本发明属于医药化学领域，具体涉及一类新的用于肿瘤或癌症治疗的化合物，特别涉及一类具有抗肿瘤活性的含氮芥的槐定碱类衍生物及其制备方法，以及此类化合物在作为药物特别是用于肿瘤或癌症治疗方面的应用。
技术背景
槐定碱是从豆科植物苦豆子中提取分离得到的一种苦参型生物碱，该类生物碱具有喹诺里西啶结构，自1977年李雪梅教授发现其对实体瘤肉瘤180(s180)、宫颈癌、lewis肺癌等多种动物移植瘤具有稳定的抗癌作用以来，槐定碱已经历了多年的药理学研究，相继有多位研究者证实了槐定碱对胃癌细胞、肝癌细胞、结肠腺癌细胞同样有稳定的抑制增殖作用。复方苦参注射剂于1995年被cfda批准用于和其他抗肿瘤药物如长春瑞滨、顺铂和紫杉醇等联合治疗非小细胞肺癌，肝癌和胃癌等。该注射剂主要成份为氧化苦参碱、苦参碱和槐定碱，均属于奎诺西啶类天然产物，其中槐定碱于2005年被cfda批准用于治疗恶性滋养型肿瘤，其作用机理能够抑制topoi活性，阻止dna的复制、转录、重组，影响细胞周期，有效抑制癌细胞增殖。槐定碱作为新化学实体，显示出如结构多变性，高溶解性和良好的药代动力学等成药性特性，且来源丰富，毒副作用小。但槐定碱抗肿瘤活性有限，且极性较大，水溶性强，使之不能广泛的应用于临床。
基于此，本发明成功地将高活性的氮芥基团引入到槐定碱骨架中，合成出系列新型的槐定碱类衍生物，用于癌症治疗。
技术实现要素：
本发明的一个目的在于，公开一类新型结构的含氮芥的槐定碱类衍生物及其药用盐。
本发明的另一个目的在于，公开一类含氮芥的槐定碱类衍生物及其药用盐的制备方法。
本发明的再一个目的在于，公开以一类新结构的含氮芥的槐定碱类衍生物及其药用盐为主要活性成份的药物组合物。
本发明还有一个目的在于，公开一类含氮芥的槐定碱类衍生物及其药用盐作为抗肿瘤药物方面的应用。
现结合本发明目的，对本发明内容进行详细阐述。
本发明具体涉及式ⅰ结构的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体：
其中：
x为o，s或者n等杂原子；
n等于1或2；
r1为脂肪碳酰基，芳香碳酰基，脂肪磺酰基，芳香磺酰基，芳香杂环磺酰基，脂肪磷酰基，芳香磷酰基，苄基或取代苄基，芳杂环苄基或取代芳杂环苄基，烯烃烷基，炔烃烷基；
y为
其中r2为氢，c1-4的直链或支链烷烃基，环烷烃基，烯烃基，烯烃烷基，炔烃基，炔烃烷基，芳环或取代芳环，芳杂环或取代芳杂环，苄基或取代苄基，芳杂环苄基或取代芳杂环苄基。
根据本发明的式ⅰ化合物，其中所述式ⅰ的化合物选自：
其中：
r1、x、y、n的定义与式(ⅰ)的定义相同。
本发明式ⅰ化合物药学上可接受的盐指：化合物与无机酸、有机酸成盐，其中优选：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐、氨基酸盐。
式ⅰa化合物的制备路线如下：
12-n取代的槐定酸乙酯(ⅲ)，在二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、dmf、dmso、乙酸乙酯、丙酮或thf等溶剂中，与硼氢化钠、四氢铝锂、二异丁基氢化铝、钯碳、红铝溶液等还原剂，‐10～100℃反应，制得关键中间体ⅱ。中间体ⅱ再与氮芥甲酰氯在二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、dmf、dmso、乙酸乙酯、丙酮或thf等溶剂中,在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化锂等缚酸剂存在下，-10～100℃反应制得目标化合物ⅰa-1。
中间体ⅱ再与氮芥磺酰氯在二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、dmf、dmso、乙酸乙酯、丙酮或thf等溶剂中-，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化锂等缚酸剂存在下，10～100℃反应制得目标化合物ⅰa-2。
中间体ⅱ再与取代的氮芥磷酰氯在二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、dmf、dmso、乙酸乙酯、丙酮或thf等溶剂中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化锂等缚酸剂存在下，-10～100℃反应制得目标化合物ⅰa-3。
式ⅰb化合物的制备方法同式ⅰa。
反应制得的各种化合物或将所得产物溶于丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚、dmf或dmso中滴加无机酸、有机酸制成药学上可接受的盐。
具体是将各种化合物溶于乙醚、dmf、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或dmso中的一种，于冰水浴下滴加盐酸乙醚至ph＝2，制成盐酸盐；或将各种化合物溶于乙醚、dmf、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或dmso中的一种，加入等摩尔牛磺酸，加热搅拌得其牛磺酸盐；抑或将各种化合物溶乙醚、dmf、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或dmso中的一种，于冰水浴下滴加浓硫酸至ph＝3，制成硫酸盐，等等。
此类化合物对于治疗人类恶性肿瘤是有效的。尽管本发明的化合物可以不经任何配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道途径(如静脉、肌肉给药)及口服给药。
本发明化合物的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。
药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本发明化合物)的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节，通常，活性化合物的量范围为组合物的0.5％～90％(重量)。另一优选的范围为0.5％-70％。
本发明的具有式ⅰ结构的化合物或其药学上可接受的盐，在体外对肿瘤有明显的抑制作用。
附图说明
图1化合物的结构通式
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，实施例仅为解释性的，决不意味着它以任何方式限制本发明的范围。所述的化合物经高效液相色谱(hplc)，薄层色谱(tlc)进行检测。随后可以采用诸如红外光谱(ir)，核磁共振谱(1hnmr，13cnmr)，高分辨质谱(hrms)等更进一步确证其结构。
实施例1：4-((3ar,3a1s,10as)-2-甲苯磺酰基十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
步骤一：槐定酸的制备
称量1.0g槐定碱置于20ml5n氢氧化钾水溶液中，加热回流12h，反应结束后，冷却至室温，加5n盐酸溶液，控制ph小于6，析出大量白色固体，过滤，滤液浓缩后，残留物加甲醇充分溶解，过滤除去无机盐，得槐定碱甲醇溶液，旋干后，得槐定酸粗品，再用甲醇重结晶，析出槐定酸纯品。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ177.13,67.62,58.99,53.08,48.78,41.72,35.94,34.64,33.47,28.38,26.46,26.37,24.50,23.33,23.13.hrms：calcdforc16h28n2o2:280.2151,found:280.2151.
步骤二：槐定酸乙酯的制备
将5ml二氯亚砜和10ml无水乙醇的反应液加入到1.0g槐定酸的无水乙醇溶液中，反应数小时，tlc显示反应完全，过滤，滤液减压浓缩后，得粗品，重结晶，得纯品，真空干燥。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ174.11,67.62,61.18,58.99,53.08,48.78,41.72,35.94,34.03,33.47,28.38,26.46,26.37,24.72,23.33,23.13,14.70.hrms：calcdforc18h32n2o2:308.2464,found:308.2464.
步骤三：12-n-(4-甲基苯磺酰基)槐定丁酸乙酯的制备
将步骤二所得的产物槐定酸乙酯在碳酸钾缚酸剂条件下，用对甲苯磺酰氯进行n-磺酰化，tlc监测反应进程，后处理，得到12-n-(4-甲基苯磺酰基)槐定丁酸乙酯粗品，过硅胶柱，分离纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.67(d,j＝8.2hz,1h),7.27(d,j＝8.2hz,1h),4.13(m,2h),3.64(s,2h),3.48(dd,j＝13.5,4.4hz,0h),2.92(dd,j＝12.3,6.7hz,2h),2.47(m,1h),2.41(s,2h),2.24(t,j＝6.7hz,1h),1.57(m,6h),1.25(m,1h),1.05(m,1h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ174.11,141.84,138.78,130.04,128.59,66.82,61.18,60.86,53.08,48.91,40.87,36.03,34.09,28.60,28.30,26.29,23.33,23.13,21.31,21.26,14.70.hrms：calcdforc24h36n2o4s:448.2396,found:448.2396.
步骤四：12-n-(4-甲基苯磺酰基)槐定丁醇的制备
将步骤三所得的产物用红铝溶液进行还原，tlc监测反应进程，后处理，得到12-n-(4-甲基苯磺酰基)槐定丁醇粗品，过硅胶柱，分离纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.62(d,j＝7.4hz,1h),7.23(d,j＝7.5hz,1h),3.75(s,1h),3.52(d,j＝39.9hz,2h),2.80(m,2h),2.43(t,j＝12.3hz,1h),2.37(s,2h),2.02(d,j＝10.5hz,1h),1.50(dddd,j＝93.5,67.4,37.7,14.7hz,9h),1.02(m,1h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ141.84,138.78,130.04,128.59,66.82,62.44,60.86,53.08,48.91,40.87,36.03,33.43,31.39,28.30,26.29,24.01,23.33,23.13,21.31.hrms：calcdforc22h34n2o3s:406.2154,found:406.2154.
步骤五：4-((3ar,3a1s,10as)-2-甲苯磺酰基十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
将步骤四所得的产物在碳酸钾缚酸剂条件下，与氮芥磺酰氯进行反应，tlc监测反应进程，后处理，得到目标化合物粗品，过硅胶柱，分离纯化。13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,141.84,138.78,130.04,128.59,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13,21.31.hrms：calcdforc27h41cl2n3o4s:573.2154,found:573.2154.
下述实施例中化合物的合成方法都参考实施例1中化合物的合成方法。用不同结构的磺酰氯取代实施例1中步骤三的对甲苯磺酰氯，其他反应条件相似。
实施例2：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((3,4-二甲基苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,139.48,136.26,134.69,131.22,131.12,125.91,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13,20.55,19.62.hrms：calcdforc28h43cl2n3o4s:587.2153,found:587.2153.
实施例3：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((4-氯苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,140.36,139.69,130.44,129.52,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc26h38cl3n3o4s:593.3212,found:593.3212.
实施例4：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((3,4-二氯苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,141.66,137.97,132.51,128.70,128.28,127.95,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc26h37cl4n3o4s:627.1212,found:627.1212.
实施例5：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((4-溴苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,139.26,132.29,130.38,130.23,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc26h38brcl2n3o4s:637.1212,found:637.1212.
实施例6：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((4-硝基苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,139.26,132.29,130.38,130.23,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc26h38cl2n4o6s:604.2325,found:604.2325.
实施例7：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((4-氟苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.77,159.28,135.23,131.51,117.37,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.
hrms：calcdforc26h38cl2fn3o4s:577.2131,found:577.2131.
实施例8：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((4-(三氟甲基)苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,145.48,135.59,129.01,125.97,124.37,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.
hrms：calcdforc27h38cl2f3n3o4s:677.2310,found:677.2310.
实施例9：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((4-甲氧基苯基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.95,159.28,131.63,130.47,113.60,66.82,66.08,60.86,56.04,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc27h41cl2n3o5s:589.2130,found:589.2130.
实施例10：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(噻吩-2-磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,131.78,127.83,117.71,66.82,66.08,60.49,53.08,50.07,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc24h37cl2n3o4s2:565.2030,found:565.2030.
实施例11：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((5-氯噻吩-2-基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,130.79,126.40,121.03,66.82,66.08,60.49,53.08,50.07,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc24h36cl3n3o4s2:599.1213,found:599.1213.
实施例12：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((5-溴噻吩-2-基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,130.19,121.26,113.77,66.82,66.08,60.49,53.08,50.07,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc24h36brcl2n3o4s2:643.0708,found:643.0708.
实施例13：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(萘-1-磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,134.44,134.12,134.06,133.28,131.43,131.32,128.82,127.25,125.48,122.29,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc30h41cl2n3o4s:609.2195,found:609.2195.
实施例14：4-((3ar,3a1s,10as)-2-((5-(二甲氨基)萘-1-基)磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,144.80,138.37,133.15,133.05,129.08,128.91,125.88,124.82,116.73,112.73,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.77,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc32h46cl2n4o4s:652.2617,found:652.2617.
实施例15：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(喹啉-8-磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,150.72,143.83,139.16,134.63,132.11,131.52,130.85,127.97,125.58,66.82,66.08,60.86,53.08,48.91,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc29h40cl2n4o4s:610.2147,found:610.2147.
实施例16：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(乙基磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,66.82,66.08,60.24,53.08,50.21,48.37,47.01,41.63,40.87,36.03,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13,10.16.hrms：calcdforc22h39cl2n3o4s:511.2038,found:511.2038.
实施例17：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(n,n-二甲基磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ159.28,66.82,66.08,60.42,53.08,49.98,47.01,41.63,40.87,36.03,34.84,31.39,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc22h40cl2n4o4s:526.2147,found:526.2147.
实施例18：4-((3ar,3a1s,10ar)-2-苯甲酰基十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基甲酸丁酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ170.59,159.28,136.20,130.35,128.38,128.16,66.82,66.08,60.28,53.08,47.49,47.01,41.63,40.66,36.71,32.48,29.69,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc27h39cl2n3o3:523.2368,found:523.2368.
实施例19：4-((3ar,3a1s,10ar)-2-苯甲酰基十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基磺酸酯的制备
实施例20：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(噻吩-2-磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基磺酸酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ131.78,127.83,117.71,67.80,66.82,60.49,53.08,51.66,50.07,41.68,40.87,36.03,31.39,29.07,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc23h37cl2n3o5s3:601.1272,found:601.1272.
实施例21：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(萘-1-磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基磺酸酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ134.44,134.12,134.06,133.28,131.43,131.32,128.82,127.25,125.48,122.29,67.80,66.82,60.86,53.08,51.66,48.91,41.68,40.87,36.03,31.39,29.07,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc29h41cl2n3o5s2:645.1865,found:645.1865.
实施例22：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(喹啉-8-磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基磺酸酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ150.72,143.83,139.16,134.63,132.11,131.52,130.85,127.97,125.58,67.80,66.82,60.86,53.08,51.66,48.91,41.68,40.87,36.03,31.39,29.07,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc28h40cl2n4o5s2:646.1817,found:646.1817.
实施例23：4-((3ar,3a1s,10as)-2-(乙基磺酰基)十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基磺酸酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ67.80,66.82,60.24,53.08,51.66,50.21,48.37,41.68,40.87,36.03,31.39,29.07,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13,10.16.hrms：calcdforc21h39cl2n3o5s2:547.1708,found:547.1708.
实施例24：4-((3ar,3a1s,10ar)-2-苯甲酰基十二氢吡啶[3,2,1-ij][1,6]萘啶-1-基)丁基双(2-氯乙基)氨基磺酸酯的制备
13cnmr(101mhz,cdcl3)δ170.59,136.20,130.35,128.38,128.16,67.80,66.82,60.28,53.08,51.66,47.49,41.68,40.66,36.71,32.48,29.07,28.30,26.29,24.09,23.33,23.13.hrms：calcdforc26h39cl2n3o4s:559.2038,found:559.2038.
实施例25：
化合物sp-1成盐酸盐：取化合物sp-1白色固体产物2.0g，溶于8ml无水乙醇。冰水浴冷却至5℃，滴加11.1％盐酸乙醇溶液至ph为2，继续于冰水浴下搅拌约1h。过滤，真空干燥，得白色固体粉末。
实施例26：
化合物sp‐3成牛磺酸盐：取化合物sp‐3白色固体产物2.5g，溶于10ml无水甲醇。加热至回流后加入等摩尔牛磺酸，继续于回流下搅拌反应约1.5h。反应完毕，于室温下静置24h。析出结晶，过滤，真空干燥。
实施例27：
化合物sp‐4成硫酸盐：取化合物sp‐4白色固体产物2.0g，溶于15ml丙酮。冰水浴冷却至0℃，滴加浓硫酸溶液至ph为3，继续于冰水浴下搅拌约1h。过滤，得白色固体。
为了更充分地说明本发明的含氮芥的槐定碱类衍生物的药物组合物，下面提供下列制剂实施例，所述实施例仅用于说明，而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可以使用本发明化合物中的任何活性化合物及其盐。
实施例28：
用下述成份制备硬明胶胶囊：
制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。按处方量将上述成份混合后，填充入硬明胶胶囊中。
实施例29：
用下述成份制备片剂：
制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。将处方量的辅料充分混匀。将原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混匀2-3次，保证药与辅料充分混匀，过20目筛，在55℃通风烘箱中干燥2h，干颗粒过16目筛整粒，测定中间体含量，混合均匀，在压片机上压片。
实施例30：
注射液的制备：
制备方法：取活性成分加入到已溶解聚山梨酯和丙二醇的注射用水中，加入药用碱调节ph值至4～8使其溶解。加入活性炭，搅拌吸附30min，除炭、精滤、灌封、灭菌。
实施例31：
注射用冻干粉的制备：
制备方法：取活性成分加入注射用水，用药用碱调节ph值至4-8使其溶解。再加入甘露醇，按注射剂的要求进行高压灭菌，加入活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，封口，即得。
实施例32：
体外抗肿瘤作用
(1)实验材料
人肝癌smmc-7721、人结肠癌lovo、人乳腺癌mcf-7、人白血病k562、人宫颈癌hela、人肺癌a549、人胃癌sgc-7901和正常细胞l929等细胞株常规培养于含10％小牛血清的1640培养基中，37℃，5％co2培养箱及饱和湿度条件下培养，3-4d传代1次。由天津市医药科学研究所细胞室提供。
mtt(scientificresearchspescial公司)；rpmi1640培养基(hyclone公司)；新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)；二甲基亚砜(dmso)等其余试剂均为国产分析纯。
阳性对照药：槐定碱，紫杉醇
待测样品：本发明化合物
实验仪器：仪器co2培养箱型号(bb16/bb5060上海力创科学仪器有限公司)，美国；酶联免疫检测仪(型号：infinitem200tecan公司瑞士产)；倒置显微镜(型号：ck奥林巴斯公司日本产)超净工作台(北京半导体设备一厂)。
(2)实验操作
用本发明的化合物处理人肝癌smmc-7721、人结肠癌lovo、人乳腺癌mcf-7、人白血病k562、人宫颈癌hela、人肺癌a549、人胃癌sgc-7901和正常细胞l929等细胞，用mtt法确定化合物的抗增殖活性。
mtt实验方法为：取处于指数生长期的状态良好的细胞，制成每毫升含5×103个细胞的悬液。将细胞悬液接种于96孔培养板中，每孔100μl，分样品组、对照组(不加样品)和空白组(只有培养基)，每组设定4个复孔。置于恒温co2培养箱中培养24h换液，加入相应浓度的受试化合物，培养48h加入mtt，每孔10μl，于培养箱中反应4h后吸去上清液，每孔加入150μldmso，在平板摇床上振摇5min，用酶联免疫检测仪在波长570nm处测定每孔的吸收度，计算细胞抑制率后再由统计软件求出ic50值。
(3)实验结果
本发明的部分化合物的抗肿瘤活性通过ic50值来表示，结果如表1所示。
表1化合物对肿瘤细胞的ic50值(μm)
(4)实验结论
药理实验结果表明：在以槐定碱和紫杉醇为对照药、与本发明的化合物同时给药的情况下，研究化合物对所选的肿瘤细胞和正常细胞的生长抑制作用，通过比较它们的抑制率和ic50值发现：本发明的化合物的抗肿瘤活性远高于槐定碱；本发明的化合物对肿瘤细胞的生长增殖抑制作用小于对正常细胞的生长增殖抑制，说明化合物有选择性抑制肿瘤细胞；对k562和hela细胞的抑制作用强于紫杉醇，但对smmc-7721细胞的抑制作用弱于紫杉醇。该类化合物具有显著的抗k562和hela细胞的作用，且对正常细胞的毒性较低。