一种全固相制备卡贝缩宫素的方法与流程

文档序号:12608788阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种卡贝缩宫素的全固相制备方法,其包括如下步骤:

1)以固相合成树脂为载体,通过连接受保护的氨基酸,脱除氨基保护基,再连接受保护的氨基酸的方法依次连接氨基和侧链经过保护的甘氨酸(Gly)、亮氨酸、脯氨酸(Pro)、半胱氨酸(Cys)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、异亮氨酸(Ile)、酪氨酸(Tyr),得到末端氨基经过保护的线性八肽片段树脂;

2)脱除末端氨基保护后,连接4-氯丁酸,得到全保护九肽片段树脂;

3)脱除半胱氨酸巯基保护基,得到裸露巯基的九肽片段树脂;

4)在DBU作用下,末端氯基团与半胱氨酸侧链巯基偶联成环,得到卡贝缩宫素肽树脂;

5)裂解卡贝缩宫素肽树脂,得到卡贝缩宫素。

2.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,其中所述氨基经过保护的甘氨酸选自Fmoc-Gly-OH;所述氨基经过保护的亮氨酸选自Fmoc-Leu-OH;所述氨基和侧链经过保护的脯氨酸选自Fmoc-Pro-OH;所述氨基和侧链经过保护的半胱氨酸选自Fmoc-Cys(Mmt)-OH;所述氨基和侧链经过保护的天冬酰胺选自Fmoc-Asn(Trt)-OH;所述氨基和侧链经过保护的谷氨酰胺选自Fmoc-Gln(Trt)-OH;所述氨基和侧链经过保护的异亮氨酸选自Fmoc-Ile-OH;所述氨基和侧链经过保护的酪氨酸选自Fmoc-Tyr(Me)-OH。

3.根据权利要求1或2任一项所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,步骤1)中所述的固相合成方法是Fmoc固相多肽合成方法,选用的偶联剂为DIPCDI+A或者DIPEA+A+B,其中A选自HOBt或HOAt,B选自PyBOP、PyAOP、HATU、HBTU、TBTU中的一种或多种;优选地,偶联剂中各成分的比例以摩尔比例计为DIPCDI:A=1.1~1.5:1.0~1.4,DIPEA:A:B=1.8~2.2:1.0~1.4:0.95~1.05;更优选为DIPCDI:A=1.3:1.2,DIPEA:A:B=2.0:1.2:1.0。

4.根据权利要求1-3任一项所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,其中,步骤1)中所述的固相载体为Rink Amide树脂Rink Amide-AM树脂或Rink Amide-MBHA树脂,优选地,树脂替代度为0.2-0.9mmol/g,更优选0.4~0.6mmol/g。

5.根据权利要求1-4任一项所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,步骤3)的脱除试剂为三氟乙酸和三异丙基硅烷的二氯甲烷溶液,三氟乙酸浓度为2~5%,三异丙基硅烷浓度为3~8%。

6.根据权利要求1-4任一项所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,步骤4)所述溶剂优选为DMF或N-甲基吡咯烷酮,反应时间为2-3小时。

7.根据权利要求1-5任一项所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,步骤5)采用的裂解试剂为TFA:TIS:H2O=85~95:2~8:2~8(V:V)。

8.根据权利要求1-5任一项所述的卡贝缩宫素的全固相制备方法,步骤5)获得产物后,还包括纯化步骤,优选所述纯化步骤选自重结晶、反相高压液相方法。

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