一种金线莲茎腐病菌LAMP检测引物及其检测方法与流程

技术特征：

1.一种金线莲茎腐病菌LAMP检测引物，其特征在于：所述LAMP引物如下：

F3: CGGATCTCTTGGTTCTGGC；

B3: TGGAAGCTCGACGTGACC；

FIP: GGCGCAATGTGCGTTCAAAGATTGAAGAACGCAGCAAAATGC ；

BIP: TGCCTGTTCGAGCGTCATTTCACGCGAATTAACGCGAGTCC。

2.一种金线莲茎腐病菌的LAMP检测方法，其特征在于：利用权利要求1所述的LAMP引物进行LAMP反应，25μl反应体系中含20mM Tris-HCl，10mM (NH₄)₂SO₄，10mM KCl，8mM MgSO₄，甜菜碱0.8 mol/L，Bst聚合酶为8 U，dNTPs 1.0 mmol/L，F3和B3为0.2 mmol/L，FIP和BIP各1.6 mmol/L，钙黄绿素50 μmol/L，氯化锰500 μmol/L，TWeen-20 0.1%，模板DNA 50~100 ng，不足部分用无菌双蒸水补足；LAMP反应条件为在63-65℃温育45-60 min，85℃灭活5-10min。

3.根据权利要求2所述的一种金线莲茎腐病菌的LAMP检测方法，其特征在于：在LAMP反应后，显色结果观察到绿色荧光判断为阳性，橙色判断为阴性；或取2μl扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测，如出现梯形条带判断为阳性，没有出现则判断为阴性。