本发明涉及医药领域，具体涉及一类低极性稀有人参皂苷的制备方法。
背景技术：
癌症是残害人类生命的世界第二大疾病，死亡率仅次于心脑血管疾病，是人类死亡的最主要因素之一。由世卫组织组织下属的的官方癌症机构国际癌症研究中心(iarc)负责的最新版《世界癌症报告》预测，全球癌症病例将呈现迅猛增殖态势，由2012年的1400万人，逐年迅增至2025年的1900万人，到2035年将达到2400万人。报告还显示，2012年全球新增癌症病例有近一半出现在亚洲，其中大部分在中国，中国新增癌症病例高居首位。2012年中国新增307万癌症患者并造成约220万人死亡，分別占全球总量的21.9％和26.8％。世卫的数据略低于中国自己的统计。全国肿瘤登记中心发布的2012年数据显示，中国每年新增癌症病例约350万，约有250万人因此死亡。
现今癌症的常用治疗方法主要有三种模式：手术、放疗和药物治疗，而选定哪个治疗方法则取决于肿瘤的位置、恶性程度、发展程度以及病人身体状态。三种模式中，手术的治疗方法，常因为癌细胞入侵蔓延到邻近组织或远端转移而效果有限；放疗的治疗方法，则受限于对体内其他正常组织造成的伤害；药物的治疗方法，对于晚期弥散性和转移性恶性肿瘤是最基本的治疗方法。过去的几十年里，着眼于直接杀伤肿瘤细胞的化疗虽有明显的发展和进步，成为肿瘤药物治疗的中坚，但这一治疗模式对增殖缓慢的实体瘤效果差、药物选择性小、毒副反应多且严重的缺陷成为临床治疗中的重要限制因素。继手术、放疗和化疗之后的第四种模式是肿瘤的生物治疗，其主要是通过肿瘤宿主防御机制或生物制剂的作用来调节机体自身的生物学反应，从而抑制或消除肿瘤；生物治疗虽然没有太大毒副作用，但由于技术要求严、工艺复杂，因此价格高，众多癌症患者及家属难以承受，影响其在癌症治疗领域的普及。
由于存在上述各种限制，天然抗肿瘤药物的研发取得了越来越多的关注。天然抗癌药物无论是在抑制或杀伤肿瘤细胞、调整机体免疫功能、改善症状与特征和减轻放化疗毒副作用上，还是在肿瘤的病后调理上，均具有重要作用。由此，天然植物新疗法将成为继手术、放疗、化疗和生物疗法之后的第五种模式。
五加科(araliaceae)人参属(pana×)植物，如人参(p.ginseng)、西洋参(p.quenquefolinus)、三七(p.notoginseng)、竹节参(p.uaponicus)，葫芦科绞股蓝属植物绞股蓝(gynostemmaoentaphyllumthrunbmak)等均为中国名贵的传统药用植物，其主要有效成分为达玛烷型四环三萜人参皂苷系列化合物。目前已发现五加科植物中的原型人参皂苷有60多种，可分为两大类：1)二醇组人参皂苷(ra、rb1、rb2、rb3、rc、rd等)；2)三醇组人参皂苷(re、rf、rg1、rg2、rh1等)，皆由甙元和糖组成，通常易溶于水，其疗效主要包括：免疫调节功能、改善微循环作用、调节消化机能、增强记忆和学习能力、抗衰老、安神等，但并没有表现出明显的抗肿瘤活性。
低极性稀有人参皂苷在原人参属植物中含量甚微，只存在于野山参，或者红参、黑参和熟三七等炮制的人参和三七产品中，也仅为万分之几，且难溶于水，通常只溶解在乙醇或乙酸乙酯等低极性有机溶剂中，被称为低极性稀有人参皂苷，主要包括原型人参皂苷通过糖苷键降解而产生的次级代谢衍生物(c-k、rg3、rh2、rh1、appd、appt等)和侧链同时脱糖脱水形成的具有多双键结构的转化衍生物(rg5、rk1、rh3、rk2、δ(20-21)ppd、δ(20-22)ppd、rh4、rk3、f4、rg6、δ(20-21)ppt、δ(20-22)ppt等)。低极性稀有人参皂苷除了具有普通原型人参皂苷原有的生物活性之外，还表现出原型皂苷不具有的抗肿瘤、抗病毒等全新的药物活性，具有极高的药用价值和应用前景。
长谷川秀夫(日本公开特许8-291194)报道的制备方法为:酸水解天然或3位羟基游离的人参皂苷，水解产物经常规和色谱分离后可获得δ(20-22)ppt和δ(20-22)ppd单品。酸水解人参皂苷的主要产物为侧链环化的人参三醇和人参二醇，δ(20-22)ppt和δ(20-22)ppd仅是微量副产物，因而，该专利所提供的制备δ(20-22)ppt和δ(20-22)ppd方法定向转化率低，产物收率低、分离纯化难度高，不适应工业生产。·
中国专利cn1249076c、cn1249077c和cn1269835c都报道了新的化合物：1、3β，6α，12β-三羟-20(21)，24(25)-二烯-达玛烷[dammar-3β，6α，12β-trihydro×yl-20(21)，24(25)-diene，简称δ(20-21)ppt。δ(20-21)ppt是δ(20-22)ppt构型异构体，具有δ(20-22)ppt类似的生物活性；及2、:3β，12β-二羟-20(21)，24(25)-二烯-达玛烧[dammar-3β,12β-dihydroxyl-20(21),24(25)-diene,简称δ(20-21)ppd]。δ(20-21)ppd是δ(20-22)ppd构型异构体，具有δ(20-22)ppd类似的生物活性，上述这几种化合物需要利用价格昂贵的原人参三醇组原料或单体原料人参皂苷f1生产制备，或是需要利用价格昂贵的原人参二醇组原料或单体原料人参皂苷c-k生产制备，均是工业化批量制备成本高，不能有效解决δ(20-22)ppt和δ(20-22)ppd的供给短缺的矛盾。截止目前为止，国内外市场上仍然没有一家企业可以同时大规模地制造高含量(>30-90％)的稀有代谢人参皂苷和稀有转化人参皂苷，其中包括抗癌活性较高的δ(20-21)ppt、δ(20-22)ppt、δ(20-21)ppd和δ(20-22)ppd。因此，研究上述两种低极性稀有人参皂苷的制备方法，对发现活性更强的成分和研制抗肿瘤新药将具有重要的意义。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供了包含有稀有人参皂苷准单体化合物δppd和准单体化合物δppt的制备方法，在此基础上，本发明还分别提供了稀有人参皂苷单体准单体化合物δppd和准单体化合物δppt的纯化制备方法。
本发明第一方面提供了上述稀有人参皂苷的制备方法，其包括：在含有低极性稀有人参皂苷的热解五加科植物茎叶提取物中依次加入正丙醇，金属钠，过氧化苯甲酰，并通氧气，并把反应液加热反应制得，其中，所述含有低极性稀有人参皂苷的热解五加科植物优选自野山参、红参、黑参、西洋参和三七；
在一优选例中，所述加热反应在四口瓶中进行，所述四口瓶装有温度计、氧气通入管、顶上连有密封橡胶管，冷凝管，所述橡胶管另一端连接漏斗，所述漏斗浸入装有液体石蜡的烧杯，
在一优选例中，加入正丙醇之后搅拌10分钟，
在一优选例中，加入金属钠，反应至无氢气放出，
在一优选例中，所述加热反应为86℃反应24小时，
在一优选例中，所述加热反应结束后，将反应液冷却到室温，然后水洗反应液，将反应液的正丙醇层减压抽干后用水溶解，然后用正己烷萃取低极性物质，再然后用乙酸乙酯萃取，蒸干乙酸乙酯部分得到稀有人参皂苷。
在一优选例中，将制得的所述稀有人参皂苷加入乙酸乙酯溶液超声，再加入的正己烷摇匀静置后过滤，过滤得到滤渣再加入的乙酸乙酯超声后，加入的正己烷摇匀静置后过滤，合并滤液并浓缩；
在一优选例中，所述加入乙酸乙酯溶液超声30min。
本发明的第二方面还提供了稀有人参皂苷准单体化合物δppd和准单体化合物δppt的纯化方法，其包括：取硅胶加入第一乙酸乙酯和正己烷溶剂搅匀装柱，所述第一乙酸乙酯和正己烷溶剂中乙酸乙酯正己烷的体积比为1:2，将所述合并滤液得到的浓缩液和硅胶拌样，并将拌样后的硅胶研细后装柱，先用所述第一乙酸乙酯和正己烷溶液冲洗3个保留体积，第2和第3保留体积收集准单体化合物δppd，再用第二乙酸乙酯和正己烷溶液1:1冲3个保留体积，一共冲洗6个保留体积，所述第二乙酸乙酯和正己烷溶剂中乙酸乙酯正己烷的体积比为1:1，第5和第6保留体积收集准单体化合物δppt；
在一优选例中，硅胶为200-300目，
在一优选例中，装柱后的硅胶柱规格长20cm宽4cm，
在一优选例中，所述装柱后的层析柱保留体积为200ml。
在本发明第一方面和第二方面的一优选例中，所述含有低极性稀有人参皂苷的热解五加科植物茎叶提取物用如下方法制得：将人参茎叶打成粉后，将人参茎叶粉放置在蒸汽高压锅中蒸煮，然后将蒸煮人参茎叶粉真空干燥得到干燥的蒸煮人参茎叶粉，用95％乙醇浸泡干燥的蒸煮人参茎叶粉，然后过滤，将滤液浓缩得到人参茎叶粉提取物；
在一优选例中，所述将人参茎叶打成粉采用粉碎机，
在一优选例中，所述在蒸汽高压锅中蒸煮为120℃、0.15mpa压力下蒸煮20h，
在一优选例中，将蒸煮人参茎叶粉真空干燥为在80℃下放入烘箱中干燥8h，
在一优选例中，所述将滤液浓缩得到人参茎叶粉乙醇提取物的步骤还包括：将乙醇回收重复使用，浸泡滤渣5次，合并最后得到蒸煮人参茎叶提取物。
本发明使用的术语具有以下定义，除非另有描述：
本文所用的术语“稀有人参皂苷”意指主要含有一种或多种稀有人参皂苷单体化合物δ(20-21)ppd、δ(20-22)ppd和δ(20-21)ppt、δ(20-22)ppt或稀有人参皂苷准单体化合物δppd和δppt。
本文所用的术语“稀有人参皂苷准单体化合物δppd”意指具有如下结构式的稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppd：
以及具有如下结构式的一种同分异构体稀有人参皂苷δ(20-22)ppd的复合物：
本文所用的术语“稀有人参皂苷准单体化合物δppt”意指具有如下结构式的稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppt：
以及具有如下结构式的一种同分异构体稀有人参皂苷δ(20-22)ppt的复合物：
本发明提供了包含有稀有人参皂苷准单体化合物δppd和稀有人参皂苷准单体化合物δppt的组合物的制备方法，相比现有的制备稀有人参皂苷的方法，此制备方法简单、成本较低，同时在此基础上，本发明还提供了制备稀有人参皂苷单体δppd和稀有人参皂苷单体δppt的方法，此方法通过简单的柱层析分离技术，可以低成本、高效率和大规模地分离制备稀有人参皂苷准单体化合物δppd和稀有人参皂苷准单体化合物δppt，为进一步开发相关药物打下基础。
附图说明
图1为稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppd的分子结构示意图。
图2为稀有人参皂苷单体δ(20-22)ppd的分子结构示意图。
图3为稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppt的分子结构示意图。
图4为稀有人参皂苷单体δ(20-22)ppt的分子结构示意图。
具体实施方式
五加科植物提取物中的主要成分人参皂苷在蒸制过程中发生糖苷键的裂解反应和侧链的脱水反应后虽然可以产生rh1、rk3、rh4、rg3、rg5、rk1等新的稀有皂苷类成分，但要想进一步断裂剩余的糖苷键形成活性更强的稀有皂苷类：rh2、rk2、rh3、appt、appd、δppt、δppd等成分却比较困难。虽然蒸制后在强酸或弱酸(高温)的条件下反应，可以进一步断裂剩余的糖苷键，但是同时也会发生许多的副反应，比如：侧链的闭环反应，侧链双键的加成反应等等，只能分离得到少量的稀有皂苷rh2、rk2、rh3、appt、appd、δppt、δppd成分，无法大规模生产制备并实现真正的应用。如果蒸制后在碱性条件下进行双氧化反应，则可以避免以上的这些侧链副反应，实现稀有皂苷类成分的大规模制备。同时，在本发明中不预先进行工艺复杂而且成本昂贵的原人参二/三醇组原料或者单体化合物原料的分离制备，而是直接采用原型五加科植物加热裂解、提取后再双氧化碱解，最后分离纯化，节省了工艺成本，有利于工业化生产。
本发明第一方面提供了上述稀有人参皂苷组合物的综合制备方法，其包括：在含有低极性稀有人参皂苷的热解五加科植物茎叶提取物中依次加入正丙醇，金属钠，过氧化苯甲酰，并通氧气，并把反应液加热反应制得，其中，所述含有低极性稀有人参皂苷的热解五加科植物优选自野山参、红参、黑参、西洋参和三七；
在一优选例中，所述加热反应在四口瓶中进行，所述四口瓶装有温度计、氧气通入管、顶上连有密封橡胶管，冷凝管，所述橡胶管另一端连接漏斗，所述漏斗浸入装有液体石蜡的烧杯，
在一优选例中，加入正丙醇之后搅拌10分钟，
在一优选例中，加入金属钠，反应至无氢气放出，
在一优选例中，所述加热反应为86℃反应24小时，
在一优选例中，所述加热反应结束后，将反应液冷却到室温，然后水洗反应液，将反应液的正丙醇层减压抽干后用水溶解，然后用正己烷萃取低极性物质，再然后用乙酸乙酯萃取，蒸干乙酸乙酯部分得到稀有人参皂苷。
在一优选例中，将制得的所述稀有人参皂苷加入乙酸乙酯溶液超声，再加入的正己烷摇匀静置后过滤，过滤得到滤渣再加入的乙酸乙酯超声后，加入的正己烷摇匀静置后过滤，合并滤液并浓缩；
在一优选例中，所述加入乙酸乙酯溶液超声30min。
本发明的第二方面还提供了稀有人参皂苷准单体化合物δppd和δppt的纯化方法，其包括：取硅胶加入第一乙酸乙酯和正己烷溶剂搅匀装柱，所述第一乙酸乙酯和正己烷溶剂中乙酸乙酯正己烷的体积比为1:2，将所述合并滤液得到的浓缩液和硅胶拌样，并将拌样后的硅胶研细后装柱，先用所述第一乙酸乙酯和正己烷溶液冲洗3个保留体积，第2和第3保留体积收集δppd，再用第二乙酸乙酯和正己烷溶液1:1冲3个保留体积，一共冲洗6个保留体积，所述第二乙酸乙酯和正己烷溶剂中乙酸乙酯正己烷的体积比为1:1，第5和第6保留体积收集δppt；
在一优选例中，硅胶为200-300目，
在一优选例中，装柱后的硅胶柱规格长20cm宽4cm，
在一优选例中，所述装柱后的层析柱保留体积为200ml。
在本发明第一方面和第二方面的一优选例中，所述人参茎叶提取物用如下方法制得：将人参茎叶打成粉后，将人参茎叶粉放置在蒸汽高压锅中蒸煮，然后将蒸煮人参茎叶粉真空干燥得到干燥的蒸煮人参茎叶粉，用95％乙醇浸泡干燥的蒸煮人参茎叶粉，然后过滤，将滤液浓缩得到人参茎叶粉提取物；
在一优选例中，所述将人参茎叶打成粉采用粉碎机，
在一优选例中，所述在蒸汽高压锅中蒸煮为120℃、0.15mpa压力下蒸煮20h，
在一优选例中，将蒸煮人参茎叶粉真空干燥为在80℃下放入烘箱中干燥8h，
在一优选例中，所述将滤液浓缩得到人参茎叶粉乙醇提取物的步骤还包括：将乙醇回收重复使用，浸泡滤渣5次，合并最后得到蒸煮人参茎叶提取物。
除非特殊说明，本发明所用术语具有本发明所属领域中的一般含义。
下面参考具体实施例，对本发明进行说明，需要说明的是，这些实施例仅仅是说明性的，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1从人参中制备低极性稀有人参皂苷组合物和低极性稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppt、δ(20-22)ppt、δ(20-21)ppd和δ(20-22)ppd的方法
本实施例提供了具有如下结构式的一种低极性稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppt的制备方法：
以及具有如下结构式的一种低极性稀有人参皂苷单体δ(20-22)ppt的制备方法：
同时，本实施例还提供了低极性稀有人参皂苷组合物和具有如下结构式的一种低极性稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppd的制备方法：
以及具有如下结构式的一种低极性稀有人参皂苷单体δ(20-22)ppd的制备方法：
(1)提取和制备：
从中药材批发市场购买的产自吉林的人参茎叶(1.0kg)，用粉碎机打成粉后放置在医用蒸汽高压锅中，在120℃、0.15mpa压力下蒸煮20h，(人参茎叶粉要尽量避免和水混合)；然后放入烘箱中在80℃下真空干燥8h得到干燥的蒸煮人参茎叶粉，用5kg95％乙醇浸泡两天，过滤，滤液浓缩得到蒸煮人参茎叶粉乙醇提取物。乙醇回收重复使用浸泡滤渣5次，合并最后得到蒸煮人参茎叶提取物650g。
在装有温度计、氧气通入管、顶上连有密封橡胶管(橡胶管另一端连一个漏斗，浸入装有液体石蜡的烧杯中)、冷凝管的2l的四口瓶中，加入蒸煮人参茎叶提取物200克和1500ml正丙醇，搅拌10分钟后，加入60克金属钠，反应至无氢气放出时，加入过氧化苯甲酰10克，开始通氧气，并把反应液加热至86℃反应24小时。反应结束后，反应液冷却到室温，水洗三次，正丙醇层减压抽干后用水溶解，先用正己烷萃取低极性物质，然后用乙酸乙酯萃取，蒸干乙酸乙酯部分得到稀有人参皂苷混合物粗品70g，粗品采用以下硅柱层析技术精制稀有人参皂苷单体。
(2)分离工艺流程：
图示中，低极性稀有人参皂苷单体δppt1指δ(20-21)ppt，δppt2指δ(20-22)ppt，δppd1指δ(20-21)ppd，δppd2指δ(20-22)ppd。
(3)操作过程及工艺条件
稀有人参皂苷粗品萃取
目的：利用溶解性差异去除色素提取有效物质。
方法：取稀有人参皂苷粗品20g加入200ml的乙酸乙酯溶液超声30min，再加入200ml的正己烷摇匀静置后过滤，滤渣再加入100ml的乙酸乙酯超声30min后加入100ml的正己烷摇匀静置后过滤，合并滤液并浓缩。
硅胶柱分离δppd、δppt
目的：利用硅胶柱分离δppd、δppt并除去大部分色素
方法：取90g硅胶(200-300目)加入300ml(乙酸乙酯：正己烷1:2)溶液搅匀装柱，硅胶柱规格长20cm宽4cm。浓缩液和15g硅胶拌样，并将拌样后的硅胶研细后装柱。保留体积大概是200ml，先用乙酸乙酯：正己烷1:2冲3个保留体积，再用乙酸乙酯：正己烷1:1冲3个保留体积共6个保留体积。第2、3保留体积收集δppd，第5、6保留体积收集δppt。
δppd中压快速制备
目的：制备提纯δ(20-22)ppd并除去大部分色素
色谱柱：c1840g40-60um仪器agela中压快速制备检测波长：203流速20ml/min
方法：95％乙腈水等度，出峰时间15-25min，进样量300mg。剩余部分为δ(20-21)ppd
δppd、δppt高压快速制备
目的：提纯δppd和δppt并除去色素
色谱柱：waterssymmetryc187um19*250仪器aglient检测波长：203nm流速:10ml/min
δppt制备方法：70％乙腈等度，出峰时间20-25min，进样量100mg。
δppd制备方法：90％乙腈等度，出峰时间15-20min，进样量100mg去除色素的纯度较高的δppd、δppt结晶方法
目的：利用结晶方法提纯
δppd结晶方法：70％以上的δppd2制备液浓缩至液体浑浊分次加入甲醇共100-200ml旋至体积20ml放于4度冰箱静置。
δppt结晶方法：70％以上的δppt2制备液旋干后加入少量甲醇15ml至完全溶解自然挥发结晶。
实施例2从三七中制备低极性稀有人参皂苷组合物和低极性稀有人参皂苷单体δ(20-21)ppt、δ(20-2122)ppt、δ(20-21)ppd和δ(20-22)ppd的制备方法
提取和制备：
从中药材批发市场购买的三七茎叶(1.0kg)，用粉碎机打成粉后放置在医用蒸汽高压锅中，在120℃、0.15mpa压力下蒸煮20h，(三七茎叶粉要尽量避免和水混合)；然后放入烘箱中在80℃下真空干燥8h得到干燥的蒸煮人参茎叶粉，用5kg95％乙醇浸泡两天，过滤，滤液浓缩得到蒸煮三七茎叶粉乙醇提取物。乙醇回收重复使用浸泡滤渣5次，合并最后得到蒸煮三七茎叶提取物550g。
分离提纯和结晶方法同实施例1。
对比例1：在受热或微酸环境中，人参或三七中的人参总皂苷部分发生降糖水解可生成人参次生皂苷
(1)原料前处理：将西洋参生晒参水洗去泥沙等杂质后粉碎，过40目筛；
(2)汽爆处理：参粉以10％醋酸润湿，使其含水量在35％，置于汽爆罐内，通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.5mpa，蒸汽爆破处理60分钟；
(3)生物复合酶处理：将汽爆后原料以水调节含水量为40％，按物料比为0.5％的量加入生物复合酶制剂(包含纤维素酶25％，α-淀粉酶25％，木聚糖酶10％，漆酶5％，蛋白酶20％，果胶酶10％，甘露聚糖酶5％)，混合均匀，在ph5.5、30℃条件下水解5h；
(4)干燥灭菌：将经(3)处理得到的反应体系，减压干燥，微波灭菌；
(5)检测：取样参粉原料进行批检验，检测样品中人参皂苷(包括单体人参皂苷rg3、rh2)、人参多糖、人参蛋白含量；
(6)包装：经检验合格的参粉按每桶25kg包装，封存。
但这些需要在较高的温度和较强的酸性条件下反应，此时产物容易发生侧链环化而形成人参二醇和人参三醇型的人参次生皂苷，同时还会发生其它副反应，很难大规模地制备药理活性更强的人参次生皂苷(rk1/rg5、rk3/rh4和rk2/rh3)。
另一方面，制备人参次生皂苷(rg3、rh1、rh2)还可以通过碱水解方法进行，在碱性条件下水解，三醇组人参皂苷可得到rh1、appt；二醇组人参皂苷可得到rg3、rh2、appd。
对比例2
将10gnaoh溶于100ml的乙二醇溶液中，再加入10g西洋参茎叶总皂甙，搅拌下加热进行水解1小时，温度控制在190℃，冷却至室温后加入50倍的水稀释，再用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，得产物7g，经tlc证明其中含有人参皂甙rg3、rh2、rh1、rg2及原人参二醇和原人参三醇。
对比例3
三七18kg(规格：无数头，购自云南)粉碎成粉末状(100-200目)，用30kg95％乙醇浸泡两天，过滤，滤液浓缩得三七乙醇提取物，乙醇回收重复使用浸泡滤渣六次，最终累计得三七乙醇提取物3.37kg，将其溶于水中，用石油醚提取三次，取水相用正丁醇提取四次，正丁醇层浓缩，共得三七总皂苷正丁醇提取物1.78kg。
取总皂苷提取物100g溶于1300ml正丁醇中，加热，搅拌，加入乙醇钠(化学纯，纯度：80％)132.6g(1.56mol，浓度：1.2mol/l)，通氧，90℃反应65小时，反应结束。反应液冷至室温，用正丁醇饱和的水洗，正丁醇层浓缩后用水溶解，乙酸乙酯提取，乙酸乙酯层用水洗，干燥。浓缩后，经硅胶柱层析[1～5％甲醇/氯仿溶液梯度淋洗]纯化，得原人参二醇(a2)6g，hplc测定纯度为97.93％；原人参三醇(a3)11g，hplc测定纯度为99.95％。化合物(a3)测定的物化数据相符于文献值：chenyingjieetal，journalofshenyangcollegeofpharmacy，1987，4(4)，282-289。
化合物(a3)测定的物化数据如下：
1hnmr(300mhz，cdcl3)：δ5.18(d，1h)，4.14(m，1h)，3.6(m，1h)，3.2(s，1h)，2.15-1.61(m，20h)，1.58-1.17(m，12h)，1.05(s，5h)，1.01(s，3h)，0.95(d，8h)。
13cnmr(300mhz，cdcl3)：132.1，125.2，78.8，74.7，71.0，68.9，61.4，53.7，51.7，49.8，47.7，47.2，41.2，39.6，39.4，39.1，34.8，31.4，31.3，31.2，27.3，27.2，26.7，26.0，22.6，18.0，17.5，17.4，17.1，15.8。
上述利用碱水解方法共有缺点是目标产物产率低，反应温度高，特别是碱水解人参皂苷时c-20位立体构型不发生变化，c-20位上的-oh和c-21或c-22位上的-h也不会脱水而在c-20和c-21或c-22之间形成双键，因此，无法通过碱水解直接制备新型人参次生皂苷(rk1/rg5、rk3/rh4、rk2/rh3等)。