技术总结
本发明涉及拟海桑提取物的生物活性CPE+MTT测定方法：MTT法：MDCK细胞37ºC下在通入5%CO2和95%氧气，含有10%FBS的RPMI-1640细胞悬浮液中培养。每孔加入2uL，50ug/mL含药物的甲醇溶液的维持液继续培养72h。然后，每孔加入20uLMTT溶液，继续培养4h。以DMSO更换溶解MTT的介质，至Formazan结晶完全溶解。酶标仪测定每孔540nm处的OD值，计算IC50。CPE法：单层MDCK细胞首先与流感病毒于37ºC培养1h。弃去病毒稀释液，将细胞于37ºC保持在含有不同浓度测试药物的感染媒介中。37ºC培养48h后，用100uL 4%的多聚甲醛与MDCK细胞在室温下固定20min。除去甲醛后，MDCK细胞用0.1%的结晶紫染色30min。将板洗净干燥，酶标仪在570nm处测定各孔中结晶紫染色的强度，计算IC50值。本发明的方法相简单快速、而且检测结果可靠，适于推广应用。
技术研发人员：褚方强
受保护的技术使用者：青岛清泉生物科技有限公司
文档号码：201510960617
技术研发日：2015.12.21
技术公布日：2017.06.27