用于鉴定牛支原体和牛传染性鼻气管炎病毒的引物组及其应用的制作方法

文档序号:12698088阅读:来源:国知局

技术特征:

1.引物组合,为如下(a1)或(a2)或(a3):

(a1)由引物对甲和引物对乙组成;

(a2)所述引物对甲;

(a3)所述引物对乙;

所述引物对甲由引物F1和引物R1组成;

所述引物F1为如下(b1)或(b2):

(b1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;

(b2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;

所述引物R1为如下(b3)或(b4):

(b3)序列表的序列2所示的单链DNA分子;

(b4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;

所述引物对乙由引物F2和引物R2组成;

所述引物F2为如下(c1)或(c2):

(c1)序列表的序列3所示的单链DNA分子;

(c2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子;

所述引物R2为如下(c3)或(c4):

(c3)序列表的序列4所示的单链DNA分子;

(c4)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子。

2.权利要求1所述引物组合在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的用途为如下(d1)或(d2)或(d3):

(d1)鉴别牛支原体和牛传染性鼻气管炎病毒;

(d2)鉴定待测病原微生物是否为牛支原体或牛传染性鼻气管炎病毒;

(d3)鉴定待测样本是否感染了牛支原体和/或牛传染性鼻气管炎病毒。

3.含有权利要求1所述引物组合的试剂盒;所述试剂盒的用途为如下(d1)或(d2)或(d3):

(d1)鉴别牛支原体和牛传染性鼻气管炎病毒;

(d2)鉴定待测病原微生物是否为牛支原体或牛传染性鼻气管炎病毒;

(d3)鉴定待测样本是否感染了牛支原体和/或牛传染性鼻气管炎病毒。

4.权利要求3所述试剂盒的制备方法,包括将各条引物单独包装的步骤。

5.一种鉴别待测病原微生物为牛支原体还是牛传染性鼻气管炎病毒的方法,包括如下步骤:

(1)提取待测病原微生物的核酸;

(2)以步骤(1)得到的核酸为模板,采用权利要求1中的所述引物对甲和所述引物对乙进行二重二温式PCR,然后进行如下判断:如果得到大小为412bp的扩增产物,待测病原微生物为牛支原体;如果得到大小为727bp的扩增产物,待测病原微生物为牛传染性鼻气管炎病毒。

6.一种鉴定待测病原微生物是否为牛支原体或牛传染性鼻气管炎病毒的方法,包括如下步骤:

(1)提取待测病原微生物的核酸;

(2)以步骤(1)得到的核酸为模板,采用权利要求1中的所述引物对甲和所述引物对乙进行二重二温式PCR,然后进行如下判断:如果得到大小为412bp的扩增产物,待测病原微生物为或候选为牛支原体;如果得到大小为727bp的扩增产物,待测病原微生物为或候选为牛传染性鼻气管炎病毒。

7.一种鉴定待测样本是否感染牛支原体和/或牛传染性鼻气管炎病毒的方法,包括如下步骤:

(1)提取待测样本的核酸;

(2)以步骤(1)得到的核酸为模板,采用权利要求1中的所述引物对甲和所述引物对乙进行二重二温式PCR,然后进行如下判断:如果得到大小为412bp的扩增产物,待测样本感染或疑似感染牛支原体;如果得到大小为727bp的扩增产物,待测样本感染或疑似感染牛传染性鼻气管炎病毒。

8.一种鉴别待测病原微生物为牛支原体还是牛传染性鼻气管炎病毒的方法,包括如下步骤:检测待测病原微生物的核酸中是否具有序列表的序列5所示的特异DNA分子或是否具有序列表的序列6所示的特异DNA分子,如果待测病原微生物的核酸中具有序列表的序列5所示的特异DNA分子、待测病原微生物为牛支原体,如果待测病原微生物的核酸中具有序列表的序列6所示的特异DNA分子、待测病原微生物为牛传染性鼻气管炎病毒。

9.一种鉴定待测病原微生物是否为牛支原体或牛传染性鼻气管炎病毒的方法,包括如下步骤:检测待测病原微生物的核酸中是否具有序列表的序列5所示的特异DNA分子或是否具有序列表的序列6所示的特异DNA分子,如果待测病原微生物的核酸中具有序列表的序列5所示的特异DNA分子、待测病原微生物为或候选为牛支原体,如果待测病原微生物的核酸中具有序列表的序列6所示的特异DNA分子、待测病原微生物为或候选为牛传染性鼻气管炎病毒。

10.一种鉴定待测样本是否感染牛支原体和/或牛传染性鼻气管炎病毒的方法,包括如下步骤:检测待测样本的核酸中是否具有序列表的序列5所示的特异DNA分子和/或是否具有序列表的序列6所示的特异DNA分子,如果待测样本的核酸中具有序列表的序列5所示的特异DNA分子、待测样本感染或疑似感染牛支原体,如果待测样本的核酸中具有序列表的序列6所示的特异DNA分子、待测样本感染或疑似感染牛传染性鼻气管炎病毒。

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