本发明涉及具有特定化学结构的具有抗炎活性的化合物或其药理学上可接受的盐。
背景技术
灰黄霉素是由aeoxford等人于1939年首次从属于米曲霉(aspergillusoryzae)的青霉属中的一种，即灰黄青霉菌(penicilliumgriseofulvum)(非专利参考文献1)中分离的抗生素物质。灰黄霉素主要口服给药。然而，它是溶解度低且容易吸收的药用物质，并且因此其口服吸收动力学复杂。灰黄霉素被用作抗皮肤癣菌(dermatophytes)如小孢子菌属(microsporum)、毛癣菌属(trichophyton)和表皮癣菌属(epidermophyton)(非专利参考文献2、3)的抗真菌药物。
灰黄霉素与细胞内的微管蛋白结合，由此将细胞周期终止在g2/m期并诱导有丝分裂异常，结果是例如真菌、植物和哺乳动物的各种细胞的生长被抑制。与哺乳动物细胞相比，真菌细胞的生长在极低浓度的灰黄霉素下被抑制。这被认为是由于灰黄霉素对真菌微管蛋白的结合亲和力比对哺乳动物微管蛋白的结合亲和力高。灰黄霉素还与微管相关蛋白(maps)结合以抑制微管的动态不稳定性，由此稳定微管运动(非专利参考文献4)。
灰黄霉素具有对人类癌细胞的生长抑制作用和诱导其凋亡的活性。如果将灰黄霉素与诺考达唑组合给药至移植在无胸腺的裸鼠中的肿瘤，其会呈现抗肿瘤活性。由此，灰黄霉素被预期具有作为抗癌剂的效力(非专利参考文献5)。
同时，早已知灰黄霉素除了抗真菌作用以外还有抗炎活性。例如，已发现灰黄霉素在具有福尔马林水肿和棉球肉芽肿的大鼠炎症模型中呈现抗炎活性(非专利参考文献6)。在临床实践中，报道灰黄霉素具有对非真菌炎性皮肤疾病如扁平苔藓(非专利参考文献7)、浆细胞性唇炎(非专利参考文献8)和色素性紫癜性皮肤病(非专利参考文献9)的医学作用。
还报道灰黄霉素对例如青斑样脉管炎(非专利参考文献9)、多关节炎如肩手综合征和肩周炎(非专利参考文献6、10)具有医学作用。
发现灰黄霉素在体外具有对白细胞的微管的作用和对炎症化学介质如组胺、血清素和前列腺素的拮抗作用(非专利参考文献6)。然而，灰黄霉素在抗炎中的作用的具体机制尚未明了。
同样地，灰黄霉素具有各种生理学活性，并且迄今为止，通过取代基替换已经合成了各种灰黄霉素衍生物(非专利参考文献11)。
引用列表
非专利参考文献
非专利参考文献1:oxfordae,raistrickh,simonartp.studiesinthebiochemistryofmicro-organisms:griseofulvin,c(17)h(17)o(6)cl,ametabolicproductofpenicilliumgriseo-fulvumdierckx.biochemj.1939feb;33(2):240-8
非专利参考文献2:gentlesjc.experimentalringworminguineapigs:oraltreatmentwithgriseofulvin.nature.1958aug16;182(4633):476-7
非专利参考文献3:williamsdi,martenrh,sarkanyi.oraltreatmentofringwormwithgriseofulvin.lancet.1958dec6;2(7058):1212-3
非专利参考文献4:wehlandj,herzogw,weberk.interactionofgriseofulvinwithmicrotubules,microtubuleproteinandtubulin.jmolbiol.1977apr15;111(3):329-42
非专利参考文献5:hoys,duhjs,jengjh,wangyj,liangyc,linch,tsengcj,yucf,chenrj,linjk.griseofulvinpotentiatesantitumorigenesiseffectsofnocodazolethroughinductionofapoptosisandg2/mcellcyclearrestinhumancolorectalcancercells.intjcancer.2001feb1;91(3):393-401
非专利参考文献6:sorrentinol,capassof,dirosam.anti-inflammatorypropertiesofgriseofulvin.agentsactions.1977mar;7(1):157-62
非专利参考文献7:sehgalvn,bikhchandanir,korannerv,nayarm,saxenahm.histopathologicalevaluationofgriseofulvintherapyinlichenplanus.adouble-blindcontrolledstudy.dermatologica.1980;161(1):22-7
非专利参考文献8:tamakik,osadaa,tsukamotok,ohtaken,furuem.treatmentofplasmacellcheilitiswithgriseofulvin.jamacaddermatol.1994may;30(5pt1):789-90
非专利参考文献9:tamakik,yasakan,osadaa,shibagakin,furuem.successfultreatmentofpigmentedpurpuricdermatosiswithgriseofulvin.brjdermatol.1995,jan;132(1):159-60
非专利参考文献10:cohena,goldmanj,danielsr,kanensonw.treatmentofshoulder-handsyndromewithgriseofulvin.jammedassoc.1960jun4;173:542-3
非专利参考文献11:petersenab,ronnestmh,larsen,to,clausenmh.thechemistryofgriseofulvin.chem.rev.2014dec;114:12088-12107。
发明概述
技术问题
本发明提供具有特定化学结构、具有抗炎活性、可用作预防和治疗炎性疾病的活性成分的化合物，其药理学上可接受的盐等，其新颖的制备方法和中间体。由于本发明的化合物或其药理学上可接受的盐在各种方面具有与已知抗炎药物的那些不同的性质，所述化合物或其盐被认为可用作新颖的药物。
问题的解决方案
本发明人为开发可用作用于预防和治疗炎性疾病的活性成分的化合物、其药理学上可接受的盐等进行了深入研究。结果，他们发现了本发明的化合物、其药理学上可接受的盐等。更具体地，本发明描述如下。
[1]
通式(1)的化合物或其药理学上可接受的盐
[式1]
其中该式中的符号定义如下：
r1：c1-c6烷基或羟基c1-c6烷基，
r2：c1-c6烷基，
a：具有键和具有1-4个选自氮原子、氧原子和硫原子的原子的5-元芳族杂环；或氧原子，和
r3：如果a是具有键和具有1-4个选自氮原子、氧原子和硫原子的原子的5-元芳族杂环，则r3是c1-c6烷基、羟基c1-c6烷基或c1-c6烷氧基c1-c6烷基；和如果a是氧原子，则r3是羟基c1-c6烷基或c1-c6烷氧基c1-c6烷基。
[2]
根据[1]的化合物或其药理学上可接受的盐，其中r1是甲基、乙基或羟基乙基。
[3]
根据[1]或[2]的化合物或其药理学上可接受的盐，其中r2是甲基。
[4]
根据[1]至[3]中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐，其中a是具有键和具有1-4个选自氮原子、氧原子和硫原子的原子的5-元芳族杂环；并且r3是甲基、乙基、羟基c1-c3烷基或甲氧基c1-c3烷基。
[5]
根据[1]至[4]中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐，其中a是选自下组的具有键的5-元芳族杂环：
[式2]
其中*表示键。
[6]
根据[1]至[3]中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐，其中a是氧原子。
[7]
通式(1)的化合物或其药理学上可接受的盐
[式3]
其中该式中的符号定义如下：
r1：甲基、乙基或羟基乙基，
r2：甲基，
a：选自下组的具有键的5-元芳族杂环：
[式4]
其中*表示键，
r3：甲基、乙基或羟基c1-c3烷基。
[8]
选自下组的化合物或其药理学上可接受的盐：
(2s,5'r)-7-氯-6-(2-羟基乙氧基)-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-6-(2-甲氧基乙氧基)-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(1-甲基吡唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-6-(1-乙基吡唑-3-基)-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-[(1s)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-[(1r)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-4-乙氧基-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-4-乙氧基-6-[5-[(1s)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-6-[3-(1-羟基乙基)-1,2,4-噁二唑-5-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮，和
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮。
[9]
药物组合物，其含有根据[1]至[8]中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐作为活性成分。
[10]
根据[9]的药物组合物，用于预防和/或治疗炎性疾病。
[11]
根据[10]的药物组合物，其中所述炎性疾病是选自以下的疾病：类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、支气管哮喘、喘息性支气管炎、弥漫性间质性肺炎、慢性阻塞性肺疾病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、急性肝炎、慢性肝炎、暴发性肝炎、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化、周围神经炎、强直性脊柱炎、湿疹（急性、亚急性、慢性）、接触性皮炎、日光性（紫外光）皮炎、放射性皮炎、特应性皮炎、脂溢性皮炎、寻常型银屑病、关节病型银屑病、红皮病型银屑病、脓疱性银屑病、扁平苔藓、红斑、酒渣鼻、荨麻疹、斑秃、天疱疮、红皮病、寻常痤疮、压疮、创伤、烧伤、结膜炎、角膜炎、巩膜炎、急/慢性中耳炎、常年性过敏性鼻炎、花粉热、鼻窦炎、喉炎、食道炎、顽固性口腔炎、舌炎、急/慢性唾液腺炎、口角唇炎、唇炎、白塞氏病、多发性硬化、i型糖尿病、ii型糖尿病、动脉粥样硬化、胰腺炎和慢性心衰。
[12]
根据[10]的药物组合物，其中所述炎性疾病是选自以下的疾病：类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、支气管哮喘、急性肝炎、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、强直性脊柱炎、接触性皮炎、日光性（紫外光）皮炎、特应性皮炎、脂溢性皮炎、寻常型银屑病、关节病型银屑病、红皮病型银屑病、脓疱性银屑病、扁平苔藓、红斑、酒渣鼻、斑秃、天疱疮、红皮病、寻常痤疮、压疮、创伤、烧伤、鼻窦炎、喉炎、食道炎、顽固性口腔炎、舌炎、急/慢性唾液腺炎、口角唇炎、唇炎和白塞氏病。
[13]
根据[10]的药物组合物，其中所述炎性疾病是选自以下的疾病：类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、强直性脊柱炎、特应性皮炎、寻常型银屑病、关节病型银屑病、红皮病型银屑病、脓疱性银屑病、扁平苔藓、压疮、创伤、顽固性口腔炎、舌炎和白塞氏病。
[14]
根据[1]至[8]中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐，用于治疗炎性疾病。
[15]
给予有效量的根据[9]的药物组合物以预防和/或治疗炎性疾病的方法。
[16]
tnf-α抑制剂，其含有根据[1]至[8]中任一项的化合物或其药理学上可接受的盐作为活性成分。
发明的有利效果
本发明的化合物、其药理学上可接受的盐等可用作用于预防和/或治疗炎性疾病的活性成分。所述炎性疾病的实例包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、支气管哮喘、喘息性支气管炎、弥漫性间质性肺炎、慢性阻塞性肺疾病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、急性肝炎、慢性肝炎、暴发性肝炎、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化、周围神经炎、强直性脊柱炎、湿疹（急性、亚急性、慢性）、接触性皮炎、日光性（紫外光）皮炎、放射性皮炎、特应性皮炎、脂溢性皮炎、寻常型银屑病、关节病型银屑病、红皮病型银屑病、脓疱性银屑病、扁平苔藓、红斑、酒渣鼻、荨麻疹、斑秃、天疱疮、红皮病、寻常痤疮、压疮、创伤、烧伤、结膜炎、角膜炎、巩膜炎、急/慢性中耳炎、常年性过敏性鼻炎、花粉热、鼻窦炎、喉炎、食道炎、顽固性口腔炎、舌炎、急/慢性唾液腺炎、口角唇炎、唇炎、白塞氏病、多发性硬化、i型糖尿病、ii型糖尿病、动脉粥样硬化、胰腺炎和慢性心衰。
其优选的实例包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、支气管哮喘、急性肝炎、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、强直性脊柱炎、接触性皮炎、日光性（紫外光）皮炎、特应性皮炎、脂溢性皮炎、寻常型银屑病、关节病型银屑病、红皮病型银屑病、脓疱性银屑病、扁平苔藓、红斑、酒渣鼻、斑秃、天疱疮、红皮病、寻常痤疮、压疮、创伤、烧伤、鼻窦炎、喉炎、食道炎、顽固性口腔炎、舌炎、急/慢性唾液腺炎、口角唇炎、唇炎和白塞氏病。
其更优选的实例包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、强直性脊柱炎、特应性皮炎、寻常型银屑病、关节病型银屑病、红皮病型银屑病、脓疱性银屑病、扁平苔藓、压疮、创伤、顽固性口腔炎、舌炎和白塞氏病。
本发明提供了用于制备本发明的化合物等的新颖和有效的方法和中间体。因此，本发明在制备药用药物中是有利的。
实施方案的描述
现在，将在下面更具体地描述本发明。
(取代基和术语的解释)
本发明涉及通式(1)的化合物或其药理学上可接受的盐
[式5]
其中该式中的符号定义如下：
r1：c1-c6烷基或羟基c1-c6烷基，
r2：c1-c6烷基，
a：具有键和具有1-4个选自氮原子、氧原子和硫原子的原子的5-元芳族杂环，或氧原子，
r3：如果a是具有键和具有1-4个选自氮原子、氧原子和硫原子的原子的5-元芳族杂环，则r3是c1-c6烷基、羟基c1-c6烷基或c1-c6烷氧基c1-c6烷基；并且如果a是氧原子，则r3是羟基c1-c6烷基或c1-c6烷氧基c1-c6烷基。
由r1表示的c1-c6烷基是具有1-6个碳原子的直链或支链烷基并且优选甲基或乙基。
由r1表示的羟基c1-c6烷基是被羟基取代的具有1-6个碳原子的直链或支链烷基并且优选羟基乙基。
由r2表示的c1-c6烷基是具有1-6个碳原子的直链或支链烷基并且优选甲基。
由r3表示的c1-c6烷基是具有1-6个碳原子的直链或支链烷基并且优选甲基或乙基。
由r3表示的羟基c1-c6烷基是被羟基取代的具有1-6个碳原子的直链或支链烷基并且优选羟基c1-c3烷基。其实例包括羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、1-羟基-1-甲基-乙基、1-羟基丙基和2-羟基丙基。
由r3表示的c1-c6烷氧基c1-c6烷基是被c1-c6烷氧基取代的具有1-6个碳原子的直链或支链烷基并且优选甲氧基c1-c3烷基。其实例包括甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、2-甲氧基乙基、1-甲氧基丙基和2-甲氧基丙基。
由a表示的5-元芳族杂环是含有1-4个选自氮原子、氧原子和硫原子的原子并且具有两个键的5-元芳族杂环。其实例包括下述5-元芳族杂环：
吡咯、吡唑、咪唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、四唑、呋喃、异噁唑、噁唑、1,2,4-噁二唑、1,3,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、噻吩、噻唑、异噻唑、1,2,4-噻二唑、1,3,4-噻二唑和1,2,5-噻二唑。
进一步优选包括下述5元环：
[式6]
其中*表示键。
所述5-元芳族杂环经由键各自形成下述用作通式(1)的化合物的化合物
[式7]
其中r1、r2和r3如上定义。
术语“其药理学上可接受的盐”是指可作为药用药物使用的盐。在具有酸性基团或碱性基团的化合物的情况下，如果碱或酸与所述基团反应，则可制备碱性盐或酸盐。由此获得的盐表示药理学上可接受的盐。
化合物的药理学上可接受的“碱性盐”的实例优选包括碱金属盐如钠盐、钾盐和锂盐；碱土金属盐如镁盐和钙盐；有机碱盐如n-甲基吗啉盐、三乙胺盐、三丁胺盐、二异丙基乙基胺盐、二环己基胺盐、n-甲基哌啶盐、吡啶盐、4-吡咯烷子基吡啶盐和甲基吡啶盐；以及氨基酸盐如甘氨酸盐、赖氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐和天冬氨酸盐。优选地，提及碱金属盐。
化合物的药理学上可接受的“酸盐”的优选实例包括无机酸盐，包括氢卤酸盐，如氢氟酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐和氢碘酸盐、硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐和磷酸盐；有机酸盐，包括：低级烷烃磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐和乙磺酸盐，芳基磺酸盐，如苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐、乙酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、酒石酸盐、草酸盐和马来酸盐；以及氨基酸盐，如甘氨酸盐、赖氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐和天冬氨酸盐。最优选地，提及氢卤酸盐（特别是盐酸盐）。
本发明的化合物或其药理学上可接受的盐当单独留在空气中或通过重结晶时有时吸收水或吸附水分或形成水合物。这些各种水合物、溶剂化物和多晶型化合物也包括在本发明中。
本发明的化合物、其药理学上可接受的盐或其溶剂化物可具有不同类型的异构体，包括几何异构体如顺式异构体和反式异构体，互变异构体，和光学异构体如d-型和l-型，这取决于取代基的类型和组合。然而，除非另有规定，所有异构体、立体异构体和任何混合比率的这些异构体和立体异构体的混合物都包括在本发明的化合物中。这些异构体的混合物可以通过本领域已知的分离手段分离。
作为本发明的化合物，还包括标记的化合物，更具体地，具有被同位素（例如，2h、3h、13c、14c、35s）替代的1个或2个或更多个原子的化合物。
在本发明中，还包括所谓的前药。术语前药是指具有通过水解或在生理条件下可转化为氨基、羟基或羧基的基团的化合物。所述参与形成这样的前药的基团在prog.med.,第5卷，第2157页至第2161页，1985中描述。更具体地，前药可如下所述。
如果存在氨基，可以提及例如具有酰化、烷基化或磷酸化的氨基的化合物（例如，具有二十烷酰化、丙氨酰化、戊基氨基羰基化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲氧羰基化、四氢呋喃化、吡咯烷基甲基化、特戊酰氧基甲基化或叔丁基化氨基的化合物）。
如果存在羟基，可以提及例如具有酰化、烷基化、磷酸化或硼酸化羟基的化合物（例如，具有乙酰化、棕榈酰化、丙酰化、特戊酰化、琥珀酰化、富马酰化、丙氨酰化或二甲基氨基甲基羰基化羟基的化合物）。
如果存在羧基，可以提及例如具有酯化或酰胺化羧基的化合物（例如，具有乙基酯化、苯基酯化、羧甲基酯化、二甲基氨基甲基酯化、特戊酰氧基甲基酯化、乙氧羰基氧基乙基酯化、酰胺化或甲基酰胺化的羰基的化合物）。
(制备方法)
现在，将描述制备方法。然而，用于制备化合物或其盐的方法不受下述方法的限制。
[方法a]
方法a是制备本发明的化合物(a-iii)的方法
[式8]
其中r1、r2和r3与上面的定义相同；并且x表示离去基团，如卤素基团。
(步骤a1)脱甲基化步骤
这是通过在碱和冠醚的存在下使用金属卤化物从化合物(a-i)获得化合物(a-ii)的步骤。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺和吡啶。
冠醚的实例包括18-冠-6醚。
金属卤化物的实例包括碘化钾。
作为溶剂，例如，可以提及n,n-二甲基甲酰胺或可以不使用溶剂。反应温度通常是约60至120℃并且反应时间通常是约1至24小时。
(步骤a2)烷基化步骤
(使用烷基卤化物的情况)
这是通过在碱的存在下使用相应的烷基化试剂从化合物(a-ii)获得化合物(a-iii)的步骤。
烷基化试剂的实例包括烷基卤化物如烷基碘化物和烷基溴化物和磺酸酯如甲苯磺酸烷基酯和甲磺酸烷基酯。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺和碳酸钾。
作为溶剂，可以提及四氢呋喃、1,4-二噁烷、乙腈、二氯甲烷和n,n-二甲基甲酰胺或这些的混合物。反应温度通常是约0至100℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
(使用mitsunobu反应的情况)
这是通过在膦和偶氮二甲酸酯或偶氮二甲酰胺(diazodicarboxamide)的存在下使用相应的醇从化合物(a-ii)获得化合物(a-iii)的步骤。
膦的实例包括三苯基膦和三正丁基膦。
偶氮二甲酸酯或偶氮二甲酰胺的实例包括偶氮二甲酸二乙酯、偶氮二甲酸二叔丁酯和1,1'-(偶氮基二羰基)二吡啶。
作为溶剂，可以提及四氢呋喃、1,4-二噁烷、甲苯或这些的混合物。反应温度通常是约0至100℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
[方法b]
方法b是制备化合物(b-iii)(等同于在方法a中使用的化合物(a-i))的方法。如果r1是甲基，可以制备化合物(b-iii)而不需要使用这些步骤。
[式9]
其中r1、r2和x与上面的定义相同。
(步骤b1)脱甲基化步骤
这是通过使用金属卤化物从化合物(b-i)获得化合物(b-ii)的步骤。
金属卤化物的实例包括碘化镁。
作为溶剂，可以提及甲苯、四氢呋喃、1,4-二噁烷或这些的混合物。
反应温度通常是约60至120℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
(步骤b2)苯酚烷基化步骤
这是以与(步骤a2)中相同的方式从化合物(b-ii)获得化合物(b-iii)的步骤。
[方法c]
方法c是从化合物(c-i)(等同于在方法a中使用的化合物(a-ii))制备本发明的化合物(c-iii)的方法。
[式10]
其中r1、r2、r3和a与上面的定义相同；tf表示三氟甲磺酰基；并且b*表示二羟硼基(-b(oh)2)或4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基。
(步骤c1)三氟甲磺酰化步骤
这是通过在碱的存在下使用三氟甲磺酰化试剂从化合物(c-i)获得化合物(c-ii)的步骤。
三氟甲磺酰化试剂的实例包括三氟甲磺酸酐、三氟甲磺酰氯和n-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)。
碱的实例包括三乙胺和二异丙基乙基胺。
作为溶剂，可以提及四氢呋喃、1,4-二噁烷、乙腈、二氯甲烷或这些的混合物。
反应温度通常是-20℃至约室温并且反应时间通常是约0.5至24小时。
(步骤c2)使用过渡金属催化剂的偶联反应的步骤
这是通过在碱的存在下使用钯催化剂和r3-a-b*从化合物(c-ii)获得化合物(c-iii)的步骤。
钯催化剂的实例包括四(三苯基膦)钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、乙酸钯、乙酰丙酮钯和双(三苯基膦)二氯化钯。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺、1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯(dbu)、1,5-二氮杂双环[4.3.0]-5-壬烯(dbn)、碳酸氢钾、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠、磷酸钾和磷酸钠。
作为溶剂，可以提及甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,4-二噁烷、水、n,n-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、甲苯或这些的混合物。
反应温度通常是约60至120℃并且反应时间通常是约0.5至12小时。
[方法d]
方法d是从化合物(d-i)(等同于在方法c中使用的化合物(c-ii))制备本发明的化合物(d-iv)的方法。
[式11]
其中r1、r2、r3和tf与上面的定义相同并且r4表示可具有取代基的苯基。
(步骤d1)与甲酸酯的偶联步骤
这是通过在碱和钯催化剂(膦配位体)的存在下使用甲酸酯从化合物(d-i)获得化合物(d-ii)的步骤。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾和氢氧化钠。
甲酸酯的实例包括甲酸苯酯和甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯。
钯催化剂的实例包括乙酸钯、乙酰丙酮钯、三氟乙酸钯、二氯化钯、三(二亚苄基丙酮)二钯或双(三苯基膦)二氯化钯。
要与钯催化剂同时使用的膦配位体的实例包括4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(xantphos)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁(dppf)、2,2'-双(二苯基膦基)-1,1-联萘(binap)、双(二苯基膦基)甲烷(dppm)、三苯基膦和1,2-双(二苯基膦基)乙烷(dppe)。
作为溶剂，可以提及n,n-二甲基甲酰胺、甲苯、四氢呋喃、乙腈或这些的混合物。
反应温度通常是约室温至120℃并且反应时间通常是约1至8小时。
(d2步骤)与酰肼的酰胺化步骤
这是通过在碱的存在下使用相应的酰肼从化合物(d-ii)获得化合物(d-iii)的步骤。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾和氢氧化钠。有时候有利地使用添加剂如n-羟基琥珀酰亚胺(hosu)、1-羟基苯并三唑(hobt)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(hoat)以使反应平稳地进行。
作为溶剂，可以提及n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈或这些的混合物。
反应温度通常是约0至60℃并且反应时间通常是约1至12小时。
(步骤d3)环化步骤
这是通过使用脱水剂从化合物(d-iii)获得化合物(d-iv)的步骤。
脱水剂的实例包括(甲氧羰基氨磺酰基)三乙基氢氧化铵内盐、磷酰氯、多磷酸、硫酸、三苯基膦/碘、甲苯磺酸盐和甲苯磺酰氯。
作为溶剂，可以提及甲苯、乙腈、二氯甲烷或这些溶剂的混合物。可以不使用溶剂。
反应温度通常是约0至100℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
[方法e]
方法e是从化合物(e-i)(等同于在方法d中使用的化合物(d-ii))制备本发明的化合物(e-iii)的方法。
[式12]
其中r1、r2、r3和r4与上面的定义相同。
(步骤e1)与偕胺肟的酰化步骤
这是通过在碱的存在下使用相应的偕胺肟从化合物(e-i)获得化合物(e-ii)的步骤。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾和氢氧化钠。有时候有利地使用添加剂如n-羟基琥珀酰亚胺(hosu)、1-羟基苯并三唑(hobt)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(hoat)以使反应平稳地进行。
作为溶剂，可以提及n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈或这些的混合物。
反应温度通常是约室温至80℃并且反应时间通常是约1至12小时。
(步骤e2)环化步骤
这是通过在室温或在加热下在溶剂中搅拌化合物(e-ii)获得化合物(e-iii)的步骤。
作为溶剂，可以提及甲苯、n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈或这些的混合物。
反应温度通常是约室温至100℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
[方法f]
方法f是从化合物(f-i)(等同于在方法c中使用的化合物(c-ii))制备本发明的化合物(f-v)的方法。
[式13]
其中r1、r2、r3和tf与上面的定义相同。
(步骤f1)使用过渡金属催化剂氰化的步骤
这是在氰化锌和钯催化剂的存在下和在存在或不存在膦的情况下从化合物(f-i)获得化合物(f-ii)的步骤。
钯催化剂的实例包括三(二亚苄基丙酮)二钯、双[三(叔丁基)膦]钯、四(三苯基膦)钯和双(三氟乙酰氧基)钯。
膦的实例包括三苯基膦、三(叔丁基)膦、三-邻-甲苯酰基膦、二苯基膦基二茂铁和二苯基膦基丁烷。作为溶剂，可以提及n-甲基-2-吡咯烷酮或n,n-二甲基甲酰胺或这些的混合物。
反应温度通常是约80至120℃并且反应时间通常是约1至8小时。
(步骤f2)添加羟胺的步骤
这是通过使用羟胺从化合物(f-ii)获得化合物(f-iii)的步骤。
作为溶剂，可以提及甲醇、乙醇、二甲亚砜、水或这些溶剂的混合物。
反应温度通常是约室温至100℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
(步骤f3)酰化肟的步骤
这是通过在缩合剂和碱的存在下使用相应的羧酸从化合物(f-iii)获得化合物(f-iv)的步骤。
缩合剂的实例包括o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n',n'-四甲基铑六氟磷酸盐(hatu)、4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(dmt-mm)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(wsc或edci)。
碱的实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺和二甲基氨基吡啶。
有时候有利地使用添加剂如n-羟基琥珀酰亚胺(hosu)、1-羟基苯并三唑(hobt)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(hoat)以使反应平稳地进行。
作为溶剂，可以提及乙醇、四氢呋喃、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲苯或这些溶剂的混合物。
反应温度通常是约室温至60℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
(步骤f4)环化步骤
这是通过在室温或在加热下在溶剂中搅拌化合物(f-iv)获得化合物(f-v)的步骤。
作为溶剂，可以提及甲苯、n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈或这些的混合物。
反应温度通常是约60至120℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
[方法g]
方法g是从化合物(g-1)制备本发明的化合物(g-iii)的方法。
[式14]
其中r1、r2、r3、a和x与上面的定义相同。
(步骤g1)脱甲基化步骤
这是以与(步骤b1)中相同的方式从化合物(g-i)获得化合物(g-ii)的步骤。
(步骤g2)烷基化步骤
这是以与(步骤a2)中相同的方式从化合物(g-ii)获得化合物(g-iii)的步骤。
[方法h]
方法h是通过去除r1'或r3'中含有的保护基以将其转化成r1或r3而从化合物(h-ii)制备本发明的化合物(h-i)的方法。
[式15]
其中r1、r2、r3和a与上面的定义相同；r1'和r3'表示受保护的r1和r3，例如，用保护基如四氢吡喃基和叔丁基二甲基甲硅烷基保护的羟基c1-c6烷基（如果r1是羟基c1-c6烷基的话）。
(h1步骤)脱保护步骤
(四氢吡喃基(thp)的情况)
这是通过使用酸从含有用四氢吡喃基保护的羟基的化合物(h-i)获得化合物(h-ii)的步骤。
酸的实例包括盐酸、硫酸、盐酸-甲醇、盐酸-1,4-二噁烷、盐酸-乙酸乙酯、乙酸、对甲苯磺酸和对甲苯磺酸吡啶鎓盐。
作为溶剂，可以提及甲醇、乙醇、四氢呋喃、水或这些的混合物。
反应温度通常是约0至80℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
(甲硅烷基的情况)
在该步骤中，甲硅烷基是指通常用作合成中的保护基的甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基和四丁基二甲基甲硅烷基。
这是通过使用脱甲硅烷基试剂从含有用甲硅烷基保护的羟基的化合物(h-i)获得化合物(h-ii)的步骤。
脱甲硅烷基试剂的实例包括酸和四丁基氟化铵(tbaf)、氟化氢和氟化氢吡啶。
酸的实例包括盐酸、硫酸、盐酸-甲醇、盐酸-1,4-二噁烷、盐酸-乙酸乙酯、乙酸、对甲苯磺酸和三氟乙酸。酸可以以催化量用于反应。
作为溶剂，可以提及甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、1,4-二噁烷、乙腈、水或这些的混合物。
反应温度通常是约0至60℃并且反应时间通常是约0.5至24小时。
通过上述方法制备的化合物可通过本领域已知的方法，如萃取、沉淀、蒸馏、色谱法、分步重结晶和重结晶来分离和纯化。
如果化合物或中间体具有不对称碳，它具有光学异构体。这些光学异构体可以通过常规方法如使用适当的盐重结晶的分级重结晶（盐分级分离）和柱色谱法来相互分离和纯化。对于从外消旋体中分级分离光学异构体的方法，参考文献:j.jacques等人,"enantiomers,racematesandresolution,johnwileyandsons,inc."。
(剂型)
作为给药途径，可以采用使用片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、粉末或液体的口服给药；或使用注射剂如关节内、静脉内或肌内注射剂、栓剂、滴眼剂、眼膏剂、透皮液体、软膏剂、透皮贴剂、透粘膜液体、透粘膜贴剂或吸入剂的胃肠外给药。
作为用于口服给药的固体组合物，使用例如片剂、粉末和颗粒。在这样的固体组合物中，一种或两种或更多种活性成分与至少一种类型的非活性赋形剂混合，所述非活性赋形剂如乳糖、甘露醇、右旋糖、羟丙基纤维素、微晶纤维素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和/或硅酸铝镁。在这种组合物中，可以根据常规方法添加非活性添加剂如润滑剂（例如硬脂酸镁）、崩解剂如羧甲基淀粉钠、稳定剂和/或增溶剂。如果必要的话，片剂或丸剂可以用糖、在胃中可溶的薄膜或肠溶膜包衣。
用于口服给药的液体组合物的实例包括药理学上可接受的乳液、溶液、混悬液、糖浆和酏剂。这种液体组合物含有通常使用的非活性稀释剂，如纯化水或乙醇。除了非活性稀释剂以外，液体组合物可以含有添加剂，例如增溶剂、润湿剂或助悬剂、甜味剂、香料、芳香物质或防腐剂。
用于胃肠外给药的注射剂的实例包括水性或非水性无菌溶液、混悬液和乳液。水性溶剂的实例包括用于注射的蒸馏水和生理盐水。非水溶剂的实例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油、醇如乙醇和聚山梨酯80。这种组合物还可以含有张度剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂或增溶剂。这样的组合物例如通过经由灭菌过滤器过滤、添加消毒剂或辐照来灭菌。或者，制备无菌固体组合物并在临使用前溶解或悬浮在注射用无菌水或无菌溶剂中，然后投入使用。
外用制剂的实例包括软膏、膏药（plaster）、乳膏、胶冻剂（jelly）、泥罨剂（cataplasm）、喷雾剂、洗剂、滴眼剂和眼膏。这样的外用制剂含有例如通常使用的软膏基质、洗液基质、水或非水溶液、混悬液或乳液。软膏或洗剂基质的实例包括聚乙二醇、丙二醇、白凡士林、蜂蜡、聚氧乙烯氢化蓖麻油、单硬脂酸甘油酯、硬脂醇、鲸蜡醇、聚桂醇和倍半油酸山梨坦。
作为吸入和透粘膜剂如经鼻剂，使用固体、液体或半固体组合物，并且可以通过本领域已知的方法制备。这种药剂可以适当地含有，例如，本领域已知的赋形剂，以及ph调节剂、防腐剂、表面活性剂、润滑剂、稳定剂或增稠剂。可以使用适当的吸入或吹入装置来给药；更具体地，使用本领域已知的装置，例如计量剂量吸入装置或喷雾器。（本发明）的化合物可单独给药或以粉末形式作为组合物给药，或以溶液或混悬液的形式与药学上可接受的载体组合使用。诸如干粉吸入器之类的吸入器可用于单次给药或多次给药。可以使用干粉或含粉末的胶囊。可替代地，吸入器可以是使用适当的推进剂，即合适的气体如氯氟烷烃、氢氟烷烃或二氧化碳的加压气雾剂喷雾器。
(剂量)
在口服给药的情况下，合适的剂量/天/重量通常是约0.001-100mg/kg，优选0.1-30mg/kg，并且更优选0.1-10mg/kg。这以单剂量或以两个或更多个剂量给药。在静脉内给药的情况下，合适的剂量/天/重量是约0.0001-10mg/kg，并以单剂量/天或以多个剂量给药。在透粘膜剂的情况下，剂量/重量是约0.001-100mg/kg，所述剂量以单剂量或以多个剂量给药。考虑个体的症状、年龄和性别，适当地和单独地确定剂量。
(组合使用)
在本发明中，本发明的化合物可与预期对疾病有影响的各种类型的治疗剂或预防剂组合使用。组合使用的药剂可以以期望的时间间隔同时或顺序或间歇地给药。要同时给药的制剂可以是组合药物或单独的药物。
(制剂实施例1)粉末状药物
将本发明的化合物(5g)、乳糖(895g)和玉米淀粉(100g)在搅拌机中混合以获得粉末状药物。
(制剂实施例2)颗粒剂
将本发明的化合物(5g)、乳糖(865g)和低取代的羟丙基纤维素(100g)混合，然后向其中加入羟丙基纤维素(300g)的10%水溶液并将混合物捏制、通过挤出造粒机造粒并干燥以获得颗粒。
(制剂实施例3)片剂
将本发明的化合物(5g)、乳糖(90g)、玉米淀粉(34g)、结晶纤维素(20g)和硬脂酸镁(1g)在搅拌机中混合并通过压片机压缩成片以获得片剂。
本发明的化合物或其药理学上可接受的盐的药理活性通过下述测试来检查。
(测试实施例)tnf-α抑制率的测定
将测试物质悬浮在0.5%（w/v）甲基纤维素中，并以100mg/kg的剂量口服给予小鼠。一小时后，腹膜内给予脂多糖（lps，sigma-aldrich，l2630（商标名））（0.4mg/kg）以诱导炎症。给药lps后小时，在异氟醚麻醉下从腔静脉取血，置于含血清分离剂的管中，室温下静置20-30分钟，并在4℃在12,000rpm离心5分钟以获得血清。然后，通过根据试剂盒的方案使用小鼠tnf-α酶联免疫吸附测定试剂盒(invitrogen,kmc3011c(商标名))或小鼠tnf-α免疫测定试剂盒(perkinelmer,al505(商标名))测量血清中的tnf-α的量。用试剂盒中含有的稀释溶液将血清稀释10倍并投入使用。
根据下述表达式计算测试物质的tnf-α抑制率（%）。
tnf-α抑制率(%)=[(对照组的tnf-α量)-(测试物质给药组的tnf-α量)]×100/(对照组的tnf-α量)。
[表1]
实施例
现在，将通过实施例和测试实施例更具体地描述本发明。然而，本发明不受这些限制。
在下述实施例中，通过使用四甲基硅烷作为标准物质来获得核磁共振（以下称为1hnmr）谱，化学位移值用δ值（ppm）表示。在分裂模式中，单峰由s表示，双重峰由d表示，三重峰由t表示，四重峰由q表示，多重峰由m表示且宽峰由br表示。
(实施例1)
(2s,5'r)-7-氯-6-(2-羟基乙氧基)-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(1a)
(2s,5'r)-7-氯-6-羟基-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将(+)-灰黄霉素(cas编号:126-07-8,产品编码:g0384(由tokyokaseikogyoco.,ltd.生产))(50g)、碘化钾(23.5g)和18-冠-6-醚(41.2g)溶解于吡啶(500ml)中，在120℃搅拌9小时并在室温静置过夜。
将反应混合物浓缩。向其中加入4%碳酸氢钠水溶液。将反应混合物用乙酸乙酯洗涤两次。将水层用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:二氯甲烷/乙醇=99/1(v/v)]以获得粗产物(19.4g)。
向粗产物中加入乙酸乙酯以使其固化。将混合物过滤以获得标题化合物(15.2g(产率:32%))，为白色固体。
(1b)
(2s,5'r)-7-氯-6-(2-羟基乙氧基)-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例1(1a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-6-羟基-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.1g)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中。向其中加入2-溴乙醇(0.0738g)和碳酸钾(0.102g)并在100℃搅拌6小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:乙酸乙酯]以获得标题化合物(38mg(产率:34%))，为淡黄色固体。
(实施例2)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-6-(2-甲氧基乙氧基)-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例1(1a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-6-羟基-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(30mg)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(1ml)中。向其中加入2-溴乙基甲基醚(136mg)和碳酸钾(135mg)。将反应混合物在80℃搅拌6小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:乙酸乙酯]以获得标题化合物(20mg(产率:57%))，为白色固体。
(实施例3)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(1-甲基吡唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(3a)
三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯
将实施例1(1a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-6-羟基-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(20g)溶解于二氯甲烷(300ml)中。向其中加入n-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)(25.3g)和三乙胺(20.6ml)。将反应溶液在室温静置过夜。
将反应溶液用二氯甲烷稀释。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=8/2-3/7(v/v)]以获得标题化合物(23.5g(产率:85%))，为白色固体。
(3b)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(1-甲基吡唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例3(3a)的化合物三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯(76mg)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(1.6ml)中。在室温向其中加入1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.0403g)、碳酸钾(0.0669g)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)二氯甲烷添加物(0.0131g)。将混合物在80℃搅拌3小时。
在反应混合物的温度回至室温后，将反应混合物用乙酸乙酯稀释并过滤掉不溶物质。将滤液倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(27mg(产率:42%))，为白色固体。
(实施例4)
(2s,5'r)-7-氯-6-(1-乙基吡唑-3-基)-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例3(3a)的化合物三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯(0.5g)溶解于甲苯(10ml)中。向其中加入1-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(0.283g)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(ii)(0.167g)和碳酸氢钠的饱和水溶液(5ml)。将反应混合物在90℃搅拌2小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(266mg(产率:60%))，为白色固体。
(实施例5)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(5a)
(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯
将实施例3(3a)的化合物三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯(20g)溶解于甲苯(200ml)中。向其中加入乙酸钯(ii)(0.477g)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(2.46g)和n,n-二异丙基乙基胺(14.8ml)。将反应混合物加热至80℃。
将甲酸2,4,6-三氯苯酯(12.5g)分成三部分，将其以30分钟的间隔加入到反应混合物中。
在将反应混合物在80℃搅拌30分钟后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=7/3-3/7(v/v)]以获得标题化合物(19.5g(产率:84%))，为白色固体。
(5b)
(2s,5'r)-n'-乙酰基-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼
将实施例5(5a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(35g)溶解于二氯甲烷(400ml)中。向其中加入3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(8.72g)、乙酰肼(纯度:90%,7.12g)、4-二甲基氨基吡啶(0.783g)和三乙胺(26.8ml)。将反应溶液在室温静置过夜。
将反应溶液用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(23.4g(产率:86%))，为白色固体。
(5c)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例5(5b)的化合物(2s,5'r)-n'-乙酰基-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼(0.25g)溶解于甲苯(5ml)和无水1,4-二噁烷(5ml)中。向其中加入(甲氧羰基氨磺酰基)三乙基氢氧化铵内盐(0.169g)。将反应混合物在60℃搅拌1小时。
向反应混合物中加入水。将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(49mg(产率:20%))，为白色固体。
(实施例6)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(6a)
(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸[(z)-1-氨基乙叉基氨基]酯
将实施例5(5a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(3g)溶解于二氯甲烷(50ml)中。向其中加入n'-羟基乙脒(0.488g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.748g)、4-二甲基氨基吡啶(0.0671g)和三乙胺(2.28ml)。将反应溶液在室温静置过夜。
将反应溶液用乙酸乙酯稀释并将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=80/20-0/100(v/v)]以获得标题化合物(2.32g(产率:定量))，为白色固体。
(6b)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例6(6a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸[(z)-1-氨基乙叉基氨基]酯(0.95g)溶解于甲苯(20ml)中。将反应溶液在110℃搅拌6小时并浓缩。将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=8/2-3/7(v/v)]并用正己烷和乙酸乙酯研磨以获得标题化合物(756mg(产率:83%))，为白色固体。
(实施例7)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(7a)
(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲腈
将实施例3(3a)的化合物三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯(1g)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中。向其中加入四(三苯基膦)钯(0)(0.245g)和氰化锌(0.499g)。将反应混合物在90℃搅拌5小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=8/2-3/7(v/v)]以获得标题化合物(540mg(产率:73%))，为淡黄色固体。
(7b)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例7(7a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲腈(0.54g)溶解于乙醇(10ml)中。向其中加入50%羟胺溶液(0.19ml)。将反应溶液在90℃搅拌6小时。
将反应溶液浓缩并与甲苯共沸蒸馏两次。将残余物溶解于二氯甲烷(20ml)中。向其中加入乙酸(0.0891ml)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.299g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.0424g)和三乙胺(0.652ml)。将反应溶液在室温搅拌5小时。
将反应溶液用二氯甲烷稀释并将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法粗略地纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]。将所得粗产物悬浮于甲苯(5ml)中并将混悬溶液在100℃搅拌7小时。
向反应混合物中加入水，将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=7/3-2/8(v/v)]以获得标题化合物(34mg(产率:5.4%,3步))，为白色固体。
(实施例8)
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(8a)
(2s,5'r)-7-氯-n'-(2-羟基-2-甲基-丙酰基)-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼
将实施例5(5a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(0.5g)溶解于二氯甲烷(10ml)中。向其中加入2-羟基-2-甲基丙酰肼(0.162g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.125g)、4-二甲基氨基吡啶(0.0224g)和三乙胺(0.639ml)。将反应混合物在室温静置过夜。
将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(415mg(产率:97%))，为白色固体。
(8b)
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例8(8a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-n'-(2-羟基-2-甲基-丙酰基)-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼(0.415g)溶解于二氯甲烷(5ml)中。向其中加入三乙胺(0.62ml)和对-甲苯磺酰氯(0.254g)。将反应混合物在室温搅拌2小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(141mg(产率:35%))，为白色固体。
(实施例9)
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-[(1s)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(9a)
(2s)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰肼
将(2s)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酸甲酯(cas登记号:153829-63-1,j.org.chem.1991,56,1088-1093)(2.2g)溶解于乙醇(8ml)中。向其中加入一水合肼(1.8g)。将反应混合物在室温静置过夜。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(1.6g(产率:73%))，为白色固体。
(9b)
(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-n'-[(2s)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰基]螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼
将实施例5(5a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(0.5g)溶解于二氯甲烷(10ml)中。向其中加入实施例9(9a)的化合物(2s)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰肼(0.258g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.125g)、4-二甲基氨基吡啶(0.0112g)和n,n-二异丙基乙基胺(0.478ml)。将反应混合物在室温静置过夜。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(490mg(产率:定量))，为白色固体。
(9c)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[5-[(1s)-1-四氢吡喃-2-基氧基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例9(9b)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-n'-[(2s)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰基]螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼(0.49g)溶解于二氯甲烷(5ml)中。向其中加入三乙胺(0.637ml)和对-甲苯磺酰氯(0.209g)。将反应混合物在室温搅拌3小时。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(452mg(产率:95%))，为白色固体。
(9d)
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-[(1s)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例9(9c)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[5-[(1s)-1-四氢吡喃-2-基氧基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.452g)溶解于乙醇(4ml)中。向其中加入水(1ml)和对-甲苯磺酸一水合物(0.0828g)。将反应混合物在50℃搅拌1小时。
将反应混合物倒入水中并向其中加入1mol/l盐酸。将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/1-1/19(v/v)]以获得标题化合物(119mg(产率:31%))，为白色固体。
(实施例10)
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-[(1r)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(10a)
(2r)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰肼
将(2r)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酸甲酯(cas登记号:124508-74-3,tetrahedron,2012,68,2068-2073)(1.6g)溶解于乙醇(8ml)中。向其中加入一水合肼(1.2ml)。将反应混合物在90℃搅拌4小时。
在将反应混合物在室温静置过夜后，将混合物在90℃搅拌10小时。将混合物进一步在室温静置过夜，然后在90℃搅拌10小时。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/1-1/9(v/v)]以获得标题化合物(1g(产率:62%))，为白色固体。
(10b)
(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-n'-[(2r)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰基]螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼
将实施例5(5a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(0.5g)溶解于二氯甲烷(10ml)中。向其中加入实施例10(10a)的化合物(2r)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰肼(0.19g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.124g)、4-二甲基氨基吡啶(0.0112g)和n,n-二异丙基乙基胺(0.478ml)。将反应混合物在室温静置过夜。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(460mg(产率:94%))，为白色固体。
(10c)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[5-[(1r)-1-四氢吡喃-2-基氧基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例10(10b)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-n'-[(2r)-2-四氢吡喃-2-基氧基丙酰基]螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼(0.46g)溶解于二氯甲烷(5ml)中。向其中加入三乙胺(0.598ml)和对-甲苯磺酰氯(0.196g)。将反应混合物在室温搅拌2小时。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(315mg(产率:71%))，为白色固体。
(10d)
(2s,5'r)-7-氯-6-[5-[(1r)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例10(10c)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[5-[(1r)-1-四氢吡喃-2-基氧基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.315g)溶解于乙醇(4ml)中。向其中加入水(1ml)和对-甲苯磺酸一水合物(0.0577g)。将反应混合物在50℃搅拌1小时。
将反应混合物倒入水中并向其中加入1mol/l盐酸。将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/19(v/v)]以获得标题化合物(112mg(产率:42%))，为白色固体。
(实施例11)
(2s,5'r)-7-氯-4-乙氧基-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(11a)
(2s,5'r)-7-氯-4-羟基-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将镁片(0.41g)加入至乙醚(60ml)中，将碘(3.9g)分成三部分，将其以20分钟的间隔加入。将反应混合物在室温搅拌1小时，然后，向其中加入实施例8(8b)的化合物(2s,5'r)-7-氯-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(6.3g)和甲苯(150ml)。将反应混合物在90℃搅拌7小时。
向反应混合物中加入水。将混合物用1mol/l盐酸中和，然后，通过加入饱和碳酸氢钠水溶液使得呈略微碱性。反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用1mol/l盐酸和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(2.7g(产率:44%))，为白色固体。
(11b)
(2s,5'r)-7-氯-4-乙氧基-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例11(11a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-4-羟基-6-[5-(1-羟基-1-甲基-乙基)-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.3g)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(4ml)中。向其中加入碳酸钾(0.191g)和碘乙烷(0.0827ml)。将反应混合物在80℃搅拌2小时。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=6/4-1/9(v/v)]以获得标题化合物(42mg(产率:13%))，为白色固体。
(实施例12)
(2s,5'r)-7-氯-4-乙氧基-6-[5-[(1s)-1-羟基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-3'-甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将镁片(0.073g)加入至乙醚(20ml)中并向其中加入少量的碘(0.70g)。将反应混合物在室温搅拌10分钟。进一步地，将碘(0.70g)分成三部分，将其以20分钟的间隔加入。在将反应混合物在室温搅拌30分钟后，向其中加入甲苯(50ml)、实施例9(9c)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[5-[(1s)-1-四氢吡喃-2-基氧基乙基]-1,3,4-噁二唑-2-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(1.3g)。将反应混合物在80℃搅拌8小时。
向反应混合物中加入水。将混合物用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。
将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物溶解于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中。向其中加入碳酸钾(1.36g)和碘乙烷(0.485ml)。将反应混合物在80℃搅拌1小时。将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=7/3-2/8(v/v)]。将得到的固体用正己烷和乙酸乙酯研磨以获得标题化合物(122mg(产率:13%))，为白色固体。
(实施例13)
(2s,5'r)-7-氯-6-[3-(1-羟基乙基)-1,2,4-噁二唑-5-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(13a)
2-四氢吡喃-2-基氧基丙腈
将2-羟基丙腈(5.0g)溶解于二氯甲烷(150ml)中。向其中加入3,4-二氢-2h-吡喃(7.7g)和对-甲苯磺酸一水合物(1.3g)。将反应溶液在室温搅拌14小时。向反应溶液中加入三乙胺，然后，将溶剂在减压下蒸馏除去。将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=97/3-7/3(v/v)]以获得标题化合物，更具体地，2种类型的非对映异构体(分别是5.7g(产率:52%)和2.5g(产率:23%))，为淡黄色固体。
(13b)
n'-羟基-2-四氢吡喃-2-基氧基-丙脒
将在实施例13(13a)中获得的非对映异构体之一2-四氢吡喃-2-基氧基丙腈(5.6g)溶解于乙醇(36ml)中。向其中加入50%羟胺溶液(4.3ml)。将反应混合物加热至80℃并搅拌5小时。在反应混合物的温度回至室温后，将溶剂在减压下蒸馏除去。将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=10/1-1/0(v/v)]以获得标题化合物(5.0g(产率:74%))，为淡黄色固体。
(13c)
(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸[(z)-(1-氨基-2-四氢吡喃-2-基氧基-丙叉基)氨基]酯
将实施例5(5a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(0.5g)溶解于二氯甲烷(10ml)中。向其中加入实施例13(13b)的化合物n'-羟基-2-四氢吡喃-2-基氧基-丙脒(0.207g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.125g)、4-二甲基氨基吡啶(0.0112g)和n,n-二异丙基乙基胺(0.478ml)。将反应混合物在室温搅拌5小时。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(410mg(产率:83%))，为白色固体。
(13d)
(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[3-(1-四氢吡喃-2-基氧基乙基)-1,2,4-噁二唑-5-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例13(13c)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1',4-二甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸[(z)-(1-氨基-2-四氢吡喃-2-基氧基-丙叉基)氨基]酯(0.41g)溶解于甲苯(5ml)中。将反应混合物在110℃搅拌7小时。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-1/9(v/v)]以获得标题化合物(375mg(产率:95%))，为白色固体。
(13e)
(2s,5'r)-7-氯-6-[3-(1-羟基乙基)-1,2,4-噁二唑-5-基]-3',4-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例13(13d)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-[3-(1-四氢吡喃-2-基氧基乙基)-1,2,4-噁二唑-5-基]螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.375g)溶解于乙醇(4ml)中。向其中加入对-甲苯磺酸一水合物(0.0687g)和水(1ml)。将反应混合物在室温搅拌8小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(195mg(产率:62%))，为白色固体。
(实施例14)
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(14a)
(2s,5'r)-7-氯-4-羟基-3',6-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将镁片(1.03g)加入至乙醚(50ml)中并将碘(8.63g)历经1小时一点点地加入至其中。在将反应混合物在室温搅拌30分钟后，向其中加入甲苯(100ml)和(+)-灰黄霉素(10g)。将反应混合物在80℃搅拌3小时。
向反应混合物中加入水。将混合物用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(7.8g(产率:81%))，为白色固体。
(14b)
(2s,5'r)-7-氯-3',6-二甲氧基-5'-甲基-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例14(14a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-4-羟基-3',6-二甲氧基-5'-甲基-螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(5.1g)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(60ml)中。向其中加入2-(2-溴乙氧基)四氢-2h-吡喃(3.8g)和碳酸钾(6.2g)。将反应混合物在80℃搅拌7小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=8/2-3/7(v/v)]以获得标题化合物(6.9g(产率:98%))，为白色固体。
(14c)
(2s,5'r)-7-氯-6-羟基-3'-甲氧基-5'-甲基-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例14(14b)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3',6-二甲氧基-5'-甲基-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(6.9g)溶解于吡啶(70ml)中。向其中加入18-冠-6-醚(4.3g)和碘化钾(2.5g)。将反应混合物在120℃搅拌8小时。
将反应溶液浓缩，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(3.8g(产率:57%))，为白色固体。
(14d)
三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯
将实施例14(14c)的化合物(2s,5'r)-7-氯-6-羟基-3'-甲氧基-5'-甲基-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(3.8g)溶解于二氯甲烷(40ml)中。向其中加入三乙胺(2.9ml)和n-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)(3.6g)。将反应混合物在室温静置过夜。
将反应溶液用二氯甲烷稀释。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=8/2-4/6(v/v)]以获得标题化合物(3.2g(产率:65%))，为白色固体。
(14e)
(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯
将实施例14(14d)的化合物三氟甲磺酸[(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-基]酯(1g)溶解于甲苯(200ml)中。向其中加入乙酸钯(ii)(0.0192g)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(0.0989g)和n,n-二异丙基乙基胺(0.596ml)。将反应混合物加热至80℃。
将甲酸2,4,6-三氯苯酯(0.501g)分成三部分，将其以10分钟的间隔加入。将反应混合物在80℃搅拌30分钟，然后，使混合物的温度回至室温。将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=8/2-4/6(v/v)]以获得标题化合物(850mg(产率:75%))，为白色固体。
(14f)
(2s,5'r)-n'-乙酰基-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼
将实施例14(14e)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(0.4g)溶解于二氯甲烷(20ml)中。向其中加入乙酰肼(纯度:90%,0.0673g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.0824g)、4-二甲基氨基吡啶(0.0148g)和三乙胺(0.254ml)。将反应混合物在室温静置过夜。
将反应混合物倒入水中，用1mol/l盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(280mg(产率:86%))，为白色固体。
(14g)
(2s,5'r)-7-氯-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例14(14f)的化合物(2s,5'r)-n'-乙酰基-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酰肼(0.28g)溶解于二氯甲烷(5ml)中。向其中加入对-甲苯磺酰氯(0.149g)和三乙胺(0.364ml)。将反应混合物在室温搅拌3小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(202mg(产率:75%))，为白色固体。
(14h)
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例14(14g)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.202g)溶解于乙醇(2ml)中。向其中加入对-甲苯磺酸一水合物(0.037g)和水(5ml)。将反应混合物在50℃搅拌2小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(39mg(产率:23%))，为白色固体。
(实施例15)
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(15a)
(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸[(z)-1-氨基乙叉基氨基]酯
将实施例14(14e)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸(2,4,6-三氯苯基)酯(0.45g)溶解于二氯甲烷(10ml)中。向其中加入n'-羟基乙脒(0.0758g)、3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.0928g)、4-二甲基氨基吡啶(0.00833g)和三乙胺(0.285ml)。将反应混合物在室温静置过夜。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(345mg(产率:94%))，为白色固体。
(15b)
(2s,5'r)-7-氯-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例15(15a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-1'-甲氧基-5'-甲基-3,3'-二氧代-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,6'-环己烯]-6-甲酸[(z)-1-氨基乙叉基氨基]酯(0.345g)悬浮于甲苯(5ml)中。将反应混合物在100℃搅拌5小时。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:正己烷/乙酸乙酯=1/1-0/1(v/v)]以获得标题化合物(283mg(产率:85%))，为白色固体。
(15c)
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例15(15b)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)-4-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙氧基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(0.283g)溶解于乙醇(2ml)中。向其中加入对-甲苯磺酸一水合物(0.0518g)和水(5ml)。将反应混合物在50℃搅拌3小时。
将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:甲醇/乙酸乙酯=0/10-1/9(v/v)]以获得标题化合物(128mg(产率:54%))，为白色固体。
(实施例16)
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
(16a)
(2s,5'r)-7-氯-4-羟基-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将实施例7(7b)的化合物(2s,5'r)-7-氯-3',4-二甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(2.3g)溶解在甲苯(20ml)和乙醚(40ml)的溶剂混合物中。向其中加入碘化镁(1.52g)。将反应混合物在80℃搅拌5小时。向反应混合物中加入水。将反应混合物用4n盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去并将所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化[洗脱溶剂:石油醚/乙酸乙酯=1/1(v/v)]以获得标题化合物(1.7g(产率:64%))，为黄色固体。
(16b)
(2s,5'r)-7-氯-4-(2-羟基乙氧基)-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮
将氯化钯(0.45mg)溶解于水(2ml)中。向其中加入四丁基溴化铵(10.3mg)和碳酸钾(4.42mg)。将反应混合物在60℃搅拌15分钟。向混合物中加入实施例16(16a)的化合物(2s,5'r)-7-氯-4-羟基-3'-甲氧基-5'-甲基-6-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)螺[苯并呋喃-2,4'-环己-2-烯]-1',3-二酮(50mg)和环氧乙烷(28.1mg)。将混合物在60℃搅拌12小时。
将反应混合物倒入水中并用二氯甲烷萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。将溶剂在减压下蒸馏除去。将所得残余物通过薄层色谱法纯化[展开剂:乙酸乙酯]以获得标题化合物(16mg(产率:29%))，为黄色固体。
在下述表中，共同地展示实施例中所述的化合物的结构式及其物理化学数据。
[表2]
[表3]
[表4]
[表5]
[表6]
[表7]
[表8]
[表9]
[表10]