本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种具有保肝作用的富硒玉米小肽及其制备方法。
背景技术：
肝脏是人体最大的代谢器官，我们吃进去的食物都需要肝脏进行合成、分解。但肝脏也是很容易“生病”的器官，日常养护十分重要。肝脏是人体“化工厂”。肝脏的主要生理功能大概有1500多种，它是人体的“化工厂”，会合成蛋白质、酶和各种身体所需的物质。肝脏也是人体最大的消化器官，会通过肝细胞分泌胆汁帮助人体的消化功能。肝脏还有储备功能，存储维生素、脂肪、糖等人体必需的能量和物质。肝脏“出错”概率高。干的活越多，“出错”的概率就越大，肝脏功能多、任务重，是一个容易“生病”的器官。大家最熟知的就是肝炎，除甲肝、乙肝、丙肝、戊肝等病毒性肝炎外，还有酒精性肝炎、脂肪性肝炎、药物性肝炎、自身免疫性肝病等。
玉米是粗粮中的保健佳品，食玉米对人体的健康颇为有利。玉米的营养成分比较全面,一般含蛋白质8.5％、脂肪4.3％、糖类73.2％、钙0.022％、磷.21％、铁0.0016％,还含有胡萝卜素、维生素b1、b2和尼克酸以及谷固醇、卵磷脂、维生素e、赖氨酸等。玉米肽的氨基酸组成中，支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)含量很高。有报道，肝昏迷、肝性脑病患者血中支链氨基酸含量下降，输入高含量支链氨基酸可使病情得到缓解，高支链输液广泛应用于肝昏迷、肝硬化、重症肝炎和慢性肝炎的治疗。玉米肽中高支链氨基酸含量在此方面可能具有很高的应用前景。
肽，是源于蛋白、优于蛋白的多功能化合物，是当前国际最热门的研究课题和极具发展前景的功能因子。肽是由两个或两个以上氨基酸通过肽键共价连接形成的聚合物，蛋白质不完全水解的产物也是肽，一般地将2肽～10肽(2肽由2个氨基酸构成，n肽由n个氨基酸构成)或相对分子质量小于2000d的肽称为寡肽或小肽(如谷胱甘肽)，将10个以上氨基酸组成的称为多肽。小肽可由蛋白质经酶解等方式获得，与蛋白质相比具有以下优点：①小肽是体现信息的信使，具有多种人体代谢和生理调节功能：有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用；②小肽活性更高，在微量和低浓度的情况下，能发挥更高的生理作用；③小肽分子量小，易消化吸收，食用安全性极高。
微量元素又称痕量元素，虽然在人体内的含量并不多，但是与人的生存和健康息息相关，对人的生命起至关重要的作用。它们的摄入过量、不足、不平衡或缺乏都会不同程度地引起人体生理的异常或发生疾病。微量元素最突出的作用是与生命活力密切相关，仅仅像火柴头那样大小或更少的量就能发挥巨大的生理作用。值得注意的是这些微量元素通常情况下必须直接或间接由土壤供给，但大部分人往往不能通过饮食获得足够的微量元素。这每种微量元素都有其特殊的生理功能。尽管它们在人体内含量极小，但它们对维持人体中的一些决定性的新陈代谢却是十分必要的。一旦缺少了这些必需的微量元素，人体就会出现疾病，甚至危及生命。比较明确的是约30％的疾病直接是微量元素缺乏或不平衡所致。
1973年，who和国际营养组织确认硒为人和动物体内必须的微量元素。硒的营养主要是通过蛋白质特别是与酶蛋白结合发挥抗氧化作用。补硒可使肝癌发生率下降35％，使有肝癌家族史者发病率下降50％，补硒可阻断乙肝病毒携带者发生肝癌和乙肝病毒在人群中的传播及提高人体免疫功能，防止肝脏病毒疾病、肝硬化、肝脏癌变、脂肪肝、酒精肝等。中国营养学会1998年10月修订的“每日膳食营养素供给量”已将硒列为15种每日膳食营养素之一，提出一个成年人每天对硒的适宜摄入量是50-250微克。
富硒玉米小肽不仅能更进一步提高硒元素的吸收率，而且还能使人体摄入两类物质(小肽和微量元素)，各自并协同发挥保肝的作用。
技术实现要素：
本发明的第一目的在于提供一种具有保肝作用的富硒玉米小肽，本发明的第二目的是提供该富硒玉米小肽在制备用于保肝的食品、保健食品及药品中的应用。
本发明目的第一目的是这样实现的：
一种具有保肝作用的富硒玉米小肽，其特征在于采用以下工艺步骤制备：
富硒玉米小肽的制备：将亚硒酸钠(或l-硒-甲基硒代半胱氨酸)溶于去离子水配制成浓度为4～6mg/ml的溶液，按溶液与玉米蛋白比例8～12:1的比例加入玉米蛋白，搅拌均匀，加热煮沸10～15分钟，待冷却至约30～50℃，以稀盐酸调节ph值1.0～3.0，加入0.5～2％胃蛋白酶，保温1～3小时，调节ph值7.0～9.0，加入0.5～2％胰蛋白酶，保温3～5小时，煮沸10～15分钟，离心，沉淀弃去，上清液通过相对分子质量为3kd的超滤膜超滤，透过液加于da201-c大孔吸附树脂柱上，以水洗脱，弃去水洗液，再以50～90％(v/v)乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇并继续浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)，喷雾干燥(进风温度为180～200℃，出风温度为90～100℃)，收集喷干粉，即得富硒玉米小肽。经检测，富硒玉米小肽肽含量为60％～90％，硒的富集率＞95％。
经过上述方法制备的富硒玉米小肽，用于制备成下述制剂：
(1)按富硒玉米小肽:玉米油:蜂蜡:卵磷脂比例为10:35:4:1混合物料，经研磨，制备成软胶囊剂；
(2)按富硒玉米小肽:聚乙二醇400:丙二醇比例为10:38:2混合物料，经研磨，制备成软胶囊剂；
(3)富硒玉米小肽，加入常规辅料，制备成口服液、胶囊剂、片剂、颗粒剂。
但本发明不限于上述剂型。制剂工艺所用的辅料可以用其他常规的辅料代替，如淀粉、糊精、糖粉、蜂蜜、甘油、羧甲基纤维素钠等；富硒玉米小肽也可与其他药用物质合用，共同达到保肝的作用。
本发明的第二目的是提供上述富硒玉米小肽的用途，其具有保肝的作用，其可用于制备保肝的食品、保健食品及药品。
本发明的有益效果是：本发明富硒玉米小肽，制备简便，成本低廉；玉米小肽与微量元素协同发挥保护肝脏的作用，同时具有毒副作用小、无耐药性、不易残留等优点，达到绿色食品纯天然的要求，能获得良好的社会效益和经济效益。
药效试验
为进一步验证本发明富硒玉米小肽的保肝的作用，发明人进行了药效学试验验证，试验方法及结果如下：
对小鼠极性酒精性肝损伤保护作用
(1)受试药物及动物
富硒玉米小肽，自制，含玉米小肽(以总肽量计)为83.4％，含硒1.10％。临用前采用无菌去离子水配成一定浓度药液，灌胃给药。
玉米小肽，自制，含玉米小肽(以总肽量计)83.1％。临用前采用无菌去离子水配成一定浓度药液，灌胃给药。
亚硒酸钠。临用前采用无菌去离子水配成一定浓度药液，灌胃给药。
spf级昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物合格证号：2015000515110。
(2)试验方法及结果
取小鼠，随机分成5组，每组10只，分别为：富硒玉米小肽组(30mg/kg)、玉米小肽组(30mg/kg)、亚硒酸钠组(1.5mg/kg)、正常对照组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)，灌胃给药，1次/d，连续21d，末次给药1h后，除正常对照组外，每组分别灌胃50％乙醇，0.012ml/g，造成急性肝损伤模型。小鼠禁食不禁水24h后，每只小鼠眼球取血，将血静置一段时间后用低温离心机2500rpm离心10min制备血清，按alt,ast,tbil试剂盒说明用生化仪进行分析。结果见表1。
表1对小鼠血清alt,ast,tbil的影响(x±s)
注：与模型对照组比较，*p<0.o5，**p<0.o1。
以上试验结果表明：富硒玉米小肽能显著改善急性酒精性肝损伤小鼠的肝功能。
具体实施方式
下面列举实施例，进一步说明本发明，各实施例仅用于说明本发明，并不限制本发明：
实施例1
富硒玉米小肽的制备：将亚硒酸钠溶于去离子水配制成浓度为5mg/ml的溶液，按溶液与玉米蛋白比例10:1的比例加入玉米蛋白，搅拌均匀，加热煮沸15分钟，待冷却至约45℃，以稀盐酸调节ph值2.0，加入1.5％胃蛋白酶，保温2小时，调节ph值8.0，加入1.0％胰蛋白酶，保温4小时，煮沸15分钟，离心，沉淀弃去，上清液通过相对分子质量为3kd的超滤膜超滤，透过液加于da201-c大孔吸附树脂柱上，以水洗脱，弃去水洗液，再以75％(v/v)乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇并继续浓缩至相对密度为1.12(60℃)，喷雾干燥(进风温度为180～200℃，出风温度为90～100℃)，收集喷干粉，即得富硒玉米小肽。
实施例2
富硒玉米小肽的制备：将亚硒酸钠溶于去离子水配制成浓度为4mg/ml的溶液，按溶液与玉米蛋白比例8:1的比例加入玉米蛋白，搅拌均匀，加热煮沸10分钟，待冷却至约50℃，以稀盐酸调节ph值3.0，加入2％胃蛋白酶，保温3小时，调节ph值7.5，加入2％胰蛋白酶，保温5小时，煮沸10分钟，离心，沉淀弃去，上清液通过相对分子质量为3kd的超滤膜超滤，透过液加于da201-c大孔吸附树脂柱上，以水洗脱，弃去水洗液，再以60％(v/v)乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇并继续浓缩至相对密度为1.15(60℃)，喷雾干燥(进风温度为180～200℃，出风温度为90～100℃)，收集喷干粉，即得富硒玉米小肽。
实施例3
取实施例1方法所得的富硒玉米小肽100g，按富硒玉米小肽:玉米油:蜂蜡:卵磷脂比例为10:35:4:1混合物料，经研磨30分钟，以明胶、纯化水、甘油、氧化铁黑按100:100:40:1比例制作软胶囊囊皮胶液，控制胶盒温度40～50℃，保温罐35～45℃，喷体温度30～40℃，压制成软胶囊，每粒内容物重0.45g，17℃～27℃冷风干燥3～5h定型，洗丸、干燥、选丸、包装，制备成软胶囊成品。
实施例4
取实施例1方法所得的富硒玉米小肽100g，按富硒玉米小肽:聚乙二醇400:丙二醇比例为10:38:2混合物料，经研磨30分钟，以明胶、纯化水、甘油、氧化铁黑按100:100:40:1比例制作软胶囊囊皮胶液，控制胶盒温度40～50℃，保温罐35～45℃，喷体温度30～40℃，压制成软胶囊，每粒内容物重0.45g，17℃～27℃冷风干燥3～5h定型，洗丸、干燥、选丸、包装，制备成软胶囊成品。
实施例5
取实施例2方法所得的富硒玉米小肽100g，加淀粉至总量为200g，混合均匀，流化床造粒，填装胶囊，包装，制备成胶囊成品。