本发明属于药物化学和药理学领域，涉及一种甲酰胺类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
：癌症的发病与危害世界卫生组织(who)预测21世纪恶性肿瘤将成为人类的“第一杀手”，故癌症控制已成为全球性的卫生战略重点。我国虽是发展中国家，但疾病谱已发生转变，中国已成为世界第一癌症大国，癌症不仅严重威胁着我国人民的生命与健康，而且给家庭、社会、国家造成了沉重的负担，干扰着我国经济建设和社会发展，是一个非常突出的社会公共卫生问题。而且，随着乡镇工业化、居住城市化、人口老龄化进程的加速、环境污染、不良生活习惯与不合理生活方式的普遍存在，多数癌症还将呈上升趋势，尤其是肺癌、肝癌、肠癌急剧上升，值得高度重视。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mtor)是一种非典型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，属于磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide3-kinase，pi3k)相关激酶家族成员，是细胞内合成和分解代谢等细胞功能的主要信号传递分子。mtor信号通路与营养、能量状态和生长因子有着密切的关系。它调节包括自体吞噬、蛋白、脂类、溶酶体合成和能量代谢、细胞骨架组建、细胞存活等多个细胞过程。在哺乳动物细胞外周营养条件不断变化下，mtor调控着合成和降解代谢的转换，从而使得细胞在不同的营养条件下能够生长和存活。由于mtor在细胞中的重要作用，异常或失调的mtor信号传递能导致人类疾病的发生(例如癌症等疾病)。因此mtor信号通路逐渐成为设计抗癌药物的一个重要靶点。本发明通过化学合成手段获得新型结构的甲酰胺类衍生物，并且通过药理实验确定此化合物的抗肿瘤活性。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种新型结构的甲酰胺类衍生物式(ⅰ)，其结构为其中，r1选自h、oh或者ch3，r2选自h、oh或者ch3，r3选自h、oh或者ch3，r4选自h、oh或者ch3。进一步地，所述甲酰胺类衍生物式(ⅰ)所表示的一些具体的优选结构如下：本发明的另一目的在于提供一种甲酰胺类衍生物式(ⅰ)及其药学可接受的盐作为mtor激酶抑制剂在预防和/或治疗疾病中的应用。本发明的另一目的在于提供一种甲酰胺类衍生物式(ⅰ)及其药学可接受的盐在治疗癌症中的应用。进一步地，所述癌症为肝癌、肺癌、神经胶质瘤、胃癌、卵巢癌、乳腺癌。本发明的化合物可以以游离的形式，或者在适当情况下以药学上可接受的盐或其它衍生物的形式用于治疗。本文所用术语“药学上可接受的盐”是指这样一些从医学角度上判断可用的盐，当其与人类和低等动物的细胞组织相接触时，不会产生过度毒性，刺激性，及过敏反应等，并且当其用于治疗时，具有合理的利益/风险比。在本领域中，诸如胺，羧酸，膦酸，和某些类型的化合物等药学上可接受的盐的制备方法是众所周知的。本发明中化合物的盐可以在该化合物的分离和纯化中制成，也可以单独使本发明的化合物与合适的游离碱或酸反应而成。药学上可接受的无毒的酸加成盐氨基与无机酸或有机酸所形成的氨基其它药学上可接受的盐包括己二酸盐，藻酸盐，抗坏血酸盐，天冬氨酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，柠檬酸盐，环戊烷，二葡糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，甲酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐，葡萄糖酸盐，半硫酸盐，氢碘酸盐，2-羟基乙磺酸盐，乳糖酸盐，乳酸盐，月桂酸盐，月桂基硫酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，丙二酸盐，甲烷磺酸盐，2-萘磺酸盐，烟酸盐，硝酸盐，油酸盐，草酸盐，棕榈酸盐，双羟萘酸盐，果胶酸盐，过硫酸盐，过3-苯基丙酸盐，磷酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸盐，硬脂酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，对甲苯磺酸盐，十一烷酸盐，戊烷基磺酸盐和芳基磺酸盐形成的胺基阳离子。本发明试验例部分采用mtor蛋白酶的活性用检测试剂盒体外检测本发明化合物的mtor激酶的抑制活性，并且用mtt法测定本发明化合物对肝癌、肺癌、神经胶质瘤、胃癌、卵巢癌、乳腺癌6种人癌细胞进行体外增殖实验证实本发明化合物具有抗肿瘤活性。本发明的另一目的在于提供一种新型结构的甲酰胺类衍生物式(ⅰ)，其合成路线为：其中，r1选自h、oh或者ch3，r2选自h、oh或者ch3，r3选自h、oh或者ch3，r4选自h、oh或者ch3。本发明的另一目的在于提供一种新型结构的甲酰胺类衍生物式(ⅰ)的合成步骤为：1)以甲苯为溶剂，将合适当量的pd(pph3)4加入到含有2-氯-5-三氟甲基烟酸乙酯，2-呋喃基硼酸和无机碱的甲苯溶液中，于高温下加热2小时。经后处理得到2-(2-呋喃基)-5-三氟甲基烟酸乙酯；2)将pto2加入到步骤1)得到的2-(2-呋喃基)-5-三氟甲基烟酸乙酯的etoh溶液中，使用parr摇动器在一定压力下氢化混合物1小时，然后经后续处理得到2-(2-呋喃基)-5-三氟甲基哌啶-3-羧酸乙酯；3)低温下，将草酰氯加入到溶解在ch2cl2中的5-溴吡啶甲酰氯的溶液中，加入催化量的dmf，将反应在室温下搅拌2小时，然后加入合成步骤2)得到的2-(2-呋喃基)-5-三氟甲基哌啶-3-羧酸乙酯和et3n，经后续处理纯化后，得到1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酸乙酯；4)在0℃下用氢化铝锂溶液还原合成步骤3)得到的中间产物，再加入到在h2o中的cro3的淤浆中，得甲酸类衍生物，然后再将其与4-甲基-3-三氟甲基苯胺和三乙胺的二氯甲烷溶液进行反应，缓慢加入1-正丙基磷酸酐t3p，并于室温下搅拌1.5小时，经后续处理纯化后，得到1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺；5)以pdnps为催化剂，将合成步骤4)得到的1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺与取代的异喹啉硼酸和碳酸钾在反应瓶中发生反应，将混合物在空气气氛下于60℃剧烈搅拌10分钟，经后续处理得到相对应的甲酰胺衍生物。进一步地，所述步骤1)中pd(pph3)4的物质的量范围可以是2-5mmol，优选2.6mmol。进一步地，所述步骤1)中的无机碱可以是氢氧化钠，碳酸钾，碳酸钠，氢氧化钾，碳酸氢钠，碳酸铯，氢氧化锂，优选碳酸钾。进一步地，所述步骤2)中parr摇动器的压力范围为30-60psi，优选40-45psi。进一步地，所述步骤3)中的低温是指0-10℃，优选0℃。具体实施方式实施例1：2-(呋喃-2-基)-1-(5-(异喹啉-4-基)吡啶甲酰基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺的合成1-12-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)烟酸乙酯的合成将pd(pph3)4(3.0g，2.60mmol)加入到含有2-氯-5-三氟甲基烟酸乙酯(2.5g，9.86mmol)，2-呋喃基硼酸(2.10g，18.77mmol)和k2co3(5.5g，39.80mmol)的甲苯(200ml)溶液中，并将反应混合物在100℃下加热2小时。将反应混合物冷却至室温后，将溶剂在减压下移除，加入30ml水搅拌5分钟。所得水层用乙酸乙酯萃取，将合并的有机层用无水硫酸钠干燥后，通过硅藻土过滤，硅藻土塞用etoac洗涤，然后减压浓缩。通过自动快速色谱柱法(sio2，10％至100％梯度的etoac-己烷)纯化残余物，真空50℃干燥，得到2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)烟酸乙酯，2.56g，产率91％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:1.30(t,3h),4.29(t,2h),6.98(t,1h),7.59(d,1h),8.07(d,1h),8.62(s,1h),8.88(s,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:14.68,61.22,106.67,110.99,124.92,127.33,129.39,135.39,143.63,146.88,148.69,150.27,167.28.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:286[m+h]。1-22-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-羧酸乙酯的合成将pto2(800mg，3.52mmol)加入到合成步骤1-1得到的2-(2-呋喃基)-5-三氟甲基烟酸乙酯(2.56g，8.98mmol)的etoh(60ml)溶液中。使用parr摇动器在40-45psi氢化混合物1小时。然后将反应混合物通过硅藻土过滤，硅藻土塞用etoh洗涤，并将滤液减压浓缩。将残余物用ch2cl2稀释并用饱和nahco3溶液洗涤。通过快速色谱柱(sio2，0-20％meoh/ch2cl2)纯化，得到所需产物2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-羧酸乙酯，2.22g，产率85％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:1.22(t,3h),1.87(m,1h),1.91(s,1h),2.36-2.72(m,4h),3.52(t,1h),4.21(q,2h),4.50(d,1h),6.35-6.45(m,2h),7.56(d,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:14.68,25.88,34.50,42.23,43.92,55.24,61.74,109.88,112.59,129.43,142.40,159.25,173.81.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:292[m+h]。1-31-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酸乙酯的合成在室温下，在反应烧瓶中将草酰氯(3.2ml，30.25mmol)加入到溶解在ch2cl2(20ml)中的5-溴吡啶甲酰氯(3.79g，17.19mmol)的溶液中，然后加入催化量的dmf。将反应在室温下搅拌2小时。在真空下将溶剂和多余的草酰氯移除，残余物在高真空下干燥20分钟。将得到的酰氯溶于无水ch2cl2(20ml)中并冷却至0℃，然后加入合成步骤1-2得到的2-(2-呋喃基)-5-三氟甲基哌啶-3-羧酸乙酯(2.22g，7.62mmol)和et3n(8.6ml，62.04mmol)。将混合物升温至室温并搅拌过夜。反应混合物用ch2cl2稀释，再加入水后，得到分层的溶液。水层用ch2cl2萃取，将合并的有机层用无水mgso4干燥并减压浓缩，通过快速色谱柱(sio2，10-35％的etoac/己烷)纯化，得到3.59g1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酸乙酯，产率为99％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:1.22(t,3h),2.59-2.83(m,2h),3.49(t,1h),3.71(m,1h),3.96(t,1h),4.21(q,2h),5.24(d,1h),6.35-6.45(m,2h),7.56(d,1h),8.30(d,1h),8.73-8.78(m,2h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:14.68,26.96,35.94,40.42,46.09,54.31,61.74,111.54,112.59,119.57,120.26,129.94,139.19,142.40,146.01,153.47,155.08,167.74,173.51.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:476[m+h]。1-41-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺的合成①在0℃下将氢化铝锂溶液(在thf中2.0mol/l，8.2ml，16.4mmol)加入到合成步骤1-3得到的1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酸乙酯(3.59g，7.54mmol)的thf(100ml)溶液中，将所得溶液在0℃下搅拌2小时直到反应完全。逐滴加入15％naoh水溶液(625μl)以淬灭反应，再加625μl的h2o。向浑浊的胶体混合物中再加入1.85ml的水，并将混合物在室温下搅拌1小时。然后将混合物通过硅藻土塞过滤，并将滤液减压浓缩。通过快速色谱柱(sio2，33-67％的etoac/己烷)纯化，得到3.04g黄色粉末状的(5-溴吡啶-2-基)(2-(呋喃-2-基)-3-(羟甲基)-5-(三氟甲基)哌啶-1-基)甲酮，产率为93％。②在室温下，将溶解在乙酸(65ml)中的来自合成步骤①的(5-溴吡啶-2-基)(2-(呋喃-2-基)-3-(羟甲基)-5-(三氟甲基)哌啶-1-基)甲酮(3.04g，7.01mmol)的溶液加入到在h2o(16ml)中的cro3(2.61g，26.10mmol)淤浆中。将所得混合物在室温下搅拌90分钟直到反应完全。然后将反应混合物通过硅藻土塞过滤，并将滤液减压浓缩。通过快速色谱柱(sio2，3-10％的ch2cl2：meoh，然后再经过50-67％的etoac/己烷)纯化，得到干燥的2.19g类白色粉末状产品1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酸，产率为70％。③将4-甲基-3-三氟甲基苯胺(1.62g，9.25mmol)加入上述制备的酸(2.19g，4.91mmol)和三乙胺(1.56g，15.42mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中。然后缓慢加入1-正丙基磷酸酐t3p(95.5mg，30.38mmol)，并将该溶液在室温下搅拌1.5小时。用ch2cl2(5ml)稀释反应混合物，依次用1mol/l的hcl水溶液、饱和nahco3水溶液洗涤。将有机层分离，用无水mgso4干燥，减压浓缩。通过快速色谱柱(sio2，5-40％的etoac/己烷)进行纯化，得到2.17g白色固体1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺，产率为73％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:2.29(s,3h),2.41(m,1h),2.49(m,1h),2.75(m,1h),3.53(m,1h),3.97-4.14(m,2h),4.74(d,1h),6.36-6.45(m,2h),7.07(d,1h),7.48(d,1h),7.56(d,1h),7.98(s,1h),8.30(d,1h),8.62(s,1h),8.73-8.78(m,2h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:19.65,24.98,35.94,40.69,46.09,52.70,111.54,112.59,118.31,119.57,120.26,124.63,125.42,129.94,130.86,131.19,133.54,135.14,139.19,142.40,146.01,153.47,155.08,167.74,173.69.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:605[m+h]。1-52-(呋喃-2-基)-1-(5-(异喹啉-4-基)吡啶甲酰基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺的合成将合成步骤1-4得到的1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺(2.17g，3.58mmol)溶于96ml的h2o:etoh(1:1)的混合溶剂中。将4-异喹啉基硼酸(0.26g，2.32mmol)和碳酸钾(0.29g，2.10mmol)加入到该混合物中。然后加入pdnps催化剂(0.4mmol％pd)，并将混合物在空气气氛下于60℃剧烈搅拌10分钟。将反应混合物加入到0.2mol/l氢氧化钠溶液(15ml)中并用乙酸乙酯(20ml)萃取两遍。将有机层合并，并在空气中干燥，得到亮黄色固体产物2-(呋喃-2-基)-1-(5-(异喹啉-4-基)吡啶甲酰基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺，2.15g，产率为92％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:1.89(t,1h),2.39(t,1h),2.50(s,3h),2.94(m,1h),3.55(m,1h),3.86(m,2h),5.20(d,1h),6.35(d,2h),7.35-7.50(m,4h),7.71-7.99(m,5h),8.91(d,1h),8.96(t,1h),9.13(d,1h).3c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:20.82,28.87,46.27,47.26,50.64,63.7,109.78,111.05,116.11,120.09,123.51,123.65,124.53,126.97,127.04,127.23,127.95,128.36,128.38,128.53,128.96,131.91,133.04,137.16,137.29,137.61,137.93,139.67,143.02,146.15,148.16,165.34,173.04.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:653[m+h]。实施例2：2-(呋喃-2-基)-1-(5-(8-羟基-异喹啉-4-基)吡啶甲酰基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺的合成将合成实施例1步骤1-4得到的1-(5-溴吡啶酰基)-2-(呋喃-2-基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺(2.17g，3.58mmol)溶于96ml的h2o:etoh(1:1)的混合溶剂中。将8-羟基-异喹啉-4-硼酸(3.94mmol)和碳酸钾(0.29g，2.10mmol)加入到该混合物中。然后加入pdnps催化剂(0.4mmol％pd)，并将混合物在空气气氛下于60℃剧烈搅拌10分钟。将反应混合物加入到0.2mol/l氢氧化钠溶液(15ml)中并用乙酸乙酯(20ml)萃取两遍。将有机层合并，并在空气中干燥，得到亮黄色固体产物2-(呋喃-2-基)-1-(5-(8-羟基-异喹啉-4-基)吡啶甲酰基)-n-(4-甲基-3-(三氟甲基)苯基)-5-(三氟甲基)哌啶-3-甲酰胺，2.08g，产率为87％。lc-ms(esi,pos,ion)m/z:669[m+h]。试验例1：体外mtor激酶活性试验mtor蛋白酶的活性用检测试剂盒(invitrogen)来检测。其试验原理为：把mtor激酶、荧光素标记的底物和atp混合，在发生反应后，加入edta和铽标记的第一抗体。在mtor激酶化学反应过程中，抗体识别发生了磷酸化并由荧光素标记的底物后，增强了“时间分辨荧光共振能量转移”(tr-fret)效应。tr-fret效应是通过受体荧光素信号与供体铽信号的比率来计算的。结合在示踪物上的抗体的量与反应后磷酸化的底物的量成正比例关系，通过这种方式，激酶的活性可以被检测到。在此试验中，mtor激酶的底物是与绿色荧光蛋白相连的4e结合蛋白1(gfp-4ebp1)。一、溶液和试剂准备1、1×检测用缓冲储存液：50mm4-羟乙基哌嗪乙磺酸(hepes)ph7.5，1mm乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸(egta)，0.01％tween-20，10mmmncl2，1mm1,4二硫代苏糖醇(dtt)。2、底物工作溶液：4ml2.5×底物(1000个反应)：3.8ml1×检测液，191μlgfp-4e-bp1(invitrogen，20.96μm储存液)，10μlatp(10mm)。最终浓度：0.4μmgfp-4e-bp1；10matp。3、mtor工作溶液：4ml2.5×mtor(invitrogen，1000个反应)：4ml。4、1×检测液；7.5μlmtor(0.4mg/ml储存液)，最终浓度为0.3μg/ml。5、检测工作液：10ml2×检测缓冲液(1000个反应)：9.6mltr-fret稀释液，11.5μltb-anti-p4e-bp1抗体(stock3.49μm)，400μledta(储存液500mm)，最终浓度:2nmtb-anti-p4e-bp1抗体，10mmedta。二、试验步骤：1、加入50μl浓度为100μm用dmso稀释的本发明化合物到38孔稀释板中。2、用dmso以1:3的比例来稀释化合物(10个稀释度外加一个零浓度)。3、把2.5μl稀释的化合物转入到相对应的孔(内含47.5μl检测液/每孔)，摇晃几秒钟。4、把4μlmtor工作液加入到384孔黑色proxi板中。5、把2μl稀释的化合物加入到检测板中(每个浓度有3个复孔)。6、在室温下孵育15分钟。7、加入4μl底物工作溶液。8、最终mtor反应浓度:0.3μg/mlmtor，0.4μmgfp-4e-bp1，10μmatp。用1％dmso稀释化合物至浓度为：1μm，0.33μm，0.11μm，0.037μm，0.0123μm，0.00411μm，0.00137μm，0.000457μm，0.000152μm，0.000051μm，0μm。9、在室温下孵育30分钟。10、加入10μl检测液，最终工作浓度：tb-anti-p4e-bp1抗体2nm，edta10mm。11、在室温下孵育30分钟。12、用envision-2104读板机检测tr-fret的读值。激发光是340nm，发射光1是495nm的，发射光2是520nm。比率＝520nm/495nm是tr-fret值13、数据分析及50％抑制率的计算(ic50)：用非线性回归方程来计算50％抑制率：y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logic50-x)*hillslope))，x：化合物的浓度(以10为底的对数)，y：tr-fret值(520nm对495nm的比率)，顶部和底部：相同高峰值作为y(plateausinsameunitsasy)，50％抑制率(logic50)：相同对数值作为x(samelogunitsasx)。三、实验结果本发明化合物对mtor激酶的抑制活性，见下表。化合物ic50(nm)a＜10b＜10c＜10g＜10h＜10i＜10由上表可知，表中所列出的化合物对mtor激酶的抑制活性的ic50均＜10nm，说明本发明化合物可以作为mtor激酶抑制剂进行更加深入的研发。试验例2：mtt法测定本发明化合物对不同癌细胞的抑制作用。一、细胞株人肺癌细胞a549，人肝癌细胞bel-7402，人神经胶质细胞瘤细胞u251，人胃腺癌细胞sgc-7901，人卵巢腺癌细胞sk-ov-3，人乳腺癌细胞mcf-7。二、实验分组：待测药物组(参见实验步骤部分)；对照组(与药物试验组相比，加入浓度梯度的待测药物改为加入不含药物的rpmi1640细胞培养液)；空白组(与对照组相比，不加细胞)。三、实验步骤：1.取对数生长期的细胞，胰蛋白酶消化，rpmi1640细胞培养液调细胞悬液浓度为6×104个/ml。在96孔培养板中每孔加细胞悬液100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养24h，细胞贴壁。2.移走rpmi1640细胞培养液，加入浓度梯度的待测药物的rpmi1640细胞培养液100μl，每个浓度设6个平行孔。将加药后的96孔板置于37℃，5％co2培养箱中培养48h，倒置显微镜下观察药物的作用效果。3.96孔板离心后弃去培养液，小心用pbs冲2～3遍后，再加入含0.5％mtt的rpmi1640细胞培养液100μl，继续培养4h。4.移走上清，每孔加入150μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使formazan结晶充分溶解。5.在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的光密度(od值)。6.平行孔od值以mean±sd表示，计算抑制率公式：[(od对照组-od空白组)-(od药物实验组-od空白组)]/(od对照组-od空白组)*100％。7.采用graphpadprism5数据处理软件，通过绘制量效曲线计算半数抑制浓度(ic50)。四、实验结果表1本发明化合物对6种人癌细胞ic50值由上表可知，表中所列出的化合物具有很好的体外癌细胞抑制活性，而且有部分化合物对一些人癌细胞的ic50值＜1μg/ml但在表中只以＜10μg/ml表示。本发明化合物体外对不同癌细胞的抑制试验说明本发明化合物具有癌细胞生长抑制作用，可以作为抗癌备选药物进行更加深入广泛的药理药效乃至药剂学研究。当前第1页12