本发明属于海洋生物制品与药品领域，具体涉及一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽及其制备工艺。
背景技术：
骨质疏松症是中、老年人常见病、多发病，严重影响该类人员的健康和生活质量。骨质疏松症及其引起的骨折在当前常见疾病中位居第7位，严重威胁着中、老年人的健康，使之成为全球的公共卫生问题。目前，人口老龄化日益严重，提高对骨质疏松症的预防意识具有非常重要的意义。临床上骨质疏松患者主要表现为腰背疼痛、驼背、易骨折，并伴有肾虚表现，严重影响了生活和生命质量。据联合国统计老龄化已成为21世纪不可逆转的世界性趋势，中国社会老龄化速度快于全国总人口增长速度，因此增加骨密度、有效治疗骨质疏松已成为人们广泛关注的领域。
我国骨质疏松病例较30年前增加了3倍，60岁以上老人发病率达59%，每年骨质疏松症骨折发病率达9.6%，并逐年增高。女性绝经后骨质疏松症属于原发性骨质疏松症，主要与雌激素水平降低有关。绝经后骨质疏松是中、老年妇女的常见病、多发病。女性在50岁后可见明显的骨质丢失加速，40岁以上骨质疏松症总患病率女性为15.70%，50-79岁人群骨质疏松症发病率女性为67.30%。绝经后骨质疏松临床症状表现主要腰背疼痛，甚至骨折，并伴有多种并发症，其致残率和致死率高。目前普遍认为，对骨质疏松症的防治重点应该放在50岁左右的绝经期及绝经后妇女。
生物活性肽是指那些有特殊生理活性的肽类的总称。由于海洋存在许多极端环境，如高压（深海）、低温（极地、深海）、高温（海底火山口）和高盐等。为了适应这些极端的海洋生境，海洋生物蛋白质无论氨基酸的组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同。随着人们对海洋资源认识水平的提高，以及现代生物技术在海洋药物研究中的应用，如RP-HPLC, 2D-NMR,TOF- MS,手性色谱（包括GC, HPLC)等技术的发展，使得对海洋活性肽的研究逐渐成为热点。
研究证明氨基酸和小肽具有促进钙吸收的作用，而且氨基酸和肽的金属复合体如Fe、Zn和Mn的生物学利用率比无机离子高，且无毒副作用。海洋生物蛋白质经水解生成的肽与微量元素结合形成的螯合物可通过小肠直接吸收，具有增强骨密度的作用，可替代市场上的补钙制剂产品治疗骨质疏松症。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽，该产品经实验多次验证，具有显著的骨密度增加作用，且无任何毒副作用。该发明技术工艺简单，适用范围广，极具推广前景。
一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽，所述的海洋寡肽通过如下步骤进行制备：
①蛋白酶解：按每克鱼胶原蛋白添加胰蛋白酶0.01-0.05%进行酶解，酶解温度20-60℃，酶解时间3-10h，pH值7.0-9.0，得到酶解物；
②亲和层析：采用亲和层析柱处理步骤①中得到的酶解物，采用pH2.0、4.0和6.5的缓冲液梯度洗脱，收集寡肽组分；
③喷雾干燥：对步骤②中寡肽组分进行喷雾干燥，且在干燥前添加质量分数为5%的甘露醇保护剂，得到海洋寡肽；
④包装：将干燥好的海洋寡肽经包装后即得防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽。
优选的，所述的海洋寡肽为pH6.5缓冲液洗脱下的寡肽组分，分子量小于2000Da。
此外，本发明还提出一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽的制备工艺，所述工艺步骤包括：
①蛋白酶解：按每克鱼胶原蛋白添加胰蛋白酶0.01-0.05%进行酶解，酶解温度20-60℃，酶解时间3-10h，pH值7.0-9.0，得到酶解物；
②亲和层析：采用亲和层析柱处理步骤①中得到的酶解物，采用pH2.0、4.0和6.5的缓冲液梯度洗脱，收集寡肽组分；
③喷雾干燥：对步骤②中寡肽组分进行喷雾干燥，且在干燥前添加质量分数为5%的甘露醇保护剂，得到海洋寡肽；
④包装：将干燥好的海洋寡肽经包装后即得防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽。
本发明相对于现有技术所具有的优点是提供了一种防治骨质疏松症的海洋寡肽，为妇女绝经后骨质疏松症的预防和治疗提供了新的制剂和药物；该产品无毒副作用，性质温和，对胃肠道无刺激作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽的制备工艺，具体制备步骤如下：
①蛋白酶解：每克鱼胶原蛋白添加0.02%的胰蛋白酶酶解，酶解温度45℃，酶解时间6h，pH值7.5，得到酶解物；
②亲和层析：采用亲和层析柱处理步骤①中得到的酶解物，采用pH2.0、4.0和6.5的缓冲液梯度洗脱，收集pH6.5洗脱的寡肽组分；
③喷雾干燥：对步骤②中寡肽组分进行喷雾干燥，且在干燥前添加质量比为5%的甘露醇保护剂，得到海洋寡肽；本发明使用的甘露醇可稳定海洋寡肽在喷雾干燥的变性，使得制得含海洋寡肽稳定性更强。
④包装：干燥好的海洋寡肽经包装后即为本发明产品。
本发明所述的鱼胶原蛋白为深海鳕鱼胶原蛋白。
实施例2：一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽的制备工艺，具体制备步骤如下：
①蛋白酶解：每克鱼胶原蛋白添加0.04%的胰蛋白酶酶解，酶解温度55℃，酶解时间3h，pH值8，得到酶解物；
②亲和层析：采用亲和层析柱处理步骤①中得到的酶解物，采用pH2.0、4.0和6.5的缓冲液梯度洗脱，收集pH6.5洗脱的寡肽组分；
③喷雾干燥：对步骤②中寡肽组分进行喷雾干燥，且在干燥前添加质量比为5%的甘露醇保护剂，得到海洋寡肽；
④包装：干燥好的海洋寡肽经包装后即为本发明产品。
通过本实施例步骤①对鱼胶原蛋白进行了充分的酶解。
实施例2：一种防治绝经后妇女骨质疏松症的海洋寡肽的制备工艺，具体制备步骤如下：
①蛋白酶解：每克鱼胶原蛋白添加0.05%的胰蛋白酶酶解，酶解温度30℃，酶解时间9h，pH值7.5，得到酶解物；
②亲和层析：采用亲和层析柱处理步骤①中得到的酶解物，采用pH2.0、4.0和6.5的缓冲液梯度洗脱，收集pH6.5洗脱的寡肽组分；
③喷雾干燥：对步骤②中寡肽组分进行喷雾干燥，且在干燥前添加质量比为5%的甘露醇保护剂，得到海洋寡肽；
④包装：干燥好的海洋寡肽经包装后即为本发明产品。
本实施例的鱼胶原蛋白为罗非鱼胶原蛋白。
当然，本发明所述的鱼胶原蛋白，不局限于实施例中列举的，还可以为其他鱼胶原蛋白，如三文鱼等。
该发明的海洋寡肽制备工艺简单，易于产业化，反应条件温和，是一种绿色加工技术。经研究发现，本发明所得的海洋寡肽具有显著的促钙吸收效果，并可提高血清钙和骨钙含量，增强骨密度，调整降钙素和甲状旁腺激素水平，具有显著的抗骨质疏松作用，可用于绝经后妇女骨质疏松症的预防与治疗。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。