一种冰胶支架及其制备方法和用途与流程

文档序号:17955440发布日期:2019-06-19 00:25阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种冰胶支架的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(a)将冰胶原料、氯化钙各自配成溶液后,再混合制得到冰胶前体溶液;

(b)将所得冰胶前体溶液注入模具中;

(c)将装载有所述冰胶前体溶液的模具进行梯度冷却,得到预凝胶三维结构体;所述梯度冷却为:将装载有所述冰胶前体溶液的模具冷却至2-6℃保存0.5-3h,继续冷却至-10- -30℃保存6-15h;

(d)以真空冷冻干燥的方式干燥步骤(c)中得到的所述预凝胶三维结构体,得到冰胶支架;所述真空冷冻干燥的温度为:-20- -40℃,所述真空冷冻干燥的压力为1-50Pa;

所述冰胶原料溶液的质量浓度为1-20%;

所述氯化钙溶液的质量浓度为0.1-4%;

所述冰胶原料溶液与氯化钙溶液混合体积比为(0.2-20):1。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述真空冷冻干燥的温度为:-25- -35℃。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述真空冷冻干燥的压力为2-4Pa。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述真空冷冻干燥的温度为:-30℃,所述真空冷冻干燥的压力为3Pa,所述真空冷冻干燥的时间为20-40h。

5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述真空冷冻干燥的时间为24h。

6.根据权利要求1-5任一所述的制备方法,其特征在于,在步骤(a)中,所述冰胶原料选自以下一种或多种物质:明胶及其衍生物、海藻酸盐及其衍生物、琼脂、基质胶、胶原、蛋白多糖、糖蛋白、透明质酸、壳聚糖、层粘连蛋白、纤维连接蛋白、纤维蛋白。

7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述冰胶原料溶液的质量浓度为1-5%。

8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述冰胶原料溶液与氯化钙溶液混合体积比为(0.5-10):1。

9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述冰胶原料溶液与氯化钙溶液混合体积比为(1-5):1。

10.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤(b)中,所述模具选自圆形培养皿、6孔板、12孔板、24孔板、48孔板、96孔板或384孔的细胞培养板。

11.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(a)将质量浓度2.5%海藻酸钠溶液与10mM氯化钙溶液以2:1的体积比例混合,得到冰胶前体溶液;

(b)使用一次性无菌注射器将1ml所述冰胶前体溶液注入96孔板;

(c)将装载有所述冰胶前体溶液的96孔板冷却至4℃并保存2-2.5小时,再于-20℃保存8-12小时,得到预凝胶三维结构体;

(d)将步骤(c)中得到的所述预凝胶三维结构体在-30℃、3Pa的条件下进行真空冷冻干燥24h,得到冰胶支架。

12.权利要求1-11任一所述制备方法得到的冰胶支架。

13.权利要求12所述冰胶支架在如下方面中的用途:(1)制备用于治疗疾病或病症的材料;(2)制备组织修复或再生的材料;(3)制备矫形或整形的材料;(4)药物开发、药物筛选、药物检测或药物测试;(5)构建药理模型、病理模型、组织/器官模型或肿瘤模型。

14.一种细胞三维培养方法,其特征在于,将细胞接种于培养基中得到细胞混悬液,再将细胞混悬液施加于权利要求12所述冰胶支架内进行三维培养;

其中,所述三维培养的方式为静态培养、悬浮培养、振荡培养或灌流培养;所述灌流培养是将装有细胞混悬液的冰胶支架置于生物反应器中进行培养。

15.根据权利要求14所述的细胞三维培养方法,其特征在于,所述灌流培养是将装有细胞混悬液的冰胶支架置于多流道生物反应器中进行培养。

16.权利要求14或15所述方法得到的细胞三维培养物。

17.权利要求16所述细胞三维培养物在制备用于治疗疾病或病症、组织修复或再生以及矫形或整形的植入物中的用途。

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