8亚烷基(芳基)”指本文定义的C1-C8亚烷基，其中亚烷基在该亚烷基的任何碳原子上连接于侧链分子且连接于该亚烷基碳原子的一个氢原子被本文定义的芳基取代。当某特定基团被“取代”时，该基团可具有一个或多个取代基，优选1-5个取代基，更优选1-3个取代基，最优选1-2个取代基，所述取代基独立地选自取代基列表。然而，该基团通常可具有任何数量的选自卤素的取代基。如此表示被取代的基团。根据发明人意图，特定分子位置上的任何取代基或变量的定义应独立于它在该分子其他位置上的定义。应理解，本领域普通技术人员可选择本发明化合物上的取代基和取代模式，以提供化学性质稳定并容易用本领域已知技术和本文所述方法合成的化合物。本文所用的保护基指选择性封闭(暂时或永久)多官能化合物中一个反应性位点的基团。所述实施方式所用的合适羟基保护基是药学上可接受的，在给予对象后可能需要或不需要从母体化合物上切除而使该化合物具有活性。在体内，切割通过正常代谢过程进行。羟基保护基是本领域众所周知的，参见ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis(《有机合成中的保护基》)，T.W.Greene和P.G.M.Wuts(约翰韦利森出版社(JohnWiley&Sons)，第3版)，通过引用全文纳入本文用于所有目的，这类保护基包括例如醚(如，烷基醚和甲硅烷基醚，包括例如，二烷基甲硅烷基醚、三烷基甲硅烷基醚、二烷基烷氧基甲硅烷基醚)、酯、碳酸酯、氨基甲酸酯、磺酸酯和磷酸酯保护基。羟基保护基的例子包括但不限于：甲醚；甲氧基甲醚、甲硫基甲醚、(苯基二甲基甲硅烷基)甲氧基甲醚、苄氧基甲醚、对-甲氧基苄氧基甲醚、对-硝基苄氧基甲醚、邻-硝基苄氧基甲醚、(4-甲氧基苯氧基)甲醚、愈创木酚甲醚、叔丁氧基甲醚、4-戊烯氧基甲醚、甲硅烷氧基甲醚、2-甲氧基乙氧基甲醚、2,2,2-三氯乙氧基甲醚、双(2-氯乙氧基)甲醚、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲醚、薄荷氧基甲醚(menthoxymethylether)、四氢吡喃基醚、1-甲氧基环己醚、4-甲氧基四氢噻喃基醚、4-甲氧基四氢噻喃基醚S,S-二氧化物、1-[(2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基醚、1-(2-氟苯基)-4-甲氧基哌啶-4-基醚、1,4-二噁烷-2-基醚、四氢呋喃基醚、四氢噻吩基醚；取代的乙醚如1-乙氧基乙醚、1-(2-氯乙氧基)乙醚、1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]乙醚、1-甲基-1-甲氧基乙醚、1-甲基-1-苄氧基乙醚、1-甲基-1-苄氧基-2-氟乙醚、1-甲基-1苯氧基乙醚、2-三甲基甲硅烷基醚、叔丁醚、烯丙醚、炔丙醚、对-氯苯基醚、对-甲氧基苯基醚、苄基醚、对-甲氧基苄基醚、3,4-二甲氧基苄基醚、三甲基甲硅烷基醚、三乙基甲硅烷基醚、三丙基甲硅烷基醚、二甲基异丙基甲硅烷基醚、二乙基异丙基甲硅烷基醚、二甲基己基甲硅烷基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚、二苯基甲基甲硅烷基醚、苯甲酰甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯基乙酸酯、苯甲酸酯、甲基碳酸烷基酯、9-芴基甲基碳酸烷基酯、乙基碳酸烷基酯、2,2,2,-三氯乙基碳酸烷基酯、1,1,-二甲基-2,2,2-三氯乙基碳酸酯、烷基磺酸酯、甲磺酸酯、苄磺酸酯、甲苯磺酸酯、亚甲基缩醛(methyleneacetal)、亚乙基缩醛(ethylideneacetal)和叔丁基亚甲基缩酮(t-butylmethylideneketal)。优选的保护基由下式代表：-Ra、-Si(Ra)(Ra)(Ra)、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)NH(Ra)、-S(O)2Ra、-S(O)2OH、P(O)(OH)2和-P(O)(OH)ORa，式中Ra是C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、-C1-C20亚烷基(碳环)、-C2-C20亚烯基(碳环)、-C2-C20亚炔基(碳环)、-C6-C10芳基、-C1-C20亚烷基(芳基)、-C2-C20亚烯基(芳基)、-C2-C20亚炔基(芳基)、-C1-C20亚烷基(杂环)、-C2-C20亚烯基(杂环)或-C2-C20亚炔基(杂环)，其中单独或作为另一基团一部分的所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基、碳环和杂环基团可选被取代。“改变天然糖基化模式”就本文目的而言意在指缺失一种或多种天然序列CD37中发现的糖部分(通过移除潜在的糖基化位点或通过用化学和/或酶方法去除糖基化)，和/或添加一种或多种天然序列CD37中不存在的糖基化位点。另外，该短语包括天然蛋白糖基化中的定性变化，涉及各种存在的糖部分的性质和比例的变化。术语“类似物”指与另一分子结构相似或具有相似或相应特质的分子(例如CD37相关蛋白)。例如，CD37蛋白类似物可由特异性结合CD37的抗体或T细胞特异性结合。除非另有说明，术语“抗体”以最广义使用。因此，“抗体”可以是天然产生或人造的，例如由常规杂交瘤技术产生的单克隆抗体。CD37抗体包括单克隆抗体和多克隆抗体以及含有这些抗体中抗原结合域和/或一个或多个互补决定区的片段。本文所用的术语“抗体”指任何形式的抗体或其片段，该抗体或其片段特异性结合CD37和/或显示所需的生物活性并具体包括单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)和抗体片段，只要其能特异性结合CD37和/或显示所需生物活性的。本文提供的方法和组合物可使用任何特异性抗体。因此，在一个实施方式中，术语“抗体”包括一种分子，该分子包含至少一个来自轻链免疫球蛋白分子的可变区和至少一个来自重链分子的可变区，其组合形成靶抗原的特异性结合位点。在一个实施方式中，该抗体是IgG抗体。例如，该抗体是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗体。用于本发明方法和组合物的抗体可以产生于细胞培养物、噬菌体或各种动物，所述动物包括但不限于牛、兔、山羊、小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、绵羊、狗、猫、猴、黑猩猩和猿。因此，在一个实施方式中，本发明的抗体在一些实施方式中是哺乳动物抗体。噬菌体技术可用于分离起始抗体或产生具有改变的特异性或亲合力特征的变体。这类技术是本领域中常规和熟知的。在一个实施方式中，该抗体通过本领域已知的重组方法生产。例如，重组抗体可通过使用包含编码抗体的DNA序列的载体转染宿主细胞来生产。可使用一种或多种载体来将表达至少一个VL区和一个VH区的DNA序列转染入宿主细胞。抗体产生和生产的重组方法的示例性说明包括Delves，ANTIBODYPRODUCTION:ESSENTIALTECHNIQUES(《抗体生产：关键技术》)(威利出版社(Wiley),1997)；Shephard等，MONOCLONALANTIBODIES(《单克隆抗体》)(牛津大学出版社(OxfordUniversityPress)，2000)；Goding，MONOCLONALANTIBODIES:PRINCIPLESANDPRACTICE(《单克隆抗体：原理和实践》)(学术出版社(AcademicPress)，1993)；和CURRENTPROTOCOLSINIMMUNOLOGY(新编免疫学实验指南)(约翰韦利森公司(JohnWiley&Sons)，最新版)。可通过重组方法对本发明的抗体进行修饰以提高抗体在介导所需功能中的功效。因此，在本发明范围中涵盖可使用重组方法通过取代修饰的抗体。通常，该取代是保守性取代。例如，可用不同的残基取代抗体恒定区中的至少一个氨基酸。参见例如，美国专利号5,624,821、美国专利号6,194,551、申请号WO9958572和Angal等，Mol.Immunol.30:105-08(1993)。氨基酸修饰包括氨基酸的缺失、添加和取代。在一些情况中，进行该变化以降低不需要的活性，例如补体依赖性细胞毒性。该抗体经常通过共价或非共价地结合一种物质来标记，该物质提供检测信号。已知各种标记和偶联技术且在科学和专利文献中广泛报道。这些抗体可根据与正常或缺陷CD37的结合来筛选。参见例如，ANTIBODYENGINEERING:APRACTICALAPPROACH(《抗体工程：实践方法》)(剑桥大学出版社(OxfordUniversityPress)，1996)。可通过以下体外试验鉴定具有所需生物活性的合适抗体，所述体外试验包括但不限于：增殖、迁移、粘着、软琼脂生长、血管生成、细胞－细胞通讯、细胞凋亡、转运、信号转导，和以下体内试验如肿瘤生长的抑制。本文提供的抗体也可用于诊断应用。作为捕获或非中和抗体，可根据结合特定抗原但不抑制该抗原的受体结合或生物活性的能力来筛选所述抗体。作为中和抗体，该抗体可用于竞争性结合试验。它们也可用于定量分析CD37或其受体。本文所用术语抗体的"抗原结合部分"或"抗体片段"(或是简称为"抗体部分")指保留特异性结合抗原(如CD37和变体；图1)能力的CD37抗体的一个或多个片段。已证明，抗体的抗原结合功能可由全长抗体的片段行使。术语抗体的“抗原结合部分”所涵盖的结合片段的示例包括：(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab')2片段，包含在铰链区由二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体单臂VL和VH结构域组成的Fv片段；(v)由VH结构域组成的dAb片段(Ward等，(1989)Nature341:544-546)；和(vi)分离的互补决定区(CDR)。而且，尽管Fv片段的两个结构域VL和VH分别由不同基因编码，但可通过重组方法利用合成接头使其连接成为一条蛋白链，其中VL和VH区配对形成单价分子(称为单链Fv(scFv)；参见例如Bird等(1988)Science242:423-426和Huston等(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883)。此类单链抗体也应该为术语抗体的“抗原结合部分”所涵盖。这些抗体片段通过本领域熟练技术人员已知的常规方法获取，并且筛选这些片段以与完整抗体相同的方式应用。如本文所用，可使用任何形式的“抗原”来生成特异性针对CD37的抗体。因此，引发抗原可以是单独或与一种或多种本领域已知的免疫原性促进剂联用的完整蛋白、单表位、或多表位。因此，引发抗原可以是分离的全长蛋白、细胞表面蛋白(例如用转染有至少部分抗原的细胞免疫)或可溶性蛋白(例如仅用蛋白的胞外结构域部分免疫)。该抗原可在遗传修饰的细胞中生产。编码抗原的DNA可以是基因组或非基因组的(例如cDNA)并编码至少一部分胞外结构域。本文所用术语“部分”在抗原的内容中指最小数目的氨基酸或核酸，适当时，构成感兴趣抗原的免疫原性表位。可采用适合转化感兴趣细胞的任何遗传载体，包括但不限于腺病毒载体、质粒，和非病毒载体(如阳离子脂质)。在一个实施方式中，本文方法和组合物中的抗体特异性结合至少一部分感兴趣CD37的胞外结构域。本文提供的抗体或其抗原结合片段可与“生物活性剂”偶联。本文所用术语“生物活性剂”指任何合成或天然产生的化合物，该化合物结合抗原和/或增强或调节所需的生物作用以增强细胞杀死毒素。在一个实施方式中，本发明中使用的结合片段是生物活性片段。本文所用术语“生物活性”指能结合所需抗原表位并直接或间接发挥生物作用的抗体或抗体片段。直接作用包括但不限于：调节、刺激和/或抑制生长信号；调节、刺激和/或抑制抗凋亡信号；调节、刺激和/或抑制凋亡或坏死信号；调节、刺激和/或抑制ADCC级联反应；和调节、刺激和/或抑制CDC级联反应。“双特异性”抗体也用于本发明的方法和组合物。本文所用术语“双特异性抗体”指某一抗体，一般是对至少两个不同抗原性表位具有结合特异性的单克隆抗体。在一个实施方式中，这些表位来自相同抗原。在另一个实施方式中，这些表位来自两个不同抗原。制备双特异性抗体的方法为本领域已知。例如，双特异性抗体可通过共同表达两种免疫球蛋白重/轻链对来重组生产。参见例如，Milstein等，Nature305:537-39(1983)。或者，可使用化学连接制备双特异性抗体。参见例如，Brennan等，Science229:81(1985)。双特异性抗体包括双特异性抗体片段。参见例如，Hollinger等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:6444-48(1993)，Gruber等，J.Immunol.152:5368(1994)。本文所述的单克隆抗体具体包括“嵌合”抗体以及此类抗体的片段，嵌合抗体中部分重链和/轻链与来源于特定物种或属于特定抗体类型或亚类抗体的对应序列相同或同源，而该(些)链的剩余部分与来源于另一物种或属于另一抗体类型或亚类抗体的对应序列相同或同源，前提是其特异性结合靶抗原和/或显示所需的生物活性(美国专利号4,816,567，和Morrison等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-6855(1984))。术语“化疗剂”指所有有效抑制肿瘤生长的化学化合物。化疗剂的非限制性示例包括烷化剂，例如氮芥、乙撑亚胺化合物和烷基硫磺酯；抗代谢物，例如叶酸、嘌呤或嘧啶拮抗剂；有丝分裂抑制剂，例如抗微管蛋白试剂(例如长春花生物碱、澳瑞他汀和鬼臼毒素衍生物)；细胞毒性抗生素；破坏或干扰DNA表达或复制的化合物，例如，DNA小沟结合物；和生长因子受体拮抗剂。另外，化疗剂包括细胞毒剂(如本文所定义)、抗体、生物分子和小分子。无论有无明确说明，术语“化合物”涉及并涵盖化学化合物本身以及其各种形式(除非文中明确排除以下情况)：化合物的无定形和结晶形式，包括多晶型，其中这些形式可以是混合物的一部分或者是分离状态；化合物的游离酸和游离碱形式，它们通常是本文提供的结构所示的形式；化合物的异构体，指光学异构体和互变异构体，其中光学异构体包括对映异构体和非对映异构体，手性异构体和非手性异构体，并且光学异构体包括分离的光学异构体以及光学异构体混合物，包括外消旋和非外消旋混合物；其中异构体可以是分离形式或与一种或多种其它异构体的混合物形式；同位素化合物，包括含氘和含氚化合物，并包括含放射性同位素的化合物，所述放射性同位素包括治疗和诊断上有效的放射性同位素；化合物多聚体形式，包括二聚体、三聚体等形式；化合物的盐，优选药学上可接受的盐，包括酸加成盐和碱加成盐，包括具有有机抗衡离子和无机抗衡离子的盐，包括两性离子形式，如果化合物与两种或多种抗衡离子相关联，那么这两种或多种抗衡离子可以相同或不同；以及化合物溶剂合物，包括半溶剂合物、单溶剂合物、二溶剂合物等，包括有机溶剂合物和无机溶剂合物，所述无机溶剂合物包括水合物；如果化合物与两种或多种溶剂分子相关联，那么这两种或多种溶剂分子可以相同或不同。在一些情况下，本文提到本发明化合物时包括明确提及一种或多种上述形式，如盐和/或溶剂合物，然而，这种提法只是为了强调，而不作为排除上文鉴定的其它形式。术语“互补决定区”和“CDR”是本领域已知的，指抗体可变区内非连续的氨基酸序列，其赋予抗体特异性和结合亲和性。通常，在各重链可变区中存在三种(3)CDR(CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)且在各轻链可变区中存在三种(3)CDR(CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3)。可以使用多种已知的方案中的任一种确定给定CDR的氨基酸序列边界，包括以下文献：Kabat等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(《免疫学感兴趣蛋白的序列》)，第5版，马里兰州贝塞斯达的国立卫生研究院公共卫生服务部(PublicHealthService)(“Kabat”编号方案)，Al-Lazikani等(1997)JMB273,927-948(“Chothia”编号方案)，MacCallum等，J.Mol.Biol.262:732-745(1996)，“Antibody-antigeninteractions:Contactanalysisandbindingsitetopography(抗体-抗原相互作用：接触分析和结合位点拓扑学)”，J.Mol.Biol.262,732-745(“接触”编号方案)，LefrancMP等，“IMGTuniquenumberingforimmunoglobulinandTcellreceptorvariabledomainsandIgsuperfamilyV-likedomains(免疫球蛋白和T细胞受体可变结构域和Ig超家族V样结构域的IMGT独特编号)”，DevCompImmunol,2003年1月；27(1):55-77(“IMGT”编码方案)以及HoneggerA和PlückthunA，“Yetanothernumberingschemeforimmunoglobulinvariabledomains:anautomaticmodelingandanalysistool(免疫球蛋白可变结构域的另一种编号方案：自动建模和分析工具)”，JMolBiol,2001年6月8日；309(3):657-70(AHo编号方案)。给定CDR的边界可基于下文表V所用的方案而不同，其列举了根据Kabat、Chothia和Contact方案的CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3和CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3的示例性位置。对于CDR-H1，给出使用Kabat和Chothia编号方案的残基编号。因此，除非另有说明，给定抗体或其区域(如可变区)的术语“CDR”和“互补决定区”以及抗体或其区域的单个CDR(如CDR-H1、CDR-H2)和框架区(FR)应理解为包括上文所述已知方案中任一种所定义的各自区域(例如互补决定区)。在一些情况下，指明用于鉴定某一或某些具体CDR的方案，如CDR按Kabat、Chothia或接触方法限定。在其他情况下，给出了CDR的具体氨基酸序列。本文所用术语“保守性取代”指本领域技术人员已知的氨基酸取代且通常不改变所得分子的生物学活性。本领域技术人员认识到，多肽非必需区域的单一氨基酸取代通常不显著改变生物学活性(参见例如Watson等，MOLECULARBIOLOGYOFTHEGENE(《基因分子生物学》)，本杰明/卡明斯出版公司(TheBenjamin/CummingsPub.Co.)，第224页(第4版1987))。这类示例性取代优选是根据表II和表III(a-b)中所示进行的取代。例如，这类变化包括用任何异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)和亮氨酸(L)取代这些疏水性氨基酸中的任何其它氨基酸；天冬氨酸(D)取代谷氨酸(E)且反之亦然；谷氨酰胺(Q)取代天冬胺酰(N)且反之亦然；以及丝氨酸(S)取代苏氨酸(T)且反之亦然。其它取代也可视为保守性取代，这取决于特定氨基酸的环境和其在蛋白质三维结构中的作用。例如，甘氨酸(G)和丙氨酸(A)经常可互换，丙氨酸(A)和缬氨酸(V)也可如此。甲硫氨酸(M)相对疏水，可经常与亮氨酸和异亮氨酸互换且有时可与缬氨酸互换。赖氨酸(K)和精氨酸(R)经常在氨基酸残基的显著特性是其电荷而这两种氨基酸残基间的pK差异不重要的位置处可互换。在特定环境中其它变化也可视为“保守性”(参见，例如本文中表III(a)，“Biochemistry(《生物化学》)”第二版第13-15页，LubertStryer编(斯坦福大学)；Henikoff等，PNAS1992卷8910915-10919；Lei等，JBiolChem1995年5月19日；270(20):11882-6)。其它取代也是允许的并可凭经验或根据已知的保守性取代来确定。术语“细胞毒剂”指抑制或阻止细胞的表达活性、细胞功能，和/或导致细胞破坏的物质。该术语旨在包括放射性同位素、化疗剂和毒素，如细菌、真菌、植物或动物来源的小分子毒素或酶活性毒素，包括其片段和/或变体。细胞毒剂的示例包括但不限于：澳瑞他汀(例如澳瑞他汀E、澳瑞他汀F、MMAE和MMAF)、金霉素、美登木素(maytansinoid)、蓖麻毒蛋白、蓖麻毒蛋白A链、考布他汀(combrestatin)、多卡米星、尾海兔素、多柔比星、柔红霉素、紫杉酚、顺铂、cc1065、溴化乙锭、丝裂霉素、依托泊苷、替尼泊苷、长春新碱、长春花碱、秋水仙碱、二羟基蒽二酮、放线菌素、白喉毒素、假单胞菌外毒素(PE)A、PE40、相思豆毒蛋白、相思豆毒蛋白A链、蒴莲根毒素A链、á八叠球菌、白树毒素、迈托毒素、限曲菌素、酚霉素、依诺霉素、麻疯树毒蛋白、抗巴豆毒素、卡奇霉素、肥皂草(Sapaonariaofficinalis)抑制剂和糖皮质激素以及其它的化疗剂和放射性同位素例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212或Bi213、P32和包括Lu177在内的Lu的放射性同位素。抗体也可与抗癌前药的活化酶偶联，该酶能将前药转变成其活性形式。本文所用术语“双抗体”指具有两个抗原-结合位点的小抗体片段，该片段包含同一多肽链(VH-VL)中连接轻链可变结构域(VL)的重链可变结构域(VH)。使用长度过短以至于无法在同一条链的两个结构域之间形成配对的接头时，迫使各结构域与另一条链的互补结构域配对，产生两个抗原-结合位点。双抗体更详细描述于例如，EP404,097；WO93/11161；和Hollinger等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90:6444-48(1993)。在关于CD37结合剂对CD37表达细胞作用的上下文中，术语“消耗”指CD37表达细胞的数目减少或消除。本文所用术语“基因产物”指肽/蛋白或mRNA。例如，“本发明的基因产物”有时在本文中指“癌氨基酸序列”、“癌蛋白”、“表I所列的癌蛋白”、“癌mRNA”、“表I所列的癌mRNA”等。在一个实施方式中，癌蛋白由图1的核酸编码。癌蛋白可以是图1中核酸所编码的片段或者全长蛋白。在一个实施方式中，癌氨基酸序列用于确定序列相同性或相似性。在另一实施方式中，该序列是图1中核酸所编码蛋白的天然产生的等位基因变体。在另一种实施方式中，该序列是本文中进一步描述的序列变体。“异源偶联物”抗体可用于本发明的方法和组合物。本文所用术语“异源偶联物抗体”指两种共价连接的抗体。这类抗体可通过合成蛋白化学的已知方法来制备，包括使用交联剂。参见例如，美国专利号4,676,980。术语“同源物”指某一分子，该分子通过例如在相应位点具有相同或相似的化学残基序列而展现出与另一分子的同源性。在一个实施方式中，本文中提供的抗体是“人抗体”。本文所用术语“人抗体”指某一抗体，其中包含互补决定区(CDR)在内的轻链和重链序列的完整序列基本上来自人基因。在一个实施方式中，人单克隆抗体通过三源杂交瘤技术、人B细胞技术(参见例如Kozbor等，Immunol.Today4:72(1983))、EBV转化技术(参见例如Cole等，MONOCLONALANTIBODIESANDCANCERTHERAPY77-96(1985))或使用噬菌体展示(参见例如Marks等，J.Mol.Biol.222:581(1991))制备。在具体的实施方式中，该人抗体在转基因小鼠中生成。本领域已知制备部分至全人抗体的技术并可使用任何这类技术。根据一种特别优选的实施方式，在工程改造成表达人重链和轻链抗体基因的转基因小鼠中制备全人抗体序列。制备生产人抗体的转基因小鼠的示例性描述参见申请号WO02/43478和美国专利6,657,103(阿布吉尼公司(Abgenix))及其同族专利。来自生产所需抗体的转基因小鼠的B细胞随后可融合以制备用于连续生产抗体的杂交瘤细胞系。例如，参见美国专利号5,569,825；5,625,126；5,633,425；5,661,016和5,545,806；以及Jakobovits,Adv.DrugDel.Rev.31:33-42(1998)；Green等，J.Exp.Med.188:483-95(1998)。本文所用术语“人源化抗体”指含有来自非人(例如鼠)抗体以及人抗体序列的抗体形式。此类抗体是嵌合抗体，其中含有衍生自非人免疫球蛋白的极少序列。通常，所述人源化抗体包含至少一个且通常两个可变结构域的几乎全部，其中全部或基本上全部的高变环对应于非人免疫球蛋白的高变环，全部或基本上全部的FR区是人免疫球蛋白序列的FR区。人源化抗体还任选包含至少一部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，一般是人免疫球蛋白的Fc。参见例如，Cabilly美国专利号4,816,567；Queen等(1989)Proc.Nat'lAcad.Sci.USA86:10029-10033；和ANTIBODYENGINEERING:APRACTICALAPPROACH(《抗体工程：实践方法》)(牛津大学出版社(OxfordUniversityPress)1996)。本文所用术语“抑制了”或“抑制”指以降低了可检测的量，或完全阻止。短语“分离的”或“生物学纯化的”指一种物质，该物质基本上或本质上不含在天然状态下通常伴随该物质的成分。因此，本发明所述的分离肽优选不含在其原位环境中通常与该肽相关的物质。例如，当基本上与污染多核苷酸分离时，核苷酸可称为“分离的”，该污染多核苷酸对应于或互补于非CD37基因或编码非CD37基因产物或其片段的多肽的基因。技术人员可容易地采用核酸分离方法来获得分离的CD37多核苷酸。例如，当采用物理、机械或化学方法从通常与蛋白相关的细胞组分中移出CD37蛋白时，称之为“分离的”蛋白。本领域技术人员可容易地使用标准纯化方法来获得分离的CD37蛋白。或者，可用化学方法制备分离的蛋白。合适的“标记”包括放射性核素、酶、底物、辅因子、抑制剂、荧光部分、化学发光部分、磁性颗粒等。教导使用这类标记的专利包括美国专利号3,817,837；3,850,752；3,939,350；3,996,345；4,277,437；4,275,149和4,366,241。另外，本文提供的抗体可用作荧光体(fluorobodies)的抗原结合组分。参见例如，Zeytun等，Nat.Biotechnol.21:1473-79(2003)。术语“哺乳动物”指归类为哺乳动物的任何生物体，包括小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、马和人。在本发明的一个实施方式中，该哺乳动物是小鼠。在本发明的另一个实施方式中，该哺乳动物是人。术语“转移性癌”和“转移性疾病”指扩散至局部淋巴结或远端部位的癌，并旨在包括AUA系统中的D期疾病和TNM系统中的TxNxM+期。本文所用术语“调节剂”或“测试化合物”或“药物候选物”或其语法上等同形式描述了待测试的任意分子，例如蛋白、寡肽、有机小分子、多糖、多核苷酸等，所述测试是测试其直接或间接改变癌症表型或表达癌序列(例如核酸或蛋白序列)以及癌序列作用(例如，信号转导、基因表达、蛋白相互作用等)的能力。一方面，调节剂会中和本发明癌蛋白的作用。“中和”指蛋白活性和对细胞的结果性作用被抑制或阻断。另一方面，调节剂通过中和所述蛋白水平来中和基因和其相应蛋白的作用。在优选的实施方式中，调节剂改变表达概况，或本文提供的核酸或蛋白的表达概况，或下游效应通路。在一个实施方式中，调节剂抑制癌表型，例如，抑制成正常组织指纹图谱(tissuefingerprint)。在另一个实施方式中，调节剂诱导癌表型。通常，用不同的试剂浓度平行运行多种试验混合物，以获得对不同浓度的差异反应。通常，这些浓度之一用作阴性对照，即零浓度或低于检测水平的浓度。调节剂、药物候选物或测试化合物包括大量化学种类，但它们一般为有机分子，优选分子量大于100且小于约2500道尔顿的小有机化合物。优选的小分子小于2000或小于1500或小于1000或小于500道尔顿。候选试剂包含对与蛋白质发生结构相互作用，特别是形成氢键，所必须的官能团，且通常至少包含胺、羰基、羟基或羧基，优选包含至少两个化学官能团。候选试剂常包含环状碳或杂环结构，和/或用一个或多个上述官能团取代的芳香结构或多芳香结构。调节剂也包含生物分子，例如肽、糖、脂肪酸、类固醇、嘌呤、嘧啶，其衍生物、结构类似物或组合。特别优选肽。一类调节剂是肽，例如含有约5-约35个氨基酸的肽，优选含有约5-约20个氨基酸的肽，特别优选含有约7-约15个氨基酸的肽。优选地，癌调节蛋白是可溶蛋白，包含非跨膜区和/或具有N末端Cys以协助溶解。在一个实施方式中，该片段的C末端保持为游离酸且N末端是游离胺以协助偶联，即偶联半胱氨酸。在一个实施方式中，本发明的癌蛋白与本文所述的免疫原性试剂偶联。在一个实施方式中，该癌蛋白与BSA偶联。在一些实施方式中，本发明的肽(例如具有优选长度的肽)可互相连接或与其它氨基酸连接以形成较长的肽/蛋白。该调节肽可以是上述天然产生的蛋白的消化物，随机肽或“偏向性”随机肽。在一个优选实施方式中，基于肽/蛋白的调节剂是如本文所定义的抗体及其片段。本文所用术语“单克隆抗体”指获自基本均一抗体群的抗体，即除了可少量可能天然存在的突变以外，群体包含的单独抗体是相同的。单克隆抗体具有针对单一抗原性表位的高度特异性。相反，常规(多克隆)抗体制剂一般包含大量针对(或特异于)不同表位的抗体。在一个实施方式中，多克隆抗体含有多种单克隆抗体，在含多个抗原性表位的单一抗原内具有不同表位特异性、亲和性或亲和力。定语"单克隆"表明抗体的特征在于获自基本均一的抗体群，而不应解释为需要通过任何特定方法来生产抗体。例如，在一些实施方式中，根据本发明所用的单克隆抗体可通过首先由Kohler等，Nature256:495(1975)所述的杂交瘤方法，或通过重组DNA方法(参见例如美国专利号4,816,567)制备。也可通过例如Clackson等，Nature352:624-628(1991)和Marks等，J.Mol.Biol.222:581-597(1991)所述的技术从噬菌体抗体文库中分离“单克隆抗体”。这些单克隆抗体通常以下列Kd结合：至少约1μM，更通常至少约300nM，一般至少约30nM，优选至少约10nM，更优选至少约3nM或更佳，该值通常由ELISA测定。“药物赋形剂”包括以下材料，例如佐剂、载剂、pH调节和缓冲剂、张力调节剂、润湿剂、防腐剂等。“药学上可接受的”指非毒性、惰性和/或生理上可与人或其它哺乳动物相容的组合物。术语“多核苷酸”指至少10个碱基或碱基对长度的核苷酸多聚体形式，可以是核糖核苷酸或脱氧核苷酸或任何核苷酸类型的改性形式，并旨在包括单链和双链形式的DNA和/或RNA。本领域中，该术语经常与“寡核苷酸”互换使用。多核苷酸可包括本文公开的核苷酸序列，其中图1所示胸苷(T)也可以是尿嘧啶(U)；该定义涉及DNA和RNA化学结构之间的差异，特别是观察到RNA的四种主要碱基之一是尿嘧啶(U)而不是腺苷(T)。术语“多肽”指含至少约4、5、6、7或8个氨基酸的聚合物。说明书通篇使用了氨基酸的标准三字母(参见表III)或单字母名称。本领域中，该术语经常与“肽”或“蛋白”互换使用。“重组”DNA或RNA分子是经体外分子操作的DNA或RNA分子。本文所用的术语“单链Fv”或“scFv”或“单链”抗体指含抗体VH和VL结构域的抗体片段，其中这些结构域存在于单个多肽链中。通常，Fv多肽的VH和VL区之间还包含多肽接头，这使sFv形成所需结构用于抗原结合。有关sFv的综述参见Pluckthun，THEPHARMACOLOGYOFMONOCLONALANTIBODIES(《单克隆抗体的药理学》)，第113卷，Rosenburg和Moore编，纽约施普林格出版社(Springer-Verlag,NewYork)，第269-315页(1994)。本文所用的术语“特异性”、“特异性结合”和“特异结合”指抗体选择性结合靶抗原表位。可通过在一组指定条件下比较与合适抗原结合以及与非相关抗原或抗原混合物结合的方式来检测抗体的结合特异性。如果该抗体与合适抗原的结合比非相关抗原或抗原混合物高至少2、5、7和优选10倍，则该抗体视为特异性抗体。在一个实施方式中，特异性抗体是一种仅与CD37抗原结合但不与非相关抗原结合的抗体。在另一实施方式中，特异性抗体是结合人CD37抗原但不结合非人CD37抗原的抗体，该非人CD37抗原相对CD37抗原具有70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的氨基酸同源性。在另一实施方式中，特异性抗体是结合人CD37抗原和结合鼠CD37抗原的抗体，但与人抗原的结合度更高。在另一实施方式中，特异性抗体是结合人CD37抗原和结合灵长类CD37抗原的抗体，但与人抗原的结合度更高。在另一实施方式中，特异性抗体结合人CD37抗原以及任何非人CD37抗原，但与人抗原或其任何组合的结合度更高。本文所用的“治疗”或“治疗的”和其语法上相关术语，指对任何疾病结果的任何改善，例如延长存活、较低的发病率和/或减少副作用(替代性治疗方式的副产结果)；正如本领域技术人员容易理解的那样，优选完全根治疾病，即使这并非是对治疗作用的要求。术语“变体”指某一分子，该分子展现不同于所述类型或标准的变化，例如在具体所述蛋白相应位点上具有一个或多个不同氨基酸残基的蛋白(例如示于图1的CD37蛋白)。类似物是变体蛋白的一个示例。剪接同种型和单核苷酸多态性(SNP)是变体的其它示例。本发明所述的“CD37蛋白”和/或“CD37相关蛋白”包括本文具体鉴定的那些蛋白(见图1)，以及可根据本文所概述的方法或本领域容易获得的方法无需过度实验而分离/产生并鉴定的等位基因变体、保守取代变体、类似物和同源物。也包括组合不同CD37蛋白或其片段的部分的融合蛋白，以及CD37蛋白与异源多肽的融合蛋白。该CD37蛋白总称为CD37相关蛋白、本发明所述的蛋白或CD37。术语“CD37相关蛋白”指具有4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25或多于25个氨基酸的多肽片段或CD37蛋白序列；或具有至少30、35、40、45、50、55、60、65、70、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、225、250、275、276、277、278、279、280或更多个氨基酸的多肽片段或CD37蛋白序列。CD37抗体本发明的另一方面提供结合CD37相关蛋白的抗体(见图1)。在一个实施方式中，与CD37相关蛋白结合的抗体是特异性结合包含氨基酸序列SEQIDNO.:2的CD37蛋白的抗体。该特异性结合包含氨基酸序列SEQIDNO.:2的CD37蛋白的抗体包括可结合其它CD37相关蛋白的抗体。例如，结合含有氨基酸序列SEQIDNO.:2的CD37蛋白的抗体可结合CD37相关蛋白，例如CD37变体和其同源物或类似物。在一些实施方式中，本发明的CD37抗体具体用于癌症(参见例如表I)预后试验、成像、诊断和治疗方法。类似地，该抗体可用于急性骨髓性白血病(“AML”)、慢性淋巴细胞性白血病(“CLL”)、非霍奇金淋巴瘤(“NHL”)和其他癌症(CD37也在这些其他癌症中表达或过表达)的治疗和/或预后。此外，胞内表达的抗体(如单链抗体)在治疗涉及CD37表达的癌症(例如晚期或转移性AML、CLL、NHL或MM癌症或其他晚期或转移性癌症)中具有治疗用处。抗体、特别是单克隆抗体的各种制备方法为本领域所熟知。例如，可通过使用分离的或免疫偶联形式的CD37相关蛋白、肽或片段免疫合适哺乳动物宿主来制备抗体(Antibodies:ALaboratoryManual(《抗体：实验室手册》)，CSH出版社(CSHPress)，Harlow和Lane编(1988)；Harlow，Antibodies(《抗体》)，纽约的冷泉港出版社(ColdSpringHarborPress)(1989))。另外，也可使用CD37融合蛋白，例如CD37GST-融合蛋白。在一个具体实施方式中，生产包含图1中所有或大部分氨基酸序列的GST融合蛋白，然后用作免疫原以生产合适的抗体。在另一实施方式中，合成CD37相关蛋白并用作免疫原。另外，使用本领域已知的裸DNA免疫技术(用或不用纯化的CD37相关蛋白或CD37表达型细胞)产生对所编码免疫原的免疫应答(关于综述，参见Donnelly等，1997，Ann.Rev.Immunol.15:617-648)。可分析如图1所示的CD37蛋白氨基酸序列来选择产生抗体的CD37蛋白特异性区域。例如，使用CD37氨基酸序列的疏水性和亲水性分析来鉴定CD37结构的亲水性区域。可使用各种本领域已知的其它方法容易地鉴定显示免疫结构以及其它区域和结构域的CD37蛋白区域，该方法例如Chou-Fasman、Garnier-Robson、Kyte-Doolittle、Eisenberg、Karplus-Schultz或Jameson-Wolf分析。可使用Hopp,T.P.和Woods,K.R.,1981,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.78:3824-3828的方法生成亲水性概况。可使用Kyte,J.和Doolittle,R.F.,1982,J.Mol.Biol.157:105-132的方法生成亲水(Hydropathicity)概况。可使用JaninJ.,1979,Nature277:491-492方法生成可及(accessible)残基百分比(％)概况。可使用BhaskaranR.,PonnuswamyP.K.,1988,Int.J.Pept.ProteinRes.32:242-255的方法产生平均挠性(AverageFlexibility)概况。可使用Deleage,G.,RouxB.,1987,ProteinEngineering1:289-294的方法生成β转角(Beta-turn)概况。因此，通过任意这些程序或方法鉴定的每个区域都在本发明的范围内。产生CD37抗体的优选方法通过本文所提供的实施例做进一步说明。用作免疫原的蛋白或多肽的制备方法为本领域熟知。制备蛋白带有载体(例如BSA、KLH或其它载体蛋白)的免疫原性偶联物的方法也是本领域熟知的。在一些情况下，使用例如碳二亚胺试剂直接偶联；在其它情况下连接试剂(例如伊利诺斯州罗克富德的皮尔斯化学公司(PierceChemicalCo.)提供的试剂)也有效。经常通过如本领域所理解的在合适时期内注射并使用合适佐剂来进行CD37免疫原的给予。免疫方案期间，可采取抗体效价测定抗体形成的充分性。可通过本领域熟知的各种方法产生CD37单克隆抗体。例如，使用通常已知的Kohler和Milstein的标准杂交瘤技术或使生成抗体的B细胞永生化的修饰方法来制备分泌所需单克隆抗体的永生化细胞系。通过免疫试验筛选分泌所需抗体的永生化细胞系，该试验中抗原是CD37相关蛋白。鉴定出合适的永生化细胞培养物时，可从体外培养物或腹水中扩增细胞并生产抗体。在一些实施方式中，本发明的抗体或片段也可通过重组方法生产。与CD37蛋白所需区域特异性结合的区域可在多物种来源的嵌合或互补决定区(CDR)移植抗体(graftedantibodies)背景中生产。也可生产人源化或人CD37抗体，并优选用于治疗情况。已熟知通过用一种或多种非人抗体CDR取代对应人抗体序列来人源化鼠和其它非人抗体的方法(参见例如Jones等，1986,Nature321:522-525；Riechmann等，1988,Nature332:323-327；Verhoeyen等，1988,Science239:1534-1536)。也可参见Carter等，1993,Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:4285和Sims等，1993,J.Immunol.151:2296。在优选实施方式中，本发明的人单克隆抗体还可使用VelocImmune小鼠制备，该小鼠中使用携带人免疫球蛋白重链(VH、DH和JH)和/或κ轻链(VK和JK)基因座的未重排种系可变区段的人基因组序列完整或部分地代替了免疫球蛋白重链(VH、DH和JH区段)和/或κ轻链(VK和JK)携带内源性小鼠可变区段的基因组序列(纽约州塔利镇的再生元公司(Regeneron))。参见例如，美国专利号6,586,251、6,596,541、7,105,348、6,528,313、6,638,768和6,528,314。另外，在一些实施方式中，本发明的人抗体可使用HuMAb小鼠(麦得莱克斯公司(Medarex,Inc.))产生，该小鼠含有人免疫球蛋白基因中编码未重排人重链(μ和γ)和κ轻链免疫球蛋白序列的小基因座，以及灭活内源性μ链和κ链基因座的靶向突变(参见例如Lonberg等，(1994)Nature368(6474):856-859)。在另一实施方式中，可使用携带转基因和转染色体上人免疫球蛋白序列的小鼠(例如携带人重链转基因和人轻链转染色体的小鼠)产生本发明的全人抗体。这类小鼠在本文中称为“KM小鼠”，该小鼠描述于Tomizuka等，(2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA97:722-727和Tomizuka等的PCTWO02/43478。在一些实施方式中，本发明的人单克隆抗体也可使用噬菌体展示方法制备以筛选人免疫球蛋白基因文库。这类用于分离人抗体的噬菌体展示方法已在本领域中建立。参见例如：Ladner等，美国专利号5,223,409；5,403,484；和5,571,698；Dower等，美国专利号5,427,908和5,580,717；McCafferty等，美国专利号5,969,108和6,172,197；以及Griffiths等，美国专利号5,885,793；6,521,404；6,544,731；6,555,313；6,582,915和6,593,081。在一些实施方式中，也可使用SCID小鼠制备本发明的人单克隆抗体，该小鼠中人免疫细胞已经重建从而可在免疫后产生人抗体应答。这类小鼠描述于例如Wilson等的美国专利号5,476,996和5,698,767。此外，在一些实施方式中，本发明的人抗体可用使用转基因小鼠的技术制备，所述小鼠经失活用于抗体生产并用人重链和轻链基因座工程改造，称为Xeno小鼠(安进福利蒙特公司(AmgenFremont,Inc.))。制备生产人抗体的转基因小鼠的示例性说明可参见美国专利6,657,103。也可参见美国专利号5,569,825；5,625,126；5,633,425；5,661,016；和5,545,806；以及Mendez等，NatureGenetics,15:146-156(1998)；Kellerman,S.A.和Green,L.L.,Curr.Opin.Biotechnol13,593-597(2002)。在优选实施方式中，本发明的CD37MAb包含称为HvCD37-6b15.1.1抗体的重链和轻链可变区，该抗体由美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection)(ATCC)登录号：PTA-120464保藏的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞生产(参见图3)，或其重链和轻链可变区含有与HvCD37-6b15.1.1的重链和轻链可变区氨基酸序列同源的氨基酸序列，且这些抗体保留本发明CD37MAb的所需功能特性。HvCD37-6b15.1.1的重链可变区由SEQIDNO:7的第1个残基(Q)至第115个残基(S)范围的氨基酸序列组成，HvCD37-6b15.1.1的轻链可变区由SEQIDNO:8的第1个残基(D)至第106个残基(R)范围的氨基酸序列组成。在一个实施方式中，HvCD37-6b15.1.1的重链可变区的CDRs1-3(Kabat)分别由SEQIDNO:7的31-35、50-65和98-104范围的氨基酸序列组成，HvCD37-6b15.1.1的轻链可变区的CDR1-3由SEQIDNO:8的24-34、50-56和89-95范围的氨基酸序列组成(参见例如图4和表V)。在一些实施方式中，CDR-H1包含或由PYYWS组成；CDR-H2包含或由EINHSGSTNYNPSLKS组成；CDR-H3包含或由RAGDFDY组成，CDR-L1包含或由RASQSISSWLA组成、CDR-L2包含或由KASSLES组成和/或CDR-L3包含或由QQYNSYI组成。可选择任何恒定区亚类作为本发明抗体的恒定区。在一个实施方式中，可以使用人IgG2恒定区作为重链恒定区和人Igκ恒定区作为轻链恒定区。例如，在一些实施方式中，本发明提供分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含重链可变区和轻链可变区，其中：(a)重链可变区包含与图3所示重链可变区氨基酸序列至少80％同源的氨基酸序列；且(b)轻链可变区包含与图3所示轻链可变区氨基酸序列至少80％同源的氨基酸序列。在其他实施方式中，VH和/或VL氨基酸序列可与图3所示VH和VL序列85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同源。在另一个实施方式中，本发明提供分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含人源化重链可变区和人源化轻链可变区，其中：(a)重链可变区包含互补决定区(CDR)，该互补决定区具有图3所示重链可变区CDR的氨基酸序列；(b)轻链可变区包含CDR，该CDR具有图3所示轻链可变区CDR的氨基酸序列。在一些实施方式中，抗体具有包含或由PYYWS组成的CDR-H1；包含或由EINHSGSTNYNPSLKS组成的CDR-H2；包含或由RAGDFDY组成的CDR-H3，包含或由RASQSISSWLA组成的CDR-L1、包含或由KASSLES组成的CDR-L2和/或包含或由QQYNSYI组成的CDR-L3。在一些实施方式中，本发明经工程改造的抗体包括对VH和/或VL中框架残基进行修饰(例如以改善抗体特性)的那些抗体。一般进行这种框架修饰以降低抗体的免疫原性。例如，一种方法是“回复突变(backmutate)”一个或多个相应种系序列的框架残基。更具体地是，经过体突变的抗体可含有不同于该抗体衍生来源的种系序列的框架残基。可通过比较抗体框架序列与该抗体衍生来源的种系序列来鉴定该残基。为将框架区序列转变回其种系构型，可通过例如定点诱变或PCR介导诱变(例如，亮氨酸“回复突变”为甲硫氨酸)将体突变“回复突变”为种系序列。本发明也旨在涵盖这些“回复突变”抗体。另一类型的框架修饰涉及突变框架区中的一个或多个残基，或甚至是一个或多个CDR区中的残基，以去除T细胞表位从而降低该抗体潜在的免疫原性。该方法也称为“去免疫化”，并进一步详细描述于Carr等的美国专利公开号2003/0153043。在一些实施方式中，除了或替代框架或CDR区中的修饰以外，本发明的抗体可经工程改造以含有Fc区的修饰，一般是改变该抗体一种或多种功能特性，例如血清半衰期、补体固定、Fc受体结合和/或抗原依赖性细胞毒性。另外，在一些实施方式中，可对本发明CD37MAb进行化学修饰(如，可将一个或多个化学部分连接于该抗体)或修饰以改变其糖基化，再次改变MAb的一种或多种功能特性。这些实施方式中的各种在下文中详细描述。在一个实施方式中，修饰CH1的铰链区从而使该铰链区的半胱氨酸残基数目发生改变，例如增加或减少。该方法进一步描述于Bodmer等的美国专利号5,677,425。改变CH1铰链区中半胱氨酸残基数目以(例如)促进轻链和重链组装或者提高或降低该CD37MAb的稳定性。在另一实施方式中，抗体的Fc铰链区进行突变以降低CD37MAb的生物半衰期。更具体地，将一个或多个氨基酸突变引入Fc铰链片段的CH2-CH3结构域界面区从而使该抗体相对于天然Fc铰链结构域SpA结合具有受损的葡萄球菌蛋白A(SpA)结合。该方法进一步详细描述于Ward等的美国专利号6,165,745。在另一个实施方式中，CD37MAb经修饰以增加其生物半衰期。可采用各种方法。例如，可如Ward的美国专利号6,277,375所述引入突变。或者，为增加该生物半衰期，可改变抗体CH1或CL区以含有取自IgGFc区CH2结构域中两个环的救援受体结合表位，如Presta等的美国专利号5,869,046和6,121,022所述。在另一个实施方式中，通过用不同的氨基酸残基替代至少一个氨基酸残基来改变Fc区，由此改变CD37MAb的效应功能。例如，选自氨基酸特异性残基的一个或多个氨基酸可被不同的氨基酸残基取代从而该抗体对效应配体的亲和性改变但保留母体抗体的抗原结合力。亲和性发生改变所针对的效应配体可以是例如Fc受体或补体的C1组分。该方法进一步描述于Winter等的美国专利号5,624,821和5,648,260。CD37抗体与CD37相关蛋白的反应性可以通过许多熟知方法建立，包括Western印迹、免疫沉淀、ELISA和FACS分析，所述方法在合适时可使用CD37相关蛋白、CD37表达细胞或其提取物。CD37抗体或其片段可标记有检测标记物或偶联至第二分子。合适的检测标记物包括但不限于放射性同位素、荧光化合物、生物发光化合物、化学发光化合物、金属螯合物或酶。另外，使用本领域通常已知的方法产生对两个或更多CD37表位特异的双特异性抗体。也可通过本领域已知的交联技术(例如Wolff等，CancerRes.53:2560-2565)生产均二聚抗体。在另一优选实施方式中，本发明的CD37MAb是包含称为HvCD37-6b15.1.1的抗体的重链和轻链的抗体。HvCD37-6b15.1.1的重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围中的氨基酸序列组成，且HvCD37-6b15.1.1的轻链由SEQIDNO:8序列的第1个残基D至第212个残基C范围中的氨基酸序列组成。其序列列于图2和图3。在优选的实施方式中，HvCD37-6b15.1.1与细胞毒剂偶联。在另一实施方式中，本发明的CD37MAb通过生产抗体或抗原结合片段的方法生产，所述方法包括培养宿主细胞以使其表达抗体或抗原结合片段，其中所述宿主细胞选自下组(a)-(d)：(a)转化有表达载体的宿主细胞，所述表达载体包含：含编码重链可变区的碱基序列的多核苷酸和含编码轻链可变区的碱基序列的多核苷酸，所述重链可变区由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S范围的氨基酸序列组成，所述轻链可变区由SEQIDNO:8的第1个残基D至第106个残基R范围的氨基酸序列组成；(b)宿主细胞，所述宿主细胞转化有包含含有编码重链可变区的碱基序列的多核苷酸的表达载体和包含含有编码轻链可变区的碱基序列的多核苷酸的表达载体，所述重链可变区由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S范围的氨基酸序列组成，所述轻链可变区由SEQIDNO:8的第1个残基D至第106个残基R范围的氨基酸序列组成；(c)转化有表达载体的宿主细胞，所述表达载体包含：含编码重链可变区的碱基序列的多核苷酸，所述重链可变区由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S范围的氨基酸序列组成；和(d)转化有表达载体的宿主细胞，所述表达载体包含：含编码轻链可变区的碱基序列的多核苷酸，所述轻链可变区由SEQIDNO:8的第1个残基D至第106个残基R范围的氨基酸序列组成。在另一实施方式中，本发明的CD37MAb通过生产抗体的方法生产，所述方法包括培养宿主细胞以使其表达抗体，其中所述宿主细胞选自下组(a)-(d)：(a)转化有表达载体的宿主细胞，所述表达载体包含：含编码重链的碱基序列的多核苷酸和含编码轻链的碱基序列的多核苷酸，所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列组成，所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围的氨基酸序列组成；(b)宿主细胞，所述宿主细胞转化有包含含有编码重链的碱基序列的多核苷酸的表达载体和包含含有编码轻链的碱基序列的多核苷酸的表达载体，所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列组成，所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围的氨基酸序列组成；(c)转化有表达载体的宿主细胞，所述表达载体包含：含编码重链的碱基序列的多核苷酸，所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列组成；和(d)转化有表达载体的宿主细胞，所述表达载体包含：含编码轻链的碱基序列的多核苷酸，所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围的氨基酸序列组成。生产称为HvCD37-6b15.1.1的抗体的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞在2013年7月8日(通过联邦快递)送至美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection)(ATCC)，弗吉尼亚州马那萨斯，邮政信箱1549，20108并指定登录号：PTA-120464。或者或此外，在本发明的另一实施方式中，在结合CD37的MAb的情况中，MAbHvCD37-6b15.1.1可经过本发明已知的翻译后修饰。翻译后修饰的示例包括但不限于：化学修饰例如二硫键、寡糖、N-末端焦谷氨酸形成、C-末端赖氨酸加工、脱酰胺、异构化、氧化、糖化、肽键切割、不可还原(non-reductible)的交联、截短和本领域已知的其他。参见例如Liu,等，单克隆抗体的异质性(HeterogeneityofMonoclonalAntibodies),J.Pharma.Sci.97卷,7期,2426-2447页(2008年7月)。其他类型的修饰包括非共价相互作用、构象异质性和聚集。同上。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1MAb在N末端重链残基1处谷氨酰胺环化为焦磷酸-谷氨酸。本领域技术人员应理解该环化会自发形成。参见Dick等，用模型肽确定单克隆抗体中N末端焦磷酸-谷氨酸变异的来源(DeterminationoftheOriginoftheN-TerminalPyro-GlutamtateVariationinMonoclonalAntibodiesUsingModelPeptides),BiotechnologyandBioengineering,97卷,3期,544-553页(2007年6月15日)。或者或此外，HvCD37-6b15.1.1MAb的氨基酸可经过其他翻译后修饰包括但不限于脱酰胺、异构化、糖化和/或氧化。本发明的多肽或其变体可经过额外的翻译后修饰，包括糖基化，例如本领域熟知的N链或O链的糖基化位置。如上所述，多肽的氨基酸序列或加工条件(例如培养、纯化和/或储存条件中的改变)可发生改变，从而排除或最小化所述变化或使其适应该加工有益的环境。此外，该制备可包括具有各种水平的多于一种类型的加工相关修饰的多肽，例如，多肽的一些、大多或基本全部C末端赖氨酸可被移除和/或一些、大多或基本全部N末端氨基酸转变为焦磷酸谷氨酸(例如图2或图3中或一致序列中所示的多肽或抗原结合片段)。加工条件例如改变缓冲液组分和温度可对此类修饰的程度产生显著影响。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1MAb在C末端重链445残基赖氨酸处包含截短。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1MAb在重链295残基天冬酰胺处添加有糖基化，包括但不限于G0(唾液酸基-、非乳糖(agalacto)、非岩藻糖基化的双-触角型复合型N-聚糖；G0F(唾液酸基-、非乳糖、核心岩藻糖基化的双-触角型复合型N-聚糖)；甘露糖-5(N-连接的寡甘露糖-5)；G1F(唾液酸基-、单乳糖、核心岩藻糖基化的双-触角型复合型N-聚糖)；G2(唾液酸基-、双乳糖、非岩藻糖基化的双-触角型复合型N-聚糖)；G2F(唾液酸基-、双乳糖、核心岩藻糖基化的双-触角型复合型N-聚糖)；A1(单唾液酸、双-触角型N-连接寡糖、Neu5酸)；和/或A2(双唾液酸、双-触角型N-连接寡糖、Neu5酸)。或者或此外，在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1MAb在轻链的一个或多个丝氨酸残基上添加有糖化。通常，糖化源自还原糖和N末端伯胺或赖氨酸侧链的氨基基团之间的非酶促反应，本领域技术人员知晓糖化可掩蔽N末端伯氨基酸基团或赖氨酸残基侧链上的正电荷，这会使抗体更具有酸性。本发明多肽的氨基酸序列可通过任何本领域已知方法(例如质谱)来验证，并且可与本文公开的序列(参见图2和图3)相同，或可由于翻译后修饰加工而与这些序列在一个或多个氨基酸残基上不同。作为非限制性示例，在基本同源的多肽的所有或部分上可从轻链或重链上移除C末端氨基酸，这通过蛋白水解加工或其他培养期间进行的加工进行。相似地，N末端氨基酸可缺失，例如缺失1、2、3、4或5个N末端氨基酸。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1MAb的重链可变区选自：SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S范围的氨基酸序列和SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S的氨基酸序列其中N末端第1个残基Q变换为焦磷酸谷氨酸。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1MAb的重链选自：SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列、SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列(其中N末端第1个残基Q变换为焦磷酸谷氨酸)、SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列(其中C末端第441个残基K被移除)、和SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围的氨基酸序列(其中N末端第1个残基Q变换为焦磷酸谷氨酸且C末端第441个残基K被移除)。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1Mab或其抗原结合片段是通过在宿主细胞中表达获得的重组生产的蛋白混合物，其中所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区选自：SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S范围的氨基酸序列和SEQIDNO:7的第1个残基Q至第115个残基S的氨基酸序列其中N末端第1个残基Q变换为焦磷酸谷氨酸。在另一实施方式中，HvCD37-6b15.1.1Mab包含重链和轻链，所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第440个残基G范围的氨基酸序列组成，其中第1个残基Q修饰为焦磷酸谷氨酸，和所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围的氨基酸序列组成。III)抗体-药物偶联物总述另一方面，本发明提供抗体药物偶联物(ADC)，该抗体药物偶联物包括偶联细胞毒剂(如化疗剂，药物、生长抑制剂、毒素(如细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素或其片段)或放射性同位素(即放射性偶联物))的抗体。另一方面，本发明还提供使用ADC的方法。一方面，ADC包括与细胞毒剂或检测试剂共价连接任何上述CD37MAb。应用抗体-药物偶联物来局部递送细胞毒剂或细胞生长抑制剂，即在癌症治疗中杀死或抑制肿瘤细胞的药物的(Syrigos和Epenetos(1999)AnticancerResearch19:605-614；Niculescu-Duvaz和Springer(1997)Adv.DrgDel.Rev.26:151-172；美国专利号4,975,278)使得药物部分靶向递送到肿瘤，并在其中胞内累积，而全身性给予这些非偶联药物试剂可能产生正常细胞以及寻求消除的肿瘤细胞所不可接受的毒性水平(Baldwin等，(1986)Lancet(1986年3月15日)第603-05页；Thorpe,(1985)“综述：癌症治疗中的细胞毒剂抗体载体(AntibodyCarriersOfCytotoxicAgentsInCancerTherapy:AReview)”收录于《单克隆抗体'84：生物和临床应用》(inMonoclonalAntibodies'84:BiologicalAndClinicalApplications)，A.Pinchera等编，第475-506页)。因此寻求最小毒性和最大功效。已报道多克隆抗体和单克隆抗体都可用于这些策略(Rowland等，(1986)CancerImmunol.Immunother.,21:183-87)。用于这些方法的药物包括道诺霉素、多柔比星、甲氨蝶呤和长春地辛(Rowland等，(1986)同上)。用于抗体毒素偶联物的毒素包括细菌毒素(例如白喉毒素)、植物毒素(例如蓖麻毒蛋白)、小分子毒素(例如格尔德霉素)(Mandler等(2000)Jour.oftheNat.CancerInst.92(19):1573-1581；Mandler等(2000)Bioorganic&Med.Chem.Letters10:1025-1028；Mandler等(2002)BioconjugateChem.13:786-791)、美登木素(maytansinoid)(EP1391213；Liu等,(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA93:8618-8623)和卡奇霉素(Lode等(1998)CancerRes.58:2928；Hinman等(1993)CancerRes.53:3336-3342)。该毒素可通过包括微管蛋白结合、DNA结合或拓扑异构酶抑制的机理实现其细胞毒性和细胞生长抑制作用。一些细胞毒性药物往往在与大抗体或蛋白受体配体偶联时失活或降低活性。抗体药物偶联物的示例是(替伊莫单抗(ibritumomabtiuxetan)，百健艾迪(Biogen/Idec))，是一种抗体同位素偶联物，其包含针对正常和恶性B淋巴细胞表面发现的CD20抗原的鼠IgG1κ单克隆抗体以及由硫脲接头-螯合剂连接的111In或90Y放射性同位素(Wiseman等(2000)Eur.Jour.Nucl.Med.27(7):766-77；Wiseman等(2002)Blood99(12):4336-42；Witzig等(2002)J.Clin.Oncol.20(10):2453-63；Witzig等(2002)J.Clin.Oncol.20(15):3262-69)。而且，MYLOTARGTM(吉姆单抗奥佐米星，惠氏制药公司(WyethPharmaceutical))是一种包含与卡奇霉素连接的人CD33抗体的抗体药物偶联物，在2000年被批准用于注射治疗急性骨髓型白血病(DrugsoftheFuture(2000)25(7):686；美国专利号4970198；5079233；5585089；5606040；5693762；5739116；5767285；5773001)。此外，还将CD37结合剂作为B细胞恶性肿瘤的潜在治疗法进行测试。EBS公司(EmergentBiosolutions)(旧称TP公司(TrubionPharmaceuticals))开发了CD37结合剂SMIP-016和TRU-016(Zhao等2007,Blood,110.2569-2577)。SMIP-016是包括来自杂交瘤的可变区和工程改造的人恒定区的单链多肽。TRU-016是抗CD37SMIP蛋白的人源化形式。参见例如美国公开申请号2007/0059306。就慢性淋巴细胞性白血病(CLL)的治疗对TRU-016进行临床测试。勃林格殷格翰公司(BoehringerIngelheim)还在国际公开申请号WO2009/019312中公开了CD37结合剂。然而，这些结合剂中无一公开CDC活性，并且没有公开在没有交联剂下的体外促凋亡活性。而且，已在两个分别的试验中尝试使用放射标记的抗CD37抗体MB-1的放射免疫治疗(RIT)。将治疗剂量的131I-MB-1给予6名复发的NHL患者(Press等1989JClinOncol.7(8):1027-38；Press等1993,NEnglJMed.329(17):1219-24)。所有6名患者在持续4-31个月后达到完全缓解(CR)。在另一试验中，131I-MB-1给予10名复发的NHL患者(Kaminski等1992JClinOncol.10(11):1696-711)。总计4名患者产生响应，持续范围为2-6个月，虽然仅报道一例CR。然而，由于放射标记的不利的生物分布，并非所有患者可被治疗，这产生了对重要非靶向器官的放射暴露的担心。事实上，在这些试验中均观察到RIT相关毒性，包括严重的骨髓抑制(myclosupression)和心肺毒性。虽然这些临床数据表明抗CD37放射免疫偶联物可能有效，但这些治疗对难以实施，并且由于高放射剂量相关的风险，复发的RIT后患者无法用RIT再次治疗。另外，莫坎妥珠单抗(Cantuzumabmertansine)(IMGN公司(Immunogen,Inc.))是一种包含通过二硫键接头SPP连接于美登木素药物部分DM1的huC242抗体的抗体药物偶联物，其正进入II期试验用于治疗表达CanAg的癌症(如结肠癌、胰腺癌、胃癌和其它癌症)。另外，MLN-2704(千年制药公司(MillenniumPharm.)，BZL生物公司(BZLBiologics)，IMGN公司(ImmunogenInc.))是一种包含连接于美登木素药物部分DM1的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单克隆抗体的抗体药物偶联物，其正开发用于潜在治疗前列腺肿瘤。最后，将澳瑞他汀肽、澳瑞他汀E(AE)和单甲基澳瑞他汀(MMAE)、尾海兔素的合成类似物偶联嵌合单克隆抗体cBR96(对癌的LewisY有特异性)和cAC10(对血液恶性肿瘤的CD30有特异性)(Doronina等(2003)NatureBiotechnology21(7):778-784)。偶联MMAE的CD30MAb目前以ADCETRIS(华盛顿州玻塞尔的西雅图遗传学公司(SeattleGenetics,Bothell,WA))市售可得。ADCETRIS(布妥昔单抗)是CD30介导的抗体药物偶联物，由三种成分组成：1)标为cAC10的嵌合IgG1抗体，其对人CD30具有特异性，2)微管破坏剂MMAE,和3)共价连接MMAE至caC10的可蛋白酶切割的接头。参见，ADCENTRIS处方信息。另外，本文描述了用于生成ADC的化疗剂。可以使用的酶活性毒素及其片段包括白喉A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来自绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa))、蓖麻毒蛋白A链、相思豆毒蛋白A链、蒴莲根毒素A链、α-帚曲菌素、油桐(Aleuritesfordii)蛋白、石竹素蛋白、美洲商陆(Phytolacaamericana)蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜(Momordicacharantia)抑制剂、麻疯树毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草(Sapaonariaofficinalis)抑制剂、白树毒素、分裂毒素(mitogellin)、局限曲菌素、酚霉素、依诺霉素和单端孢霉烯族毒素(tricothecenes)。参见例如，1993年10月28日公开的WO93/21232。多种放射性核素可用于放射性偶联抗体的产生。示例包括212Bi、131I、131In、90Y和186Re。所述抗体与细胞毒剂的偶联可利用多种双功能蛋白偶联剂完成，例如N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二巯基)丙酸盐(SPDP)、亚氨基四氢噻吩(IT)、亚胺酸酯的双功能衍生物(如己二酸亚氨酸二甲酯HCl)、活性酯(如二琥珀酰亚胺基辛二酸酯)、醛(例如戊二醛)、双叠氮化合物(例如双(对-叠氮苯甲酰基)己二胺)、双重氮衍生物(例如双-(对-重氮苯甲酰基)-乙二胺)、二异氰酸酯(例如甲苯2,6-二异氰酸酯)和双活性氟化合物(例如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，蓖麻毒蛋白免疫毒素可按Vitetta等(1987)Science,238:1098所述制备。碳14-标记的1-异硫氰苄基-3-甲基二亚乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)是用于偶联放射性核素与抗体的示例性螯合剂(WO94/11026)。本文也考虑了抗体与一个或多个小分子毒素及具有毒素活性的所述毒素衍生物的偶联物，该小分子毒素例如卡奇霉素、美登木素、尾海兔素、澳瑞他汀、新月毒素和CC1065。III(A).美登木素适用作美登木素药物部分的美登素(Maytansine)化合物为本领域技术人员熟知并可根据已知方法从天然来源中分离、通过遗传工程技术(参见Yu等(2002)PNAS99:7968-7973)生产或者根据已知方法合成制备美登醇和美登醇类似物。示例性美登木素药物部分包括具有修饰芳环的那些药物部分，例如：C-19-去氯(US4256746)(通过安沙菌素(ansamytocin)P2的氢化铝锂还原制备)；C-20-羟基(或C-20-去甲基)+/-C-19-去氯(美国专利号4,361,650和4,307,016)(使用链霉菌或放线菌通过去甲基化制备或使用LAH通过脱氯制备)；和C-20-去甲氧基、C-20-酰氧基(-OCOR)、+/-去氯(美国专利号4,294,757)(使用酰氯通过酰化作用制备)以及在其它位点具有修饰的那些。示例性美登木素药物部分也包括具有修饰的那些药物部分，例如：C-9-SH(US4,424,219)(通过美登醇与H2S或P2S5反应制备)；C-14-烷氧基甲基(去甲氧基/CH2OR)(US4331598)；C-14-羟甲基或酰氧基甲基(CH2OH或CH2Oac)(US4450254)(通过诺尔卡菌属制备)；C-15-羟基/酰氧基(US4,364,866)(通过链霉菌属转化美登醇制备)；C-15-甲氧基(美国专利号4,313,946和4,315,929)(分离自滑桃树(Trewianudlflora))；C-18-N-去甲基(美国专利号4,362,663和4,322,348)(通过链霉菌属将美登醇去甲基化制备)；和4,5-脱氧(US4,371,533)(通过用三氯化钛/LAH还原美登醇制备)。含有美登木素的ADC、其制备方法以及其治疗应用公开于例如美国专利号5,208,020、5,416,064、6,441,163和欧洲专利号EP0425235B1，其公开内容通过引用明确纳入本文。Liu等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA93:8618-8623(1996)描述了包含美登木素的ADC，该美登木素称为DM1并与针对人结直肠癌的单克隆抗体C242连接。发现该偶联物对培养的结肠癌细胞有高度的细胞毒性，并在体内肿瘤生长试验中表现出抗肿瘤活性。Chari等，CancerResearch52:127-131(1992)描述了ADC，其中美登木素通过二硫键接头与结合人结肠癌细胞系上抗原的鼠抗体A7，或与另一种结合HER-2/neu癌基因的鼠单克隆抗体TA.1偶联。该TA.1-美登木素偶联物的细胞毒性在人乳腺癌细胞系SK-BR-3中体外测试，该细胞系中每个细胞表达3x105个HER-2表面抗原。该药物偶联物所达到的细胞毒性水平与游离美登木素药物相似，该水平可通过增加每抗体分子的美登木素分子数目来提高。A7美登木素偶联物在小鼠中表现出较低的全身细胞毒性。III(B).澳瑞他汀和尾海兔素在一些实施方式中，ADC包含与尾海兔素或尾海兔素肽类似物和衍生物、澳瑞他汀(美国专利号5,635,483；5,780,588)偶联的本发明所述抗体。尾海兔素和澳瑞他汀已显示干扰微管动力学、GTP水解以及细胞核和细胞分裂(Woyke等(2001)Antimicrob.AgentsandChemother.45(12):3580-3584)并具有抗癌(US5,663,149)和抗真菌活性(Pettit等(1998)Antimicrob.AgentsChemother.42:2961-2965)。尾海兔素和澳瑞他汀药物部分可通过肽药物部分的N(氨基)末端或C(羧基)末端连接抗体(WO02/088172)。示例性的澳瑞他汀实施方式包括N末端连接的单甲基澳瑞他汀药物部分DE和DF，公开于Senter等，美国癌症研究协会会议录(ProceedingsoftheAmericanAssociationforCancerResearch)，卷45，摘要号623，2004年3月28日发表，以及描述于美国专利公开号2005/0238649，其公开内容通过引用全文明确纳入本文。示例性的澳瑞他汀实施方式是MMAE(其中波浪线表示共价连接至抗体药物偶联物的接头(L))。另一个示例性的澳瑞他汀实施方式是MMAF，其中波浪线表示共价连接至抗体药物偶联物的接头(L)(US2005/0238649):其他包含MMAE或MMAF以及各种接头组分(本文进一步描述)的示例性实施方式具有以下结构和缩写(其中Ab表示抗体且p是1至约8)：一般基于肽的药物部分可通过形成两个或多个氨基酸和/或肽片段之间的肽键来制备。例如，这类肽键可根据液相合成方法(参见E.和K.Lübke,“ThePeptides(《肽》)”，卷1，第76-136页，1965，学术出版社)来制备，该方法为肽化学
技术领域：
熟知。澳瑞他汀/尾海兔素药物部分可根据以下方法制备：US5635483；US5780588；Pettit等(1989)J.Am.Chem.Soc.111:5463-5465；Pettit等(1998)Anti-CancerDrugDesign13:243-277；Pettit,G.R.等Synthesis,1996,719-725；Pettit等(1996)J.Chem.Soc.PerkinTrans.15:859-863；和Doronina(2003)NatBiotechnol21(7):778-784。III(C).卡奇霉素在其他实施方式中，ADC包含与一个或多个卡奇霉素分子偶联的本发明所述抗体。抗生素的卡奇霉素家族能够以亚皮摩尔浓度产生双链DNA断裂。为制备卡奇霉素家族偶联物，参见美国专利5,712,374、5,714,586、5,739,116、5,767,285、5,770,701、5,770,710、5,773,001,5,877,296(都属于美国氰氨公司(AmericanCyanamidCompany))。可以使用的卡奇霉素结构类似物包括但不限于：γ1I、α2I、α3I、N-乙酰基-γ1I、PSAG和θI1(Hinman等，CancerResearch53:3336-3342(1993)，Lode等，CancerResearch58:2925-2928(1998)以及前述美国氰氨公司的专利)。另一种可与抗体偶联的抗肿瘤药物是QFA，该药物是一种抗叶酸剂。卡奇霉素和QFA均有胞内作用位点且不易穿过质膜。因此，通过抗体介导的内化使细胞摄取这些试剂显著增强了其细胞毒性作用。III(D).其它细胞毒剂在一些实施方式中，可与本发明所述抗体偶联的其它抗肿瘤剂包括BCNU、链脲霉素、长春新碱和5-氟尿嘧啶、描述于美国专利5,053,394和5,770,710中统称为LL-E33288复合物的一类试剂，以及埃斯波霉素(美国专利5,877,296)。可使用的酶活性毒素及其片段包括白喉A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来自绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa))、蓖麻毒蛋白A链、相思豆毒蛋白A链、蒴莲根毒素A链、α-帚曲菌素、油桐(Aleuritesfordii)蛋白、石竹素蛋白、美洲商陆(Phytolacaamericana)蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜(Momordicacharantia)抑制剂、麻疯树毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草(Sapaonariaofficinalis)抑制剂、白树毒素、分裂毒素(mitogellin)、局限曲菌素、酚霉素、依诺霉素和单端孢霉烯族毒素(tricothecenes)。参见例如，1993年10月28日公开的WO93/21232。在一些实施方式中，本发明还包括抗体与具有溶核活性的化合物(例如，核糖核酸酶或DNA内切核酸酶，如脱氧核糖核酸酶；DNA酶)之间形成的ADC。为了选择性破坏肿瘤，该抗体可包含高放射性原子。各种放射性同位素可用于生成放射性偶联抗体。示例包括At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素。当将该偶联物用于检测时，其可包含用于闪烁扫描研究的放射性原子，例如tc99m或I123，或用于核磁共振(NMR)成像(也称为磁共振成像，mri)的自旋标记，例如碘-123、碘-131、铟-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、钆、锰或铁。可用已知的方法将放射性或其它标记引入该偶联物。例如，可生物合成或使用合适的氨基酸前体通过化学氨基酸合成法合成该肽，所述氨基酸前体包含例如氟-19以替代氢。可通过肽的半胱氨酸残基来连接标记如tc99m或I123、Re186、Re188和In111。钇-90可通过赖氨酸残基连接。可使用IODOGEN方法(Fraker等(1978)Biochem.Biophys.Res.Commun.80:49-57引入碘-123。“MonoclonalAntibodiesinImmunoscintigraphy(免疫闪烁法中的单克隆抗体)”(Chatal，CRC出版社(CRCPress)1989)详细描述了其它方法。IV)结合CD37的抗体药物偶联化合物本发明提供用于药物靶向递送的抗体药物偶联化合物。发明人已发现抗体药物偶联化合物具有针对表达CD37的细胞的强效细胞毒性和/或细胞生长抑制活性。该抗体药物偶联化合物包含共价连接至少一个药物单元的抗体单元。药物单元可直接连接或通过接头单元(-LU-)连接。在一些实施方式中，抗体药物偶联化合物是下式的化合物：L-(LU-D)p(I)或其药学上可接受的盐或其溶剂合物；式中：L是抗体单元，例如本发明的CD37MAb，和(LU-D)是接头单元-药物单元部分，其中：LU-是接头单元，且-D是对靶细胞具有细胞抑制或细胞毒活性的药物单元；且p是1-20的整数。在一些实施方式中，p的范围是1-10、1-9、1-8、1-7、1-6、1-5、1-4、1-3或1-2。在一些实施方式中，p的范围是2-10、2-9、2-8、2-7、2-6、2-5、2-4或2-3。在其它实施方式中，p是1、2、3、4、5或6。在一些实施方式中，p是2或4。在一些实施方式中，抗体药物偶联化合物是下式的化合物：L-(Aa-Ww-Yy-D)p(II)或其药学上可接受的盐或其溶剂合物；式中：L是抗体单元，例如CD37MAb；且-Aa-Ww-Yy-是接头单元(LU)，其中：-A-是延伸单元，a是0或1,-W-各自独立地是氨基酸单元，w是0-12的整数，-Y-是自分解型间隔单元，y是0、1或2；-D是对靶细胞具有细胞生长抑制或细胞毒活性的药物单元；且p是1-20的整数。在一些实施方式中，a是0或1，w是0或1，y是0、1或2。在一些实施方式中，a是0或1，w是0或1，且y是0或1。在一些实施方式中，p的范围是1-10、1-9、1-8、1-7、1-6、1-5、1-4、1-3或1-2。在一些实施方式中，p的范围是2-8、2-7、2-6、2-5、2-4或2-3。在其它实施方式中，p是1、2、3、4、5或6。在一些实施方式中，p是2或4。在一些实施方式中，如果w不是0，则y是1或2。在一些实施方式中，如果w是1-12，则y是1或2。在一些实施方式中，w是2-12且y是1或2。在一些实施方式中，a是1，w和y是0。对于包含多个抗体的组合物，p代表药物载量，即每个抗体的平均药物分子数量。药物载量的范围可以是每个抗体1-20个药物(D)。可通过常规方法如质谱、ELISA实验和HPLC鉴定偶联反应制备中每个抗体的平均药物数量。也可以p的形式确定抗体-药物偶联物的定量分布。在某些情况下，可通过诸如反相HPLC或电泳等方式将具有某一确定p值的均一抗体-药物偶联物与其它药物载量的抗体-药物偶联物分离、纯化，并鉴定。在示例性实施方式中，p是2-8。可通过任何本领域技术人员已知的技术生成抗体药物偶联化合物。简而言之，抗体药物偶联化合物包含作为抗体单元的CD37MAb、药物和连接药物与结合剂的任选接头。在优选实施方式中，抗体是CD37MAb，其含有上文所述称为HvCD37-6b15.1.1抗体的重链和轻链可变区。在更优选实施方式中，抗体是CD37MAb，其含有上文所述称为HvCD37-6b15.1.1抗体的重链和轻链。多种不同的反应可用于药物和/或接头与结合剂的共价连接。其经常通过结合剂(例如抗体分子)的氨基酸残基的反应来实现，所述氨基酸残基包括赖氨酸的氨基、谷氨酸和天冬氨酸的游离羧酸基团、半胱氨酸的巯基以及芳族氨基酸的不同部分。一种最常用的非特异性共价结合方法是连接化合物的羧基(或氨基)基团与抗体的氨基(或羧基)基团的碳二亚胺反应。此外，已将双功能试剂(例如二醛或亚氨酸酯)用于连接化合物的氨基与抗体分子的氨基。也可将席夫碱(Schiffbase)反应用于药物与结合剂的连接。该方法涉及含有乙二醇或羟基的药物的高碘酸盐氧化，从而形成之后与结合剂反应的醛基。通过用结合剂的氨基基团形成席夫碱来发生连接。还可采用异硫氰酸盐作为偶联剂来共价连接药物和结合剂。其它技术为本领域技术人员已知并在本发明范围内。在某些实施方式中，作为接头前体的中间体在合适条件下与药物反应。在某些实施方式中，活性基团用于药物和/或中间体上。药物和中间物的之间的反应产物，或衍生药物继而在合适条件下与CD37MAb反应。抗体药物偶联化合物的各具体单元均会在本文中进一步详细说明。示例性的接头单元、延伸单元、氨基酸单元、自分解型间隔单元和药物单元的合成和结构也描述于美国申请专利公开号2003/0083263、2005/0238649和2005/0009751，其各通过引用全文纳入本文以用于所有目的。V)接头单元通常，抗体-药物偶联化合物在药物单元和抗体单元之间包含接头单元。在一些实施方式中，接头在胞内条件下可切割，在胞内环境中切割接头后从抗体释放药物单元。在其它实施方式中，接头单元不可切割且例如通过抗体降解来释放药物。在一些实施方式中，接头可由胞内环境中(如，溶酶体或内体或胞膜窖(caveolea)内)存在的切割剂切割。接头可以是例如被胞内肽酶或蛋白酶切割的肽酰接头，所述酶包括但不限于溶酶体或内体的蛋白酶。在一些实施方式中，肽酰接头的长度为至少两个氨基酸或至少三个氨基酸。切割剂可包括组织蛋白酶B和D以及纤溶酶，已知它们均可水解二肽药物衍生物，导致在靶细胞内释放活性药物(参见例如，Dubowchik和Walker，1999，Pharm.Therapeutics83:67-123)。最常见的是可由CD37表达型细胞内存在的酶切割的肽酰接头。例如，可使用由硫醇依赖性蛋白酶组织蛋白酶-B切割的肽酰接头(如Phe-Leu或Gly-Phe-Leu-Gly(SEQIDNO:9)接头)，所述蛋白酶在癌组织中高表达。这类接头的其他示例描述于例如美国专利号6,214,345，其通过应用全文纳入本文并用于全部目的。在特定实施方式中，可由胞内蛋白酶切割的肽酰接头是Val-Cit接头或Phe-Lys接头(参见例如美国专利6,214,345，其描述了具有val-cit接头的多柔比星的合成)。使用胞内蛋白水解释放治疗剂的一个优点是该试剂偶联时通常减弱且偶联物的血清稳定性通常较高。在其它实施方式中，可切割接头具有pH敏感性，即某些pH值下对水解敏感。通常，pH敏感型接头可在酸性条件下水解。例如，能使用在溶酶体中可水解的酸不稳定性接头(如腙、缩氨基脲、缩氨基硫脲、顺式-乌头酰胺(cis-aconiticamide)、原酸酯、缩醛、缩酮等)。(参见例如美国专利号5,122,368；5,824,805；5,622,929；Dubowchik和Walker，1999，Pharm.Therapeutics83:67-123；Neville等，1989，Biol.Chem.264:14653-14661。)这类接头在中性pH条件下(例如在血液中)相对稳定，但在低于pH5.5或5.0的条件(接近溶酶体的pH)下不稳定。在某些实施方式中，可水解接头是硫醚接头(如通过酰腙键连接治疗剂的硫醚(参见例如，美国专利号5,622,929)。在其它实施方式中，该接头在还原条件下可切割(如二硫键接头)。本领域已知多种二硫化物接头，包括例如，可用SATA(N-琥珀酰亚胺基-S-乙酰基硫代乙酸酯)、SPDP(N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯)、SPDB(N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)丁酸酯)和SMPT(N-琥珀酰亚胺基-氧基羰基-α-甲基-α-(2-吡啶基-二硫)甲苯)、SPDB和SMPT形成的接头。(参见例如Thorpe等，1987，CancerRes.47:5924-5931；Wawrzynczak等，刊于Immunoconjugates:AntibodyConjugatesinRadioimageryandTherapyofCancer(《免疫偶联物：放射成像和癌症治疗中的抗体偶联物》)(C.W.Vogel编，牛津大学出版社(OxfordU.Press)，1987。也参见美国专利号4,880,935。)在其它具体实施方式中，接头是丙二酸接头(Johnson等，1995，AnticancerRes.15:1387-93)、马来酰亚胺苯甲酰接头(Lau等，1995，Bioorg-Med-Chem.3(10):1299-1304)或3’-N-酰胺类似物(Lau等，1995，Bioorg-Med-Chem.3(10):1305-12)。在其它实施方式中，接头单元不可切割并通过降解抗体来释放药物。(参见美国公开号2005/0238649，其通过引用全文纳入本文并用于全部目的)。通常，接头对胞外环境基本不敏感。对于接头，本文所用术语“对胞外环境基本不敏感”指抗体-药物偶联化合物出现在胞外环境中(如血浆中)时，抗体-药物偶联化合物样品中不超过约20％，通常不超过约15％，更通常不超过约10％，甚至更通常不超过约5％、不超过约3％或不超过约1％的接头被切割。可通过例如以下方法测定接头是否对胞外环境基本不敏感：将抗体-药物偶联化合物与血浆一起孵育一段时间(如2、4、8、16或24小时)，然后定量测定血浆中出现的游离药物量。在其它非互斥实施方式中，接头促进细胞内化。在某些实施方式中，接头在与治疗剂偶联时促进细胞内化(即，在本文所述的抗体-药物偶联化合物的接头-治疗剂部分的情况下)。在其它实施方式中，接头与澳瑞他汀化合物和CD37Mab偶联时促进细胞内化。可用于本组合物和方法的各种示例性接头描述于WO2004-010957、美国公开号2006/0074008、美国公开号20050238649和美国公开号2006/0024317(其各通过引用全文纳入本文以用于所有目的)。“接头单元”(LU)是可用于连接药物单元和抗体单元以形成抗体-药物偶联化合物的双功能化合物。在一些实施方式中，接头单元具有下式：-Aa-Ww-Yy-其中：-A-是延伸单元，a是0或1,-W-各自独立地是氨基酸单元，w是0-12的整数，-Y-是自分解型间隔单元，且y是0、1或2。在一些实施方式中，a是0或1，w是0或1，且y是0、1或2。在一些实施方式中，a是0或1，w是0或1，且y是0或1。在一些实施方式中，如果w是1-12，则y是1或2。在一些实施方式中，w是2-12且y是1或2。在一些实施方式中，a是1，w和y是0。延伸单元延伸单元(A)存在时，能够将抗体单元连接于氨基酸单元(-W-)(如果存在)、间隔单元(-Y-)(如果存在)；或连接于药物单元(-D)。CD37Mab(例如HvCD37-6b15.1.1)上可存在的有用官能团(天然存在或通过化学操作加入)包括但不限于：巯基、氨基、羟基、糖的异头羟基和羧基。合适的官能团是巯基和氨基。在一个示例中，巯基基团可通过还原CD37Mab的分子内二硫键来产生。在另一实施方式中，可通过CD37MAb赖氨酸部分的氨基与2-亚氨基四氢噻吩(兆特试剂(Traut’sreagent))或其它巯基生成试剂的反应产生巯基。在某些实施方式中，CD37MAb是重组抗体，经工程改造成携带一个或多个赖氨酸。在某些其它实施方式中，重组CD37MAb经工程改造成携带额外的巯基，如额外的半胱氨酸。在一个实施方式中，延伸单元与抗体单元的硫原子成键。该硫原子可衍生自抗体的巯基。式IIIa和IIIb方括号内表示该实施方式的代表性延伸单元，其中L-、-W-、-Y-、-D、w和y的定义如上所述，R17选自-C1-C10亚烷基-、-C1-C10亚烯基-、-C1-C10亚炔基-、碳环基-、-O-(C1-C8亚烷基)-、O-(C1-C8亚烯基)-、-O-(C1-C8亚炔基)-、-亚芳基-、-C1-C10亚烷基-亚芳基-、-C2-C10亚烯基-亚芳基、-C2-C10亚炔基-亚芳基、-亚芳基-C1-C10亚烷基-、-亚芳基-C2-C10亚烯基-、-亚芳基-C2-C10亚炔基-、-C1-C10亚烷基-(碳环基)-、-C2-C10亚烯基-(碳环基)-、-C2-C10亚炔基-(碳环基)-、-(碳环基)-C1-C10亚烷基-、-(碳环基)-C2-C10亚烯基-、-(碳环基)-C2-C10亚炔基、-杂环基-、-C1-C10亚烷基-(杂环基)-、-C2-C10亚烯基-(杂环基)-、-C2-C10亚炔基-(杂环基)-、-(杂环基)-C1-C10亚烷基-、-(杂环基)-C2-C10亚烯基-、-(杂环基)-C1-C10亚炔基-、-(CH2CH2O)r-或-(CH2CH2O)r-CH2-，r是1-10的整数，其中单独出现或作为另一基团一部分的所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基、碳环、碳环基(carbocyclo)、杂环基(heterocyclo)和亚芳基基团是可选取代的。在一些实施方式中，其中单独或作为另一基团一部分的所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基、碳环、碳环基、杂环基和亚芳基是未取代的。在一些实施方式中，R17选自-C1-C10亚烷基-、-碳环基-、-O-(C1-C8亚烷基)-、-亚芳基-、-C1-C10亚烷基-亚芳基-、-亚芳基-C1-C10亚烷基-、-C1-C10亚烷基-(碳环基)-、-(碳环基)-C1-C10亚烷基-、-C3-C8杂环基-、-C1-C10亚烷基-(杂环基)-、-(杂环基)-C1-C10亚烷基-、-(CH2CH2O)r和-(CH2CH2O)r-CH2-，r是1-10的整数，其中所述亚烷基是未取代的且剩余基团是可选取代的。从所有示范性实施方式中应该理解，即使没有明确说明，也可将1-20个药物部分连接于抗体(p＝1-20)。说明性延伸单元是式IIIa的延伸单元，其中R17是-(CH2)5-：另一种说明性延伸单元是式IIIa的延伸单元，其中R17是-(CH2CH2O)r-CH2-；r是2：说明性延伸单元是式IIIa的延伸单元，其中R17是-亚芳基-或亚芳基-C1-C10亚烷基-。在一些实施方式中，芳基是未取代的苯基。另一说明性延伸单元是式IIIb的延伸单元，其中R17是-(CH2)5-：在某些实施方式中，通过抗体单元的硫原子和延伸单元的硫原子之间的二硫键，使延伸单元与抗体单元连接。式IV的方括号内表示此实施方式的代表性延伸单元，其中R17、L-、-W-、-Y-、-D、w和y如上所定义。在本申请中应注意，除非文中另有说明，下式的S部分指抗体单元的硫原子。在其它实施方式中，延伸单元含有可与抗体的伯或仲氨基成键的活性位点。这些活性位点的例子包括但不限于：活性酯如琥珀酰亚胺酯、4-硝基苯酯、五氟苯酯、四氟苯酯、酸酐、酰基氯、磺酰氯、异氰酸酯和异硫氰酸酯。式Va和Vb的方括号内表示该实施方式的代表性延伸单元，其中-R17-、L-、-W-、-Y-、-D、w和y如上所定义；在一些实施方式中，延伸单元含有可与抗体上可能出现的修饰糖的(-CHO)基团发生反应的活性位点。例如，可利用诸如高碘酸钠等试剂温和氧化糖，所得的氧化糖的(-CHO)单元可与含有官能团如酰肼、肟、伯或仲胺、肼、缩氨基硫脲、羧酸肼和芳基酰肼的延伸单元缩合，如Kaneko等，1991，BioconjugateChem.2:133-41所述。式VIa、VIb和VIc的方括号内表示该实施方式的代表性延伸单元，其中-R17-、L-、-W-、-Y-、-D、w和y的定义如上所述。VII)氨基酸单元存在时，氨基酸单元(-W-)连接延伸单元与间隔单元(如果存在间隔单元)，连接延伸单元与药物部分(如果不存在间隔单元)，连接抗体单元与药物单元(如果不存在延伸单元和间隔单元)。Ww-可以是，例如，单肽、二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或十二肽单元。-W-单元各自独立地具有下面方括号中所示通式，w是0-12的整数：其中R19是氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苄基、对-羟基苄基、-CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH2CH2SCH3、-CH2CONH2、-CH2COOH、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、-(CH2)3NH2、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCHO、-(CH2)4NHC(＝NH)NH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)4NHCHO、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NHCONH2、-CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2-吡啶基甲基-、3-吡啶基甲基-、4-吡啶基甲基-、苯基、环己基、在一些实施方式中，可利用包括癌症或肿瘤相关蛋白酶在内的一种或多种酶对氨基酸单元进行酶促切割，以释放药物单元(-D)，其在一个实施方式中于释放后体内质子化以提供药物(D)。在某些实施方式中，氨基酸单元可包含天然氨基酸。在其他实施方式中，氨基酸单元可包含非天然氨基酸。式(VII)-(IX)代表说明性Ww单元：其中R20和R21如下：其中R20、R21和R22如下：其中R20、R21、R22和R23如下：示例性氨基酸单元包括但不限于式VII的单元，其中：R20是苄基且R21是-(CH2)4NH2；R20是异丙基且R21是-(CH2)4NH2；或者R20是异丙基且R21是-(CH2)3NHCONH2。另一示例性氨基酸单元是式VIII的单元，其中R20是苄基，R21是苄基且R22是-(CH2)4NH2。有用的-Ww-单元可作设计并优化其对特定酶如肿瘤相关蛋白酶的酶切选择性。在一个实施方式中，-Ww-单元是组织蛋白酶B、C和D，或纤溶酶蛋白酶催化切割的单元。在一个实施方式中，-Ww-是二肽、三肽、四肽或五肽。当R19、R20、R21、R22或R23不是氢时，与R19、R20、R21、R22或R23连接的碳原子是手性碳。与R19、R20、R21、R22或R23连接的碳原子各自独立地是(S)或(R)构型。在氨基酸单元的一个方面，该氨基酸单元是缬氨酸-瓜氨酸(vc或val-cit)。在另一方面，该氨基酸单元是苯丙氨酸-赖氨酸(即fk)。在氨基酸单元的另一方面，该氨基酸单元是N-甲基缬氨酸-瓜氨酸。另一方面，该氨基酸单元是5-氨基戊酸、高苯丙氨酸赖氨酸、四异喹啉羧酸赖氨酸、环己基丙氨酸赖氨酸、异哌啶酸(isonepecoticacid)赖氨酸、β-丙氨酸赖氨酸、甘氨酸丝氨酸缬氨酸谷胺酰胺和异哌啶酸。VIII)间隔单元间隔单元(-Y-)存在时，连接氨基酸单元与药物单元(氨基酸单元存在时)。或者，不存在氨基酸单元时，间隔单元连接延伸单元与药物单元。不存在氨基酸单元和延伸单元时，间隔单元也连接药物单元与抗体单元。间隔单元有两种主要类型：非自分解型或自分解型。非自分解型间隔单元是对抗体药物偶联物的氨基酸单元进行切割特别是酶切后，一部分或全部间隔单元保持结合于药物部分的间隔单元。非自分解型间隔单元示例包括但不限于(甘氨酸-甘氨酸)间隔单元和甘氨酸间隔单元(均示于方案1)(见下)。通过酶(如肿瘤细胞相关蛋白酶、癌细胞相关蛋白酶或淋巴细胞相关蛋白酶)对含有甘氨酸-甘氨酸间隔单元或甘氨酸间隔单元的偶联物进行酶切时，从L-Aa-Ww-中切割甘氨酸-甘氨酸-药物部分或甘氨酸-药物部分。在一个实施方式中，在靶细胞内发生独立的水解反应，切割甘氨酸-药物部分键并释放药物。方案1在一些实施方式中，非自分解型间隔单元(-Y-)是-Gly-。在一些实施方式中，非自分解型间隔单元(-Y-)是-Gly-Gly-。在一个实施方式中，提供不存在间隔单元的药物-接头偶联物(y＝0)，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。或者，含有自分解型间隔单元的偶联物可释放-D。本文所用术语“自分解型间隔物”指能够将两个间隔的化学部分共价连接成稳定三联分子的双官能化学部分。如果与第一部分的键被切割，则自发与第二化学部分分离。在一些实施方式中，-Yy-是对-氨基苯甲醇(PAB)单元(参见方案2和3)，它的亚苯基部分被Qm取代，其中Q是-C1-C8烷基、-C1-C8烯基、-C1-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C1-C8烯基)、-O-(C1-C8炔基)、-卤素、-硝基或-氰基；且m是0-4的整数。无论单独存在或作为另一基团的一部分，所述烷基、烯基和炔基均可任选被取代。在一些实施方式中，-Y-是通过PAB基团的氨基氮原子连接于-Ww-的PAB基团，并通过碳酸酯、氨基甲酸酯或醚基团直接连接于-D。不希望受任何具体理论或机理的限制，方案2描述了通过氨基甲酸酯或碳酸酯基团直接连接于-D的PAB基团的药物释放的可能机理，如Toki等，2002，J.Org.Chem.67:1866-1872所述。方案2在方案2中，Q是-C1-C8烷基、-C1-C8烯基、-C1-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C1-C8烯基)、-O-(C1-C8炔基)、-卤素、-硝基或-氰基；m是0-4的整数；且p的范围是1至约20。无论单独存在或作为另一基团的一部分，所述烷基、烯基和炔基均可任选被取代。不希望受任何具体理论或机理的限制，方案3描述了通过醚或胺连接直接连接于-D的PAB基团的药物释放的可能机理，其中D包含构成药物单元的一部分的氧或氮基团。方案3在方案3中，Q是-C1-C8烷基、-C1-C8烯基、-C1-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C1-C8烯基)、-O-(C1-C8炔基)、-卤素、-硝基或-氰基；m是0-4的整数；且p的范围是1至约20。无论单独存在或作为另一基团的一部分，所述烷基、烯基和炔基均可任选被取代。自分解型间隔物的其它示例包括但不限于：电学性质类似于PAB基团的芳族化合物，如2-氨基咪唑-5-甲醇衍生物(Hay等，1999，Bioorg.Med.Chem.Lett.9:2237)和邻或对-氨基苄基缩醛。可以使用在酰胺键水解时发生环化的间隔物，例如取代和未取代的4-氨基丁酸酰胺(Rodrigues等，1995，ChemistryBiology2:223)、合适取代的双环[2.2.1]和双环[2.2.2]环系统(Storm等，1972，J.Amer.Chem.Soc.94:5815)和2-氨基苯基丙酸酰胺(Amsberry等，1990，J.Org.Chem.55:5867)。甘氨酸α-位上取代的含胺药物的消除(Kingsbury等，1984，J.Med.Chem.27:1447)也是自分解间隔物的示例。在一个实施方式中，间隔单元是支链双(羟甲基)-苯乙烯(BHMS)单元，如方案4所示，其可用于掺入和释放多个药物。方案4在方案4中，Q是-C1-C8烷基、-C1-C8烯基、-C1-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C1-C8烯基)、-O-(C1-C8炔基)、-卤素、-硝基或-氰基；m是0-4的整数；n是0或1；且p的范围是1-约20。无论单独存在或作为另一基团的一部分，所述烷基、烯基和炔基均可任选被取代。在一些实施方式中，-D部分相同。在另一实施方式中，-D部分不同。在一个方面，间隔单元(-Yy-)由式(X)-(XII)表示：其中Q是-C1-C8烷基、-C1-C8烯基、-C1-C8炔基、-O-(C1-C8烷基)、-O-(C1-C8烯基)、-O-(C1-C8炔基)、-卤素、-硝基或-氰基；且m是0-4的整数。无论单独存在或作为另一基团的一部分，所述烷基、烯基和炔基均可任选被取代。和包含抗体-药物偶联化合物的式I和II的实施方式可包括：其中w和y各自是0、1或2，且其中w和y各自是0，IX)药物单元该药物部分(D)可以是任何细胞毒性、细胞生长抑制或免疫调节(例如免疫抑制)或药物。D是具有可与间隔单元、氨基酸单元、延伸单元或抗体单元成键的原子的药物单元(部分)。在一些实施方式中，药物单元D具有氮原子，其可与间隔单元成键。本文所用术语“药物单元”和“药物部分”含义相同且可互换使用。有用的细胞毒性或免疫调节剂种类包括例如抗微管蛋白剂、DNA小沟结合物、DNA复制抑制剂和烷化剂。在一些实施方式中，所述药物是澳瑞他汀，例如澳瑞他汀E(本领域也称为尾海兔素-10的衍生物)或其衍生物。例如，该澳瑞他汀可以是澳瑞他汀E和酮酸间形成的酯。例如，澳瑞他汀E可与对乙酰基苯甲酸或苯甲酰戊酸反应，分别产生AEB和AEVB。其它典型的澳瑞他汀包括AFP、MMAF和MMAE。示例性澳瑞他汀的合成和结构参见美国专利申请公开号2003-0083263、2005-0238649和2005-0009751；国际专利公开号WO04/010957、国际专利公开号WO02/088172和美国专利号6,323,315；6,239,104；6,034,065；5,780,588；5,665,860；5,663,149；5,635,483；5,599,902；5,554,725；5,530,097；5,521,284；5,504,191；5,410,024；5,138,036；5,076,973；4,986,988；4,978,744；4,879,278；4,816,444；和4,486,414，上述文献各自通过引用全文纳入本文并用于所有目的。已证明澳瑞他汀干扰微管动力学以及细胞核和细胞分裂并具有抗癌活性。澳瑞他汀结合微管蛋白并可对CD37表达细胞产生细胞毒性或细胞生长抑制作用。有许多本领域已知的不同实验可用来确定澳瑞他汀或是所得的抗体-药物偶联物对所需细胞系产生细胞生长抑制或细胞毒性作用。用于测定化合物是否结合微管蛋白的方法是本领域已知的。参见例如Muller等，Anal.Chem2006,78,4390-4397；Hamel等，MolecularPharmacology,199547:965-976；和Hamel等，TheJournalofBiologicalChemistry,1990265:28,17141-17149。出于本发明目的，可测定化合物对微管蛋白的相对亲和性。本发明的一些优选澳瑞他汀结合微管蛋白的亲和性范围从比MMAE与微管蛋白的结合亲和性低10倍(较弱亲和力)，到比MMAE与微管蛋白结合亲和性高10倍、20倍或100倍(较强亲和力)。在一些实施方式中，-D是式DE或DF的澳瑞他汀：或其药学上可接受的盐或溶剂合物；其中，在每个位置上独立地给出以下说明：波浪线表示键；R2是-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基；R3是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、-碳环、-C1-C20亚烷基(碳环)、-C2-C20亚烯基(碳环)、-C2-C20亚炔基(碳环)、-芳基、-C1-C20亚烷基(芳基)、-C2-C20亚烯基(芳基)、-C2-C20亚炔基(芳基)、-杂环、-C1-C20亚烷基(杂环)、-C2-C20亚烯基(杂环)或-C2-C20亚炔基(杂环)；R4是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、碳环、-C1-C20亚烷基(碳环)、-C2-C20亚烯基(碳环)、-C2-C20亚炔基(碳环)、-芳基、-C1-C20亚烷基(芳基)、-C2-C20亚烯基(芳基)、-C2-C20亚炔基(芳基)、-杂环、-C1-C20亚烷基(杂环)、-C2-C20亚烯基(杂环)或-C2-C20亚炔基(杂环)；R5是-H或-C1-C8烷基；或者R4和R5一起形成碳环且具有式-(CRaRb)s-，其中Ra和Rb独立地是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基或碳环，且s是2、3、4、5或6，R6是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基；R7是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、碳环、-C1-C20亚烷基(碳环)、-C2-C20亚烯基(碳环)、-C2-C20亚炔基(碳环)、-芳基、-C1-C20亚烷基(芳基)、-C2-C20亚烯基(芳基)、-C2-C20亚炔基(芳基)、-杂环、-C1-C20亚烷基(杂环)、-C2-C20亚烯基(杂环)或-C2-C20亚炔基(杂环)；R8各自独立地是-H、-OH、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、-O-(C1-C20烷基)、-O-(C2-C20烯基)、-O-(C1-C20炔基)或-碳环；R9是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基；R24是-芳基、-杂环或-碳环；R25是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、-碳环、-O-(C1-C20烷基)、-O-(C2-C20烯基)、-O-(C2-C20炔基)或OR18，其中R18是-H、羟基保护基或在OR18代表＝O时为直接键；R26是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基、-芳基、-杂环或-碳环；R10是-芳基或-杂环；Z是-O-、-S-、-NH-或-NR12-、其中R12是-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基；R11是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、-芳基、-杂环、-(R13O)m-R14或-(R13O)m-CH(R15)2；m是1-1000的整数；R13是-C2-C20亚烷基、-C2-C20亚烯基或-C2-C20亚炔基；R14是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基；每次出现时，R15独立地是-H、-COOH、-(CH2)n-N(R16)2、-(CH2)n-SO3H、-(CH2)n-SO3-C1-C20烷基、-(CH2)n-SO3-C2-C20烯基或-(CH2)n-SO3-C2-C20炔基；每次出现时，R16独立地是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基或-(CH2)n-COOH；且n是0-6的整数；其中单独出现或作为另一基团一部分的所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基、碳环和杂环基是可选取代的。式DE的澳瑞他汀包括其中所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基、碳环和杂环基团未发生取代的那些。式DE的澳瑞他汀包括其中R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9基团未被取代且R19、R20和R21基团是如本文所述可选取代的那些。式DE的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是-C1-C8烷基；R3、R4和R7独立地选自-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、单环C3-C6碳环、-C1-C20亚烷基(单环C3-C6碳环)、-C2-C20亚烯基(单环C3-C6碳环)、-C2-C20亚炔基(单环C3-C6碳环)、C6-C10芳基、-C1-C20亚烷基(C6-C10芳基)、-C2-C20亚烯基(C6-C10芳基)、-C2-C20亚炔基(C6-C10芳基)、杂环、-C1-C20亚烷基(杂环)、-C2-C20亚烯基(杂环)或-C2-C20亚炔基(杂环)；其中所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、碳环、芳基和杂环基团是可选取代的；R5是-H；R6是-C1-C8烷基；R8各自独立地选自-OH、-O-(C1-C20烷基)、-O-(C2-C20烯基)或-O-(C2-C20炔基)，其中所述烷基、烯基和炔基基团是可选取代的；R9是-H或-C1-C8烷基；R24是可选取代的苯基；R25是-OR18，其中R18是H、羟基保护基或在OR18代表＝O时是直接键；R26选自-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基或碳环，其中所述烷基、烯基、炔基和碳环基团是可选取代的；或其药学上可接受的盐或溶剂合物形式。式DE的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是甲基；R3是-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基或-C2-C8炔基，其中所述烷基、烯基和炔基是可选取代的；R4是-H、-C1-C8烷基、-C2-C8烯基、-C2-C8炔基、单环C3-C6碳环、-C6-C10芳基、-C1-C8亚烷基(C6-C10芳基)、-C2-C8亚烯基(C6-C10芳基)、-C2-C8亚炔基(C6-C10芳基)、-C1-C8亚烷基(单环C3-C6碳环)、-C2-C8亚烯基(单环C3-C6碳环)、-C2-C8亚炔基(单环C3-C6碳环)；其中单独出现或作为另一基团一部分的所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基和碳环基团是可选取代的；R5是-H；R6是甲基；R7是-C1-C8烷基、-C2-C8烯基或-C2-C8炔基；R8各自是甲氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R24是苯基；R25是-OR18，其中R18是H、羟基保护基或在OR18代表＝O时是直接键；R26是甲基；或其药学上可接受的盐形式。式DE的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物形式：R2是甲基；R3是-H或-C1-C3烷基；R4是-C1-C5烷基；R5是–H；R6是甲基；R7是异丙基或仲丁基；R8是甲氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R24是苯基；R25是-OR18；其中R18是-H、羟基保护基团或在OR18代表＝O时是直接键；且R26是甲基。式DE的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些化合物：R2是甲基或C1-C3烷基，R3是-H或-C1-C3烷基；R4是-C1-C5烷基；R5是H；R6是-C1-C3烷基；R7是-C1-C5烷基；R8是-C1-C3烷氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R24是苯基；R25是-OR18，其中R18是H、羟基保护基或在OR18代表＝O时是直接键；且R26是-C1-C3烷基；或其药学上可接受的盐形式。式DF的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是甲基；R3、R4和R7独立地选自-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、单环C3-C6碳环、-C1-C20亚烷基(单环C3-C6碳环)、-C2-C20亚烯基(单环C3-C6碳环)、-C2-C20亚炔基(单环C3-C6碳环)、C6-C10芳基、-C1-C20亚烷基(C6-C10芳基)、-C2-C20亚烯基(C6-C10芳基)、-C2-C20亚炔基(C6-C10芳基)、杂环、-C1-C20亚烷基(杂环)、-C2-C20亚烯基(杂环)或-C2-C20亚炔基(杂环)；其中无论单独存在或作为另一基团一部分的所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、碳环、芳基和杂环基团是可选取代的；R5是-H；R6是甲基；R8各自是甲氧基；R9是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基；其中所述烷基、烯基和炔基是可选取代的；R10是可选取代的芳基或可选取代的杂环；Z是-O-、-S-、-NH-或-NR12-，其中R12是-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基，各自是可选取代的；R11是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基、芳基、杂环、-(R13O)m-R14或-(R13O)m-CH(R15)2，其中所述烷基、烯基、炔基、芳基和杂环基团是可选取代的；m是1-1000的整数或m＝0；R13是-C2-C20亚烷基、-C2-C20亚烯基或-C2-C20亚炔基，各自是可选取代的；R14是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基或-C2-C20炔基，其中所述烷基、烯基和炔基是可选取代的；每次出现时，R15独立地是-H、-COOH、-(CH2)n-N(R16)2、-(CH2)n-SO3H、-(CH2)n-SO3-C1-C20烷基、-(CH2)n-SO3-C2-C20烯基或-(CH2)n-SO3-C2-C20炔基，其中所述烷基、烯基和炔基是可选取代的；每次出现时，R16独立地是-H、-C1-C20烷基、-C2-C20烯基、-C2-C20炔基或-(CH2)n-COOH，其中所述烷基、烯基和炔基是可选取代的；n是0-6的整数；或其药学上可接受的盐。在某些实施方式中，R10是可选取代的苯基。式DF的澳瑞他汀包括其中R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9基团未被取代且R10和R11基团如本文所述的那些化合物。式DF的澳瑞他汀包括其中所述烷基、烯基、炔基、亚烷基、亚烯基、亚炔基、芳基、碳环和杂环基团未被取代的那些化合物。式DF的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是-C1-C3烷基；R3是-H或-C1-C3烷基；R4是-C1-C5烷基；R5是–H；R6是-C1-C3烷基；R7是-C1-C5烷基；R8是-C1-C3甲氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R10是任选取代的苯基；Z是–O-、-S-或–NH-；R11如上所定义；或其药学上可接受的盐。式DF的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是甲基；R3是-H或-C1-C3烷基；R4是-C1-C5烷基；R5是–H；R6是甲基；R7是异丙基或仲丁基；R8是甲氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R10是任选取代的苯基；Z是–O-、-S-或–NH-；且R11如上所定义；或其药学上可接受的盐。式DF的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是甲基；R3是-H或-C1-C3烷基；R4是-C1-C5烷基；R5是–H；R6是甲基；R7是异丙基或仲丁基；R8是甲氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R10是苯基；且Z是–O-或–NH-；且R11如上所定义，优选氢；或其药学上可接受的盐形式。式DF的澳瑞他汀包括符合以下定义的那些：R2是-C1-C3烷基；R3是-H或-C1-C3烷基；R4是-C1-C5烷基；R5是–H；R6是-C1-C3烷基；R7是-C1-C5烷基；R8是-C1-C3烷氧基；R9是-H或-C1-C8烷基；R10是苯基；Z是–O-或–NH-；且R11如上所定义，优选氢；或其药学上可接受的盐形式。式DE或DF的澳瑞他汀包括其中R3、R4和R7独立地是异丙基或仲丁基且R5是-H的化合物。在一个示例性实施方式中，R3和R4各自是异丙基，R5是H，且R7是仲丁基。剩余取代基如本文所定义。式DE或DF的澳瑞他汀包括其中R2和R6各自是甲基且R9是H的那些化合物。剩余取代基如本文所定义。式DE或DF的澳瑞他汀包括R8每次出现时均为-OCH3的那些化合物。剩余取代基如本文所定义。式DE或DF的澳瑞他汀包括R3和R4各自是异丙基、R2和R6各自是甲基、R5是H、R7是仲丁基、R8每次出现时是-OCH3且R9是H的那些化合物。剩余取代基如本文所定义。式DF的澳瑞他汀包括其中Z是-O-或-NH-的那些化合物。剩余取代基如本文所定义。式DF的澳瑞他汀包括其中R10是芳基的化合物。剩余取代基如本文所定义。式DF的澳瑞他汀包括其中R10是苯基的化合物。剩余取代基如本文所定义。式DF的澳瑞他汀包括其中Z是-O-且R11是氢、甲基或叔丁基的那些化合物。剩余取代基如本文所定义。式DF的澳瑞他汀包括当Z是-NH时，R11是-(R13O)m-CH(R15)2的那些化合物，其中R15是-(CH2)n-N(R16)2且R16是-C1-C8烷基或-(CH2)n-COOH。剩余取代基如本文所定义。式DF的澳瑞他汀包括当Z是-NH时，R11是-(R13O)m-CH(R15)2的那些化合物，其中R15是-(CH2)n-SO3H。剩余取代基如本文所定义。在优选实施方式中，当D是式DE的澳瑞他汀时，w是1-12，优选2-12的整数，y是1或2，且a优选为1。在一些实施方式中，当D是式DF的澳瑞他汀时，a是1且w和y是0。说明性药物单元(-D)包括具有以下结构的药物单元：或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一个方面，可将亲水基团，例如但不限于三乙二醇酯(TEG)通过R11连接于药物单元。不受理论限制，亲水基团有助于药物单元的内化和非凝聚。在一些实施方式中，药物单元不是TZT-1027。在一些实施方式中，药物单元不是澳瑞他汀E、尾海兔素10或澳瑞他汀PE。示例性抗体药物偶联化合物具有以下结构，其中“L”或“mAb-s-”代表本文中称为HvCD37-6b15.1.1的CD37Mab：L-MC-vc-PAB-MMAF或L-MC-vc-PAB-MMAE.或L-MC-MMAF或其药学上可接受的盐。在一些实施方式中，药物单元是卡奇霉素、喜树碱、美登木素或蒽环类抗生素。在一些实施方式中，所述药物是紫杉烷、拓扑异构酶抑制剂、长春花生物碱等。在一些典型的实施方式中，合适的细胞毒剂包括例如DNA小沟结合物(例如，烯二炔(enediyne)和脂肪酸释放激素(lexitropsin)、CBI化合物；也可参见美国专利号6,130,237)、多卡米星、紫杉烷(例如紫杉酚和多西紫杉醇)、嘌呤毒素和长春花生物碱。其它细胞毒剂包括例如CC-1065、SN-38、托泊替坎、吗啉代-多柔比星、根霉素、氰基吗啉代-多柔比星、棘霉素、考布他汀、纺锤菌素、埃博霉素(epothilone)A和B、雌氮芥、隐花植物素(cryptophysin)、西马多丁、类美坦西醇、淅皮海绵内酯、艾榴塞洛素和米托蒽醌。在一些实施方式中，该药物是抗微管蛋白剂。抗微管蛋白剂的例子包括：澳瑞他汀、紫杉烷(如(紫杉醇)、(多西紫杉醇))、T67(杜拉瑞克(Tularik))和长春花生物碱(如长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨)。其他抗微管蛋白剂包括，例如浆果赤霉素衍生物、紫杉烷类似物(如埃博霉素A和B)、诺考达唑(nocodazole)、秋水仙素和秋水仙胺(colcimid)、雌氮芥、隐花植物素(cryptophycin)、西马多丁、美登木素、考布他汀、淅皮海绵内酯和艾榴塞洛素(eleutherobin)。在某些实施方式中，所述细胞毒剂是美登木素，另一组抗微管蛋白剂。例如，在特定实施方式中，所述美登木素是美登素或DM-1(IMGN公司(ImmunoGen,Inc.)；也参见Chari等，1992,CancerRes52:127-131)。在某些实施方式中，细胞毒剂或细胞生长抑制剂是尾海兔素。在某些实施方式中，细胞毒剂或细胞生长抑制剂是澳瑞他汀类。因此，在具体实施方式中，细胞毒剂或细胞生长抑制剂是MMAE(式XI)。在另一具体实施方式中，细胞毒剂或细胞生长抑制剂是AFP(式XVI)。在某些实施方式中，细胞毒剂或细胞生长抑制剂是式XII-XXI的化合物或其药学上可接受的盐：X)药物载量p代表药物载量，即分子中每个抗体的药物部分的平均数量。药物载量的范围可以是每个抗体1-20个药物部分(D)。在一些实施方式中，本发明的ADC包括与1-20范围的药物部分偶联的抗体集合。可通过常规方法如质谱和ELISA试验鉴定来自偶联反应的ADC制品中每个抗体的平均药物部分数量。也可以p的形式确定ADC的定量分布。在一些情况下，可通过诸如电泳的方式将具有某一确定p值的均一ADC与其它药物载量的ADC分离、纯化，并进行鉴定。对于一些抗体药物偶联物，p可能受到抗体结合位点数目的限制。例如，当所述连接是上文示例性实施方式中的半胱氨酸巯基时，抗体可只具有一个或多个半胱氨酸巯基基团，或可只具有一个或多个可经其连接于接头的充足反应性巯基基团。在某些实施方式中，较高的药物载量(例如p>5)可能导致一些药物抗体偶联物聚集、不溶性、毒性或失去细胞通透性。在某些实施方式中，本发明ADC的药物载量范围是1-约8、约2-约6、约3-约5、约3-约4、约3.1-约3.9、约3.2-约3.8、约3.2-约3.7、约3.2-约3.6、约3.3-约3.8或约3.3-约3.7。实际上，已证明对于某些ADC，每个抗体药物部分的最佳比例可少于8并可为约2-约5。参见US2005-0238649A1(通过引用全文纳入本文)。在某些实施方式中，在偶联反应中与抗体偶联的药物部分少于理论最大值。例如，抗体可含有不与药物接头中间体或接头试剂发生反应的赖氨酸残基，如下所述。通常，抗体不含大量可与药物部分连接的游离且反应性的半胱氨酸巯基基团；事实上，抗体中多数半胱氨酸巯基残基以二硫桥的形式存在。在某些实施方式中，抗体可在部分或全还原条件下用还原剂(例如二硫苏糖(DTT)或三羰基乙基膦(TCEP))还原以产生反应性半胱氨酸巯基基团。在某些实施方式中，抗体经历变性条件以显示反应性亲核基团，例如赖氨酸或半胱氨酸。可通过不同方法控制ADC的载量(药物/抗体比例)，例如：(i)限制药物接头中间体或接头试剂相对于抗体的摩尔过量，(ii)限制偶联反应时间或温度，(iii)部分或限制半胱氨酸巯基修饰还原条件，(iv)通过重组技术工程改造抗体的氨基酸序列，从而修饰半胱氨酸数目和位点以控制接头药物连接的数目和/或位点(例如根据本文及WO2006/034488所述制备的巯基MAb或巯基Fab(其通过引用全文纳入本文))。应理解，一个以上亲核基团与药物接头中间体或接头试剂反应再与药物部分试剂反应时，所得产物是ADC化合物的混合物，其中分布了一种或多种与抗体连接的药物部分。每个抗体的平均药物数目可通过双ELISA抗体试验从混合物中计算，该试验对抗体有特异性并对药物有特异性。单独的ADC分子可用质谱法在混合物中鉴定并通过HPLC分离，例如疏水相互作用色谱(参见例如Hamblett,K.J.等，“Effectofdrugloadingonthepharmacology,pharmacokinetics,andtoxicityofananti-CD30antibody-drugconjugate(《药物载量对抗CD30抗体药物偶联物的药理学、药代动力学和毒性的作用》)”摘要号624，美国癌症研究协会(AmericanAssociationforCancerResearch)，2004年会，2004年3月27-31日，AACR会议记录，卷45，2004年3月；Alley,S.C.等，“Controllingthelocationofdrugattachmentinantibody-drugconjugates”(《抗体药物偶联物中药物连接位置的控制》)摘要号627，美国癌症研究协会，2004年会，2004年3月27-31日，AACR会议记录，卷45，2004年3月)。在某些实施方式中，可通过电泳或色谱法从偶联混合物中分离具有单一载量值的均一ADC。XI)测定ADC细胞毒性作用的方法测定药物或抗体药物偶联物是否对细胞产生细胞生长抑制和/或细胞毒性作用的方法是已知的。通常，可通过以下方法测量抗体药物偶联物的细胞毒性或细胞生长抑制活性：将表达抗体药物偶联物靶蛋白的哺乳动物细胞暴露在细胞培养基中；将细胞培养约6小时至约5天的一段时间；并测定细胞活力。可采用基于细胞的体外测试来测量抗体药物偶联物的活力(增殖)、细胞毒性和细胞凋亡的诱导(半胱天冬酶活性)。为测定抗体药物偶联物是否产生细胞生长抑制作用，可采用胸苷掺入试验。例如，96孔板上以5,000细胞/孔的密度接种的靶抗原表达癌细胞能培养72小时并在72小时期间的最后8小时中接触0.5μCi的3H-胸苷。在有和没有抗体药物偶联物的情况下测量培养物细胞中3H-胸苷的掺入。为了测定细胞毒性，可测量坏死或凋亡(程序性细胞死亡)。坏死通常伴随着质膜通透性增加；细胞溶胀和质膜破裂。凋亡的特征通常是膜出泡、胞质浓缩和内源性核酸内切酶的激活。检测到任意这些对癌细胞的作用表明，抗体药物偶联物可用于癌症治疗。可通过测定细胞摄入的染料(例如中性红、台盼蓝或ALAMARTM蓝)来测量细胞活力(参加例如Page等，1993,Intl.J.Oncology3:473-476)。在此类试验中，在含有染料的培养基中孵育细胞、洗涤细胞，并用分光光度法测量剩余染料来反映细胞对染料的摄取。也可利用蛋白质-结合染料磺基罗丹明B(SRB)测量细胞毒性(Skehan等，1990，J.Nat’lCancerInst.82:1107-12)。或者，在定量比色测定中使用四唑盐(例如MTT)，该定量比色测定通过检测存活而非死亡的细胞来测定哺乳动物细胞的存活和增殖(参见例如Mosmann,1983,J.Immunol.Methods65:55-63)。可通过测量(例如)DNA片段化来定量分析细胞凋亡。已有市售的体外定量检测DNA片段化的分光光度方法。此类试验的示例包括TUNEL(检测片段化DNA中掺入的带标记核苷酸)和基于ELISA的试验，描述于Biochemica，1999，2号，第34-37页(罗氏分子生化制品公司(RocheMolecularBiochemicals))。也可通过测量细胞形态学变化来确定细胞凋亡。例如，关于坏死，可通过检测某些染料(例如荧光染料，如吖啶橙或溴化乙锭)的摄入来测定质膜完整性的缺失。测量凋亡细胞数目的方法已描述于Duke和Cohen的CurrentProtocolsinImmunology(《新编免疫学实验指南》)(Coligan等编，1992，第3.17.1-3.17.16页)。也可用DNA染料标记细胞(例如吖啶橙、溴化乙锭或碘化丙锭)并观察细胞的染色质凝聚和沿内核膜的边集(margination)。可测量以确定细胞凋亡的其他形态学变化包括例如胞质凝聚、膜出泡增加和细胞缩小。可由培养物的附着和“漂浮”的腔室(compartment)来测量凋亡细胞是否存在。例如，可通过去除上清液、胰蛋白酶消化粘附的细胞、离心洗涤步骤(例如2000rpm离心10分钟)后混合制备物并检测细胞凋亡(例如，通过测量DNA片段化)来收集两种腔室。(参见例如，Piazza等，1995,CancerResearch55:3110-16)。可在合适的动物模型中体内评估CD37治疗组合物的作用。例如，可使用异种癌模型，其中将癌外植体或经传代的异种移植组织引入免疫受损动物中，例如裸小鼠或SCID小鼠(Klein等，1997，NatureMedicine3:402-408)。例如，PCT专利申请WO98/16628和美国专利6,107,540描述了各种人前列腺癌异种移植模型，这些模型能重现原发性肿瘤的发展、微转移和晚期疾病特征性成骨细胞转移的形成。可通过测量肿瘤形成抑制、肿瘤消退或转移等的试验来预测功效。评估促进细胞凋亡的体内试验可用于评估治疗组合物。在一个实施方式中，检测经治疗组合物处理的荷瘤小鼠的异种移植物中细胞凋亡灶的存在，并与未经处理的对照荷异种移植物小鼠作比较。经处理小鼠肿瘤中发现的细胞凋亡灶的程度提供组合物治疗功效的指示。用于实施上述方法的治疗组合物可配制成药物组合物，该药物组合物包含适用于所需递送方法的载体。合适的载体包括当与治疗组合物组合时保持治疗组合物抗肿瘤功能的任何物质，并通常与患者免疫系统无反应性。示例包括但不限于任何数量的标准药物载体，例如无菌磷酸盐缓冲盐水溶液、抑菌水等(参见，Remington’sPharmaceuticalSciences(《雷明顿药物科学》)第16版，A.Osal.编，1980)。治疗制剂可以是溶解的并可通过任何能向肿瘤位点递送治疗组合物的途径给予。可能有效的给药途径包括但不限于：静脉内、胃肠外、腹膜内、肌内、肿瘤内、皮内、器官内、原位等。用于静脉内注射的优选制剂包含：在防腐剂抑菌水、不含防腐剂的无菌水的溶液中，和/或稀释于含0.9％注射用无菌氯化钠的聚氯乙烯或聚乙烯袋(USP)中的治疗组合物。可将治疗蛋白制品以无菌粉末形式冻干并保存，优选在真空条件下，然后在注射前于抑菌水(含有例如苯甲醇防腐剂)或无菌水中重建。使用上述方法治疗癌症的剂量和给药方案可根据方法和靶标癌而变化，并通常取决于本领域理解的许多其它因素。在一个实施方式中，由于HvCD37-6b15.1.1MAb的修饰，本发明的药物组合物可包括超过一种类型的本发明ADC。例如，本发明包括含本发明ADC的药物组合物，其中HvCD37-6b15.1.1MAb是缺少重链C末端赖氨酸的抗体、具有N末端翻译后修饰的抗体、缺少重链C末端赖氨酸并具有N末端翻译后修饰的抗体、和/或具有重链C末端赖氨酸并不具有N末端翻译后修饰的抗体。例如，在一些实施方式中，本发明药物组合物包括含本发明的两种或更多种ADC的药物组合物，其中ADC的HvCD37-6b15.1.1MAb选自下组1)-4):1)含重链和轻链的HvCD37-6b15.1.1MAb，其中所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围中的氨基酸序列组成，并且所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围中的氨基酸序列组成；2)含重链和轻链的HvCD37-6b15.1.1MAb，其中所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围中的氨基酸序列组成，其中N末端第1个残基Q变换为焦磷酸谷氨酸，并且所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围中的氨基酸序列组成；3)含重链和轻链的HvCD37-6b15.1.1MAb，其中所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围中的氨基酸序列组成，其中C末端第441个残基K被移除，并且所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围中的氨基酸序列组成；和4)含重链和轻链的HvCD37-6b15.1.1MAb，其中所述重链由SEQIDNO:7的第1个残基Q至第441个残基K范围中的氨基酸序列组成，其中N末端第1个残基Q变换为焦磷酸谷氨酸并且C末端第441个残基K被移除，并且所述轻链由SEQIDNO:8的第1个残基D至第212个残基C范围中的氨基酸序列组成。XII)对表达CD37的癌症的治疗鉴定CD37是在一组限定组织中正常表达的蛋白，但也在癌例如表I所列那些中表达，这就拓展了治疗这些癌症的多种治疗方法。值得注意的是，即使当靶蛋白在正常组织，甚至是重要正常器官组织上表达时，靶向抗肿瘤治疗也是有用的。重要器官是维持生命的必需器官，例如心脏或结肠。非重要器官是移除后个体仍能存活的器官。非重要器官的示例是卵巢、乳腺和前列腺。正常组织甚至是重要正常组织中的靶蛋白表达，不会破坏该蛋白的靶向试剂治疗某些也过量表达该蛋白的肿瘤的效用。例如，重要器官中的表达不造成损害也不造成自身损害。另外，视为非必需的器官(如前列腺和卵巢)可以移除而不影响死亡率。最后，一些重要器官由于免疫豁免不受正常器官表达的影响。免疫豁免的器官是受到血液-器官屏障保护隔离血液的器官并因此无法进行免疫治疗。免疫豁免器官的示例是大脑和睾丸。因此，抑制CD37蛋白活性的治疗方法对患有CD37表达癌症的患者有用。这些治疗方法通常分为三类。第一类调节CD37功能(由于该蛋白涉及肿瘤细胞生长)从而抑制或阻滞肿瘤细胞生长或诱导肿瘤细胞死亡。第二类包括抑制CD37蛋白与其结合伙伴或其它蛋白的结合或关联的各种方法。第三类包括抑制CD37基因转录或CD37mRNA翻译的各种方法。因此，可对癌症患者评估CD37表达的存在和水平，优选使用肿瘤组织的免疫组化评价、定量CD37成像或可靠指示CD37表达存在或程度的其它技术。就此目的，优选肿瘤活检或外科手术样本的免疫组化分析。肿瘤组织的免疫组化分析的方法是本领域熟知的。XIII.)将CD37作为靶标用于基于抗体的治疗CD37是基于抗体治疗策略中具有吸引力的靶标。许多靶向胞外和胞内分子的抗体策略为本领域熟知(参见，例如补体和ADCC介导的杀伤以及胞内抗体的应用)。由于CD37由相对于相应正常细胞的各种癌细胞系表达，准备全身给予CD37免疫反应性组合物，其展现出极佳的灵敏性但不出现因免疫反应性组合物与非靶标器官和组织结合引起的毒性、非特异性和/或非靶向性作用。抗体与CD37结构域的特异性反应有助于全身性治疗表达CD37的癌症，优选作为其中偶联物带有毒素或治疗剂的抗体药物偶联物(即ADC)。本领域技术人员应理解，抗体可用于特异性靶向并结合免疫原性分子，例如图1所示CD37序列的免疫原性区域。另外，本领域技术人员应理解将抗体与细胞毒剂偶联是常规的(参见，例如Slevers等，Blood93:113678-3684(1999年6月1日))。细胞毒剂和/或治疗剂直接递送到细胞时，例如通过将其偶联于对细胞表达的分子(例如CD37)特异的抗体，细胞毒剂能对那些细胞产生其已知的生物作用(即细胞毒性)。用抗体细胞毒剂偶联物杀伤细胞的多种组合物和方法是本领域已知的。癌症情况下，一般方法包括向具有肿瘤的哺乳动物给予生物有效量的偶联物，所述偶联物包含与靶向试剂(例如CD37MAb，优选HvCD37-6b15.1.1)连接的所选细胞毒性和/或治疗剂，其与所表达可供结合或定位于细胞表面的抗原(例如CD37)结合。典型的实施方式是向CD37表达细胞递送细胞毒性和/或治疗剂的方法，该方法包括将细胞毒剂与免疫特异性结合CD37表位的抗体偶联，并将细胞暴露于与抗体药物偶联物(ADC)。另一种说明性实施方式是治疗疑似患有转移性癌的个体的方法，该方法包括对所述个体经胃肠外给予药物组合物的步骤，该药物组合物含有治疗有效量的与细胞毒剂和/或治疗剂偶联的抗体。可根据已成功用于治疗其它类型癌症的各种方法用CD37抗体进行癌症免疫治疗，所述癌症包括但不限于结肠癌(Arlen等，1998，Crit.Rev.Immunol.18:133-138)、多发性骨髓瘤(Ozak等，1997，Blood90:3179-3186，Tsunenari等，1997，Blood90:2437-2444)、胃癌(Kasprzyk等，1992，CancerRes.52:2771-2776)、B细胞淋巴癌(Funakoshi等，1996，J.Immunother.EmphasisTumorImmunol.19:93-101)、白血病(Zhon等，1996,Leuk.Res.20:581-589)、结直肠癌(Moun等，1994,CancerRes.54:6160-6166；Velders等，1995，CancerRes.55:4398-4403)和乳腺癌(Shepard等，1991,J.Clin.Immunol.11:117-127)。一些治疗方法包括将裸抗体与毒素或放射性同位素偶联，例如将Y91或I131分别与抗CD20抗体偶联(例如ZevalinTM，IDEC制药公司(IDECPharmaceuticalsCorp.)或BexxarTM，库尔特制药公司(CoulterPharmaceuticals))，而其它方法包括共同给予抗体和其它治疗剂，例如HerceptinTM(曲妥珠单抗(trastuzuMAb))和紫杉醇(基因泰克公司(Genentech,Inc.))。在优选实施方式中，抗体将偶联有细胞毒剂，同上，优选称为MMAE的澳瑞他汀衍生物(西雅图遗传学公司(SeattleGenetics,Inc))。虽然CD37抗体治疗对所有癌症分期有用，但抗体治疗可尤其适于晚期或转移性癌。在一些实施方式中，本发明所述的抗体治疗对症治疗已接受一轮或多轮化疗的患者。或者，在一些实施方式中，对于尚未接受化疗的患者，将本发明所述抗体治疗与化疗或放疗方案联用。另外，抗体治疗可使伴随的化疗使用减低剂量，尤其对于不能很好耐受化疗剂毒性的患者。Fan等(CancerRes.53:4637-4642,1993)、Prewett等(InternationalJ.ofOnco.9:217-224,1996)和Hancock等(CancerRes.51:4575-4580,1991)描述了各种抗体与化疗剂的共同应用。治疗表I中所示癌症的CD37单克隆抗体包括针对肿瘤启动有效免疫应答的抗体或具有直接细胞毒性的抗体。关于这点，CD37单克隆抗体(MAb)可通过补体介导或抗体依赖性细胞毒性(ADCC)机理引起肿瘤细胞裂解，这2种种途径都需要免疫球蛋白分子的完整Fc部分以与补体蛋白上效应细胞Fc受体位点相互作用。此外，对肿瘤生长产生直接生物效应的CD37MAb在治疗表达CD37的癌症中有用。细胞毒性Mab的直接作用机理包括：抑制细胞生长、调控细胞分化、调控肿瘤发生因子概况和诱导细胞凋亡。使用评估细胞死亡的任何数目的体外试验来评价具体CD37MAb产生抗肿瘤作用的机理，所述试验例如ADCC、补体介导的细胞裂解等，如本领域通常已知的。因此，用于本发明所述治疗方法的优选单克隆抗体包括全人抗体和以高亲合性特异性结合靶标CD37抗原的抗体。XIV.)CD37ADC混合物在一些实施方式中，本发明治疗方法考虑了给予单一CD37ADC以及不同MAb的组合或混合物(即CD37MAb或结合另一蛋白的MAb)。这类MAb混合物可具有某些优势，因为其含有靶向不同表位的MAb，利用不同的效应机理或组合了直接细胞毒性MAb与依赖免疫效应功能的MAb。这类组合MAb可展现协同治疗作用。另外，CD37MAb的给予可伴随其它治疗方法，所述其它治疗方法包括但不限于各种化疗和生物试剂、雄激素阻滞剂、免疫调节剂(例如IL-2、GM-CSF)、外科手术或放射。在一个优选实施方式中，给予偶联形式的CD37MAb。通过能向肿瘤细胞递送抗体的任何途径给予CD37ADC制剂。给药途径包括但不限于：静脉内、腹膜内、肌内、肿瘤内、皮内等。治疗通常包括通过可接受的给予途径(例如静脉内注射(IV))重复给予CD37ADC制剂，且通常剂量范围包括但不限于：0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20或25mg/kg体重。通常，每周10-1000mgMAb范围的剂量是有效的且耐受良好。基于用(曲妥珠单抗)治疗转移性乳腺癌的临床经验，约4mg/kg患者体重IV的MAb制剂起始加载剂量和之后约2mg/kgIV的每周剂量代表了可接受的给药方案。优选地，起始加载剂量以90分钟或更长时间的输注给予。如果起始剂量耐受良好，周期性维持剂量以30分钟或更长时间的输注给予。本领域技术人员应理解，特定情况下，各种因素能影响理想剂量方案。该因素包括例如，所用MAb的结合亲和性和半衰期、患者的CD37表达水平、循环脱落CD37抗原的程度、所需稳定状态抗体浓度水平、治疗频率和与所提供的治疗方法联用的化疗或其它试剂的影响，以及特定患者的健康状态。任选地，应对患者的给定样品评估CD37水平(例如，循环CD37抗原和/或CD37表达细胞水平)以协助确定最有效给药方案等。这类评估也用于治疗中的监测目的并与其它参数评估(例如，膀胱癌治疗中尿细胞学和/或免疫细胞水平，或通过类比方法评估前列腺癌治疗中的血清PSA水平)联用以评估治疗成功。本发明的一个目的是提供CD37ADC，其抑制或延迟表达CD37的肿瘤细胞的生长。本发明的另一个目的是使用该CD37ADC，特别是联用该CD37ADC与其它药物或免疫学活性治疗，提供抑制血管生长和其它生物功能从而降低哺乳动物(优选人)中肿瘤的生长的方法。XV.)联合治疗在一个实施方式中，用CD37ADC与化疗剂或放射或其组合联合治疗肿瘤(包括人肿瘤)时，有协同作用。换言之，与化疗剂或放射或其组合联用时，CD37ADC对肿瘤生长抑制的增强超过预期水平。协同作用可例如通过以下显示：联合治疗对肿瘤生长的抑制大于对单独CD37ADC治疗或CD37ADC和化疗剂或放射治疗的叠加作用的预期。优选地，通过癌症减轻证实协同作用，其中用CD37ADC治疗或用CD37ADC和化疗剂或放射叠加组合治疗预期没有减轻癌症。使用CD37ADC与化疗或放射或其两者的组合来抑制肿瘤细胞生长的方法包括在开始化疗或放疗之前、期间或之后以及其任何组合(即开始化疗和/或放疗之前和期间、之前和之后、期间和之后，或之前、期间和之后)给予CD37ADC。例如，一般在开始放疗和/或化疗前1-60天，优选3-40天，更优选5-12天内给予CD37ADC。然而，根据治疗方案和特定患者需求，以提供最有效治疗和最终延长患者生命的方式实施该方法。可以各种方法实现化疗剂的给药，包括通过胃肠外和肠内途径的全身性给药。在一个实施方式中，以单独的分子的形式给予CD37ADC和化疗剂。化疗剂或化疗的具体示例包括：顺铂、达卡巴嗪(DTIC)、更生霉素、双氯乙基甲胺(氮芥)、链脲菌素、环磷酰胺、卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、多柔比星(阿霉素)、柔红霉素、丙卡巴肼、丝裂霉素、阿糖胞苷、依托泊甙、氨甲喋呤、5-氟尿嘧啶、长春碱、长春新碱、博来霉素、紫杉醇(红豆杉醇)、多西紫杉醇(多西他赛)、阿地白介素、天冬酰胺酶、白消安、卡铂、克拉屈滨、达卡巴嗪、氟尿苷、氟达拉滨、羟基脲、异环磷酰胺、干扰素α、亮丙瑞林、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、普卡霉素、米托坦、培门冬酶、喷司他丁、哌泊溴烷、普卡霉素、链脲菌素、他莫昔芬、替尼泊甙、睾内酯、硫鸟嘌呤、噻替哌、尿嘧啶氮芥、长春瑞滨、吉西他滨、苯丁酸氮芥、红豆杉醇和其组合。与CD37ADC联用的放射来源可以在待治疗患者的外部或内部。当放射源在患者外部时，该治疗称为外照射放疗(externalbeamradiationtherapy)(EBRT)。当放射源在患者内部时，该治疗称为近程治疗(BT)。上述治疗方案可进一步与其他癌症治疗剂和/或方案联用，例如额外的化疗、癌症疫苗、信号转导抑制剂、用于治疗异常细胞生长或癌症的试剂、抗体(例如，如WO/2005/092380所述的抗-CTLA-4抗体(辉瑞))或通过结合于IGF-1R抑制肿瘤生长的其它配体，和细胞因子。在哺乳动物经受额外化疗时，可使用上述化疗剂。另外，可使用生长因子抑制剂、生物响应调节剂、抗激素治疗、选择性雌激素受体调节剂(SERM)、血管生成抑制剂和抗雄激素。例如可使用抗激素，例如抗雌激素如诺瓦得士(他莫昔芬)，或抗雄激素如康士得(4'-氰基-3-(4-氟苯基磺酰基)-2-羟基-2-甲基-3-'-(三氟甲基)地恩丙胺)。上述治疗方法可与多种外科手术、化疗或放疗方案中的任一种联用。在一些实施方式中，本发明所述治疗方法可使化疗(或其它治疗)使用降低剂量和/或使用较低的频率给予，这对所有患者且特别是不能很好耐受化疗剂毒性的患者来说具有优势。XVI.)试剂盒/制品对于本文所述在实验室、预后、预防、诊断和治疗中的应用，试剂盒在本发明的范围之内。这类试剂盒可包含载体、包装或容器，其经分隔可容纳一个或多个容器例如小瓶、管等，每个容器包含一种用于本方法的单独元件，以及含有使用(例如本文所述的应用)说明的标签或插页。例如，容器可包含带可检测标记或能被可检测标记的抗体。试剂盒可包含含有药物单元的容器。该试剂盒可包括图2或图3中的所有或部分氨基酸序列或其类似物，或编码这些氨基酸序列的核酸分子。在一些实施方式中，本发明试剂盒一般包含上述容器和一个或多个与其相关的容器，该容器包含从商业和使用者立场来看需要的物质，包括缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器；载体、包装、容器、小瓶和/或管，列出内含物和/或使用说明的标签，和带使用说明的包装插页。标签可存在于容器上或和容器一起以指示组合物用于特定治疗或非治疗性应用，例如预后、预防、诊断或实验室应用，并且也可指示体内或体外使用(例如本文所述的应用)指南。指南和/或其它信息也可包括在和试剂盒一起或试剂盒上的说明书或标签中。该标签可在容器上或为该容器所附带。当形成标签的字母、数字或其它字符是模塑或蚀刻到容器本身中时，标签可在容器上；当容器存在容纳该容器的接收容器或载体中时，标签可与该容器附在一起，例如作为包装插页。所述标签可指示该组合物用于诊断、治疗、预防或预后病症，例如表I所示组织的癌症。术语“试剂盒”和“制品”可以同义使用。在本发明的另一个实施方式中，提供包含组合物(例如抗体或抗体药物偶联物(ADC))的制品，例如用于诊断、预后、预防和/或治疗组织癌症(如表I所示的那些)的物质。该制品通常包含至少一个容器和至少一个标签。合适的容器包括例如瓶、小瓶、注射器和试管。该容器可由各种材料(如玻璃、金属或塑料)制成。该容器可容纳氨基酸序列、小分子、核酸序列、细胞群和/或抗体。在另一实施方式中，容器包含用于评估细胞和组织中CD37蛋白表达，或相关实验室、预后、诊断、预防和治疗目的的抗体、其结合片段或特异性结合蛋白；所述应用的指示和/或指南可置于容器上或和容器放在一起，用于该目的的试剂和其它组合物或工具也可如此。或者，该容器可容纳对于治疗、诊断、预后或预防病症有效的组合物并具有无菌进入端口(例如，该容器可以是具有被皮下注射针头刺穿的塞子的静脉输液袋或小瓶)。组合物中的活性剂可以是能够特异性结合CD37的抗体或特异性结合CD37的抗体药物偶联物。该制品还可包括含有药学上可接受缓冲剂(如磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和/或右旋糖溶液)的第二容器。还可包括从商业和使用者立场来看需要的其他材料，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、搅拌物、针头、注射器和/或具有指示和/或使用说明的包装插页。实施例：通过以下几个实施例对本发明各方面做进一步说明和展示，这些实施例不旨在限制本发明范围。实施例1CD37抗原CD37，还称为白细胞抗原CD37(以及包括但不限于四旋蛋白26)，是由CD37基因编码的蛋白质。该基因编码的蛋白质是跨膜4超家族(还称为四旋蛋白家族)的成员。这些成员中多数是细胞表面蛋白，其特征为存在4个疏水结构域。该蛋白介导信号转导事件，在调控细胞发育、活化、生长和运动中其关键作用。该编码的蛋白是细胞表面糖蛋白，已知其与整联蛋白和其他跨膜4超家族蛋白复合。参见例如VirtanevaKI等,Immunogenetics37(6):461-465(1993年3月).参见例如Horejsi等,FEBSLetters,288卷1,2期1-4页(1991年8月)。还参见例如Link等,J.Immun.,137卷9期,3013-3018页(1968年11月)。而且，还应注意可变剪接导致编码不同同种型的多种转录本变体。Tomlinson等,Mol.Immun.,33卷,10期867-872页(1996)。CD37cDNA的长度为1,263bp并编码281个氨基酸的ORF(参见图1)。对于CD37抗原的示例性实施方式，参见图1。实施例2生成CD37单克隆抗体(MAb)在一个实施方式中，针对CD37的治疗性单克隆抗体(“Mab”)包含与细胞上表达的CD37结合的与CD37特异性表位发生反应的那些。产生此类Mab的免疫原包括设计用于编码或包含胞外结构域或整个CD37蛋白质序列、预期包含功能性基序的区域、和通过计算机分析氨基酸序列而预期具有抗原性的CD37区域。免疫原包括肽和重组蛋白质和内源表达CD37或已工程改造以表达CD37的细胞(例如293T-CD37)。CD37的MAb使用技术(纽约州塔利镇的再生元公司(Regeneron))生成，其中遗传工程改造的小鼠产生具有完全人可变区和小鼠恒定区的抗体。在免疫具有表达CD37的重组293T细胞的Velocimmune小鼠之后产生称为HvCD37-6b15.1.1的MAb。CD37MAbHvCD37-6b15.1.1特异结合CD37表达细胞(重组和内源)。选择后，通过组合来自velocimmune抗体的人可变区序列与人恒定区将HvCD37-6b15.1.1MAb(杂交瘤细胞系天然产生)转变为中华仓鼠卵巢(CHO)表达的全人抗体。使用Trizol试剂(生命技术公司吉布可BRL(LifeTechnologies，GibcoBRL))从各杂交瘤细胞中分离mRNA后，确定CD37MAbHvCD37-6b15.1.1的DNA编码序列。采用以下方案对来自杂交瘤细胞的抗CD37HvCD37-6b15.1.1重链和轻链可变核酸序列进行测序。用Trizol试剂(生命技术公司吉布可BRL(LifeTechnologies，GibcoBRL))裂解分泌HvCD37-6b15.1.1的杂交瘤细胞。纯化并定量分析总RNA。通过吉布可-BRLSuperscript预扩增系统(Gibco-BRLPreamplificationsystem)用寡(dT)12-18引物从总RNA中得到第一链cDNA。使用人免疫球蛋白可变重链引物和人免疫球蛋白可变轻链引物扩增第一链cDNA。对PCR产物测序并确定可变重链和轻链区。可变重链和轻链区的核酸和氨基酸序列在图2和图3中列出。HvCD37-6b15.1.1MAb与人Ig种系的比对示于图4A-4B。实施例3用重组DNA法表达HvCD37-6b15.1.1为在转染细胞中重组表达HvCD37-6b15.1.1MAb，将HvCD37-6b15.1.1MAb可变重链和轻链序列分别克隆到人重链IgG2和人轻链Igκ恒定区的上游。将完整的HvCD37-6b15.1.1MAb人重链和轻链盒克隆到克隆载体中CMV启动子/增强子的下游。聚腺苷酸化位点包含在MAb编码序列下游。表达重组HvCD37-6b15.1.1MAb的构建体转染入CHO细胞。通过FACS评估重组细胞分泌的HvCD37-6b15.1.1MAb与表达CD37的人癌症细胞系的结合(参见表VI)。通过流式细胞术检测结合。结果显示CHO细胞中表达的重组表达的HvCD37-6b15.1.1与细胞表面上的CD37结合。结果显示，CHO细胞中重组表达的HvCD37-6b15.1.1与CD37的结合类似于纯化自杂交瘤的HvCD37-6b15.1.1。还通过ELISA评估了分泌自重组细胞的HvCD37-6b15.1.1MAb对CD37重组蛋白的结合。在来源于CHO和来源于杂交瘤细胞的MAb材料之间，HvCD37-6b15.1.1与CD37蛋白的结合相同。生产称为HvCD37-6b15.1.1的抗体的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞在2013年7月8日(通过联邦快递)送至美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection)(ATCC)，弗吉尼亚州马那萨斯，邮政信箱1549，20108并指定登录号：120464。如实验分析所示，使用本领域已知的方法(例如蛋白酶消化、LCMS分析等)分析源自CHO细胞的HvCD37-6b15.1.1MAb的氨基酸修饰显示在制备纯化的HvCD37-6b15.1.1MAb中，典型重链包含N末端谷氨酰胺向焦磷酸谷氨酸的修饰以及重链C末端赖氨酸的缺失。实施例4HvCD37-6b15.1.1MAb的抗体药物偶联使用以下方案，使用本文所述的vc(Val-Cit)接头将HvCD37-6b15.1.1MAb(图2)与称为MMAE(式XI)的澳瑞他汀衍生物偶联，以产生称为HvCD37-6b15.1.1vcMMAE的抗体药物偶联物(ADC)。通过使用表IV所示一般方法完成vc(Val-Cit)接头与MMAE(西雅图遗传学公司(SeattleGenetics,Inc.)华盛顿州西雅图)的偶联以产生细胞毒性vcMMAE(参见US/2006/0074008)。然后，使用以下方案制备称为HvCD37-6b15.1.1vcMMAE的抗体药物偶联物(ADC)。简而言之，向35.5mLpH7.4的磷酸盐缓冲盐水中2.7mg/mL的HvCD37-6b15.1.1Mab中加入以及1体积％的5NNaCl、11体积％的0.5N硼酸钠缓冲液(pH9.0)和1体积％的0.5MEDTA以将该溶液调节至pH8.9、5mMEDTA和50mM氯化钠。随后通过添加11.5摩尔当量的TCEP(相对于MAb的摩尔数)部分还原MAb，然后37℃搅拌2.5小时。然后部分还原的MAb溶液冷却至室温并以8％(v/v)DMSO溶液加入5.2摩尔当量的vcMMAE(相对于抗体摩尔数)。室温搅拌混合物60分钟，然后加入相对Mab为5摩尔当量的N-乙酰基半胱氨酸再搅拌10分钟。通过用6渗滤体积的20mM组氨酸(pH5.2)对抗体药物偶联物(ADC)进行超滤/膜渗滤，除去已淬灭的过量vcMMAE和其它反应组分，然后加入40％的浓缩蔗糖溶液以调整蔗糖浓度至5％。所得抗体药物偶联物(ADC)命名为HvCD37-6b15.1.1vcMMAE并具有下式：其中，MAb是HvCD37-6b15.1.1(图2和图3)，p是1-10。该实施例中抗体药物偶联物的优选的p值为3.5-3.7。实施例5HvCD37-6b15.1.1MAb的表征使用实施例中题为“CD37单克隆抗体(MAb)的产生”的过程来生成结合CD37的MAb，并使用本领域已知试验的组合对其进行筛选、鉴定和表征。A.FACS结合测试HvCD37-6b15.1.1对体外生长的不同NHL、CLL和AML细胞系(参见表VI)的结合。HvCD37-6b15.1.1和匹配对照抗体的同种型用NHSLC生物素进行生物素化。体外指数生长的癌症细胞系用于所有实验。简而言之，通过离心收获并清洗细胞。抗体稀释至终浓度5μg/mL并在4℃与细胞共孵育1小时。孵育最后，清洗细胞并用最终稀释1:400(1.25μg/mL)的检测链霉亲-PE二抗4℃孵育1小时。洗涤未结合的二抗后，用FACS分析细胞，每样品总计收集10000次事件。用FlowJo分析数据，确定并报告几何平均荧光(GeometricMeanFluorescence)。如下计算荧光比率：几何平均AGS67C/几何平均同种型对照＝MFR，一种高于同种型对照的表达倍数的测量。获取几何均值和平均荧光比率(MFR)值(表VI)并显示直方图(表VII)。结果显示HVCD37-6b15.1.1结合表达NHL、CLL和AML的几种人癌症细胞系。实施例6HvCD37-6b15.1.1vcMMAE抑制肿瘤体内生长CD37在肿瘤细胞中显著表达而在正常细胞中限制性表达，这使CD37成为抗体疗法和经由ADC的相似疗法的良好靶标。因此，评价HvCD37-6b15.1.1vcMMAE在人CLL、AML和NHL癌症异种移植小鼠模型中的治疗功效。在小鼠癌症异种移植模型(例如皮下和原位)中研究抗体药物偶联物对肿瘤生长和转移形成的功效。将5x104-106个癌细胞以1:1稀释度与基质胶(Matrigel)(合作研究公司(CollaborativeResearch))混合，在雄性SCID小鼠右肋注射以形成皮下(s.c.)肿瘤。为测试ADC对肿瘤形成的功效，即在注射肿瘤细胞同一天开始注射ADC。作为对照，对小鼠注射纯化的人IgG或PBS；或识别人细胞中不表达的非相关抗原的纯化的MAb。在初步研究中，发现对照IgG或PBS对肿瘤生长的作用无差异。通过卡尺测量确定肿瘤尺寸，且以宽度2x长度/2计算肿瘤体积，其中宽度是最小尺寸且长度是最大尺寸。皮下肿瘤直径大于1.5cm时处死小鼠。异种移植癌症模型的优点是能研究新血管形成和血管生成。肿瘤生长部分依赖于新血管发展。虽然毛细血管系统和正发展的血管网络来源于宿主，但新血管形成的引发和结构由异种移植肿瘤调节(Davidoff等，ClinCancerRes.(2001)7:2870；Solesvik等，EurJCancerClinOncol.(1984)20:1295)。根据本领域已知的方法研究抗体和小分子对新血管形成的作用，所述方法是例如对肿瘤组织和其周围微观环境进行IHC分析。HvCD37-6b15.1.1ADC抑制代表DoHH2、Ramos-RR-XCL、CLL-JVM3、AML-MV-4-11、和人杂交瘤拉吉(Raji)癌症异种移植的癌症细胞系的形成。这些结果表明HvCD37-6b15.1.1ADC在治疗局部和晚期癌症以及优选表I所示那些癌症中的效用。CD37ADC:如标题为“CD37单克隆抗体(MAb)的产生”的实施例所述生产抗CD37的单克隆抗体。如标题为“HvCD37-6b15.1.1MAb的抗体药物偶联”的实施例所述进一步将MAb与毒素偶联以形成HvCD37-6b15.1.1vcMMAE。通过FACS表征HvCD37-6b15.1.1和HvCD37-6b15.1.1vcMMAE，并用本领域已知其他方法确定其结合CD37的能力。细胞系和异种移植物：如本领域已知的那样，将细胞维持在补充有L-谷氨酰胺和10％FBS的DMEM中。DoHH2、Ramos-RR-XCL、CLL-JVM3、AML-MV-4-11、和人杂交瘤拉吉(Raji)癌症异种移植通过在SCID小鼠中连续增殖来维持。HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人滤泡B细胞淋巴瘤DoHH2中的评估。在该实验中，将人滤泡性B细胞淋巴瘤DoHH2细胞(每只小鼠10x106个细胞)注射至单个CB17/SCID小鼠的胁部并允许肿瘤在未治疗的情况下生长至其达到200mm3的大致体积(QWx2)。此时，使用研究主管软件(v.1.7；加利福尼亚州南旧金山的研究日志系统公司)基于治疗开始时的肿瘤体积将动物分成各组以确保各组中具有类似的平均肿瘤尺寸和方差。所有ADC治疗组在第0天和第7天通过静脉推注注射接受2剂量。使用卡尺测量每周两次监测各组中的肿瘤生长直至研究终点。使用针对分级数据的非参数方差分析(ANOVA)在全部各组都可获得数据的最后时间点处进行肿瘤体积的统计学分析。结果显示，与未治疗的对照相比，HvCD37-6b15.1.1vcMMAE显示强力的剂量递增抑制作用(p<0.0001)(图5)。HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人淋巴瘤Ramos-RR-XCL的异种移植模型中的评估。在另一实验中，将人淋巴瘤Ramos-RR-XCL细胞(每只小鼠3x106个细胞)注射至单个CB17/SCID小鼠的胁部并允许肿瘤在未治疗的情况下生长至其达到200mm3的大致体积(QWx2)。此时，使用研究主管软件(v.1.7；加利福尼亚州南旧金山的研究日志系统公司)基于治疗开始时的肿瘤体积将动物分成各组以确保各组中具有类似的平均肿瘤尺寸和方差。所有ADC治疗组在第0天和第6天通过静脉推注注射接受2剂量。此外，在第0、3、6和9天给予4剂量的利妥昔(Ramos-RR-XCL是利妥昔抗性细胞系)。使用卡尺测量每周两次监测各组中的肿瘤生长直至研究终点。使用针对分级数据的非参数方差分析(ANOVA)在全部各组都可获得数据的最后时间点处进行肿瘤体积的统计学分析。结果显示，与未治疗对照或相应的ADC对照H3-12bc1.1vcMMAE相比，HvCD37-6b15.1.1vcMMAE都显示强力的剂量递增肿瘤抑制作用(两种情况下都是p<0.0001)(图6)。HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人慢性淋巴细胞性白血病JVM3中的效力研究。在另一实验中，将慢性淋巴细胞性白血病JVM3细胞(每只小鼠10x106个细胞)注射至单个CB17/SCID小鼠的胁部并允许肿瘤在未治疗的情况下生长至其达到200mm3的大致体积(QWx3)。此时，使用研究主管软件(v.1.7；加利福尼亚州南旧金山的研究日志系统公司)基于治疗开始时的肿瘤体积将动物分成各组以确保各组中具有类似的平均肿瘤尺寸和方差。所有ADC治疗组在第0天和第7天和第14天通过静脉推注注射接受3剂量。使用卡尺测量每周两次监测各组中的肿瘤生长直至研究终点。使用针对分级数据的非参数方差分析(ANOVA)在全部各组都可获得数据的最后时间点处进行肿瘤体积的统计学分析。结果显示，与载剂对照(p<0.0001)或相应的ADC对照Ha3-12bc1.1vcMMAE(p＝0.0001)相比，HvCD37-6b15.1.1vcMMAE都显示强力的剂量依赖性抑制作用(图7)。HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入CB17/SCID小鼠的皮下建立的人急性髓细胞性白血病MV-4-11中的效力研究。在另一实验中，将急性髓细胞性白血病MV-4-11细胞(每只小鼠3x106个细胞)注射至单个CB17/SCID小鼠的胁部并允许肿瘤在未治疗的情况下生长至其达到200-250mm3的大致体积(QWx3)。此时，使用研究主管软件(v.1.7；加利福尼亚州南旧金山的研究日志系统公司)基于治疗开始时的肿瘤体积将动物分成各组以确保各组中具有类似的平均肿瘤尺寸和方差。所有ADC治疗组在第0天和第7天和第14天通过静脉推注注射接受3剂量。使用卡尺测量每周两次监测各组中的肿瘤生长直至研究终点。使用针对分级数据的非参数方差分析(ANOVA)在全部各组都可获得数据的最后时间点处进行肿瘤体积的统计学分析。结果显示，与载剂对照(p<0.0001)或相应的ADC对照Ha3-12bc1.1vcMMAE(p＝0.0001)相比，HvCD37-6b15.1.1vcMMAE都显示强力的剂量依赖性抑制作用(图8)。HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE在移植入SCID小鼠的皮下建立的人利妥昔抗性淋巴瘤细胞系Ramos-RR-XCL中的效力研究。在另一实验中，将人淋巴瘤Ramos-RR-XCL细胞(每只小鼠3x106个细胞)注射至单个ICR/SCID小鼠的胁部并允许肿瘤在未治疗的情况下生长至其达到200mm3的大致体积(QWx2)。此时，使用研究主管软件(v.1.7；加利福尼亚州南旧金山的研究日志系统公司)基于治疗开始时的肿瘤体积将动物分成各组以确保各组中具有类似的平均肿瘤尺寸和方差。所有ADC治疗组在第0天和第4天和第7天和第11天通过静脉推注注射接受4剂量。使用卡尺测量每周两次监测各组中的肿瘤生长直至研究终点。使用针对分级数据的非参数方差分析(ANOVA)在全部各组都可获得数据的最后时间点处进行肿瘤体积的统计学分析。结果显示HvCD37-6b15.1.1vcMMAE相比以1mg/kg给予的其他CD37ADC具有显著更强的抑制效果。(图9)。HvCD37-6b15.1.1.vcMMAE和HvCD37-6b15.1.1在移植入SCID小鼠的皮下建立的人急性单核白血病细胞系MOLM-13的异种移植模型中的效力研究。在另一实验中，将人急性单核白血病MOLM-13细胞(每只小鼠1.0x106个细胞)注射至单个SCID小鼠的胁部并允许肿瘤生长。当平均肿瘤体积达到预定尺寸(如200mm3)时，使用研究主管软件(v.1.7；加利福尼亚州南旧金山的研究日志系统公司)对动物进行大小匹配并将其随机分为治疗组和对照组，其中各组具有类似的平均肿瘤尺寸和方差。HvCD37-6b15.1.1vcMMAE和HvCD37-6b15.1.1通过静脉推注注射以1.0mg/kg剂量接受单一剂量或一周一次总计2剂量。对照ADC和对照MAb、Ha8-7acd6.1-vcMMAE和Ha8-7acd6.1通过静脉推注注射以1.0mg/kg接受一周一次总计2剂量。5％右旋糖用作载剂对照。所有试剂基于在各给药前即刻获得的各动物个体体重给予。使用卡尺测量每周两次监测各组中的肿瘤生长直至研究终点。用克-瓦二氏(Kruskal-Wallis)检验在杀死动物之前的最后一天进行肿瘤体积数据的统计分析。用图吉(Tukey)检验(2侧)进行逐对比较以保证实验的错误率。本发明评估MOLM-13人急性单核白血病异种移植模型中HvCD37-6b15.1.1vcMMAE的效用并将其与其裸抗体组分HvCD37-6b15.1.1进行对比。结果显示裸MAbHvCD37-6b15.1.1相比HvCD37-6b15.1.1vcMMAE抗体药物偶联物不显示任何效用，后者表现出显著更强的抑制效果。(图11)。结论总之，图5-9和11显示，与对照ADC相比，命名为HvCD37-6b15.1.1vcMMAE的CD37ADC显著抑制了表达CD37的肿瘤细胞的生长。因此，HvCD37-6b15.1.1vcMMAE可用于治疗目的，治疗并管理表I所示的癌症。此外，显示出名为HvCD37-6b15.1.1的ADC相比针对CD37的其他ADC和针对CD37的其他抗体具有显著更强的效果。因此，HvCD37-6b15.1.1的显著效果显示出其作为治疗剂治疗并管理表I所示的癌症的重要性。实施例7通过使用CD37ADC治疗和诊断人癌的人临床试验在一些实施方式中，根据本发明使用特异性结合CD37的CD37ADC，并用于治疗某些肿瘤，优选示于表I的那些。关于每个所示情况，成功推行了两种临床方法。I.)辅助治疗：辅助治疗中，联用CD37ADC与化疗或抗肿瘤试剂和/或放疗或其组合治疗患者。通过向标准一线和二线治疗加入CD37ADC以标准方案处理原发性癌靶标(例如表I所列的那些)。方案设计根据以下示例评估来解决有效性问题，所述示例包括但不限于：原发性或转移病灶肿瘤质量的降低、无进展存活的增加、总体存活、患者健康状况的改善、疾病稳定以及降低标准化疗和其它生物试剂常用剂量的能力。这些剂量减少能通过减少化疗或生物试剂的剂量相关毒性而允许额外和/或延长的治疗。在数种辅助临床试验中采用CD37ADC与化疗或抗肿瘤试剂。II.)单一治疗：关于CD37ADC在肿瘤单一治疗中的应用，向患者给予CD37ADC但不给予化疗剂或抗肿瘤试剂。在一个实施方式中，在有广泛转移性疾病的末期癌症患者中开展临床单一治疗。方案设计根据以下示例评估来解决有效性问题，所述示例包括但不限于：原发性或转移病灶肿瘤质量的降低、无进展存活的增加、总体存活、患者健康状况的改善、疾病稳定以及降低标准化疗和其它生物试剂常用剂量的能力。剂量_可调整剂量方案以提供最佳所需响应。例如，可给予单一推注剂量，可随时间给予分成数次的剂量或可如治疗情况的紧急性所示成比例降低或增加剂量。尤其有利的是配制成单位剂型的胃肠道外组合物以便于给药和剂量均一性。本文所用的剂量单位形式指作为单一剂量用于待治疗哺乳动物对象的物理离散单位，每个单位包含预定量的活性化合物，该预定量经计算能够产生与所需药物载体相关的所需治疗效果。在一些实施方式中，本发明单位剂型的规格决定于并直接取决于(a)抗体和/或ADC的独特特性和可达到的具体治疗或预防作用，和(b)就治疗个体敏感性而言复合该活性化合物技术中固有的局限性。根据本发明所述联合给予CD37ADC的治疗有效量的非限制性范围示例是约0.5至约10mg/kg、约1至约5mg/kg、至少1mg/kg、至少2mg/kg、至少3mg/kg或至少4mg/kg。其他示例性非限制性范围是例如约0.5至约5mg/kg，或例如约0.8至约5mg/kg，或例如约1至约7.5mg/kg。本发明的高剂量实施方式涉及超过10mg/kg的剂量。需要注意的是，剂量值可根据待缓解的病症类型和严重程度而变化，并可包括单次剂量或多次剂量。需要进一步理解，对于任何具体的对象，应当随着时间根据个体的需求以及给予或监督组合物给予的个人专业判断来调节具体给药方案，本文所列的剂量范围仅仅是示例性的，不意在对所要求权利的组合物的范围或实施方式构成限制。临床开发计划(ClinicalDevelopmentPlan)(CDP)CDP遵循并发展有关辅助治疗或单一治疗的CD37ADC治疗。各试验最初证实重复剂量的安全性并其后确定其有效性。试验是开放标记，其比较标准化疗与标准疗法加CD37ADC。应理解，可与招募患者相关使用的一个非限制性标准是患者根据活检所测的肿瘤中CD37表达水平。关于任何基于蛋白或抗体输注的治疗，安全性问题主要涉及(i)细胞因子释放综合征，即高血压、发热、颤抖、寒战；(ii)对该物质的免疫性应答的发展(即由患者对抗体治疗产生的人抗体，或HAMA应答)；和(iii)对表达CD37的正常细胞的毒性。采用标准测试和随访以监控各种这类安全性问题。发现CD37ADC对于人给药是安全的。实施例8在癌症患者样品中通过IHC检测CD37蛋白通过免疫组化测试来自非霍奇金淋巴瘤(NHL)和多发性骨髓瘤(“MM”)患者的肿瘤样品中的CD37蛋白表达。简言之，将福尔马林固定、石蜡包埋的组织切成四(4)微米切片并装在载玻片上。将该切片脱蜡，再水合并在EZ-Retriever微波(拜耳基因公司(Biogenex)，加利福尼亚州圣拉蒙)中用斯特拉(citra)抗原修复溶液(拜耳基因公司，加利福尼亚州圣拉蒙)在95℃处理45分钟。然后用3％的过氧化氢溶液处理该切片以灭活内源性过氧化物酶活性。采用无血清蛋白封闭物(大科公司(Dako)，加利福尼亚州卡朋特里亚)来抑制非特异性结合，然后用单克隆小鼠抗CD37抗体或同种型对照孵育。接着，采用SuperSensitiveTM聚合物-辣根过氧化物酶(HRP)检测系统处理该切片，该系统由以下组成：先在SuperEnhancerTM试剂中孵育，之后用聚合物-HRP二抗偶联物(生物基因公司，加利福尼亚州圣拉蒙)孵育。然后使用DAB试剂盒(生物基因公司，加利福尼亚州圣拉蒙)显影该切片，细胞核用苏木精染色并通过明视场显微镜分析。使用CD37免疫活性抗体在患者样品中检测由棕色染色指示的特异性染色(参见图10(A)和10(C))。相反，对照抗体不对患者样品染色(参见图10(B)和10(D))。结果显示CD37在NHL和MM的肿瘤细胞中的CD37表达。这些结果显示，CD37在人NHL和MM中表达，并且针对该抗原的抗体(例如HvCD37-6b15.1.1)和称为HvCD37-6b15.1.1vcMMAE的抗体药物偶联物可用于诊断和治疗目的。(图10)。实施例9HvCD37-6b15.1.1MAb结合患者来源的样品在来自急性淋巴细胞白血病的患者的外周血的PBMC样品中评估HvCD37-6b15.1.1Mab在髓细胞(AML)、白血病干细胞(LSC)、T细胞和B淋巴细胞群体中的结合。A.FACS结合材料和方法本实验中，HvCD37-6b15.1.1和匹配对照抗体的同种型用NHSLC生物素(赛默科学有限公司(ThermoScientific)，伊利诺伊州洛克福德))进行生物素化。得到同意和批准之后，从急性髓细胞性白血病患者中获取外周血细胞(PBMC)的Ficoll-Paque(GE医疗集团(GEHealthcare)，宾夕法尼亚州匹兹堡)分离。刚解冻的PBMC用混合物CD45、CD33、CD38(BD生物科学公司(BDBioscience)，美国加利福尼亚州圣何塞)、CD34、CD3(加利福尼亚州布利市的贝克曼库尔特公司(BeckmanCoulter)和HvCD37-6b15.1.1-生物素(抗CD37)或同种型-生物素mAb进行孵育。用链霉素–PE(SAv–PE)(BD生物科学公司，美国加利福尼亚州圣何塞)检测试剂制备荧光减一(Fluorescenseminusone(FMO))对照混合物，并用于门选细胞群体。生物素化的HvCD37-6b15.1.1和同种型mAb的二级测试为SAv–PE或SAv–PC5。LSRII流式细胞仪(BD生物科学公司，美国加利福尼亚州圣何塞)用于获取数据。在CD45+(常见白细胞抗原)群体上门选淋巴细胞，其中定义了4各不同群体：CD33+/3-/20-(髓系胚细胞)、CD33+/3-/34+/38-(LSC)、CD33-/3+(T淋巴细胞)和CD33-/20+(B淋巴细胞)。用FlowJo9.5.4软件(数星公司(TriStar)，俄勒冈州艾士兰)完成分析。各AML样品的MFIR通过HvCD37-6b15.1.1MFI除以(over)匹配的同种型MFI来计算。B.结果几何均值和平均荧光强度比例(MFIR)通过HvCD37-6b15.1.1MFI除以匹配的同种型MFI来获得。表VIII所示针对AML患者样品的结果显示HvCD37-6b15.1.1MAb结合所有测试样品的髓系、LSC、T和B细胞群体。此外，如表IX所示，所有测试样品的MFIR分布图显示出LSC和B细胞群体中的高度可变性，而髓系胚细胞和T细胞的MFIR可变性较低。髓系胚细胞的平均MFIR为约85，其在所有样品中显示出结合，而LCS的平均MFIR为1126，其在三个样品中显示出高水平的HvCD37-6b15.1.1结合。B细胞上的HvCD37-6b15.1.1染色在所有群体中均最高，平均MFIR为1548，而平均T细胞结合(MFIR246)比B细胞的低。(参见表IX)。此外，如表X所示，患者淋巴细胞的细胞群体分布显示出AML中的特征为大多数是CD33+(髓系)阳性。还观察到小群体的LSC(VD34+/38-)、T(CD3+)和B细胞(CD20+)。所有4个群体均为CD37阳性，如HvCD37-6b15.1.1结合所证实。表VIII、IX和X中所示的全部结果显示了HvCD37-6b15.1.1MAb特异结合患者来源的表达AML、LSC和T和B细胞淋巴细胞的组织。本申请中通篇引用了各种网站数据内容、各种出版物、专利申请和专利。(网站可通过其统一资源定位符或URL、万维网上的地址来引用。)这些参考文献中每篇的公开内容通过引用全文纳入本文。本发明不局限于本文所述实施方式的范围，这些实施方式仅旨在说明本发明的单独方面，任何功能等同形式也在本发明范围内。本文所述以外的对发明模型和方法的各种改良通过以上描述和教导对本领域技术人员显而易见，所述改良同样旨在落入本发明的范围内。可以实施此类改良或其它实施方式而不偏离本发明的真实范围和精神。表格表I：恶性时表达CD37的组织/细胞。急性髓细胞性白血病(“AML”)；慢性淋巴细胞性白血病(“CLL”)非霍奇金淋巴瘤(“NHL”)；多发性骨髓瘤(“MM").表II：氨基酸缩写单字母三字母全称FPhe苯丙氨酸LLeu亮氨酸SSer丝氨酸YTyr酪氨酸CCys半胱氨酸WTrp色氨酸PPro脯氨酸HHis组氨酸QGln谷氨酰胺RArg精氨酸IIle异亮氨酸MMet甲硫氨酸TThr苏氨酸NAsn天冬酰胺KLys赖氨酸VVal缬氨酸AAla丙氨酸DAsp天冬氨酸EGlu谷氨酸GGly甘氨酸表III：氨基酸取代矩阵改自GCG软件9.0BLOSUM62氨基酸取代矩阵(模块取代矩阵)。值越高，相关天然蛋白中发现取代的可能性越大。表IV.合成vcMMAE的一般方法其中:AA1＝氨基酸1AA2＝氨基酸2AA5＝氨基酸5DIL＝海兔异亮氨酸DAP＝海兔脯氨酸接头＝Val-Cit(vc)表V.分别由Kabat、Chothia和接触方案鉴定的CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3和CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3的位置。对于CDR-H1，给出使用Kabat和Chothia编号方案的残基编号。表VI.FACS试验中的几何均值和平均荧光比例(MFR)值注：*所有MFR比例计算时使用同种型对照作为参考，除了Granta-519、KG-1和Hel92.1使用二级测试作为参考，由于它们的同种型对照背景结合较高。表VII.每细胞系的FACS结合结果的直方图。CD37在B细胞系中的表达:使用HvCD37-6b15·1·1IG2的FACSCD37在AML细胞系中的表达：使用HvCD37-6b15.1.1IgG2的FACS表VIIIAML样品的HvCD37-6b15.1.1MFIR值。·未就含总样品少于0.1％的群体的HvCD37-6b15.1.1MFIR值。表IX髓系、LCS、T-细胞和B-细胞上的HvCD37-6b15.1.1MFIR分布。表XAML患者样品中HvCD37-6b15.1.1结合的细胞群体。患者样品中的群体％当前第1页1 2 3