本发明涉及农药学与有机化学领域，具体地，涉及一种含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物及其制备方法和应用。
背景技术：
：灰霉菌是能够引起番茄、草莓、葡萄黄瓜等多种重要农产品作物腐烂、减产严重的真菌病害之一。其腐生性强，寄主范围广，不同寄主植物之间的灰霉病菌可相互致病。它可以通过侵染果实、幼苗及贮藏器官等方式引起灰霉病。有数据表明，在我国因灰霉病导致的农作物减产可达20％～50％。目前化学防治依然是控制灰霉病菌侵染农作物宿主的主要手段。在新时期已经商品化或者正在研发的杀菌剂中，杂环化合物受到了人们越来越多的关注。含有噻吩环结构的化合物是一类具有良好的生物和药理活性的杂环化合物，它有着和苯环类似芳香性的五元杂环，在设计和合成药物中经常被作为苯环的电子等排体在对药物的结构改造中被引入。许多天然噻吩类杂环化合物是临床上常用药物，其中噻吩衍生物在抗生素方面的应用较多，带有噻吩环的抗生素比苯基同系物具有更好的疗效，令人感兴趣的是近年来发现噻吩衍生物在治疗肿瘤疾病等方面有着新的药理用途。鉴于其结构的独特性和良好的生物药理活性，采用活性基团拼接法将噻吩基团引入到农药分子骨架结构中，是新农药合成的重要手段。然而，这类杀菌剂因长期使用而产生了严重的抗性问题。因此，开发结构新颖、减量增效的杀菌剂对灰霉病菌的防治具有重要意义。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物，该含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物可作为高效低毒的杀菌剂，对灰霉菌有良好的防治效果。本发明的目的之二在于提供上述化合物的制备方法。本发明的目的之三在于提供上述化合物的应用。为了实现上述目的，一方面，本发明提供一种含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物，该化合物具有式(ⅰ)所示的结构，第二方面，本发明提供一种含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物的制备方法，以4-(5-噻吩基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯甲基磷酸二乙酯为原料，经wittig-hornor反应、酯水解、酰胺化反应制得含二苯乙烯基的琥珀酸脱氢酶抑制剂化合物。该方法具体包括以下步骤：第三方面，本发明提供一种本发明所得的含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物以及由本发明的含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物的制备方法制备得到的含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物在防治灰霉菌中的应用。与现有技术相比，本发明具有如下优点和有益效果：本发明合成了一种含噻吩环二苯乙烯酰胺杀菌剂。研究结果表明：该杀菌剂高效低毒，对灰霉菌有良好的防治效果。附图说明图1为含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物的核磁共振氢谱(a)和碳谱图(b)。图2为含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物的高分辨质谱图。图3为含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物对灰霉病菌的体内防治效率，其中(a)：空白对照；(b)：代森锰锌；(c)：化合物ⅰ。具体实施方式下面结合附图，对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。实施例1(e)-4-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑)苯乙烯基)苯甲酸甲酯的制备将1.13g(3.0mmol)4-(5-噻吩基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯甲基磷酸二乙酯和3.0mmol对甲酰基苯甲酸甲酯溶于20mln,n-二甲基甲酰胺(dmf)中，室温反应半小时后，缓慢滴加10ml含0.41g(3.6mmol)叔丁醇钾(t-buok)的乙醇溶液，室温继续反应6小时；在混合物中加20ml蒸馏水冷却过滤洗涤，红外干燥，粗产物用二甲基亚砜(dmso)/水混合溶剂重结晶，得淡黄色固体(e)-4-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑)苯乙烯基)苯甲酸甲酯，收率79％。实施例2(e)-4-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑)苯乙烯基)苯甲酸的制备将3mmol(e)-4-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑)苯乙烯基)苯甲酸甲酯加入40ml1m氢氧化钠水溶液中，80℃搅拌回流。反应完全后加入10ml的1m盐酸水溶液，反应体系用乙酸乙酯萃取两次，将所得的有机层经无水na2so4干燥后减压得黄色固体(e)-4-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑)苯乙烯基)苯甲酸，收率75.4％。meltingpoint(mp)，333-335℃；1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ12.91(s，cooh，1h)，8.07(d，j＝8.0hz，th-h，2h)，7.96(d，j＝7.5hz，ph-h，4h)，7.85(d，j＝8.1hz，ph-h，2h)，7.75(d，j＝8.0hz，ph-h，2h)，7.48(s，ch＝ch，2h)，7.32(t，j＝4.3hz，th-h，1h)；13cnmr(101mhz，dmso-d6)δ167.46，163.76，160.78，141.38，140.65，132.12，131.00，130.45，130.29，130.24，130.18，129.20，128.05，127.49，127.27，124.76，122.67；hrms(esi)，m/zcalcdforc21h15n2o3s[m+h]+375.0798；found，375.0793。实施例3(e)-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯乙烯基)苯甲酰基)-l-缬氨酸的制备将0.374g(1mmol)(e)-4-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑)苯乙烯基)苯甲酸溶于15mldmf中，依次加入0.135g(1mmol)1-羟基苯并三唑(hobt)、0.192g(1mmol)1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(edci)室温反应2小时后加入1mmoll-缬氨酸，常温搅拌5-7小时。反应结束后加入30ml蒸馏水，抽滤，用0.5m盐酸溶液/甲醇洗涤。粗产物用无水乙醇/二甲基亚砜(dmso)混合溶剂重结晶，得黄色固体(e)-(4-(2-噻吩基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯乙烯基)苯甲酰基)-l-缬氨酸，收率70.5％％。meltingpoint(mp)，215-217℃；1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ12.59(s，cooh,1h)，8.42(d，j＝8.1hz，conh，1h)，8.10(d，j＝8.0hz，th-h，2h)，8.00–7.94(m，ph-h，4h)，7.88(d，j＝8.1hz，ph-h，2h)，7.76(d，j＝8.0hz，ph-h，2h)，7.50(s，ch＝ch，2h)，7.34(t，j＝4.3hz，th-h，1h)，4.33(t，j＝7.5hz，ch，1h)，2.23(h，j＝6.9hz，ch，1h)，1.00(t，j＝7.3hz，ch3，6h)；13cnmr(101mhz，dmso-d6)δ173.60，166.85，140.83，139.94，133.85，132.14，131.02，130.51，129.46，129.22，128.62，127.97，127.51，126.97，124.77，122.54，58.88，30.02，19.81，19.32；hrms(esi)，m/zcalcdforc26h23nan3o4s[m+na]+496.1301；found，496.1308。另外，实施例3所制备的含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物的核磁表征如图1，高分辨质谱如图2。实施例4本实施例用于说明对照药剂(代森锰锌)、本发明所制备的含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物ⅰ对灰霉菌的体外抑制活性。本实施例中的试验靶标为灰霉菌。实验方法：在土豆葡萄糖琼脂培养基(成分为酶400ml培养基含土豆80g，葡萄糖8g，琼脂7g)中分别加入一定量的待测药液，以得到各个药剂浓度分别为200、100、50、25、12.5、6.25μg/ml。将直径为5mm的菌饼接种于该固体培养基上。25℃恒温培养5天后根据每浓度的抑制率计算ec50值。每处理重复三次。表1序号抑制率(％，200μg/ml)ec50(μg/ml)ⅰ63.4139.4代森锰锌69.1137.4从表1所示的结果可以得知，本发明的化合物ⅰ对灰霉菌菌具有与阳性对照代森锰锌相当的杀菌活性。实施例5本实施例用于测定实施例3制得的化合物ⅰ的体内杀菌活性。本实施例中的试验靶标为灰霉菌(botrytiscinerea)。实验方法：按照《农药生物活性测定标准操作规范(sop)》,含噻吩环二苯乙烯酰胺化合物配制成乳油(以下简称ec),利用以下试验方法(活体测定)评价这些化合物在400mg/l剂量下该试验靶标的杀菌活性。选择两个长势一致的西红柿，冲洗干净后，用75酒精喷雾处理后，将药剂均匀喷洒于西红柿表面，晾干。用打孔器在西红柿赤道线打出直径为5mm深度为4mm的孔，将100μl的被测菌种孢子悬浮液注入孔中。将西红柿置于温度为25℃，湿度为95％的培养箱中，培养5天。待对照充分发病后用卡尺计量每个接种点病灶直径，计算防治效果。实施例3以及阳性对照代森锰锌对该试验靶标普筛结果如下表2所示。表2序号浓度(mg/l)对灰霉菌的防治效果(％)ⅰ40057.8％代森锰锌40055.8％试验结果如图3，结合图3和表2可以看出，在400mg/l浓度下，本发明的化合物对灰霉菌有优于阳性对照的防治效果，对灰霉菌的防治效果达到57.8％，为通过进一步结构优化发现更高活性的化合物奠定了良好的基础。以上详细描述了本发明的优选实施方式。本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。当前第1页12