本发明涉及到生化制品领域，具体涉及一种玫瑰茄花色苷的制备方法。
背景技术：
花色苷(anthocyanins)是植物界广泛存在的一类水溶性色素，属于黄酮类化合物。花色苷苯环上含有多个酚羟基，具有高度共轭结构，并且存在氧正离子，具有很强的抗氧化和清除自由基能力。自由基在人体新陈代谢中发挥重要作用，但若人体自由基产生过多或者代谢紊乱，可能诱发基因突变、蛋白质变性和脂质过氧化，进而损伤各类细胞，引起氧化应激疾病。有诸多报道称花色苷对心血管疾病、高血压、癌症和糖尿病的预防与治疗具有很好的效果。
玫瑰茄（hibiscussabdariffa）是锦葵科一年生热带植物，原产于非洲，后传播至世界各地，在我国福建、广东、广西、云南各地均有大量种植。玫瑰茄富含黄酮、花色苷、有机酸和多糖等多种生物活性物质，具有很好的医用价值。玫瑰茄是传统的药食两用植物，花萼肉质多汁，富含花色苷，是提取花色苷的重要植物。
传统的花色苷提取工艺多采用浸提、蒸发浓缩、溶剂提纯等工艺，存在能耗高，色素破坏大，产品纯度低等问题。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对传统技术的不足与缺点，提供一种玫瑰茄花色苷的制备方法。本发明采用预处理溶液除杂→萃取液提取→膜分离→大孔树脂分离的组合技术，得到高纯度玫瑰茄花色苷，其主要成分为飞燕草素-3-o-桑布二糖苷和矢车菊素-3-o-桑布二糖苷，其色价
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
（1）预处理溶液除杂：取玫瑰茄花萼，粉碎处理至粒径100-1000μm，将粉碎所得物料与预处理溶液混合，料液比为1:5-1:100（g/ml），温度为4-60℃，搅拌处理0.5-10h，固液分离收集滤渣，所得滤渣重复上述处理1-6次，预处理溶液回收重复使用；
（2）萃取液提取：将步骤（1）得到的滤渣与萃取液混合，料液比为1:5-1:100（m/v），搅拌提取0.5-6h，温度为4-70℃，重复提取1-6次，合并上清液得到花色苷提取液；
（3）膜分离：采用膜分离法去除步骤（2）得到的花色苷提取液中的大分子杂质；
（4）大孔吸附树脂分离：采用大孔吸附树脂对步骤（3）得到的花色苷提取液进行特异性吸附-解吸，去除小分子杂质，得到玫瑰茄花色苷纯化液。
步骤（1）中所述的预处理溶液为有机溶剂与水按10:0.1-10（v/v）混合而成，其中有机溶剂为石油醚、溶剂油、乙醚、乙酸乙酯、正己烷、环己烷中的一种或几种混合。
步骤（2）中所述的萃取液为有机溶剂与水按10:0.1-10（v/v）混合而成，其中有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、乙腈中的一种或几种混合。
步骤（3）中，所述的采用膜分离法去除花色苷提取液中的大分子杂质，所用膜材料为聚烯烃类、聚砜类、无机类、含氟高分子材料、聚酰胺类纤维素类或甲壳类膜材料中的一种或几种混合材料。
步骤（4）中，采用大孔吸附树脂进行特异性吸附-解吸，除去小分子类杂质，其中所用的大孔树脂骨架为苯乙烯、丙烯酸、酚醛或环氧中的一种或几种。
本发明的有益效果在于：工艺简单，成本低，可用于大规模生产高纯度的花色苷，其色价
附图说明
图1为高纯度的玫瑰茄花色苷制备工艺流程图；
图2为高纯度的玫瑰茄花色苷高效液相色谱图；
图3（a）为飞燕草素-3-o-桑布二糖苷的紫外-可见光光谱图；图3（b）为矢车菊素-3-o-桑布二糖苷紫外-可见光光谱图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不仅仅限于这些实施例。
实施例1
将玫瑰茄花萼粉碎处理，至粒径100μm，称取1000g粗花粉，加入5l预处理溶液（石油醚：水=10：1，v/v），30℃搅拌4h，固液分离取滤渣，所得滤渣重复处理3次；往所得滤渣中加入10l的萃取液（40%的乙醇溶液），40℃提取2h，重复提取2次，合并上清液得到花色苷提取液；采用聚砜的超滤膜除去提取液中大分子杂质；膜分离后的溶液经hz-802大孔吸附树脂动态吸附花色苷，60%的乙醇溶液洗脱花色苷，洗脱液旋蒸除去乙醇，喷雾干燥得高纯度花色苷。产品呈深红色，色价
实施例2
将玫瑰茄干花萼粉碎处理，至粒径500μm，称取500g原料，加入5l预处理溶液（乙酸乙酯：水=10：2，v/v），30℃搅拌3h，固液分离取滤渣，所得滤渣重复处理3次；往所得滤渣中加入10l的60%的甲醇溶液，60℃下提取1h，重复提取3次，合并上清液得到花色苷提取液；采用尼龙超滤膜除去提取液中大分子杂质；膜分离后的溶液经x-5大孔吸附树脂动态吸附花色苷，80%的乙醇洗脱花色苷样品，旋蒸除去乙醇，喷雾干燥得高纯度花色苷。产品呈红色，其色价
实施例3
将玫瑰茄干花萼粉碎处理，至粒径1000μm，称取250g原料，加入5l预处理溶液（正己烷：水=10：5，v/v），40℃搅拌6h，固液分离取滤渣；所得滤渣重复处理2次；往所得滤渣中加入10l的60%的丙酮溶液，20℃下避光提取4h，重复提取4次，合并上清液得到花色苷提取液。采用聚四氟乙烯超滤膜除去提取液中大分子杂质；膜分离后的溶液经d101大孔吸附树脂动态吸附所含花色苷，90%的乙醇溶液洗脱花色苷样品，洗脱液旋蒸除去乙醇，喷雾干燥得到高纯度花色苷。产品呈红色，其色价
制得的高纯度的玫瑰茄花色苷hplc-ms分析结果如表1所示。
表1高纯度的玫瑰茄花色苷hplc-ms分析结果
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。