本发明涉及一种肝素钠脱色方法，能有效去除肝素钠的颜色，属于肝素钠纯化方法技术领域。
背景技术：
肝素钠是临床上使用最多、最广泛的抗凝剂，在生物体内与蛋白的复合物形式出现。常见的肝素钠分离方式有酶解或盐解、醇沉、氧化等，由于肝素的来源以及提取方式，粗品肝素中必然含有大量的核酸及蛋白杂质，较深的颜色。
目前国内肝素钠的生产原料主要为猪小肠，肝素钠的颜色产生与蛋白杂质以及血液中的铁元素有直接关系，这些杂质会与肝素钠形成金属桥，使用普通的除蛋白方式或者直接加入金属络合剂除去效果效果均不明显，导致在精制过程中直接脱色的步骤，如普遍采用的高锰酸钾氧化、双氧水氧化或是两者联用的方式，氧化剂的使用量较大，对肝素钠的结构形成了破坏，降低了产品的品质与收率。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种不会影响肝素钠活性、质量稳定，收率高的肝素钠脱色方法。
本发明采用的一种肝素钠脱色方法，包括：用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为8000iu/ml；使用盐酸将所得到的肝素钠溶液的ph调至2.5；将所得溶液边搅拌边加入亚硫酸钠，搅拌反应0.6h；向得到的溶液中加入质量浓度为1.5%硅藻土，过滤并收集滤液；使用氢氧化钠溶液调节所得的滤液，边搅拌边调节，使ph=4.5；得到的溶液中加入质量浓度为0.8%edta，反应2h；得到的溶液中加入%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解；将得到的溶液的温度保持65℃，加入0.9倍乙醇，搅拌0.6h后通入冷却水，使所得溶液温度降温至30℃；将得到的混合物静置沉淀，沉淀后的上层清液为废乙醇、下层沉淀物为含肝素钠的混合物，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品；加入的亚硫酸钠的质量浓度为1.5%；过滤收集滤液后，用水冲洗硅藻土中的残留效价，将残留效价收集并混合到所收集的滤液中；在加入0.6%edta的同时，将溶液加热至60℃，使溶液保持70℃反应2h。
本发明的有益效果是本发明使用盐酸将肝素钠溶液的ph调节至酸性，既能够使部分杂质变性，起到去除蛋白的效果，又能够为后续去除铁元素创造环境条件。经过前处理的肝素溶液，在亚硫酸钠和金属络合剂edta的联用效果下能够很好的去除铁元素，起到了单一加入络合剂无法达到的效果。本发明通过调节反应环境，促进金属络合剂发挥作用，有效破坏肝素钠与蛋白杂质以及铁元素之间的金属桥，又不破坏肝素钠结构，然后在去除蛋白杂质与去除铁元素的同时，有效降低后续精制过程中氧化剂的用量，减少肝素钠活性的破坏，稳定质量，提高收率。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。本实施例的肝素钠脱色方法，包括以下步骤：用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为8000iu/ml；使用盐酸将所得到的肝素钠溶液的ph调至2.5；将所得溶液边搅拌边加入亚硫酸钠，搅拌反应0.6h；向得到的溶液中加入质量浓度为1.5%硅藻土，过滤并收集滤液；使用氢氧化钠溶液调节所得的滤液，边搅拌边调节，使ph=4.5；得到的溶液中加入质量浓度为0.8%edta，反应2h；得到的溶液中加入%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解；将得到的溶液的温度保持65℃，加入0.9倍乙醇，搅拌0.6h后通入冷却水，使所得溶液温度降温至30℃；将得到的混合物静置沉淀，沉淀后的上层清液为废乙醇、下层沉淀物为含肝素钠的混合物，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品；加入的亚硫酸钠的质量浓度为1.5%；过滤收集滤液后，用水冲洗硅藻土中的残留效价，将残留效价收集并混合到所收集的滤液中；在加入0.6%edta的同时，将溶液加热至60℃，使溶液保持70℃反应2h。
对本实施例得到肝素钠产品的结果进行分析：对肝素钠颜色降低的百分比以及静置过程中高锰酸钾使用量的减少比例进行测试。经过检测得本次实施例的方法颜色去除率为35%。将使用本发明处理过的产品，使用高锰酸钾氧化脱色，使用紫外分光光度计检测od400nm的数值，通过此项指标显示颜色指标，结果显示在使颜色达标的基础上，高锰酸钾用量降低了60%。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。