本发明涉及一种抗丙肝药物索非布韦的制备方法，属于医药技术领域。本发明还公开用于制备含磷活性物的有用中间体的合成工艺。
背景技术：
丙型病毒性肝炎(简称丙型肝炎、丙肝)是一种由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎。据世界卫生组织统计，全球丙肝的感染率约为3％，约1.8亿人感染HCV，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。丙型肝炎呈全球性流行，可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，100名患者中有1％～5％可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)而死亡。
目前，HCV病毒共有6种基因型。标准治疗方案为聚乙二醇干扰素(Peg-IFN)联合利巴韦林(RBV)，总治愈率不足50％，需坚持足够剂量持续治疗一年以上。作为1周注射1次的Peg-IFN存在诸多不良反应、药物相互作用和患者依从性差等缺点，对其临床使用有所限制。因此，提高治愈率、缩短治疗时间和采用全口服而不使用Peg-IFN治疗丙肝的直接抗病毒药物(DAAs)不断出现。
2009年以来，直接抗病毒药物(DAAs)相继出现了以病毒RNA复制的NS3/4A蛋白酶抑制剂，如波普瑞韦、特拉匹韦、司普瑞韦。索非布韦作为一种新型HCV聚合酶抑制剂，它作用于病毒RNA复制的核苷酸类似物NS5B聚合酶位点，中止HCV复制，经临床试验证实，其对全部基因型丙肝病毒均可有效控制。美国食品药品监督管理局(FDA)于2013年12月6日，批准由美国吉利德(Gilead)公司研发并上市的新分子实体药物索非布韦(sofosbuvir)片剂，商品名Sovaldi，用于慢性丙型肝炎(CHC)的治疗。
索非布韦(通用名：Sofosbuvir，简称SOF，又称GS7977或PSI7977)为白色至灰白色结晶固体，分子式为C22H29FN3O9P，相对分子质量为529.45。化学名为(S)-2-((S)-(((2R，3R，4R，5R)-5-(2，4-二氧-3，4-二氢嘧啶-1-(2H))-3-羟基-4-氟-4-甲基-2-四氢呋喃)-甲氧基)-磷酰化苯氧基)氨基丙酸异丙酯，结构如下。
索非布韦的合成主要是关键中间体核苷类似物和磷酸酯试剂的合成，以及二者的连接。 有关核苷类似物中间体的合成，文献报道了多种方法，但大都是已保护的邻二羟基丙醛为原料，经一系列的反应得到核苷类似物，然后和磷酸酯试剂进行反应得到索非布韦。
技术实现要素：
本发明主要解决的技术问题：开发一种合成索非布韦的方法，该方法使用3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-2-C-甲基-D-核糖-γ-内酯(下列合成路线中化合物2)作为起始物料，经过一系列反应得到了产物索非布韦。具体的技术方案如下：
1)反应瓶中加入3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-2-C-甲基-D-核糖-γ-内酯2，溶剂，降温至-20℃～-10℃，搅拌下滴加还原剂，在-10℃～-15℃保温搅拌2小时，然后再加入少量还原剂，-10℃～-15℃下保温搅拌1小时。之后向反应体系加入冰水搅拌30分钟，加入乙酸乙酯搅拌15分钟，萃取分层，有机层依次用水、盐水洗涤后再用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到呋喃核糖中间体3的溶液。
2)将N-苯甲酰胞嘧啶、硫酸铵、六甲基二硅氮烷和氯苯加入到反应瓶中，搅拌回流1小时(约135℃)至体系澄清后，减压浓缩。在浓缩物中加入已制备的3的溶液和氯化锡。升温至70℃保温反应6小时左右，反应结束降温至20～25℃加入二氯甲烷稀释。然后将反应液加入到含NaHCO3和CELITE的二氯甲烷悬浮液中，降温至10～15℃后缓慢滴加水，搅拌30分钟，过滤并用二氯甲烷洗涤滤饼，合并滤液并浓缩，然后将浆液将至-5℃析晶2小时，过滤并用异丙醇洗涤滤饼，65～70℃真空干燥，得到化合物4。
3)反应瓶中加入4和70％乙酸水溶液，加热至回流(约110℃)搅拌10小时，然后冷却至20～25℃加入水搅拌2小时，过滤，滤饼用水洗涤，干燥12小时得到5。
4)0℃下加入化合物5，合适碱的甲醇溶液，搅拌1小时后升温至45～50℃搅拌3小时。反应完后通过CELITE过滤并减压浓缩滤液，然后加入乙酸乙酯室温下搅拌3小时，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤。干燥得到化合物6。
5)将化合物6加入到干燥THF中搅拌，加入格式试剂，搅拌30分钟，加入磷酸酯中间体7的THF溶液。25～30℃下搅拌20小时，加入饱和NH4C1水溶液淬灭，然后加入乙酸乙酯搅拌30分钟后，分层萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，加入二氯甲烷搅拌析晶，得到固体1。
其中步骤1)所述溶剂选自以下的一种或多种：吡啶、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷和四氢呋喃。
合适的还原剂为RED-A1溶液、LiAl(t-BuO)3H溶液。
步骤4)合适的碱为NH3，碱金属如甲醇钠，甲醇钾。以甲醇作为溶剂时优选使用甲醇钠。
步骤5)格式试剂为叔丁基卤化镁如叔丁基溴化镁、叔丁基氯化镁。
通过对索非布韦合成路线的优化，缩短了合成路线，简化了工艺操作；反应条件温和，生产周期短，环境污染小，产品收率得到了提高，适合工业化生产。
本发明还提供了磷酸酯中间体的一种合成方法：
-78℃下，向全氟苯氧基二氯磷酸酯的二氯甲烷溶液中加入预先制备的苯酚和三乙胺的二氯甲烷，在该温度下搅拌30分钟后，将此混合物加入到含有L-丙氨酸异丙酯盐酸盐的二氯甲烷溶液的反应瓶中，加入过程保持反应瓶中温度＜0℃，之后再加入三乙胺，＜0℃搅拌1小时，浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯搅拌30分钟后，滴加正己烷，0～5℃搅拌析晶，得到白色固体即为化合物7。
具体实施方式
通过下述实施例有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
实施例一
反应瓶中加入100g 3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-2-C-甲基-D-核糖-γ-内酯2，1000ml四氢呋喃，降温至-20℃～-10℃，搅拌下滴加155g LiAl(t-BuO)3H的四氢呋喃(500ml)溶液，在-10℃～-15℃保温搅拌2小时，然后再加入16g LiAI(t-BuO)3H，-10℃～-15℃下保温搅拌1小时。之后向反应体系加入500ml冰水搅拌30分钟，加入2000ml乙酸乙酯搅拌15分钟，萃取分层，有机层依次用水、盐水洗涤后再用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到呋喃核糖中间体3的溶液。
将88.5g N-苯甲酰胞嘧啶、0.7g硫酸铵、66g六甲基二硅氮烷和524g氯苯加入到反应瓶中，135℃搅拌回流1小时至体系澄清后，减压浓缩。在浓缩物中加入已制备的3的溶液和282g氯化锡。升温至70℃保温反应6.5小时，反应结束降温至20～25℃加入二氯甲烷1000ml稀释。然后将反应液加入到含470g NaHCO3和94g CELITE的二氯甲烷悬浮液中，降温至10～15℃后缓慢滴加85g水，搅拌30分钟，过滤并用二氯甲烷洗涤滤饼，合并滤液并浓缩，然后将浆液将至-5℃析晶2小时，过滤并用异丙醇洗涤滤饼，65～70℃真空干燥，得到90.2g 1-(2-脱氧-2-氟-2-甲基-3，5-O-二苯甲酰-β-D-呋喃核糖基)-N-4-苯甲酰胞嘧啶4，收率58.7％，纯度99.5％。
反应瓶中加入80g化合物4和70％乙酸水溶液1200ml，加热至110℃回流搅拌10小时，然后冷却至20～25℃加入水搅拌2小时，过滤，滤饼用水洗涤，干燥12小时得到60g二苯甲酰基尿苷中间体5，收率91.7％，纯度90.5％。
0℃下加入50g化合物5，16g甲醇钠和500ml甲醇，搅拌1小时后升温至45～50℃搅拌3小时。反应完后通过CELITE过滤并减压浓缩滤液，然后加入300ml乙酸乙酯室温下搅拌3小时，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤。干燥得到25.6g化合物6，收率89.9％，纯度99.0％。
将24g化合物6加入到干燥800ml THF中搅拌，加入4g叔丁基溴化镁，搅拌30分钟，加入45.9g磷酸酯中间体7的THF溶液500ml。25～30℃下搅拌20小时，加入150ml饱和NH4C1水溶液淬灭，然后加入400ml乙酸乙酯搅拌30分钟后，分层萃取，合并有机相并用无水硫酸钠干燥并浓缩，加入100ml二氯甲烷搅拌析晶，得到23.5g固体1，收率48.1％，纯度99.8％。
实施例二
反应瓶中加入100g 3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-2-C-甲基-D-核糖-γ-内酯2，800ml二氯甲烷，降温至-20℃～-10℃，搅拌下滴加125g RED-Al的甲苯(250m1)溶液，在-10℃～-15℃保温搅拌2小时，然后再加入12.5g LiAl(t-BuO)3H，-10℃～-15℃下保温搅拌1小时。之后向反应体系加入500ml冰水搅拌30分钟，加入2000ml乙酸乙酯搅拌15分钟，萃取分层，有机层依次用水、盐水洗涤后再用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到呋喃核糖中间体3的溶液。
将88.5g N-苯甲酰胞嘧啶、0.7g硫酸铵、66g六甲基二硅氮烷和524g氯苯加入到反应瓶中，搅拌137℃回流1小时至体系澄清后，减压浓缩。在浓缩物中加入已制备的3的溶液和氯化锡282g。升温至70℃保温反应7小时，反应结束降温至20～25℃加入二氯甲烷1000ml稀释。然后将反应液加入到含470g NaHCO3和94g CELITE的二氯甲烷悬浮液中，降温至10～15℃后缓慢滴加85g水，搅拌30分钟，过滤并用二氯甲烷洗涤滤饼，合并滤液并浓缩，然后将浆液将至-5℃析晶2小时，过滤并用异丙醇洗涤滤饼，65～70℃真空干燥，得到89.5g 1-(2-脱氧-2-氟-2-甲基-3，5-O-二苯甲酰-β-D-呋喃核糖基)-N-4-苯甲酰胞嘧啶4，收率58.2％，纯度99.4％。
反应瓶中加入80g化合物4和70％乙酸水溶液1200ml，加热至109℃回流搅拌10小时，然后冷却至20～25℃加入水搅拌2小时，过滤，滤饼用水洗涤，干燥12小时得到58.6g二苯甲酰基尿苷中间体5，收率89.6％，纯度91.3％。
0℃下加入50g化合物5，12.5g甲醇钾和500ml甲醇，搅拌1小时后升温至45～50℃搅拌3小时。反应完后通过CELITE过滤并减压浓缩滤液，然后加入300ml乙酸乙酯室温下搅拌3小时，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤。干燥得到24.8g化合物6，收率87.1％，纯度99.6％。
将24g化合物6加入到干燥800ml THF中搅拌，加入5g叔丁基氯化镁，搅拌30分钟，加入45.9g磷酸酯中间体7的THF溶液500ml。25～30℃下搅拌20小时，加入150ml饱和NH4C1水溶液淬灭，然后加入400ml乙酸乙酯搅拌30分钟后，分层萃取，合并有机相并用无水硫酸钠干燥并浓缩，加入100ml二氯甲烷搅拌析晶，得到21.Sg固体1，收率44.6％，纯度99.5％。
实施例三
-78℃下，向50g全氟苯氧基二氯磷酸酯的二氯甲烷溶液(200ml)中加入制备好的10g苯酚和15ml三乙胺的200ml二氯甲烷溶液，在该温度下搅拌30分钟后，将此混合物加入到含有30.6g L-丙氨酸异丙酯盐酸盐的200mi二氯甲烷溶液的反应瓶中，加入过程保持反应瓶中温度＜0℃，之后再加入30ml三乙胺，＜0℃搅拌1小时，浓缩，向残留物中加入200mi乙酸乙酯搅拌30分钟后，滴加100ml正己烷，0～5℃搅拌析晶，得到56.8g白色固体即为化合物7，收率65.1％。