微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及试剂盒技术领域，具体为一种新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒。

背景技术：

微卫星标记(microsatellite)，又称为短串联重复序列(short tandem repeats，STRs)或简单重复序列(simple sequence repeats)，是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列，由2～6个核苷酸的串联重复片段构成，由于重复单位的重复次数在个体间呈高度变异性并且数量丰富，因此微卫星标记的应用非常广泛。微卫星位点通常通过PCR扩增，扩增产物通过电泳分析并根据大小分离等位基因进行检测。

微卫星DNA是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分，主要由串联重复单元组成，每单元长度在1-10bp之间，1个SSR的总长度可达几十到几百个bp。每个微卫星DNA都由核心序列和侧翼序列组成，其核心序列呈串联重复排列。侧翼DNA序列位于核心序列的两端，为保守的特异单拷贝序列，能使微卫星特异地定位于染色体常染色质区的特定部位。PCR扩增后的等位微卫星可以用多种方法检测，如荧光标记、银染。微卫星存在于大多数生物的基因组中，被广泛的应用于遗传杂交育种和绘制染色体遗传图谱等领域。高度多态的微卫星还可以用来在人群进行个体识别。

目前司法或法医鉴定所使用的试剂盒大多为国外生产，国内市场上很少见到国产试剂盒，尤其对于需要利用多重PCR技术进行检测的技术来讲，引物的使用尤为关键，但没有一款试剂盒考虑到操作人员的使用情况。在试剂盒使用过程中，有46条引物需要依次加入反应体系，很容易出现漏加或者多加的情况，这对多重PCR的结果会产生本质上的改变。同时，市场上大多数的试剂盒都不做相应的试剂保温工作，让试剂长时间暴露在室温状态下，极容易造成DNA降解、酶失活以及试剂变性。

技术实现要素：

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本实用新型提供了一种新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，解决了新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒在使用的过程中引物漏加或多加以及DNA降解、酶失活以及试剂变性的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本实用新型通过以下技术方案予以实现：一种新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内放置引物盒，引物盒内腔的一个侧而与底侧设置单向滑轨，另一内腔侧面设置推动杆。引物盒内腔上设置46个500微升管。引物盒外腔设计为金属外壳，内容物为冻存液。所述盒体中，引物盒旁边设置若干1.5ml离心管，分别装有dNTPs、Taq 酶、Mg²⁺等PCR体系试剂，试剂下方为海绵层，海绵层下方设置金属腔体，腔体内设置冻存液。

优选的，所述的引物盒上设置单向滑轨，滑轨与滑块之间的卡扣采用三角形构造。

优选的，所述引物盒外腔设置为金属外壳，内容物为冻存液。

优选的，引物盒内腔设置46个500微升管，管内填装检测所用引物。

优选的，引物盒内腔另一侧面设置推动杆，并在引物盒外腔上设置相应的滑道。

优选的，所述盒体中，引物盒旁边设置若干1.5ml离心管，分别装有dNTPs、 Taq酶、Mg²⁺等PCR体系试剂，试剂下方为海绵层，海绵层下方设置金属腔体，腔体内设置冻存液。并在设置放置引物盒的相应凹槽。

(三)有益效果

本实用新型提供了一种新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒。具备以下有益效果：

(1)、该新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，通过对引物盒的改良，设置滑道、卡扣、推动杆，达到了保证实验人员可以依次加入引物的目的，方便了实验操作，同时通过设置推动杆和金属外壳以及冻存液，达到了方便实验人员控制引物加样顺序以及引物保温的效果。

(2)、该新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，通过对试剂盒的改造，设置海绵层以及下方的金属盒、冻存液，保证了PCR体系中其他相关试剂的保温。

(3)、该新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，通过对试剂盒的设计，设置相应的引物盒凹槽，达到了携带方便，一体化的目的，节约了试剂盒放置所需的空间。

附图说明

附图1为本实用新型试剂盒整体结构示意图；

附图2为本实用新型引物盒结构示意图。

图中：(1)引物盒外腔、(2)46个500微升管、(3)引物盒内腔、(4) (5)滑轨、(6)推动杆、(7)1.5ml离心管、(8)试剂盒盒体、(9)引物盒。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

请参阅图1，本实用新型提供一种技术方案；一种新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，包括引物盒9，引物盒9的内腔一侧与底侧设置单向滑轨 4、5，另一内腔侧面设置推动杆6。单向滑轨4、5以及推动杆6的设计，方便在操作人员实验操作时可以依次添加引物2，在完成一次引物2提取加入后，用推动杆6拉出引物盒内腔3，单向滑轨4、5保证了引物盒内腔3只能向一个方向移动，滑轨与滑块之间的三角形卡扣设计，保证了内腔一次只能露出一个引物。

所述试剂盒盒体8采用海绵层分割为两个部分，海绵层部分放置若干 1.5ml离心管7，以及引物盒9。海绵层下方设置金属外壳的腔体，腔体内放有冻存液，保证了试剂盒的一体化，节约了空间，同时保证了PCR体系中其他相关试剂的保温，并达到了对引物盒的保温作用，以此冷却试剂盒的同时，也让引物盒内的冻存液同时冷却。

所述引物盒外腔1，采用金属外壳填充冻存液，保证了实验操作过程中所有的引物都处于低温状态，有效避免了引物在实验操作过程中的降解。

综上所述，该新型微卫星多重PCR个体识别检测试剂盒，通过对引物盒9 以及试剂盒盒体8的冻存装置的设计，达到了引物以及PCR反应体系中其他相关试剂的保温，从而提高了试剂盒的使用寿命，提高了实验结果的可重复性，保证了检测的准确性。

并且，通过对引物盒9的滑轨4、5以及推动杆6的设计，达到了避免实验操作中漏加或多加引物的目的，降低了实验难度，从而提高了实验效率以及实验结果的准确性。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。

尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。