一种胃蛋白酶提取方法与流程

文档序号:16207895发布日期:2018-12-08 07:20阅读:2558来源:国知局

本发明涉及一种提取方法,特别涉及一种胃蛋白酶提取方法。



背景技术:

胃蛋白酶先是表达为酶原,即胃蛋白酶原。胃蛋白酶原是胃蛋白酶的无活性的前体,其一级结构比胃蛋白酶多出了44个氨基酸。在胃中,胃粘膜主细胞释放出胃蛋白酶原。这一酶原在遇到胃酸(由胃壁细胞所释放)中的盐酸后被激活。当胃对食物进行消化时,在被称为胃泌素的一种激素和迷走神经作用下,启动胃蛋白酶原和盐酸从胃壁中释放。在盐酸所创造的酸性环境中,胃蛋白酶原发生去折叠,使得其可以以自催化方式对自身进行剪切,从而生成具有活性的胃蛋白酶。随后,生成的胃蛋白酶继续对胃蛋白酶原进行剪切,将44个氨基酸残基切去,产生更多的胃蛋白酶。但是目前胃蛋白酶提取步骤繁琐,提取的酶活力过低。



技术实现要素:

发明目的:本发明提供一种胃蛋白酶提取方法,可以高效简单提取胃蛋白酶。

技术方案:本发明所述一种胃蛋白酶提取方法,包含以下步骤:(1)原材料的选择和预处理:取直径10cm,深2-3mm的胃基底部黏膜;(2)自溶:在夹套锅内预先加水,在加入盐酸,加热至50-100℃,在搅拌下加入猪胃黏膜,快速搅拌使酸度均匀,保持45-48度,消化,得自溶液;(3)过滤:用纱布过滤除去未消化的组织尿蛋白,收集滤液;(4)脱脂、去杂质:将滤液降温至30℃以下,加入15-20%氯仿或乙醚,搅匀后转入沉淀脱脂器内,静置24-48小时,使杂质沉淀,分出弃去,得脱脂酶液;(5)浓缩、干燥:取清酶液,在40℃以下减压浓缩,再将浓缩液真空干燥,球磨过80-100目筛,即得胃蛋白酶粉。

进一步地,所述胃粘膜基底部粘膜每个胃选取量为90-100g左右。

进一步地,所述加水量为60-100升。

进一步地,所述盐酸为0.1-0.5mol/l。

进一步地,所述猪胃黏膜为150-200g。

进一步地,所述消化时间为3-5h。

进一步地,所述减压浓缩为浓缩至原体积的0.2-0.5。

有益效果:本发明可以快速提取胃蛋白酶,提取的胃蛋白酶活性高。

具体实施方式

实施例1:取直径10cm,深2mm,90g左右的胃基底部黏膜,在夹套锅内预先加水60升,在加入0.1mol/l盐酸,加热至50-100℃,在搅拌下加入150g猪胃黏膜,快速搅拌使酸度均匀,保持45-度,消化3h,得自溶液,用纱布过滤除去未消化的组织尿蛋白,收集滤液,将滤液降温至30℃以下,加入15-20%氯仿或乙醚,搅匀后转入沉淀脱脂器内,静置24小时,使杂质沉淀,分出弃去,得脱脂酶液,取清酶液,在40℃以下减压浓缩至原体积的0.2,再将浓缩液真空干燥,球磨过80-100目筛,即得胃蛋白酶粉。

实施例2:取直径10cm,深3mm,100g左右的胃基底部黏膜,在夹套锅内预先加水100升,在加入0.5mol/l盐酸,加热至100℃,在搅拌下加入200g猪胃黏膜,快速搅拌使酸度均匀,保持48度,消化5h,得自溶液,用纱布过滤除去未消化的组织尿蛋白,收集滤液,将滤液降温至30℃以下,加入15-20%氯仿或乙醚,搅匀后转入沉淀脱脂器内,静置48小时,使杂质沉淀,分出弃去,得脱脂酶液,取清酶液,在40℃以下减压浓缩至原体积的0.5,再将浓缩液真空干燥,球磨过80-100目筛,即得胃蛋白酶粉。

实施例3:取直径10cm,深2mm,100g左右的胃基底部黏膜,在夹套锅内预先加水80升,在加入0.2mol/l盐酸,加热至60℃,在搅拌下加入200g猪胃黏膜,快速搅拌使酸度均匀,保持46度,消化4h,得自溶液,用纱布过滤除去未消化的组织尿蛋白,收集滤液,将滤液降温至30℃以下,加入15-20%氯仿或乙醚,搅匀后转入沉淀脱脂器内,静置36小时,使杂质沉淀,分出弃去,得脱脂酶液,取清酶液,在40℃以下减压浓缩至原体积的0.3,再将浓缩液真空干燥,球磨过80-100目筛,即得胃蛋白酶粉。

实施例4:取直径10cm,深3mm,100g左右的胃基底部黏膜,在夹套锅内预先加水70升,在加入0.4mol/l盐酸,加热至50-100℃,在搅拌下加入150g猪胃黏膜,快速搅拌使酸度均匀,保持45度,消化4h,得自溶液,用纱布过滤除去未消化的组织尿蛋白,收集滤液,将滤液降温至30℃以下,加入15-20%氯仿或乙醚,搅匀后转入沉淀脱脂器内,静置24-小时,使杂质沉淀,分出弃去,得脱脂酶液,取清酶液,在40℃以下减压浓缩至原体积的0.4,再将浓缩液真空干燥,球磨过80-100目筛,即得胃蛋白酶粉。



技术特征:

技术总结
本发明公开了一种胃蛋白酶提取方法,包含以下步骤:(1)原材料的选择和预处理:取直径10cm,深2‑3mm的胃基底部黏膜;(2)自溶:在夹套锅内预先加水,在加入盐酸,加热至50‑100℃,在搅拌下加入猪胃黏膜,快速搅拌使酸度均匀,保持45‑48度,消化,得自溶液;(3)过滤:用纱布过滤除去未消化的组织尿蛋白,收集滤液;(4)脱脂、去杂质:将滤液降温至30℃以下,加入15‑20%氯仿或乙醚,搅匀后转入沉淀脱脂器内,静置24‑48小时,使杂质沉淀,分出弃去,得脱脂酶液;(5)浓缩、干燥,得成品。本发明可以高效、快速的提取胃蛋白酶。

技术研发人员:朱友兵
受保护的技术使用者:朱友兵
技术研发日:2017.05.22
技术公布日:2018.12.07
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