本发明属于医药领域，具体涉及一种依维莫司的制备方法。
背景技术：
依维莫司(everolimus；商品名：Afinitor)化学名[40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素]，是新一代大环内酯类雷帕霉素衍生物药物，结构式如下：
依维莫司是由瑞士诺华公司研发的具一定水溶性的雷帕霉素衍生物，可以口服给药，临床上主要用来预防肾移植和心脏移植手术后的排斥反应。其作用机制主要包括免疫抑制作用、抗肿瘤作用、抗病毒作用、血管保护作用，常与环孢素等其他免疫抑制剂联合使用以降低毒性。此外还用于治疗晚期肾癌。也正在进行对神经内分泌肿瘤、淋巴瘤、其他癌症以及结节性硬化症的研究，可作为单一制剂或者与现有的癌症治疗方法合用。
WO9409010最早报道了以雷帕霉素为原料合成制备依维莫司的方法；文献J.labelled Compd Radiopharm.2000，43，113-120也报道了与该专利文献类似的依维莫司合成制备方法。上述以雷帕霉素为原料合成制备依维莫司的方法包括两步反应：首先在二异丙基乙胺碱性条件下，以雷帕霉素和2-(叔丁基二苯基硅基)氧乙基三氟甲磺酸酯为反应物，在一定的有机溶剂中反应制备中间体1；中间体1脱去保护基即得到产品依维莫司，上述制备工艺产率低，成本高，制备中间体的产率仅为6％；第二步反应的产物收率也仅为21％。
CN102127092A公开了一种依维莫司的制备方法，该制备方法基本沿用了上述以雷帕霉素为原料合成制备依维莫司的工艺路线，只是对未反应的雷帕霉素原料实施了回收。
由于雷帕霉素反应位点较多，性质不稳定，上述以雷帕霉素为原料合成制备依维莫司的制备方法中，其反应需要控制在较温和的条件下进行，通常温度控制在50-60℃，温度过低，反应不能充分进行；温度过高，雷帕霉素及其中间体容易降解或生成其他未知杂质，反应温度过低或过高均会导致产品的总收率较低。现有文献报道方案反应温度有效控制在50-60℃时，仍会有超过50％的雷帕霉素不能有效得以参加反应。
技术实现要素：
针对现有技术中依维莫司合成方法存在的不足，本发明提供一种依维莫司制备方法。通过雷帕霉素在碱性条件下，与三甲基氯硅烷反应双羟基保护后，在酸性条件下与环氧乙烷进行缩合反应，再酸性条件下水解得依维莫司，该方法操作方便、雷帕霉素易于反应，反应收率高，为了实现上述发明目的。
本发明提供了以下技术方案，该方案包括A、B、C、D四个步骤：
A步骤：雷帕霉素在碱性条件下，与三甲基氯硅烷反应将31，40位羟基保护后，酸性水解，得到31位羟基保护的中间体1；
B步骤：在酸性条件下，中间体1与环氧乙烷进行缩合反应，得到中间体2，
C步骤：中间体2溶解在溶剂中酸性水解，得到依维莫司粗品，
D步骤：该粗品用制备液相分离纯化，得到依维莫司。
具体的反应路线如下：
A步骤：
B步骤
C步骤：
D步骤：
本发明A步骤：雷帕霉素在碱性条件下，与三甲基氯硅烷反应将31、40位羟基保护后，酸性水解，得到31位羟基保护的中间体1：本步骤的碱性条件是由有机碱提供的，有机碱包括：三乙胺、吡啶、二异丙基乙基氨、2、6-二甲基吡啶、咪唑等；反应溶剂只要能溶解反应物，且对反应没有影响的溶剂都可以，如乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿四氢呋喃等。反应温度随试剂或者溶剂的变化而变化，通常是-40℃～30℃，反应时间也是随着试剂或者溶剂的变化而变化，通常是1-8小时；TLC检测，无雷帕霉素斑点，则双保护反应完成；然后酸性水解，得到31位羟基保护的中间体1；酸主要是各种无机酸，硫酸，盐酸，氢溴酸等，反应温度随试剂或者溶剂的变化而变化，通常是-20℃～30℃，反应时间也是随着试剂或者溶剂的变化而变化，通常是3-28小时；TLC检测，无双保护雷帕霉素斑点，则水解反应完成；反应完成后，用常规的后处理方式处理就可以得到中间体1。
本发明B步骤：中间体1在溶剂中，在酸性条件下，与环氧乙烷进行缩合反应，得到中间体2；溶剂是无水乙醚、四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯等一种或者几 种；作为催化剂的酸主要是微量或者少量的各种无机酸，如硫酸，盐酸，氢溴酸等；反应温度随试剂或者溶剂的变化而变化，通常是-20℃～40℃，反应时间也是随着试剂或者溶剂的变化而变化，通常是2-12小时；TLC检测，无中间体1斑点，则缩合反应完成；反应完成后，用常规的后处理方式处理就可以得到中间体2。
本发明C步骤：中间体2溶解在溶剂中酸性水解，得到依维莫司粗品：反应溶剂只要能溶解反应物，且对反应没有影响的溶剂都可以，如乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、甲醇等；酸主要是各种无机酸，硫酸，盐酸，氢溴酸等，反应温度随试剂或者溶剂的变化而变化，通常是-10℃～20℃，反应时间也是随着试剂或者溶剂的变化而变化，通常是3-10小时；TLC检测，无中间体2斑点，则水解反应完成；反应完成后，用常规的后处理方式处理，然后过硅胶柱处理就可以得到依维莫司粗品。
本发明D步骤：粗品用制备液相分离纯化，得到依维莫司；粗品用乙腈和纯化水的混合液溶解，经0.45微米滤膜滤过后，以500ml/min流速进样，收集含依维莫司主峰的部分进行处理，得到依维莫司。
具体实施方式
现通过以下实施例来进一步描述本发明的有益效果，应理解为这些实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明范围之内。
实施例1：依维莫司中间体1的制备：
将9g蕾帕霉素，4.5g2、6-二甲基吡啶，100ml四氢呋喃加入到250ml的三口瓶中，冰盐水浴降温，搅拌溶解，0.5h后开始滴加7ml的(CH3)3SiCl，保温反应，反应3小时后，TLC检测反应进程，无雷帕霉素斑点，则双保护反应完成，然后滴加5mlHCl,反应5小时后，TLC检测，无双保护雷帕霉素斑点，则水解反应完成。将反应液用200ml乙酸乙酯提取，乙酸乙酯层用水50ml，NaHCO3饱和液50ml洗涤，再用50ml食盐水洗，水层用乙酸乙酯提取2次，合并有机层，无水Na2SO4干燥；减压蒸除乙酸乙酯，得单保护9.6g。
实施例2：依维莫司中间体2的制备
0～10℃下，于1L三口圆底烧瓶中加入500ml甲苯，然后加入4.4g环氧乙烷，降温后，将9.6g雷帕霉素中间体1加入到反应液中，同时加入少量盐酸，继续反应6小时，TLC监 测至反应完全，用水250ml，NaHCO3饱和液250ml洗涤，再用250ml食盐水洗，水层用甲苯提取2次，合并有机层，无水Na2SO4干燥；减压蒸除甲苯，得依维莫司中间体2纯品6.8g。
实施例3：依维莫司粗品的制备
将6.8g偶联产物用500ml甲醇溶解在一个1L单口瓶中，冰水浴降温，半小时后滴加10ml HCl，滴加完成后，反应4小时，TLC跟踪检测，，反应完毕后，减压蒸干，然后用500ml乙酸乙酯溶解残余物，用饱和盐水水洗，乙酸乙酯提取水层3次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得黄色油状物，过柱分离得粗品5.6g。
实施例4：依维莫司的制备
将依维莫司粗品5.6g，以200ml乙腈和120ml纯化水溶解，配制成样品溶液，经0.45微米滤膜滤过后，待进样；启动进样泵，以500ml/min流速进样1.4min，然后开启梯度洗脱程序开始洗脱，至目标峰出现时，调整切换阀，收集目标峰，取样由HPLC检测，目标峰其他部分包括异构体峰均收集至不合格品容器内，然后切换至废液收集桶；重复上述过程，直至本批样品完全做完；收集液用旋转蒸发仪低温减压蒸馏，得到依维莫司粉末状固体3.8g。
依维莫司样品结构确证：
依维莫司样品的元素百分含量
依维莫司样品的IR谱各吸收峰归属
依维莫司样品在DMSO-d6中的1H-NMR数据