本发明涉及技术领域，特别是涉及一种提高肝素钠澄清度的制备方法。
背景技术：
肝素钠主要用于预防静脉血栓栓塞性疾病(预防静脉内血栓形成)，特别是预防与骨科或普外手术有关的血栓形成；治疗已形成的深静脉栓塞，伴或不伴有肺栓塞；与阿司匹林同用，治疗不稳定性心绞痛及非Q波心梗；用于血液透析体外循环中，防止血栓形成等。
肝素钠通过对猪肠黏膜肝素的苄基酯衍生物进行碱解聚而获得，其基本步骤为：以猪黏膜肝素为起始原料，经肝素季铵盐制备、肝素苄酯制备、对肝素苄酯进行碱解聚，以酸中和、醇沉淀，精制、脱色，脱水干燥，得到肝素钠成品。其中，在酸中和、醇沉淀后得到的肝素钠中间体，其澄清度往往很差，如果不加以精制纯化，就无法达到《中国药典》2010版的澄清度要求。
现在国内仿制肝素钠的厂家很多，在国内仿制除了要达到原研厂家的标准外，还必须达到或超过中国药典的基本要求。现有技术中制备肝素钠粗品常用的方法是在反应釜中加入苄索氯铵，用水溶解，再向反应釜中搅拌下加入用水溶解好的并且去除掉硫酸皮肤素的肝素钠溶液，产生大量沉淀，收集肝素季铵盐沉淀。沉淀用纯化水洗涤，沉淀过滤收集、干燥。在反应釜中加入肝素季铵盐用二氯甲烷溶解。溶解后加入氯化苄反应，反应后缓慢加入醋酸钠甲醇溶液，得肝素苄酯沉淀混悬液，静置沉降,抽出上层清液，得肝素苄酯。将肝素苄酯用纯化水溶解用氢氧化钠水溶液降解，得肝素钠溶液；用甲醇沉淀干燥得肝素钠粗品。
肝素钠属于注射剂用原料药，按照中国药典的要求，其水溶液澄清度必须为澄清，即小于0.5号浊度标准液，中国药典对此的标准比欧洲药典要严格许多。由于肝素钠在反应过程中会有很多杂质产生，这些杂质会对澄清度造成影响，所以提供一种能够提高澄清度、进而提高肝素钠质量的制备方法尤为必要。
技术实现要素：
本发明的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，而提供一种收率高、安全性高的提高肝素钠澄清度的制备方法。
为实现本发明的目的所采用的技术方案是：一种提高肝素钠澄清度的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将肝素钠粗品，放入氯化钠溶液A中溶解，得到肝素钠粗品溶液，过滤；
(2)将乙醇或甲醇加入到步骤(1)中制得的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀，静置后收集沉淀；
(3)将步骤(2)收集的沉淀氯化钠溶液A溶解，将得到的肝素钠粗品溶液过滤；用季铵盐检测试纸检测季铵盐浓度，若等于或小于5ppm，进行步骤(5)的操作；若季铵盐浓度大于5ppm，则进行步骤(4)的操作；
(4)重复进行步骤(2)和步骤(3)；
(5)用氯化钠溶液B溶解沉淀，用0.22微米的微孔滤膜进行过滤；
(6)将乙醇或甲醇加入到上述的肝素钠粗品溶液中，静置8小时，收集沉淀；
(7)将步骤(6)得到的沉淀中加入5倍于沉淀重量的无水乙醇或甲醇，搅拌2小时，静置后取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥温度为65～75℃，得肝素钠成品。
本发明的反应原理为采用高于4.0％(w/v)浓度的氯化钠溶解肝素钠粗品，通过置换反应使已经与肝素钠粗品结合的季铵盐游离出来，然后用高倍量乙醇或甲醇沉淀出肝素钠，同时也稀释了体系中的季铵盐，重复此过程以达到了去除季铵盐的目的。
与现有技术相比，本发明提供的提高肝素钠澄清度的制备方法具有以下有益效果：
(1)肝素钠产品的澄清度好；
(2)处理方式简便易行；
(3)产品收率高。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1：
一种提高肝素钠澄清度的制备方法，包括如下操作步骤：
(1)称取100g肝素钠粗品，用事先配制好的4％的氯化钠溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素钠粗品溶液，过滤；
(2)将8倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置8小时，收集沉淀；
(3)将收集的沉淀用事先配制好的4％的氯化钠溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素钠粗品溶液，过滤；用季铵盐检测试纸检测季铵盐浓度，若小于5ppm，就进行(5)的操作。若季铵盐浓度大于5ppm，就进行(4)的操作；
(4)将8倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置8小时，收集沉淀；重复(3)操作。
(5)用2％(w/v)氯化钠溶液B溶解沉淀，用0.22微米的膜过滤器过滤；
(6)将8倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置8小时，收集沉淀；
(7)将沉淀中加入无水乙醇或甲醇，按照沉淀重量的5倍重量加入，搅拌2小时，静置8小时，取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥温度为65—75℃，得肝素钠成品。
实施例2：
一种提高肝素钠澄清度的制备方法，包括如下操作步骤：
(1)称取100g肝素钠粗品，用事先配制好的10％(w/v)的氯化钠溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素钠粗品溶液，过滤；
(2)将9倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置12小时，收集沉淀；
(3)将收集的沉淀用事先配制好的10％的氯化钠溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素钠粗品溶液，过滤；用季铵盐检测试纸检测季铵盐浓度，若小于5ppm，就进行(5)的操作。若季铵盐浓度大于5ppm，就进行(4)的操作。
(4)将9倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置12小时，收集沉淀；重复(3)操作。
(5)用2％(w/v)氯化钠溶液B溶解沉淀，用0.22微米的膜过滤器过滤；
(6)将9倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置12小时，收集沉淀；
(7)将沉淀中加入无水乙醇或甲醇，按照沉淀重量的5倍重量加入，搅拌2小时，静置12小时，取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥温度为65—75℃，得肝素钠成品。
实施例3：
一种提高肝素钠澄清度的制备方法，包括如下操作步骤：
(1)称取100g肝素钠粗品，用事先配制好的15％(w/v)的氯化钠溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素钠粗品溶液，过滤；
(2)将10倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置20小时，收集沉淀；
(3)将收集的沉淀用事先配制好的15％的氯化钠溶液A1000ml溶解，使成10％(w/v)的肝素钠粗品溶液，过滤；用季铵盐检测试纸检测季铵盐浓度，若小于5ppm，就进行(5)的操作。若季铵盐浓度大于5ppm，就进行(4)的操作。
(4)将10倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置20小时，收集沉淀；重复(3)操作。
(5)用1％(w/v)氯化钠溶液B溶解沉淀，用0.22微米的膜过滤器过滤；
(6)将10倍(v/v)乙醇或甲醇(乙醇或甲醇温度控制在10℃以下)加入到上述的肝素钠粗品溶液中，得到沉淀沉淀，静置20小时，收集沉淀；
(7)将沉淀中加入无水乙醇或甲醇，按照沉淀重量的5倍重量加入，搅拌2小时，静置20小时，取沉淀置真空干燥箱中干燥，干燥温度为66～75℃，得肝素钠成品。
以上实施例1～3所用的肝素钠粗品的10％的水溶液很浑浊，其浑浊程度按照《中国药典》2010版附录IXB“澄清度检查法”检查大大超过4号浊度标准液，而经过本实施例最终得到的肝素钠成品的澄清度浅于1号浊度标准液甚至达到0.5号浊度标准液以下，同时用季铵盐试纸检测后，季铵盐残留显示为零。
本工艺采取4.0％(w/v)以上的氯化钠浓度置换出与肝素钠结合的苄索氯铵，然后经过乙醇(或甲醇)倍比稀释的方法去掉苄索氯铵杂质。得到的成品澄清度也符合欧洲药典EP7.0标准甚至高于欧洲药典EP7.0的标准。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。