斑马鱼notch2基因突变体的制备方法与流程

文档序号:15762768发布日期:2018-10-26 19:31阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明公开了涉及一种斑马鱼notch2基因突变体的制备方法;包括如下步骤:确定notch2基因敲除的靶点位置;以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板,使用引物T7‑notch2‑sfd、tracr rev进行PCR扩增;对PCR产物纯化、体外转录获得gRNA;将gRNA与Cas9蛋白显微注射入斑马鱼胚胎一细胞期中,筛选获得稳定遗传的notch2基因突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术,通过选择独特的一段打靶区,使得斑马鱼中的notch2基因被敲除,又不“误伤”其他基因,形成Notch2敲除的斑马鱼,为后续基因功能的深入研究提供了实验材料,对于研究Notch信号通路意义重大。

技术研发人员:张庆华;岳倩文;徐行;季策;李伟明
受保护的技术使用者:上海海洋大学
技术研发日:2018.05.28
技术公布日:2018.10.26
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