一种胶原蛋白纯化的方法与流程

文档序号:14185825阅读:1178来源:国知局

本发明涉及生物技术、医疗器械、日用化工技术领域,特别涉及胶原蛋白纯化方法及其应用。



背景技术:

胶原蛋白广泛存在于肌腱、韧带、软骨、皮肤、牙齿等动物结缔组织中,起着支撑器官,赋予组织机械强度,对细胞的分化、运动化趋向、结缔组织的修复起着重要作用。胶原蛋白以其天然的止血、低毒性、低抗原性、低免疫性、能引导细胞再生和与人体相容性较好等优点,而广泛应用于生物医学材料和临床医。

目前国内医用级的胶原蛋白的纯化大多是采用透析的方法处理量少,耗时较长(一般需要3天左右),操作繁琐(经常更换透析液),效率低;而采用本发明方法一次处理量大,100l料液大约4-6小时就可以纯化好。

经多次实验和研究,采用超滤纯化易于将胶原蛋白溶液中的小分子杂蛋白(少量)和多余的醋酸除掉;同时,超滤纯化的过程也可以降低胶原蛋溶液的生物负载;此外,采用超滤纯化法可以有效地将胶原蛋白溶液进行浓缩。



技术实现要素:

本发明的目的在于针对现有胶原蛋白纯化技术中的不足之处而提供一种高效纯化技术,该胶原蛋白纯化技术安全有效、低风险、简单易行,节能节电,生产效率高,适宜于工业化生产。

为达到上述目的,本发明通过以下技术方案来实现。

胶原蛋白纯化的方法,主要包括以下步骤:

步骤一,将溶解后的胶原蛋白溶液用纯化水进行稀释;

步骤二,将步骤二中的料液进行超滤浓缩;

步骤三,将步骤二所得的料液加纯化水进行稀释;

步骤四,将步骤三所得的料液进行超滤浓缩;

2.根据权利要求1所述的胶原蛋白超滤纯化的方法,其特征在于:在所述步骤一中胶原蛋白溶液稀释至其体积的2-4倍。

3.根据权利要求1所述的胶原蛋白超滤纯化的方法,其特征在于:所述步骤二中所得料液浓缩1-3倍。

4.根据权利要求1所述的胶原蛋白超滤纯化的方法,其特征在于:所述步骤三中所得料液稀释至其体积的2-6倍。

5.根据权利要求1所述的胶原蛋白超滤纯化的方法,其特征在于:所述步骤一和步骤三中纯化水的用量为料液的1-8倍。

本发明的有益效果:该胶原蛋白纯化技术安全有效、低风险、简单易行,节能节电,生产效率高,不污染环境,适宜于工业化生产。所纯化的胶原蛋白可以制备成以胶原蛋白为原材料的各种医疗器械、制剂、日化产品。

附图说明

具体实施方式

为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。

实施例1:

取胶原蛋白溶解液20l,加水40l纯化水稀释后进行超滤纯化,超滤纯化分为两个步骤:首先将料液浓缩2倍,至15l,然后加料液体积4倍的纯化水稀释,再进行超滤纯化,最后将料液浓缩至6倍,最终得到纯化的胶原蛋白。超滤纯化完毕后测得的各项数据如下:平均通量5.6m3/h;胶原蛋白收率83.2%,蛋白纯度99.1%。

实施例2:

取胶原蛋白溶解液30l,加水60l纯化水稀释后进行超滤纯化,超滤纯化分为两个步骤:首先将料液浓缩2倍,至22.5l,然后加料液体积6倍的纯化水稀释,再进行超滤纯化,最后将料液浓缩至6倍,最终得到纯化的胶原蛋白。超滤纯化完毕后测得的各项数据如下:平均通量5.3m3/h;胶原蛋白收率83.7%,蛋白纯度98.7%。

应当说明的是,以上实施例仅用于说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。



技术特征:

技术总结
本发明公开了一种高效简便的胶原蛋白超滤纯化方法,经该法纯化得到的胶原蛋白适宜于除去多余的离子和小分子杂蛋白,且胶原蛋白保持完整的三螺旋结构,可用于制备胶原蛋白海绵及胶原蛋白相关产品。该纯化方法主要包括以下步骤:将溶解好的胶原蛋白溶液进行稀释;开启输送泵,胶原蛋白溶液通过纯化系统,进行纯化,通过反复纯化可制得纯化的胶原蛋白。通过该法制备的胶原蛋白,可保留胶原蛋白的三螺旋结构,纯化过程中可最大限度除去多余的离子和小分子杂蛋白,胶原蛋白纯度高,适用于各种以胶原蛋白为原料的产品开发(如胶原蛋白海绵、胶原蛋白敷料、胶原面膜、胶原蛋白粉)。本发明所提供的纯化方法安全有效、低风险、简单易行,节能节电,生产效率高,适宜于工业化生产。

技术研发人员:陈新亮;彭新生;张智武;周艳芳
受保护的技术使用者:浙江崇山生物制品有限公司
技术研发日:2016.10.11
技术公布日:2018.04.17
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