本发明涉及自然生物提取技术领域，具体涉及一种三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的分离方法。
背景技术：
三叶木通(学名：akebiatrifoliata(thunb.)koidz.)是木通科，木通属落叶木质藤本植物。茎皮灰褐色，掌状复叶互生或在短枝上的簇生；叶柄直，叶片纸质或薄革质，卵形至阔卵形，先端通常钝或略凹入，基部截平或圆形，边缘具波状齿或浅裂，上面深绿色，下面浅绿色；总状花序自短枝上簇生叶中抽出，总花梗纤细，雄花：花梗丝状，萼片淡紫色，阔椭圆形或椭圆形，花丝极短，药室在开花时内弯；退化心皮长圆状锥形。雌花：花梗稍较雄花的粗，柱头头状，具乳凸，橙黄色。果长圆形，直或稍弯，种子极多数，扁卵形，种皮红褐色或黑褐色，稍有光泽。4-5月开花，7-8月结果。
近年来，随着一些植物多糖在免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗辐射、抗病毒和抗衰老等方面独特功效的研究开发，且多糖来源广泛、无毒、无副作用，所以其在医药业、食品业、化工业方面的巨大开发前景，引起越来越多国内外科研工作者的兴趣，并成为21世纪世界生命科学研究的热点。但由于植物源多糖种类的多样性、结构组成的复杂性以及多糖分子量大、极性大等特点，给植物多糖提取、分离带来很大困难，所以选择一种合适的提取分离方法对植物多糖的开发利用具有重大的意义。目前，常规的多糖提取分离采用水煮醇沉法，水煮温度都在100℃，对多糖的选择性不好，可把三叶木通果皮果胶中的黄酮、皂甙等同时提取出来，在后续工艺中又不能把它们分离出来，并且浪费能源和资源，经济效益低。
技术实现要素：
(一)要解决的技术问题
为了克服现有技术不足，现提出一种三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的分离方法，可以较为快速的提取果皮果胶降解产物中的多糖。
(二)技术方案
本发明通过如下技术方案实现：本发明提出了一种三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的分离方法，包括如下步骤：1)、将将三叶木通果皮果胶用蒸馏水洗净，干燥后粉碎，用石油醚脱脂，乙醇脱小分子糖后，料渣用水浸提，浸提液离心分离，取清液浓缩后加入乙醇醇沉，醇沉物即为粗总多糖；2)粗总多糖经除蛋白、醇沉、洗涤、透析以及干燥即得精总多糖；3)提取时，向精总多糖内加入nacl溶液，料液比为1：25(g：ml)，超声时间10min，超声温度80℃，超声功率350w，提取次数2～3次，溶液ph值为9～11；4)分离时，采用无水乙醇，沉淀3～5小时，五倍体积的乙醇加入量。
(三)有益效果
本发明相对于现有技术，具有以下有益效果：
本发明提到的一种三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的分离方法，本发明运用超声波法进行提取，操作简便、节约溶剂、提取率高、对多糖结构破坏小等优点，是一种快速、高效的中药提取新方法。利用正交实验设计，通过少量有代表性的实验，综合考察多种因素对提取分离的影响，实验结果的可靠性高。最终确定了三叶木通果皮果胶降解产物多糖的最佳提取分离工艺。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的分离方法，
包括如下步骤：1)、将将三叶木通果皮果胶用蒸馏水洗净，干燥后粉碎，用石油醚脱脂，乙醇脱小分子糖后，料渣用水浸提，浸提液离心分离，取清液浓缩后加入乙醇醇沉，醇沉物即为粗总多糖；2)粗总多糖经除蛋白、醇沉、洗涤、透析以及干燥即得精总多糖；3)提取时，向精总多糖内加入nacl溶液，料液比为1：25(g：ml)，超声时间10min，超声温度80℃，超声功率350w，提取次数2次，溶液ph值为9；4)分离时，采用无水乙醇，沉淀3小时，五倍体积的乙醇加入量。
本发明提到的一种三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的分离方法，得出三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的最佳提取分离工艺：超声时间10min、超声温度80℃、料液比1∶25(g∶ml)、超声功率350w、提取次数2次、溶液ph为9，提取的三叶木通果皮果胶降解产物中多糖收率最高，达8.927％，是传统水提法的1.46倍；最佳分离组合是用无水乙醇，沉淀3h，5倍体积的乙醇加入量，提取率达到1.993％。
验证实验：称取三叶木通果皮果胶0.5g3份，按照上述最优的提取工艺条件进行验证试验，结果三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的平均提取率为8.900％；利用最优的分离工艺进行验证实验，得出三叶木通果皮果胶降解产物中多糖的提取率为1.978％。验证实验结果与最佳提取分离工艺一致，表明所用的提取分离工艺方法可行、稳定、重现性好。
上面所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的构思和范围进行限定。在不脱离本发明设计构思的前提下，本领域普通人员对本发明的技术方案做出的各种变型和改进，均应落入到本发明的保护范围，本发明请求保护的技术内容，已经全部记载在权利要求书中。