一种金黄色葡萄球菌噬菌体及应用的制作方法

本发明涉及一种金黄色葡萄球菌噬菌体及应用。

(二)背景技术

金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus,sau)是临床上常见的致病性比较强的革兰阳性球菌。自青霉素问世后，金黄色葡萄球菌引起的感染得到了控制，但随着青霉素的广泛使用，不断产生新的耐药菌。1959年甲氧西林应用于临床治疗，曾有效地控制了耐青霉素金黄色葡萄球菌的感染，然而1961年英国就分离到第一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus，mrsa)，目前其已成为院内和社区感染的重要病原菌之一。近几年，在我国常见的医院获得性金葡菌的主要克隆型为st239。而社区获得性的金葡菌主要克隆型为st398和st59。

mrsa可以引起皮肤、软组织感染以及肺部感染。其引起的骨髓炎也是临床难以治疗的疾病。此外，mrsa引起的菌血症和感染性心内膜炎可能会导致心力衰竭和死亡。

近年来，mrsa导致的感染逐年增多，其对抗菌药物的耐药性亦逐年上升，多重耐药菌的比例明显增加。一直以来，万古霉素都是临床治疗mrsa感染的首选药物，曾被称为临床抗感染的最后一道防线。但是随着万古霉素的广泛使用，万古霉素的敏感性正逐年降低，临床上逐渐产生万古霉素中介金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediatestaphylococcusaureus，visa)和耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(vancomycin-resistantstaphylococcusaureus，vrsa)。寻找新的治疗手段迫在眉睫。

噬菌体(bacteriophage)是一种能感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，通过感染、增殖、成熟并释放子代等一系列的过程侵染病原体，达到裂解、杀灭宿主菌的作用。早在1915年和1917年，twort和d,herelle就已各自独立发现了噬菌体的存在。之后的一段时间里，许多科学家都针对噬菌体进行了各项研究并且应用于临床感染性疾病的治疗，也获得了一定的疗效。然而，自20世纪40年代青霉素等抗生素的发现并应用以来，抗生素在很长一段时间里都以其高效杀灭病原体，安全性高等特点获得了全世界范围内的广泛推广，这也使得大多数国家终止了对噬菌体制剂的研究，导致对噬菌体治疗的研究被搁置下来。但是，由于抗生素的滥用，出现了越来越多的耐药菌株，其耐药性也愈加广泛，甚至出现了泛耐药的“超级细菌”，新型抗生素的研发速度远不及细菌出现耐药性突变的速度，于是，针对噬菌体治疗的研究又重新引起人们的重视。

迄今为止，噬菌体应用于人体治疗的临床病例已有数千例；2006年美国食品和药品管理局首次批准，将噬菌体用作食品添加剂，用于杀灭肉制品中的李氏杆菌。然而噬菌体的应用却始终未得到推广，除上文述及的抗生素的发现与应用外，另一个原因是噬菌体对宿主菌特异性要求过高。噬菌体能对抗的病原菌包括葡萄球菌、链球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等，能治疗的疾病包括化脓性伤口感染、皮炎、肺炎、脓胸、肠胃炎、脓毒症、骨髓炎等。噬菌体治疗具有指数增殖、特异性强、易实时更新、副作用小、无残留及周期短、成本低等优点，因而具有广阔的开发前景。

(三)

技术实现要素：

本发明目的是提供一种金黄色葡萄球菌噬菌体sh-st15644，该噬菌体能够用于制备金黄色葡萄球菌抑菌剂以及预防或治疗由金黄色葡萄球菌感染疾病的药物。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种金黄色葡萄球菌噬菌体(staphylococcusaureusphagest59-9，下称st59-9)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期是2017年6月28日，保藏编号为cctccno:m2017394，保藏地址：中国武汉，武汉大学，邮编430072。

本发明还提供一种所述金黄色葡萄球菌噬菌体在制备金黄色葡萄球菌抑菌剂中的应用。

本发明还涉及一种所述金黄色葡萄球菌噬菌体在制备预防或治疗金黄色葡萄球菌感染疾病药物中的应用，所述金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

本发明的有益效果：本发明分离并纯化得到新型金黄色葡萄球菌噬菌体sh-st15644，能够特异有效地消灭金黄色葡萄球菌，对耐药性金黄色葡萄球菌具有良好的体内、外抗菌作用，为临床开发预防治疗耐药性金黄色葡萄球菌感染的制剂提供实验基础，具有极大的临床应用潜力。在体外试验中，moi＝10和1时(即细菌计数为10⁷cfu，噬菌体计数分别为10⁸pfu以及10⁷pfu)，噬菌体与宿主菌共培养5小时后，与对照组(moi＝0)相比，od600nm吸光度读数明显下降(这里以od600nm的吸光度来代表细菌浓度)，moi＝10的平均od600nm＝0.0125,moi＝1的平均od600nm＝0.094,对照组的平均od600＝1.155。

在皮肤脓肿模型中，moi＝10时，噬菌体治疗组裸鼠皮肤脓肿平均面积为47.32mm²、平均细菌裁量为3.553×10⁷cfu/g；mrsa感染组裸鼠皮肤脓肿平均面积为150.4mm²、平均细菌载量为2.284×10⁸cfu/g。噬菌体治疗组小鼠的皮肤脓肿面积、菌落计数都小于mrsa感染组，且差异具有统计学意义。

(四)附图说明

图1为噬菌体sh-st15644在双层琼脂平板上的噬菌斑形态(a)及在日立透射电子显微镜h-9500下的电镜图(b)。

图2噬菌体sh-st15644生物学特性，a为不同温度对sh-st15644效价的影响，b为ph对于sh-st15644裂解能力的影响，c为噬菌体sh-st15644吸附曲线图，d为sh-st15644一步生长曲线图。

图3为实施例6中噬菌体sh-st15644体外裂解能力。

图4为噬菌体sh-st15644体内治疗能力。

(五)具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

本发明采集用上海交通大学附属瑞金医院和上海华山医院污水，用双层平板法分离、筛选以及纯化得到一种新型金黄色葡萄球菌噬菌体sh-st15644，提取其dna并进行测序，进行基因分析。之后，采用双层琼脂平板法测定噬菌体的效价，采用点滴法来分析噬菌体sh-st15644宿主谱，并通过热稳定实验、酸碱稳定性实验、吸附试验以及一步生长曲线测定其生物学特性。此外，还要对噬菌体进行电子显微镜下的观察，了解其形态结构。最后，通过构建金黄色葡萄球菌皮肤脓肿模型，进行噬菌体sh-st15644治疗效果的评估。本发明实施例所用金黄色葡萄球菌宿主菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌标准菌株(atcc43300)。

lb液体培养基：胰蛋白胨10g/l，酵母提取物5g/l，氯化钠10g/l，加双蒸水补足到1l，ph值自然，高压灭菌后使用。

上层培养基：lb液体培养基+质量浓度0.7％琼脂粉。

底层培养基：lb液体培养基+质量浓度1.5％琼脂粉。

smbuffer为nacl5.8g/l，mgso4·7h2o2g/l，明胶0.1g/l，ph7.5tris·hcl50ml/l，溶剂为水。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液：将耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus，mrsa)菌株(atcc43300)接种至lb液体培养基中，37℃培养至od600＝0.6(10⁸cfu/ml)，获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液。

实施例1噬菌体sh-st15644的分离和筛选

取上海交通大学附属瑞金医院和上海华山医院污水样本加入少量氯仿，4℃、3500rpm离心10min，取上清液，用smbuffer适当稀释后，取10μl与400μl耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液(od600＝0.6)混合，加入上层培养基混匀，倒入底层培养基制成双层lb平板。凝固后倒置，并于37℃培养箱中培养过夜。平板上若有噬菌斑，则用注射器针头挑取典型、透亮的单个噬菌斑，加至1mlsmbuffer中碾碎，置于4℃摇床上4h以上，加入0.1ml氯仿于管中，离心取上清，4℃保存。用双层平板法重复纯化至少3次后(噬菌斑形状、大小相同)，即得到噬菌体sh-st15644培养液。

实施例2噬菌体sh-st15644的纯化

将实施例1获得的噬菌体sh-st15644培养液(10⁶pfu/ml)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液(od600＝0.6，10⁸cfu/ml)混合，在37℃培养，翌日，加2％氯仿4℃静置1h，随后6500r/min，15min，4℃离心。上清加入各自终浓度均为1μg/ml的dnase1酶和rnase1酶，室温放置30min。加入nacl至终浓度为0.5m，冰浴1h后，4℃，11000g离心10min。取上清，加入固体peg8000至终浓度为10％(w/v)，混匀后静置于4℃过夜。取前1日混合液，4℃，8500r/min，离心20min后，弃上清，沉淀用smbuffer重悬。加等量氯仿轻混30秒，4000g离心10min，取上清。氯化铯密度梯度法纯化噬菌体。用截留分子量为3000的透析袋以smbuffer为透析液进行透析之后，过0.22μm滤膜，取滤液，获得纯化的噬菌体sh-st15644，4℃保存并用于透射电子显微镜观察及dna抽提。

实施例3噬菌体sh-st15644效价的测定

噬菌体的效价是指1ml培养液中所含活噬菌体的数量。将实施例2制备的噬菌体sh-st15644用smbuffer稀释至10^-7、10^-8、10^-9三个梯度后，取10μl和400μl耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液(od600＝0.6，10⁸cfu/ml)混合加入上层培养基中，再倒入底层培养基中制成双层平板，待其凝固置于37℃孵箱过夜。第二天，计数噬菌斑个数(计算公式：滴度(pfu/ml)＝噬菌斑个数×稀释倍数×100)。

sh-st15644感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌形成的噬菌斑直径约为0.5-1mm。斑呈圆形透明。参见图1中a，实施例2制备的噬菌体sh-st15644效价2×10¹¹pfu/ml。

实施例4噬菌体sh-st15644电子显微镜观察

取实施例2制备的噬菌体sh-st156441ml(效价2×10¹¹pfu/ml)。4℃，40000g离心40min，弃上清。加入体积浓度2％戊二醛水溶液200μl，充分吹打静置30min固定噬菌体。44000g离心40min，小心吸出上清，用100μlpbs重悬噬菌体，4℃保存，备送电镜。取5μl重悬噬菌体滴在含有碳膜的铜网上，待其自然沉淀4min后，吸去多余液体，加一滴2％磷钨酸(pta)染色4min，吸去多余染液，待室温干燥。用日立透射电子显微镜h-9500进行观察、拍照，并记录噬菌体颗粒的形态大小。

观察结果如图1中b所示，可知噬菌体sh-st15644属于长尾噬菌体，头部呈瘦长的椭圆形，头部长约75nm，宽约40nm。尾长约250nm，非收缩性。尾部宽度约为20nm。

实施例5噬菌体sh-st15644宿主谱分析

采用点滴法。37℃，200r/min，将表1临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株接种至哥伦比亚血琼脂培养基(购自上海中信亚特斯诊断试剂有限公司)，37℃过夜培养。挑取单个菌落，接种于3mllb液体培养基，37℃，200r/min摇床培养16小时。次日，以体积比1:100的比例将菌液接种于lb液体培养基，37℃，200r/min摇床培养至对数生长期(od600＝0.6)，取菌400μl加入上层培养基，倒入底层培养基制成双层平板。凝固后在双层平板表面滴加2μl实施例2制备的噬菌体(2×10¹¹pfu/ml)，待板上液体变干后，37℃倒置培养过夜。通过噬菌斑产生情况判断噬菌体的裂解谱，见表1所示，37株mrsa中有12株能够被裂解。

表1sh-st15644的宿主谱

+:susceptible,-:resistant

实施例6噬菌体sh-st15644生物学特性

(1)热稳定性实验

将实施例2制备的噬菌体液(效价2×10¹¹pfu/ml)用sm缓冲液稀释10倍后，分别置于4℃、37℃、40℃、50℃、60℃、70℃水浴中作用1h。作用时间结束后立即铺双层lb平板(同实施例1)，确定噬菌体滴度(实施例3方法测试)。

sh-st15644热稳定性，如图2中a所示，横坐标表示不同的温度，纵坐标表示相对于4℃效价(1.14×10⁹pfu/ml)的百分比。其在40℃作用1h后仍保持较高的活性，50℃活性大大降低，60℃时失去活性。

(2)酸碱稳定性实验

将实施例2制备的噬菌体液(效价2×10¹¹pfu/ml)用smbuffer稀释10倍。取ph为2、3、4、5、6、7、7.45、8、9、10、11、12、13的smbuffer各990μl，再加入10μl噬菌体稀释液。在37℃中放置1h后，取10μl与400μl耐甲氧西林金黄色葡萄糖球菌菌液(od600＝0.6)混合，37℃孵育5min后，用双层平板法铺板(同实施例3)。次日，根据噬菌斑个数确定ph稳定性。每个ph实验重复3次。

通过酸碱稳定性实验发现，如图2中b所示，横坐标表示噬菌体处于不同的ph值，纵坐标表示相对于ph7.45效价(1.4×10⁸pfu/ml)的百分比。sh-st15644能够稳定在ph6-9的环境中，ph7.45时活力最高，ph≤4以及≥11时则活力完全丧失，说明该噬菌体适合长期储存在在中性环境中。

(3)吸附实验

培养耐甲氧西林金黄色葡萄糖球菌至对数生长期。以moi＝0.01比例混合噬菌体液(效价2×10¹¹pfu/ml)和耐甲氧西林金黄色葡萄糖球菌菌液(od600＝0.6，浓度为10⁸cfu/ml)。分别于混合后0、1、2、3、4、5、10、15、20、25、30min时，各取100μl加至900μlsmbuffer缓冲液中，混匀。立即以4℃，13000g离心1min，吸上清液100μl加至900μlsmbuffer缓冲液中，混匀待用。双层平板法确定效价(同实施例3)。

通过sh-st15644对其本身宿主吸附实验研究发现，如图2中c所示，横坐标表示噬菌体和细菌共同孵育时间，纵坐标表示未被宿主菌吸附的噬菌体百分比。当sh-st15644和宿主混合孵育，20min后大部分噬菌体吸附到宿主上。

(4)一步生长实验

取耐甲氧西林金黄色葡萄糖球菌菌液(od600＝0.6)1ml，加入moi＝0.01的实施例2制备的噬菌体液(效价2×10¹¹pfu/ml)于1.5mlep管，混匀37℃水浴1min。13000g离心1min，弃上清。用3ml预热液体lb重悬沉淀。颠倒混匀后，100r/min，每个时间点取100μl重悬液，稀释不同的倍数(0-24分钟稀释至10^-3梯度，27-36分钟稀释至10^-4梯度)，用双层平板法测效价(同实施例3)。

一步生长曲线表明，噬菌体sh-st15644在耐甲氧西林金黄色葡萄糖球菌中生长一代噬菌体的时间为21min，其潜伏期约为12min，裂解期约为9min，裂解量约为13pfu。

(5)体外裂解能力的测定

取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液(od600＝0.6)，以moi＝10、1、0.1、0(作为对照)比例混合实施例2制备的噬菌体液(效价2×10¹¹pfu/ml)。之后，放入摇床振荡培养5小时(100rpm，37℃)。每隔30分钟在600nm处测定od值，记录其变化，结果见图3所示。

实施例7噬菌体sh-st15644的dna提取和测序

采用酚-氯仿-异戊醇法抽提实施例3噬菌体sh-st15644的基因。然后送至上海派森诺公司测序。基因全长45111bp(seqidno.1所示)，gc含量33.35％。共有64个开放阅读框。

实施例8噬菌体sh-st15644治疗金黄色葡萄球菌感染小鼠效果评估

(1)实验动物

实验动物均为spf级雌性裸鼠，4-6周。经上海交通大学医学院实验动物中心购自上海斯莱克实验动物有限公司。全部小鼠饲养环境为常温，自由饮水供食。

(2)金黄色葡萄球菌皮肤脓肿模型的构建

哥伦比亚血琼脂培养基上挑取单克隆耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株(atcc43300)置于3mllb培养基中，37℃，200rpm培养过夜(约16小时)。过夜的菌悬液按体积比1:100稀释到新鲜lb液体培养基，37℃，200rpm培养至对数生长中期(约4h)后，使用酶标仪检测od600吸光度，用无菌pbs洗涤一次，之后用无菌pbs调节菌量(od＝0.5)。

用三溴乙醇(3-5mg/25g裸鼠)麻醉后，在其背部皮下注射100μl含有1×10⁷cfu耐甲氧西林金黄色葡萄球菌悬液。

(3)应用sh-st15644治疗皮肤脓肿裸鼠

给菌1h后在相同位置皮下注射100μl实施例3噬菌体sh-st15644治疗(moi＝10)，并设置对照组(给菌量与治疗组相同，但治疗时注射100μl无菌smbuffer)。治疗后24h使用量尺测量裸鼠皮肤脓肿的长(l)和宽(w)，计算脓肿面积area(a)＝π(l×w)/2。之后将裸鼠安乐死，解剖取皮肤脓肿，称重。在无菌pbs中碾碎，12000g离心5分钟，吸走上清液，用pbs再重悬沉淀并铺板进行菌落计数，最后计算得到cfu/g。通过比较两组脓肿面积与cfu/g是否有差异，来判断噬菌体治疗是否有效。实验结果：噬菌体治疗组裸鼠皮肤脓肿平均面积为47.32mm²、平均细菌裁量为3.553×10⁷cfu/g；mrsa感染组裸鼠皮肤脓肿平均面积为150.4mm²、平均细菌载量为2.284×10⁸cfu/g。噬菌体治疗组小鼠的皮肤脓肿面积、菌落计数都小于mrsa感染组(图4)，表明噬菌体sh-st15644能够有效抑制mrsa引起的皮肤感染。本研究采用graphpadprism6.0统计软件进行统计分析。实验各结果间比较采用t检验。p<0.05为差异具有统计学意义。本实验各图表中统计学差异以“*”标注，*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

序列表

<110>浙江工业大学

<120>一种金黄色葡萄球菌噬菌体及应用

<160>1

<170>siposequencelisting1.0

<210>1

<211>45111

<212>dna

<213>金黄色葡萄球菌噬菌体(staphylococcusaureusphage)

<400>1

attacgggatgaattgaaaaacagtgatttgatgatggagcataccaataaagctggagc60

aagtaatattgttaagaatccattaagtattgaactgacaaaaacagttcaaacactaaa120

taacttactcaagtctatgggtttaactgcagcacaaaggaaaaagatagtgcaagaaga180

aggtggatttggtgactattaaaatattaaatgaaccctcaccaaaattactaacaacgt240

ggtatgcagaacaagttattcaagggaaaataaaaacaagtaaatatgtaaaaaaagaat300

gtgaaagacacattaggtatttgaaaaatggcggtaaatggatgtttgatgaagaattag360

cacatcgtcctattcgatttatagaaaagttttgtaaaccttccaaaggatctaaacgtc420

aacttgtattacagccatggcaacattttattattggtagtttatttggctgggttcata480

aagaaacaaaactgcgcaggtataaagaagctttaatatttatgggtcgaaaaaatggta540

aaacaacaaccatttctggtgtcgctaactatgctgtgtcacaagatggagaaaatggtg600

cagaaattcatttgttagctaatgtgatgaaacaagcgaggattctatttgatgaatcta660

aggctatgataaaagctagcccaaaacttagagagaatttcaggcctttaagagatgaaa720

ttcattacgatgcaacgatatctaaaattatgccacaggcttcagacagtgataagttgg780

atggtttaaatacacatatgggcattttcgatgaaatccatgaatttaaagactataaat840

tgatttcagttataaaaaactcaagagcggcaaggttacaacctcttcttatctacatta900

cgacagcgggttaccaattagatggtccactcgttgatatggtagaagcgggaagagaca960

cattagatcaaatcatcgaagatgaaagaactttttactatttagcatctttagatgatg1020

acgatgatataaatgattcgtcgaattggattaaagcaaatcctaacctgggcgtttcta1080

tcgatttagatgaaatgaaagaagagtgggaaaaagctaaacgtacaccagctgaacgag1140

gagattttataacaaaaagatttaatatatttgctaataacgacgaaatgagcttcattg1200

attatccaacgcttcaaaaaaataatgacattatttccttagatgagctggaaggaagac1260

cttgtacgattggttacgatttatcagagacagaagattttacagccgcatgtgcaacat1320

ttgcgttagataatggtaaagttgctgtcttaacacattcatggattcctaagcataagg1380

tagagtactcaaatgaaaaaataccatatagagaatgggaagaagatggcttactaacta1440

ttcaagataaaccgtatattgattatcaggatgtctttaattggataataaagatgaatg1500

agcattatgttgtagaaaaaattacttatgatagagccaatgctttcaaactaaatcaag1560

agttaaaaaattatggatttgaaacagaagaaacaagacaaggggctttgactttaagtc1620

cagcactgaaagatctaaaagagatgtttttagacggcaaaataatatttaataacaatc1680

ctttaatgaaatggtatatcaataatgttcagttgaaactagacagaaacggaaactggt1740

tgccgtctaagcaaagcagatatcgtaaaatagatggctttgcagcatttttaaacacat1800

atacagatattatgaataaagttgtttctgatagtggtgaaggaaacatagagtttatta1860

gtattaaagacataatgcgttaaggaggtgaatgttatcgcaaaagagaatattgtcaca1920

cgcataaagaaaaaattgatagacaattggattgatcagtcaacttctaagctttatgac1980

tttagcccatggaaaaatagatctttttggggtgtaattaataatacgcttgaaactaat2040

gaaacgatattttcagctattacaaagttatctaattcgatggctagtttgcccttgaaa2100

atgtatgaagattataaagtagttaatacagaagtatctgatttacttacagtgtcaccg2160

aataattctctgagcagttttgattttattaatcaaattgaaacaatcagaaatgaaaaa2220

ggtaatgcatatgtgctaattgaacgagacatctatcatcaaccatcaaagcttttctta2280

ttaaatccagatgttgttgaaatgttaattgaaaaccaatcacgtgaactttattattcc2340

attcatgctgcaactggaaataaattgattgttcataatatggacatgttgcattttaaa2400

cacatcgtggcatctaatatggtgcaaggcattagtccgattgatgtgttgaagaataca2460

actgattttgataatgcagtaagaacctttaatcttacagaaatgcaaaaacctgattct2520

ttcatgcttaaatatggttccaatgtaggtaaagaaaaaaggcagcaagtgttagaagat2580

ttcaaacagtactatgaagaaaacggtggaatattattccaagagcctggtgttgaaatc2640

gaaccgttacctaaaaaatatgtctctgaagatatagtggcaagcgagaatttaacaaga2700

gaaagagtagctaacgtttttcaattgccctcagtattcttaaatgcaagatcaaataca2760

aatttcgcgaaaaatgaagagttaaacagattttacttgcagcataccttattgccaatc2820

gtcaaacagtatgaagaagaatttaatcggaaactacttactaaaacagacagagaaaaa2880

aataggtattttaaatttaacgttaaatcttatttaagggctgatagtgcaacacaagca2940

gaagtgtactttaaagcagttcgtagtggttactacactataaatgacattagagagtgg3000

gaagatttaccaccagttgaaggtggagataagccgctaataagcggtgatttataccca3060

attgacacgccacttgaattaagaaaatctttgaaaggtggtgataaaaatgtcaatgaa3120

agctaagtattttcaaatgaaaagaaaatcaaaaagtaaaggtgaaatatttatttatgg3180

tgatattgtaagtgataaatggtttgaaagtgatgtaactgctacagatttcaaaaataa3240

actagatgaactaggagacatcagtgaaatagatgttcatataaattcatctggaggcag3300

tgtatttgaagggcatgcaatatacaatatgctaaaaatgcatcctgcaaaaattaatat3360

ctatgtcgatgccttagcggcatcaattgctagtgttatcgctatgagtggtgacactat3420

ttttatgcacaaaaatagttttttaatgattcataattcatgggttatgactgtaggtaa3480

tgcagaagaattaagaaagacagcggatttacttgaaaaaacagatgctgttagtaattc3540

agcttatttagataaagcaaaagatttagatcaagaacacttaaaacagatgttagatgc3600

agaaacttggcttactgcagaagaagccttgtctttcggcttgatagatgaaattttagg3660

agctaatgaaatagctgctagtatctctaaagagcaatataagcgtttcgagaacgtccc3720

agaagatttaaagaaagatgtagacaaaatcactaaaattgatgatgtagatacatctga3780

attggttgaaacacctaaagaaagtatgtcactagaagaaaaagaaaaaagagaaaaaat3840

taaacgcgaatgcgaaattttaaaaatgacaatgaattattaggaggaaatgaaatgccg3900

acattatatgaattaaaacaatccttaggtatgattggacaacaattaaaaaataaaaat3960

gatgaattgagtcagaaagcaacagatccaaatattgatatggaagacatcaaacaacta4020

gaaacagaaaaagcaggtttacaacaaagatttaacattgttgaaagacaagtgcaagac4080

attgaagagaaagaaaaagcgaaagttaaagataaaggagaagcttatcaatctttaagt4140

gataatgagaagatggttaaagctaaggcagagttttatcgtcacgcgattttaccaaat4200

gaatttgaaaaaccttcaatggaggcacaacgtttattacacgctttaccaacaggaaat4260

gattcaggtggagataagctcttaccaaaaacactttctaaagaaattgtttcagaacca4320

tttgctaaaaaccaattacgtgaaaaagctcgtctaactaacattaaaggtttagagatt4380

ccaagagtttcatacactttagacgatgatgatttcattacagacgtagaaacagcaaaa4440

gaattaaaagcaaaaggtgatacagtcaagttcactactaataaattcaaagtatttgct4500

gcaatttcagatactgtaattcatggatcagatgtagatttagtaaactgggttgaaaac4560

gcactacaatcaggattagcagctaaagagcgtaaagatgccttagcagtaagtcctaaa4620

tctggattagaacacatgtcattttataacggatctgttaaagaagttgagggagcagac4680

atgtatgatgctattattaacgctttagcagatttacatgaagattatcgtgataacgca4740

acaatttatatgcgatatgcagattatgtcaaaattattagtgttctttcaaatggaaca4800

acaaatttctttgacacaccagcagaaaaagtatttggcaaaccagtagtatttacagat4860

gcagcagttaaacctattgtgggagatttcaattattttggaattaactatgatggaaca4920

acttatgacactgataaagatgttaaaaaaggcgaatatttgtttgtattaacagcatgg4980

tatgatcagcaacgtacattagacagtgcattcagaattgcaaaagcaaaagaaaataca5040

ggtccattacccagctaagccccaaaaggttaatgtaacagctaaggctaaatcagctgt5100

aatatcagccgaataggggtgatgaaatgagtttagaagaaattaaattgtggttgagaa5160

ttgactataatttcgaaaatgatttaattgaaggtctcattcaatcggctaagtctgaat5220

tactattaagtggggttccagattatgacaaagatgacttggaatacccgcttttttgta5280

cagcgattaaatatatcattgcaagagattatgaaagtcgtggatactcaaatgaccaat5340

ctagaagcaaggtgtttaatgaaaaaggattgcaaaaaatgattttgaaattaaaaaagt5400

ggtaggtgatttttaaatggaatttaatgaatttaaagatcgcgcgtatttttttcaata5460

tataaacaaaggaccatatccagatgaagaggaaaaaatgaaattgtatagttgcttttg5520

taaaatttataatccttctatgaaagatagagaaattttaaaagcgactgaatcaaaatc5580

aggattaaccataattgtcaggtcttctaaaactgaatatctaccacaaacaaatcactt5640

agttaaaattgacagtgcattatattccgataaattattcaacattgtagaaataagaat5700

tgatacaccagatattggctataatacagtggttttatcagaaaaatgagtgtagaaatt5760

aaagggatacctgaagtgttgaataaattagaatcggtatacggtaaacaagcaatgcag5820

gctaagagtgataaagctttaaatgaagcatctgaattttttataaaggctttaaagaaa5880

gagttcgagagctttaaagatacgggtgccagtatagaagaaatgactaaatctaagcct5940

tatacaaaagttggcagtcaagaaagggctgttttaattgaatgggtaggccctatgaat6000

cgcaaaaacattattcacttgaatgaacatggttatacaagagatggaaaaaaatataca6060

ccaagaggttttggagttattgcaaaaacattagctgctagcgaacgtaagtatagagaa6120

attataaaaaaggagttggccagataaatgaatatattaaacaccataaaaggaatttta6180

ttatctgatgcagagctcaaaacacatataaattctagaatatactattacaaagtcact6240

gaaaacgctgaaacttccaaaccctttgttgttattacacctgtttatgatttgccttca6300

gactttatgtctgataaatatctcagtgaagaatacttaattcaaatagatgtagaatct6360

tcaaataatcagaaaacaattgatataacaaaacgaataagatacctgttatatcaacaa6420

aatttaattcaagcatctagtcagttagatgcttattttgaagaaactaaacgttatgtg6480

atgtcgagacgatatcaaggcatacccaaaaatatatattataaaaatcagcgcatcgaa6540

taggtgtgctttttaatttttaaggaggaaataagcaatggcagaaggacaaggttctta6600

taaagtaggttttaaaagattatacgttggagtttttaacccagaagcaacaaaagtagt6660

taaactcatgacatgggaagatgaaaaaggtggtacagttgacctaaatatcacaggttt6720

agcaccagatttagtagatatgtttgcatctaacaaacgtgtatggatgaaaaaacaagg6780

tactaatgaagttaagtctgacatgagtattttcaatattccaagtgatgatttaaacac6840

agttattggacgtactaaagataaaaatggtacatcttgggtaggagagaatacaagagc6900

accgtatgtaacagtaattggcgaatcggaagatggtttaacaggtcagccggtatatgt6960

agccttacttaaaggtacttttagtttagattcaattgaatttaaaacacgaggtgaaaa7020

agcagaagccccagaacctacaaaattaacaggtgactggatgaatagaaaagttgatgt7080

tgatggaacgtcacaaggtattgtatacggttatcatgaaggtaaagaaggagaagcaga7140

attcttcaaaaaagtattcgttggatacacggacagtgaagatcattcagaggattctgc7200

aggttcgttacccagctaatccccaaaatgttgaagtagcagttaattcaaaatctgcaa7260

cagtttcagcagaataggggctttcaaaataaatcaaaggagaataatttatgactaaaa7320

ctttaaaggtttataaaggagacgacgtcgtagcttctgaacaaggtgaaggcaaagtgt7380

cagtaactttatctaatttagaagcggatacaacttatccaaaaggtacttaccaagtgg7440

catgggaagaaaatggtaaagaatctagtaaagttgatgtacctcaattcaaaaccaatc7500

caattctagtctcaggcgtatcatttacaccagaaactaaatcaattatggtaaataccg7560

atgacaatgttgagccaaacattgcaccaagcacagcaacgaataaaatattgaaatata7620

caagtgaacatccagaatttgttactgtagatgaaaatacaggagcaattcacggtgtag7680

ctgaaggtacttcagtaatcactgctatgtctactgatggaagcgataagtcaggacaaa7740

tttcagtgacagtaacaaacggatagggatttaaggcgcagtatatctgcgtctttttta7800

tttgaataaaaggagctaatacaatgattaaatttgaaattaaagatcgtaaaacaggaa7860

aaacagagagctatacaaaagaagatgtaacaatgggcgaagcagaaaaatgctatgagt7920

atttagaattagtaaatcaagagaataaaaaagaagcacctaacgcaacaaaaatgagac7980

aaaaagagcgacagttattagtagatttatttaaagatgaaggattgactgaagaagatg8040

ttctgaacaagatgagtactaaaacttatacaaaagccttacaagatatatttcgagaaa8100

tcaatggtgaagatgaagaagattcagaaactgaaccagaagagatgggaaagacagaag8160

aacaatctcaataaaagacattttatcgaacattaagaaaatacaacgtttctgtatgga8220

gcagtatgggtggacattaactgaagtcagaaaacagccgtatgtaaaacttttagaaat8280

acttaatgaagagaataaagaagagactgaagaaaaacaaagtgaacaaaaagtcattac8340

aggtacggatttaagaaaactttttggaagctagaaaggaggttaatatgaatgaaaaag8400

tagaaggcatgaccttggagctgaaattagaccatttaggtgtccaagaaggcatgaaag8460

gtttaaagcgacaattaggtgttgttaatagtgaaatgaaagctaatctgtcagcatttg8520

ataagtctgaaaaatcaatggaaaaatatcaggcgagaattaaggggttaaatgataggc8580

ttaaagttcaaaaaaagatgtattctcaagtagaagatgagcttaaacaagttaacgcta8640

attaccaaaaagctaaatccagtgtaaaagatgttgagaaagcatatttaaagttagtag8700

aagccaataaaaaagaaaaattagctcttgataaatctaaagaagccttaaaatcatcga8760

atacagaacttaaaaaagctgaaaatcaatataaacgtacaaatcaacgtaaacaagatg8820

cgtatcaaaaacttaaacagttgagagatgcagaacaaaagcttaagaatagtaaccaag8880

ctactactgcacaactaaaaagagcaagtgacgcagtacagaagcagtccgctaagcata8940

aagcacttgttgaacaatataaacaagaaggcaatcaagttcaaaaactaaaagtgcaaa9000

atgacaatctttcaaaatcaaatgataaaattgaaagttcttacgctaaaactaatacta9060

aattaaagcaaacagaaaaagaatttaatgatttaaacaatactattaagaatcatagcg9120

ctaatgtcgcaaaagctgaaacagctgttaataaagaaaaagctgctttaaataatttgg9180

agcgttcaatagataaagcttcatccgaaatgaagacttttaacaaagaacaaatgatag9240

ctcaaagtcatttcggtaaacttgcaagtcaagcggatgtcatgtcaaagaaatttagtt9300

ctattggagacaaaatgacttccctgggacgtacaatgacgatgggcgtatctacaccaa9360

ttactttagggttaggtgcagcattaaaaacaagtgcagactttgaaggccaaatgtctc9420

gagttggagcgattgcgcaagcaagcagtaaagacttgaaaagcatgtctaatcaagcag9480

ttgacttaggagctaaaaccagtaaaagtgctaacgaagttgctaaaggtatggaagaat9540

tggcagctttaggctttaatgccaaacaaacaatggaggctatgccaggtgttatcagtg9600

cagcagaagcaagtggtgcagaaatggctacaactgcaactgtaatggcttcagcgatta9660

actctttcggtttaaaagcatctgatgcaaatcatgttgctgatttacttgcgagatcag9720

caaatgatagtgctgcagatattcagtacatgggagatgcattgaagtatgctggtactc9780

ctgcaaaagcattaggagtttcaatagaggacacttccgcagcaattgaagttttatcta9840

actcaggtttagagggttctcaagcaggtactgccctaagagcttcatttatcaggctag9900

ctaatccaagtaaaaatacagctaaggaaatgaaaaaattaggtattcatttgtctgatg9960

ctaaaggtcaatttgttggcatgggtgaattgattagacagttccaagataatatgaaag10020

gcatgacgagagaacaaaaactagctacagtggctacaatagttggtactgaagcagcaa10080

gtggatttttagccttgattgaagcgggaccagataaaattaatagctatagtaaatcct10140

taaagaattccaatggcgaaagtaaaaaagcagcagatttgatgaaagataatctcaaag10200

gcgctctggaacaattaggtggcgcttttgaatcattagcaatcgaagtcggtaaagatt10260

taacgcctatgattagagcaggagcggaaggtttaacaaaattagttgatggatttacac10320

atctccctggttgggttagaaaagcttcagtaggattagcactttttggtgcagcaattg10380

gacctgcagttcttgctggagggttattaatacgtacagttggaagtgctgctaaaggat10440

atgcgtcattaaatagacgtattgctgaaaatacaatcctttcaaatactaattcaaaag10500

caatgaaatctttaggtcttcaaacattatttcttggttctacaacaggaaaaacgtcaa10560

aaggctttaaagggttagccggagctatgatgtttaatttaaaacctataaatgttttga10620

aaaattctgcaaagctagcaattttaccgttcaaacttttgaaaaacggtttaggattag10680

ctgcaaaatctttatttgcagtaagtggaggcgcaagatttgcgggtgtagccttaaggt10740

ttttaacaggacctataggtgctacaataactgctattacaattgcgtataaagttttta10800

aaaccgcatatgatcgtgtggaatggttcagaaacggtattaacggtttaggagaaacta10860

taaagttttttggtggtaaaattattggcggcgctgttagaaagctaggagagtttaaaa10920

actatcttggaagtatcggcaaaagcttcaaagaaaagttttcaaaagatatgaaagatg10980

gttataaatcattaagcgacgatgaccttctcaaagtaggagtcaacaagtttaaaggat11040

ttatgcaaaccatgggcacagcttctaaaaaagcgtctgatactgtaaaagtgttaggga11100

aaggtgtttcaaaagaaacagaaaaagctttagaaaaatatgtgcattattctgaagaaa11160

atagcagaatcatggaaaaagtacgtttaaactcgggtcagatatcagaagacaaagcaa11220

aaaaacttttgaaaattgaaacggatttatctaataaccttatagctgaaatagaaaaaa11280

gaaataaaaaggaactcgaaaaaactcaagaacttattgataagtatagtgcattcgatg11340

aacaagaaaagcaaaacattttaactcgaactaaagaaaaaaatgacttgcgaattaaaa11400

aagagcaagaactcaatcagaaaatcaaagaattgaaagaaaaagctttgagtgatggtc11460

agatttcagaaaatgaaagaaaagaaattgaaaagcttgaaaatcaaagacgtgatatca11520

ctgttaaagaattgagtaagactgaaaaagagcaagagcgtattttagtaagaatgcaaa11580

gaaacagaaatgcttattcaatagacgaagcgagcaaagcaattaaagaagcagaaaaag11640

caagaaaagcaagaaaaaaagaagtggacaagcaatatgaagatgatgtcattgctataa11700

aaaataacgtcaacctttctaagtctgaaaaagataaattgttagctattgctgatcaaa11760

gacataaagatgaagtaagaaaagcaaaatctaaaaaagatgctgtagtagatgttgtta11820

aaaagcaaaataaagatattgataaagaaatggatttatccagtggacgtgtatataaaa11880

atactgaaaagtggtggaatggccttaaaagttggtggtctaactttagagaagaccaaa11940

agaaaaaaagcgataaatacgctaaagaacaagaagaaacagctcgtagaaacagagaaa12000

atataaagaaatggtttggaaatgcttgggacggcgtaaaaagtaaaactggcgaagcct12060

ttagtaaaatgggcagaaatgctaatcattttggcggcgaaatgaaaaaaatgtggagcg12120

gaatcaaagggattccaagcaaattaagttcaggttggagctcagccaaaagttctgtag12180

gataccacactaaggctatagctaatagtactggtaaatggtttggaaaagcttggcaat12240

ctgttaaatcgacaacaggaagtatttacaatcaaactaagcaaaagtattcagatgctt12300

cagataaagcttgggcgcattcaaaatctatttggagaggcacatcaaaatggtttagca12360

atgcatataaaagtgcaaagggctggctaacggatatggctaataaatctcgcgcgaaat12420

gggataatatttctagtacagcttggtcgaatgcaaaatccgtttggaaaggaacatcga12480

aatggtttagtaactcatacaaatctttaaaaggttggactggggatatgtattcaagag12540

cccacgatcgttttgatgcaatttcaagttcggcatggtctaacgctaaatcagtattta12600

atggttttagaaaatggctatccaaaacatatgattggattagagatattggtaaagaca12660

tgggaagagctgcggctgatttaggtaaaaatgttgctaataaagctattggcggtttga12720

atagcatgattggcggtattaataaaatatctaaagccattactgataaaaatctcatca12780

agccaatacctacattgtctactggtactttagcaggaaagggtgtagctaccgataatt12840

cgggagcattaacgcaaccgacatttgctgtattaaatgatagaggttctggaaacgccc12900

caggtggtggagttcaagaagtaattcacagggctgacggaacattccatgcaccccaag12960

gacgagatgtggttgttccactaggagttggggatagcgtaataaatgctaatgacactc13020

tgaagttacagcgtatgggtgttttaccaaagtttcatggaggtacgaaaaagaaagatt13080

ggctagaccaacttaaaggtaatataggtaaaaaagcaggagaatttggagctacagcta13140

aaaacacagcgcataatatcaaaaaaggtgcagaagaaatggttgaagcagcaggcgata13200

aaatcaaagatggtgcatcttggttaggcgataaaatcggcgatgtgtgggattacgtac13260

aacatccagggaaactagtaaataaagtaatgtcaggtttaaatattaattttggaggcg13320

gagctaacgctacagtaaaaatagctaaaggcgcatactcattgctcaaaaagaaattag13380

tagacaaagtaaaatcgtggtttgaagatttcggtggtggaggcgatggaagctatctat13440

ttgaatatccaatctggcaaagatttggacgctacacaggtggacttaactttaatggcg13500

gtcgtcactatggtatagactttggtatgcctactggaacaaacgtttatgccgttaaag13560

gtggtatagcagataaggtatggactgattacggtggcggtaattctatacaaattaaga13620

ctggtgctaatgaatggaactggtatatgcatttatctaagcaattagcaagacaaggcc13680

aacgtattaaagctggtcaactgatagggaaatcaggtgctacaggtaatttcgttagag13740

gagcacacttacatttccaattgatgcaagggtcacatccagggaatgatacagctaaag13800

atccagaaaaatggttgaagtcacttaaaggtagtggcgttcgaagtggttcaggtgtta13860

ataaggctgcatctgcttgggcaggcgatatacgtcgtgcagcaaaacgaatgggtgtta13920

atgttacttcgggtgatgtaggaaatattattagcttgattcaacacgaatcaggaggaa13980

atgcaggtataactcaatctagtgcgcttagagacatcaacgttttacagggcaatccag14040

caaaaggattgcttcaatatatcccacaaacatttagacattatgctgttagaggtcaca14100

acaatatatatagtggttacgatcagttattagcgttctttaacaacagatattggcgct14160

cacagtttaacccaagaggtggttggtctccaagtggtccaagaagatatgcgaatggtg14220

gtttgattacaaagcatcaacttgctgaagtgggtgaaggagataaacaggagatggtta14280

tccctttaactagacgtaaacgagcaattcaattaactgaacaggttatgcgcatcatcg14340

gtatggatggcaagccaaataacatcactgtaaataatgatacttcaacagttgaaaaat14400

tgttgaaacaaattgttatgttaagtgataaaggaaataaattaacagatgcattgattc14460

aaactgtttcttctcaggataataacttaggttctaatgatgcaattagaggtttagaaa14520

aaatattgtcaaaacaaagtgggcatagagcaaatgcaaataattatatgggaggtttga14580

ctaattaatgcaatcttttgtaaaaatcatagatggttacaaggaagaagtaataacaga14640

ttttaatcagcttatatttttagatgcaagggctgaaagtccaaacaccaatgataacag14700

tgtaactattaacggagtagatggtattttaccgggcgcaattagttttgcgcctttttc14760

attagtattaaggtttggctatgatggtatagatgttatagatttaaatttatttgagca14820

ttggtttagatctgtgtttaatcgcagacatccttattatgttattacttctcaaatgcc14880

tggtgttaaatatgcagtgaatacagctaatgttacatctaatttaaaagatggttcttc14940

aactgaaattgaagtaagtttaaatgtttataaagggtattctgaatcagttaattggac15000

cgatagcgagttcttattcgactctaattggatgtttgaaaatggaattcctcttgattt15060

cacacctaaatatactcatacatcaaatcaatttactatttggaacggttctactgatac15120

gataaatccacgattcaagcacgatttgaaaatattaattaatttaaatgcgagtggagg15180

atttgaactggttaactatacaacaggtgatatttttaagtacaacaaaagtatagataa15240

aaacactgattttgttttagatggtgtgtatgcatatcgagatataaatagagtgggaat15300

tgatacaaatagaggcattataacattagcgccaggtaaaaatgaatttaagattaaagg15360

agacgtcagtgatattaaaactacatttaagtttccttttatttataggtaggtgattta15420

atggattatcatgatcatttatcagtaatggattttaatgaattgatttgtgaaaattta15480

ctagatgtagattatggttcttttaaagaatattatgaactgaatgaagctaggtacatc15540

acctttacagtttatagaactactcataatagttttgtttttgatttattgatttgtgaa15600

aacttcataatttatcatggtgaaaaatatacaattaagcagacagcgccaaaggttgaa15660

ggtgataaagtttttattgaagttacggcatatcacataatgtatgaatttcaaaatcac15720

tcagtggaatcaaataagcttgatgacgacagtagcgaaactggtaaaacgccagaatac15780

tctttagatgagtacttaagatatggatttgcaaatcaaaaaacttcggtcaaaatgacc15840

tataaaataattggagattttaagcgaaaagtaccgattgacgaattaggtaacaaaaac15900

ggcttagaatactgtaaagaagcggtagacctgtttggctgtataatttacccaaatgat15960

acagagattggtttttattctcctgaaacattttatcaaagaagcgagaaagtgattcga16020

tatcaatataatactgatactgtatctgcaactgtcagtacattggaattaagaacagct16080

ataaaagtttttggaaaaaagtatacagctgaggaaaagaaaaattataatcctattaga16140

acaactgacattaaatattcaaatggttttataaaagaaggtacttatcgtaccgcaaca16200

attgggtctaaagctactattaactttgattgcaagtatggtaatgaaacagttagattt16260

acaataaaaaagggctctcaaggtggaatatataagttgattttagacggcaagcaaatt16320

aagcaaatttcttgttttgctaagtcggttcagtctgaaacaatagatttaataaaaaat16380

attgataaaggcaagcacgttttagaaatgatatttttaggagaagaccccaaaaataga16440

attgatatatcttcaaataaaaaagctaagccttgtatgtatgttggaactgaaaaatca16500

acagtcttaaatttaattgctgacaattcaggtcgcaatcaatacaaagcaattgtcgac16560

tacgtcgcagatagtgcaaagcagtttgggattcgatatgctaatacgcaaacaaatgaa16620

gatatcgaaacacaggataagttgttagaatttgcaaaaaagcaaataaatgatactcct16680

aagactgaattagatgttaattatataggttatgaaaaaatagagccaagagatagcgta16740

ttctttgttcatgaattaatgggatataacactgaattaaaggttgttaaacttgatagg16800

tcacatccatttgtaaacgcaatagatgaggtgtctttcagcaatgaaataaaagatatg16860

gtacaaattcaacaagcgcttaacagacgagttattgcacaagataatagatataactat16920

caagcaaatcgtataaatcatttatacactagtactttgaattctcctttcgagacaatg16980

gatatagggagtgtattaatataatggcaacagaagaagttaaaatcaaagcgctacttg17040

aaaacgataaacagtactttccagctacacattggaaagctataaatgggataccttatg17100

caggcagtagtgatattgatggattgcctcaagacggtatcatttcggtagatgataaaa17160

ataaattagataatttaaaaataggcgaagcaggaattattcaaaatagcattgtacaga17220

aatccccaaacggtaaattgtggaaaataacagttgacgatagtgggaaacttggtacag17280

tgctattttattagaaaggaaggtgcattatggaaaatttgtatttaataaaggatttgg17340

gagctttagcaggtcgagattatagagctaaggaaatacaaaacttacaaagaatagagc17400

aatttgcgcttggcttgacaacagagtttaagttgcatcagaaagctaaaacaattcaac17460

acttcgctgagcaaatttattataatggtagatcgcaagcagcagtaaacaaatctttac17520

aaagtcaaattaacgcacttgttgtggcaccacgtaataacagtgctaatgagattgttc17580

aagctcgagttaatgtaaacggcgaaacctttgacacattaaaagaacatttagacgatt17640

gggaaaccaaaactcaaattaataaagaggaaactataagagaattaaataagaccaaac17700

aagaaattcttgatatcgagtatcgttttgaacctgataagcaagaatttttatttgtga17760

cagaacttgcacctcttacaaatgcagtaatgcaatccttctggtttgataatagaacag17820

gcatagtatacatgacacaagctagaaataatggctatatgctaagtcgtttaagaccta17880

atggtcaatttatagacagctcattgattgtaggtgggggtcatggtacacataacggtt17940

atagatatattgatgatgagttatggatttatagttttatcttaaatggtaataatgaga18000

atacattagttcgtttcaagtatacgcctaatgtggaaattagctatggcaagtatggta18060

tgcaagatgtatttacaggacacccagaaaaaccctacatcacccctgtcataaatgaaa18120

aagaaaataaaattctatacagaattgagagacctagaagtcagtgggaacttgaaaact18180

caatgaattatatagagataagaagtttagacgatgttgataaaaatattgataaagttt18240

tgcataaaatcagtatccctatgagactaacaaacgaaacccaaccaatgcagggtgtga18300

cttttgatgaaaaatacttgtattggtatacaggagacagtaatccaaataatagaaact18360

atttaacggctttcgatttagaaacaggagaagaagcgtatcaggttaatgctgactatg18420

gtggaacactagattcatttcctggcgaatttgcggaagcagaaggtttgcaaatatact18480

atgacaaagatagtggtaaaaaagctttgatgctaggtgttactgtcggtggtgatggaa18540

atagaacacatcgtattttcatgattgggcaaagaggtattttagaaatacttcactcaa18600

gaggcgttccttttatcatgagtgacacaggtggtagagttaaacctttaccaatgaggc18660

ctgataaacttaagaatcttgggatgttaacagagccaggtctttactatttatacactg18720

atcatacagttcaaatcgatgatttcccattaccaagagaatggcgtgatgcaggttggt18780

tcttggaagttaagccaccacaaactggcggtgatgtaattcagatattgacgcgtaata18840

gttatgcaaggaatatgatgacttttgaaagggttctttctggaagaactggagacattt18900

cggactggaattatgtgcctaaaaatagtggtaaatgggagagagtaccttcattcatca18960

caaaaatgtcagatattaacatagtaggtatgtcgttttatttaactacggatgatacaa19020

aacgttttacagattttccaactgaacgtaaaggggtagcaggttggaacttatatgtag19080

aagcttctaacacaggtggttttgttcataggctagttcgtaatagtgttacagcatctt19140

gtgaaatattattgaagaactatgatagtaaaacaagttcagggccatggactttacacg19200

aagggagaattataagttaatgagtaatttagagaaatctgtagctataaatttagaaaa19260

cacagcgcattatgaaaatatttcaaatctagatataacttttagaacaggagagagtga19320

ttcttctgttcttctttttaatatcattaaaaataatcaaccgttattattgagtgaaga19380

aaatatcaaagcacgaatagcgattcgaggtaaaggagtcatggtagttgctccactaga19440

aatattagatccatttaaaggtattttaaaatttcaattacctaatgatgtaattaaacg19500

agatggaagttatcaagctcaagtttcggttgcagaattaggtaattcagacgtggtagt19560

tgtcgagagaactatcacatttaacgttgaaaaaagtttgtttagcatgattccatctga19620

aacaaaattacactatattgttgaatttcaggaattagaaaaaactattatggatcgtgc19680

gaaagcaatggacgaggctataaaaaatggtgaagattatgcgagtctgattgaaaaagc19740

taaagaaaaaggtctatcagatattcaaatagcaaaatcttcaagtatagatgaattaaa19800

gcaacttgctaatagccatataaccgatttggaaaataaagctcagtcttattcaagaac19860

atttgatgagcgaaagcgatatatggatgagaaacatgaggctttcaagcagtcagtgaa19920

tagcggcggtttagtcacaagtggttcaacttcaaattggcaaaaatctaagattactaa19980

agacgacggtaaaataacacagattactggatttgattttaataatccagaacaaagagt20040

aggagattcaacccaatttatttacgtctcacaagccataaattatccaagaggcgtaag20100

cactaatggtattgtcgaatatttagtagtaacttccgactacaaacgtatgacatatcg20160

tccaaatggtacaaataaagtatttgttaagagaaaagaagcaggttcttggtctgattg20220

gtcagaattagcccttaatgattacaatacgccttttgaaactgttcaaaacgcgcaatc20280

aaaagctaatacggctgaaagcaacgccaaactatacacagatgacaagtttaataaaag20340

atattcagttatttttgatgggacggcaaatggcgttggctcaacattatatcttaatga20400

aagtttagatcaatttattttgttaattttttatggaacttttccagggggagattttac20460

tgagtttggcaacccctttggtggcggaaaaatttcattgaacccatcaaatttaccgga20520

taatgatggtaatggtggaggcgtttatgagtttggattaactaaatctagtcgtacatc20580

tttaacgatatcgaacgatgtttattttgatttaggaagtcaaagaggttctggtgcaaa20640

tgcaaatagaggaacaatcaacaaaattataggagtgagaaaataatgcaaatattagtt20700

aacaagcgtaatgagataatttcatacgctatcattggtggctttgaagaaggtattgat20760

attgaaaatttaccagaaaatttctctcaagtttttagacctaaagcctttaaatattca20820

aatggggaaatagtttttaacgaagattattcagaagaaaaagatgacttgcatcaacag20880

attgacagtgaagaacaaaacacagtcgcttctgatgacatcttacgaaaaatggttgct20940

agtatgcagaaacaagttgttcaaagtacaaagttatcgatgcaagttaataagcaaaat21000

gcactaatggcaaaacaacttgtgacacttaataaaaaattagaagaggttaaaggagag21060

actgaaaatgcttaaattaatttcaccaacattcgaagatattaaaacatggtatcaatt21120

gaaagaatatagtaaagaagatatagcgtggtatgtagatatggaagttatagataaaga21180

ggaatatgcaattattacaggagaaaagtatccagaaaatctagagtcataggttataat21240

cttatggctttttaatttgaataaagtgggtggtgtaatgtttggatttaccaaacgaca21300

cgaacaagattggcgtttaacgcgattagaagaaaatgataagactatgtttgaaaaatt21360

cgacagaatagaagacagtctgagaacgcaagaaaaaatttatgacaagttagatagaaa21420

tttcgaagaactaagacgtgacaaagaagaagatgaaaaaaataagaaagaaaacgacaa21480

aaatatacgcgatatgaaaatgtggattctcggtttgatagggactatcttcagtacgat21540

tgtcatagctttactaagaactatttttggcatttaaaggaggtgattaccatgcttaag21600

ggaattttaggatatagcttttggtcgtgtttctggtttggtaagtgtaagtaatagtta21660

agagtcagtgcttcggcactggctttttattttggataaaaggagcaaacaaatggaagc21720

aaaagtaatggcaagatacgttgtattgattttagcgttagtcaatcagtttttagcgaa21780

taaaggtataagcccgataccagtagatgaagaaagtatttcatcgatcatcttaacagt21840

tattgctttatacactacgtataaagacaatccaacatcacaagaaggacgttgggcgaa21900

tcaaaaattaaagaaatataaagcagaaagtaaatatagaaaagcaacaggacaagcacc21960

tatcaaagaagtgatgacacctacaaatatgaacgacacaaatgatttagggtaggtggt22020

tgatatatgttaatgacaaaaaatcaagcagaaaaatggttcgacaattcactagggaaa22080

caatttaatccagatggttggtatggatttcagtgttatgattatgccaatatgttcttt22140

atgttagcgacaggcgaaaggctgcaaggtttatatgcttataacatcccgtttgataat22200

aaagcgaagattgaaaaatatggtcaaataattaaaaactatgacagctttttgccgcaa22260

aagttggatattgtcgtcttcccatcgaagtatggtggtggagctggacacgttgaaatt22320

gttgagagcgcaaatttaaatactttcacatcatttggtcaaaactggaacggtaaaggt22380

tggactaatggcgttgcgcaacctggttggggtcctgaaactgtgacaagacatgttcat22440

tattatgacaatccaatgtattttattaggttaaacttccctaacaacttaagcgttggc22500

aataaagctaaaggtattattaagcaagcgactacaaaaaaagaggcagtaattaaacct22560

aaaaaaattatgcttgtagccggtcatggttataacgatcctggagcagtaggaaacgga22620

acaaacgaacgcgattttatacgtaaatatataacgcctaatatcgctaagtatttaaga22680

catgcaggacatgaagttgcattatatggtggctcaagtcaatcacaagacatgtatcaa22740

gatactgcatacggtgttaatgtaggaaataataaagattatggattatattgggttaaa22800

tcacaggggtatgacattgttctagagattcatttagacgcagcaggagaaaatgcaagt22860

ggtgggcatgttattatctcaagtcaattcaatgcggatactattgataaaagtatacaa22920

gatgttattaaaaataacttaggacaaataagaggtgtaacacctcgtaatgatttactg22980

aacgttaatgtatcagcagaaataaatatcaattatcgtttatctgaattaggttttatt23040

actaataaaaaagatatggattggattaagaagaattatgacttgtattctaaattaata23100

gctggtgcgattcatggtaagcctataggtggtttggtagctggtaatgttaaaacatca23160

gctaaaaaccaaaaaaatccaccagtgccagcaggttatacacttgataagaataatgtg23220

ccttataaaaaagagactggtaattacacagttgccaatgttaaaggtaataacgtaagg23280

gacggctattcaactaattcaagaattacaggtgtattacctaataacgcaacaatcaaa23340

tatgacggcgcatattgcatcaatgggtatagatggattacttatattgctaatagtgga23400

caacgtcgctatattgcgacaggagaggtagacaaggcaggtaatagaataagtagtttt23460

ggtaagtttagcacgatttagtatttacttagaataaaaattttgctacattaattatag23520

ggaatcttacagttattaaataactatttggatggatgttaatattcctatacacttttt23580

aacattactctcaagatttaaatgtgcgtaactggcaggtacttcggtacttgcctattt23640

ttttatgttatagctagcctacgggctagttttttgttatgatgtgttacacatgcatca23700

actatttacatctatccttgttcacccaagcatgtcactgggtgttttttcttacgatag23760

agagcatagttttcatactactccccgtagtatatatgactttagcattcccgtataaca23820

gtttacggggtgctttttatgttatacttacttttatatagtaggagtgaactatatagc23880

cgggcagaggccatgtatctgactgttggtcccacaggagacatcttccttgtcatcact23940

cgatacatatatcttaacaacatagaaatgttacattcgctacaaccgtatcttaatcga24000

tacggttatatttattcccctacaaccaacaaaaccacagatcctattaatttagggttg24060

tggttatttttgtgttttttcggggcaaaaaaagggcagattatttgaaaaagggcaaac24120

gcttgtggaaaatctaaaaggttaaaaataataaagaacttggtataacaagggttttat24180

acatttgcgtacaacgacgaaatgtcaatttaccatcacattatgatgatatgtttattt24240

caagaaaagctttaacgccagtgttctcaagcgttttataaagcttgtaaaaaatataag24300

ggcaaaaaaagggcggatttaagctaacttggaatgttttcgagtttttgagttagttct24360

ctatccattttttcagttacatgagtatatatgcgaatggttgttttttcatctacatgt24420

cctacccttttcataattgcttttaaagaaacattcatttctactaataaagttatgtgt24480

gtatgtctaaatgtgtgcgtggtaactttcttattcatatttaaagcttttgtagttttc24540

ttaagcacaccggcgatttgattattacataaaggattccctttttttgttgtgaatatg24600

aaccctctgtcaacatagctcgaattccatcttttcaacattttgttttccagtattatc24660

tttttaaaaatttctacggttctagaattgatgctaatacttctttttgaacttatagtc24720

tttgtagtgtctttgtatccgaatccttcttcgtatttaatgcggtgaattgtacctgtt24780

atatttatagttttgtttaataaatctatatctttttcctgcagtgcttgtagttctcct24840

atgcgcataccagttaaagcctgtacttctaagatgctggcaattaaaatgcgatttcgc24900

ttgtgtaacttattatcatttagtatatgatcacgtatctgtaggacttggttcatttct24960

aaatagttgtacattttagattcatctttttcgatatcctctattgtttttcttctttta25020

ggaattttgacattagttaacaaatattcatttggataattgtaaaatttaactgcatat25080

ttaatagctcctttcatatctccgagttgacgggttacttgattttgagaatagatatct25140

gataatttattaataaatatctgcatatattttgtatcaagtttgtttaaaagcaagttc25200

tcagagcagtatcgtttaatgtttttaattcttatttttatattattaagagtagtcaac25260

tttgaacctgatgtttttatatgatattcaagccattcatctaatagcgcgtgaaaagtc25320

aaagtttttaattcgcttgacgacttgttgttcagtttttcttttattttttcttctaaa25380

cgaaacattgcttctttttgagattgttttgtattcttgttcaacacaacacttacgcgc25440

ttccatttatctgtgtatggatctttgtacttctcgtaatatctgtatttagtttcgtta25500

tttttgtttttaaatttttcaatccacatgtttatacctcctgtaggaacgtacgttctg25560

taaatttgtaaaaaataataagggtaggtgggctacccaaaatttagtactaggtactaa25620

atatgttataataaaataaaaagtaggtgataagatgactcaatttctaggggcgcttct25680

tcttacaggagttttaggttacataccatataaatatctaacaatgataggtttagttag25740

tgaaaaaaacaaggttatcaatactcctgtattattgattttttctattgaaacatgttt25800

gatatggttttatagttttataatttttaataatgttgatttaaaaaatttgaatttaat25860

tcagttgcttacaggtctaaaagcaaatattttgtttctatttatttttgttttaacagt25920

gtttgtatttaatcctttaattgttaaatttattatctggttaattaatataaccagaaa25980

gtttatgaaattggattgtataagcttattagacaaaagagacaagttgtttaataacaa26040

cggtaaaccagtatttatagttataaaagactttgaaaacagaatcattgaagagggtga26100

acttaaaacctataattcagctggtagcgatttcgatttactagaggttgagcgacaaga26160

tttcaaagtatctgatttaccgtcaaacgatgaattgtatattaaacatacacttgtaga26220

ccttaaacaacaaattaaattggatttatatttaatgaatgaatattaatcttttttctt26280

agctttttctgataaagtgctttttaagttttcgctggcacccggcttttcaaaactttt26340

gtttattgggttactacgggtagcttcttgttttttgtttttatccgccataaaattctc26400

accaccattcaacgtctacactagtaggcgtttttgaatttttttttaatcctttttctc26460

gtcacgctatataggtacttttaatcgtaattaaagccaagtttatttaaaatctctaaa26520

taatctgacgactttgcccgtaatgtttacgtcatttatttttgacattgggtagcttct26580

atctttaatggtaacgtaattagataatcgctttagggtaaatgtgtcatctgagttaaa26640

tataatttcacaaaaatattcatcagtcgcagttccgttttcaggacagtaaacagtaat26700

tatatctctgtcaaagataaagtccattacatcatcatcctgatctaaaatgtagcaaac26760

agtcatatcttcattttcaactcttcttgcgctatttatagtagttattggttgggcaac26820

taatttgccttttgcctctgtgtatctttttggaaattccacataattcattaaatcgat26880

tgttttatttgtttccatattagctcttctttcttatattgttttattagttaatattgg26940

ctcctggtactgcgctagcaccagctcttgcttcctcttcttttccttttttgtaatctt27000

caaaagctttagcctgttcatctttagtccagccaggcgaaacgacatactcatcattta27060

aattagtattttgtgaatcgtttttatttatatttgcaggagtattattagatggatctg27120

aattattattaagttgattgttttgtgattggttttgattggttgcattgttttgtacgc27180

tattaataggtggatttttatcttcaacttttttcgttttttctttttgcttttttggtt27240

tgctatctttatgtttttgtgtatgagactttttattttcttctttttttggtttttctt27300

tttcaccacaagctgttaaagctaatgtacttactagtagcagtccgattacttttttca27360

tatgtatctctcctttgtttatatttccttatatttaaaaactctcaacggctcaaatgt27420

gatcgaatactcgccatagtgagttccaataccatatatctttttatattgttctattgc27480

ttctaatatgtattcttcgcttaattgtagatactcagacaattcatacaagttacgtac27540

gccataattataagcttctacaatttcgcgtaatggaacagctgagataaagccgtgtcg27600

tcttgcgtaattttcgaacttgcgattgttgaatttcgagtaatcggctatatcaccgta27660

tgtaagtttattatgtgctaattcttcaaagagaatccctgctttttctctatctgataa27720

accacgctttatcaaaattaaatctcctaaccataccccgtctaaattatctggaagcac27780

atcagcctctcttatttcaatataatcatgttgtattaaagtttcttcatataatcccat27840

ctgatacatcctttacttacgtttacttcttatataatctgcataatctaaaactctttg27900

ccactcgtcatcagttaattctccttctaaatgagctgcacgatgttgtacttcgttttc27960

tgtttgtctattttttaatagtaaatattctggggtaactttcaatgcattggcaatctc28020

agctatatcctccataggtatttttctgctaccgttttcatatcgggataaggtagattt28080

attgacacctatcttagttgcaaaatcagttaaattcacattattctcttttcgtagttg28140

tttgattaatttacctatttccgctgaagttctcatttcaaatttacctccgttttattt28200

ataacagtataataacacttttccatataggaaacaactagcattttaaaagaataaaaa28260

atatttttcgagatttttgttgacaattaggaaacttaggtttagtattgagttaacttc28320

aaaaaacggaggtgagcaaatgtatgagttcaacgtcaaaagaatgaaagctgaacgcat28380

tgctaaaggcatttcgatttctgatatggcaaaaaaattaggaatgacaccaggaactta28440

ttcaaaaaaagaaaacgggcatattagaattaatgttgacgatttagcaaaagtaattga28500

agtactagaattgccacaagataagtgcggtattttttttacttatagagtttccaaaat28560

gtcaacagaacaaaaacaaacatcttaaaaggaggacactatggaacaaataacgttaac28620

caaagaagagttgaaagaaattatagcgaaagaagttagaaatgctataaaaggcgagaa28680

accaatcagctcaggtgcaattttcagtaaagtaagaatcaataatgacgatttagaaga28740

aatcaataaaaaactcaatttcgcaaaagatttgtcactaggaagattgaggaagcttaa28800

tcatccgattccactaaaaaagtatcagcatggcttcgaatcaattcatcaaaaagctta28860

tgtacaagatgttcatgatcatattagaaaattaacattatcgatttttggagtgacgct28920

taattcagatttgagtgaaagtgaatataacctagcagcaaaagtttatcgagaaatcaa28980

aaactattatttatatatctatgaaaagagagtttcagaattaactatcgatgatttcga29040

ataaaggaggttcaacaaatgttacaaaaatttagaatcgctaaagaaaaaagtaaatta29100

aaactcaatttactaaaacatgcaaacagtaatttagaaacaagaaacaaccctgaactg29160

ttgcgagcagttgcagagttgcttaaagagattaatcgataaattctatgaattcgattt29220

tagctgaagcgatagctactattttgtctccaacaaaagtatatgagccattagtgaaca29280

aggaacttttaattttttcttttgatatttcaacagttccgcgatgacctgactttatca29340

ctttttctaaattatcgatttcaacaaatttatcattagaaagatataaacaagctttca29400

tacttatcacctccttaggttgataacaacattatacacgaaaggtggaacaacaaatga29460

acattcaagaagcaactaagatagctacaaaaaatcttgtctctatgacacggaaagatt29520

ggaaagaaagtcatcgaactaagatattaccaacaaatgatagttttttacaatgcatca29580

tttcaaatagcgatgggacaaaccttatcagatattggcaaccttcagccgatgacctca29640

tggcaaatgattgggaagttataaacccaactagagaccaggaattattgaagcaatttt29700

agaaatgctatcaatgatactttttaaattgtttttaaactcattttcaaagtaaacaac29760

agtcttgtctgaaattgttacatgataaatagtgttactagcatacacgccgtttaggaa29820

cccagagtttttaagtttatttaaatcgtattttacatcttcgaaatgtagtttttgaaa29880

atactttgtatgtatatctttagcacttccaaaattattgcaggttaatttaaccgaacc29940

taactttacacattctaaataatctttgtagagtacggacaagatatattgttggtcttt30000

agtaagtgtatcaaattcatcagatatcaagggcatgttatcacctccttaggttgataa30060

caacattatacacgaaaggagcataaacaaatgaacacaagatcagaaggattgcgtata30120

ggcgtcccacaagtttctagcaaagctgatgcttcttcatcctatttaacggaaaaggaa30180

cgtaacttaggagcggaaatattagagcttattaaaaaaagtgattacagctacttagaa30240

ataaacaaagttttctatgcattagatagagaacttcaatacagggcgaataataacaaa30300

ctttaacatttatctaaaggagtgatagagatgccaaaaatcataataccaccaacacca30360

gaaaacacatatcgaggcgaagaaaaatttgtgaaaaagttatacgcaacacctacacaa30420

atccatcaattgtttggagtatgtagaagtacagtatacaactggttgaaatattaccgt30480

gaagataatttaggtgtagaaaatttatacattgattattcagcaacgggaacattgatt30540

aatatttctaaattggaagagtatttaatcagaatgcataaaaaatggtattaggaggat30600

attaaatgagcgacacatataaaagctacttaatagcagtactgtgcttcacagtcttag30660

cgattgtactcatgccgtttctatacttcactacagcatggtcaattgcgggattcgcaa30720

gtatcgcaacattcacattttataaggaatacttttatgaagaataaagaaactgctact30780

tgttggagcaagtaacagtgcaagatgagcaattgtcttaaataattatataaggagtta30840

ttaatatgaccttacaacaaaaaatactatcacattttgcaacatatgacaatttcaatt30900

ctgatgatgttgttgaaaattttgggatatctaaaacacatgcaaaatccactctttcaa30960

aacttaagaaaaaaggaaagattgaaatggaaagttggggtatctggcgtgttattgaat31020

cgcaattgcatttaagtgtagtcgaacgtaaaaaagaaattttagaagaacaatttgaat31080

tgttagcaagattaaatgaacaaagtgatgaccctagagaaatagaagaacgtatcaagt31140

taatgattcgtctagctaaccaattttaaggaggagttaatcaatggcagtattagaaga31200

tatttttgaagaattaaaactattaaataagaatttacgtgtgttaaacactgaactgtc31260

aactgtagattcatcaattgtacaagagaaagttaaagaagcaccaatgccaaaagaaga31320

aacagctcaactggaatcaattgaagaagttaaggaaacttctgctgatttgactaaaga31380

ttatgttttatcagtaggaaaagagttccttaaaaaagcagacacttctgataagaaaga31440

atttagaaataaacttaacgaacttggtgcggataagctatctactatcaaagaagagca31500

ttatgaaaaaattgttgatttcatgaaggcgagaattaatgcatgaaactagatcactca31560

aatagagctcatgcaaagcttagtgcaagtggagcaaaacaatggctaaactgtccaccg31620

agtattaaggcaagtgaaggtattgcagataaaagttcagtttttgctgaagaaggtaca31680

ttcgctcatgagttaagtgagttatatttcagtcttaaatatgaaggcctaacacagttt31740

gagtttaataaagcttttcaaaattataagcgaaatcaatattacagtgaagagttgcgc31800

gaatatgttgaagagtacgtagctaatgtagaagaaaagtataacgaggctttgagtaga31860

gatgacgatgtaatagctttatttgaaacaaaattggatttaggtaaatacgtccctgaa31920

tcttttggtactggtgatgtcattatattttcaggtggtgtacttgaaattattgacctt31980

aaatacggtaaaggcattgaagtttcagctatagataatcctcaacttagattatatggc32040

ttgggcgcatatgaactgcttagtttaatgtatgacattcatacaattcgcatgactatc32100

atacaacctcgaatagataacttttctactgaagagttaccaatatcaagattacttcaa32160

tggggaaccgattttgttaaaccattagccagacttgcttataacggtgaaggtgagttt32220

aaagcaggtagtcattgtagattctgtaagataaagcattcatgtagaacacgtgcagaa32280

tacatgcaaaatgtgcctcaaaagccaccacatttgttaagtgatgaagagattgcagaa32340

cttttatataaactgcctgatatcaaaaaatgggctgatgaagtagaacaatatgcacta32400

gatcaagcaaaagaaaatgataaaaactatcctgggtggaagcttgtagaaggtcgttcg32460

cgaagagtgataactgatacaaaagcaacgcttgaaaagttagttgaagagggttataaa32520

cctgaagatattacagaaaccaagttacttagcattacgaatttagaaaaattaatcggc32580

aaaaaagcattttctaaaattgcagaaggctttatagaaaagccgcaaggtaaattaaca32640

cttgctactgagtcagataaaaggccagctataaagtcatctgctgaagatgattttgac32700

aaactataaaaatttaaaaggacggtatataaacatgaaagcaaaagtattaaataaaac32760

taaagtgattacaggaaaagtaagagcatcatatgcacatatttttgaacctcacagtat32820

gcaagaagggcaagaagcaaagtattcaatcagtttaatcattcctaaatcagatacaag32880

tacgataaaagccattgaacaagctatagaagctgctaaagaagaagggaaagttagtaa32940

atttggaggcaaagttcctgcaaatctgaaacttccattacgtgatggagatactgaaag33000

agaagatgatgtcaattatcaagacgcttattttattaacgcatcaagcaaacaagcacc33060

tggtattattgaccaaaacaaaattagattaacggattctggaactgttgtaagtggtga33120

ttatattagagcttcaattaatctatttcctttcaacacaaatggtaataagggtatcgc33180

agttggattgaacaacattcaacttgtagaaaaaggcgaacctcttggcggtgcgagtgc33240

agcagaagatgatttcgatgaattagacactgatgatgaggatttcttataagtcaatag33300

gtggggttttagccccactttaattttaaagaaattgaggtgtcaagaatttgaaattta33360

tgaatatagatattgaaacatatagcagtaatgatatttcgaaatgtggtgcctataaat33420

acacagaagctgaagatttcgaaattttaattatagcttattcaatagatggtggagcga33480

ttagtgcgattgacatgactaaagtagatgatgagccctttcacgctgattatgagacat33540

ttaaaattgctctttttgaccctgctgtaaaaaagtatgcattcaatgctaatttcgaaa33600

gaacttgtcttgctaaacattttaataaacagatgccacctgaagaatggatttgcacaa33660

tggttaattcaatgcgtattggcttacctgcttcgcttgataaagttggagaagttttaa33720

gactacaaaaccaaaaagataaagcaggtaaaaatttaattcgttatttctctatacctt33780

gtaaaccaacaaaagttaatggaggaagaacaagaaacttgcctgaacatgatcttgaaa33840

aatggcaacaatttatagattactgtattcgagatgtagaagtagaaatgacgattgctc33900

ataaaattaaagactttccagtaactgcaattgaacaagcatattgggtttttgaccaac33960

atataaacgacagaggtattaagctttctaaatcattgatgttaggagctaatgtgctcg34020

ataagcagagtaaagaagaattgcttaaacaagctaaacatataacaggtttagaaaatc34080

ctaatagtcctacacagttattggcttggttaaaggatgaacaaggattagatataccta34140

atttacaaaagaaaacggttcaggattacttaaaagaagccacaggaaaagctaaaaaaa34200

tgctagaaattagattgcaaatgtctaaaaccagtgtgaaaaaatacaacaaaatgcatg34260

acatgatgtgcagtgatgaacgggtaagaggtctgtttcaattttacggtgccggtactg34320

gaagatgggcaggtagaggtgtacaacttcagaatttaacaaagcattatatttcagata34380

ctgaattagaaatagcaagagatcttattaaagaacaacgttttgacgatttagatttat34440

tactgaatgttcatcctcaagacttattaagtcaattagttaggacaacatttacttctg34500

aagaaggtaatgaactagcagtaagtgatttttctgcaatagaggcaagagtcatagcat34560

ggtatgcaaaagaacgatggcgtttagatgtgttcaacacacacggaaagatatatgaag34620

catcggcttctcaaatgtttaatgtcccggtagaaagcataactaaaggcgaccctctca34680

gacaaaagggaaaagtgtccgaattagctttaggttatcaaggtggcgctggagctttaa34740

aagcaatgggtgcattggaaatgggcattgaagaaaacgagttacaaggtttagttgata34800

gttggcgtaacgcaaatcctaacatagttaatttttggaaggcttgccaagaggctgcaa34860

ttaatactgtaaaatctcgaaagacgcaccatacacatggacttagattttacatgaaaa34920

aaggctttctaatgattgaactacctagtggaagagctttagcttatccaaaagcttcag34980

ttggtgaaaatagttggggtagtcaagttgttgaatttatgggcttagatcttaaccgta35040

aatggtcaaagttaaaaacatatggtgggaagttagtcgagaatattgttcaagcaactg35100

caagggatttacttgcgatttctatagctaggcttgaagcatcaggttttaaaatagttg35160

gtcatgtccatgatgaagtaattgtagaaatacctagaggttcaaatggacttaaggaaa35220

tcgagactatcatgaataagcctgttgattgggcaaaaggattgaatttgaatagtgacg35280

gatttacttctccgttttatatgaaggattaggagtgtgattgaatgcaacatcaagctt35340

atatcaatgcttctgttgacattagaattcctacagaagtcgaaagtgttaattacaatc35400

agattgataaagaaaaagagaatttggcggactatttatttaataatccaggtgaactat35460

taaaatataacgttataaatatcaaggttttagatttagaggtggaatgatggctagaag35520

aaaagttataagagtgcgtatcaaaggaaaactaatgacattgagagaagtttcagaaaa35580

atatcatatatctccagaacttcttagatacagatacaaacataaaatgcgcggcgatga35640

attattgtgtggaagaaaagactcaaaatctaaagatgaagttgaatatatgaagagtca35700

aataaaagatgaagaaaaagagagagaaaaaatcagaaaaaaagcgattttgaacctata35760

ccaacgaaatgtgagagcggaatatgaagaagaaagaaagagaagattgagaccatggct35820

ttatgatggaacgccacaaaaacattcacgtgatccgtactggttcgatgtcacttataa35880

ccaaatgttcaagaaatggagtgaagcacaatgagcataatcagtaacagaaaagtagat35940

atgaatgaaatacaagacaatgttaagcaaccagcgcattacacatatggcgacattgaa36000

attatagattttattgaacaagttacggcacagtacccaccacaattagcattcgcaata36060

ggtaatgcaattaaatacttgtctagagcaccgttaaagaatggacatgaggatatggca36120

aaagcgaagttttacgttgatagagtgtttgacttgtgggagtgatgacaatgacagata36180

gcggacgtaaagaatacttaaaacattttttcggctctaagagatatctgtatcaggata36240

acgaacgagtggcacatatccatgtagtaaatggcacttattactttcacggtcatatcg36300

tgccaggttggcaaggtgtgaaaaagacatttgatacagcggaagagcttgaaacatata36360

taaagcaaagtgatttggaatatgaggaacagaagcaactaactttattttaaaagggcg36420

gaaacaatgaaaatcaaaattgaaaaagaaatgaatttacctgaacttatccaatgggct36480

tgggataaccccaagttatcaggtaataaaagattctattcaaatgatgttgagcgcaac36540

tgttttgtgacttttcatgttgatagcatcttatgtaatgtgactggatatgtatcaatt36600

aacgataaatttactgttcaagaggagatataacaatgaaaatcaaagttaaaaaagaaa36660

tgagattagatgaattaattaaatgggcgcgagaaaatccggatctatcacaaggaaaaa36720

tatttttttcaacaggatttagtgatggattcgttcgttttcatccaaatacaaataagt36780

gttcgacgtcaagttttattccaattgatatccccttcatagttgatattgaaaaagaag36840

taacggaagagactaagtttgattgtctagtagaactaaacgatattgaaggttttgaaa36900

tatatgaaaatgattcaatcagagagttgatagacggtacttccagagcgttttatatac36960

taaacgaagataaaactatgacattaatttggaaagatggggagttgctagtatgatgtt37020

gaaatttaaagcttgggataaagataaaaaagttatgagtattattgacgaaatcgattt37080

taatagtgggtacattttgatttcaacaggttataaaagtttcaatgaagtaaaactatt37140

acaatacacaggatttaaagatgtgcacggtgtggagatttatgaaggggatattgttca37200

agattgttattcgagagaagtaagttttatcgagtttaaagaaggagccttttatataac37260

ttttagcaatgtaactgaattactaagtgaaaatgacgatattattgaaattgttggaaa37320

tatttttgaaaatgagatgctattggaggttatgagatgacgttcaccttatcagatgaa37380

caatataaaaatctttgtactaactctaacaagttattagataaacttcacaaagcatta37440

aaagattgtgaagagtacaagaagcaacgatatgagcttattggggttatagcgaagtta37500

cgagattgtaacaaagaactggagaagaaagcaagcgcatgggataggtattgcaagagc37560

gttgaaagagatttaataaacaaattcggtaacgatgatgaaagagttaaattcggaatg37620

gaattaaacaataaaatttttatggaggaagacacaaatgaataaccgtgaacaaataga37680

acaatccgttataagtgctagtgcgtataacggcaatgacacagagggattactaaaaga37740

gattgaggacgtatataagaaagcgcaagcgtttgatgaaatacttgagggaatgacaaa37800

tgctattcaacattcagttaaagaaggtattgaacttgatgaagcagtagggattatgac37860

gggtcaagttgtctataaatatgaggaggcacaggaaaatgactaacacattaacaattg37920

atcagttacaagagttattacaaatacaaaaggagttcgacgatagaataccaacgctga37980

acttacgagatagcaaaatagcatatgtagttgaattctttgaatggtttaatacattgg38040

aaacgtttaaaaactggaagaagaaaccaggtaagccgttagacgtacaacttgatgaat38100

tagctgacatgttggcgtttggattgagtattgcgaatcaagtaggagtgtcatcagaag38160

agataaaagaagcgattgaatcaagttttaaagatacagaatttcacaaaatgtttaatt38220

ttaaagataaagaatttgctcaagacgcagttgttagtacaccacagataatatttaaag38280

aattttatcccgaccaattggcaattgttatagcgatagacatagcttacaacttatatt38340

caatcaaccaactcattgacgcatacaaaaagaaaatgaaaaggaatcatgaaagacaag38400

atggaacagcagacgcaggaaaaggatacgtgtaaagacatattagatcgggtcaaggag38460

gttttggggaagtgacacaatacttagtcacaacattcaaagattcaacaggacgtaaac38520

atacacacataactaaagctaagagcaatcaaaggtttacagttgttgaggcagagagta38580

aagaagaagcgaaagagaggtacgaggcgcaagttaaaagaggtgcagttattaaagtgg38640

gtcagttgtatgaaaatataagggagtgtgggaaatgattaaaaaacttaaaaatatgga38700

tgggttcgacatctttattgttggaatactgtcattattcggtataaccgcattgctact38760

tgttgtcgcattgcctatctatacagtggctagttaccaaaacaaagaagtacatcaagg38820

gacaattacagataaatataacaaaagacaagataaagaggacaaattctatattgtatt38880

agatgataaacaagtcatcgaaaactcagacttattcttcaaaggaaagtttgatagcgc38940

agacatacaagctaggttaaaagtaggtgataaagtaaaagttaagacgattggatatag39000

aatacactttttaaatttatatccggtcttatacgaagtaaagaaggtagataaacaatg39060

attaaacaaatactaagactattattcttactagcgatgtatgagctaggtaagtatgta39120

acggagcaagtatatattatgatgacggctaatgatgatgtagaggagccgagtgacttt39180

gaaaaaatcagagctgaagtttcatgttaatagctattatcatttttgaattaattatat39240

taatgtgtttagcaatagcactggaggtgttgtaaatatgtggattgtcatttcaattgt39300

tttatctatatttttattgatcttgttaagtagcatttctcataagatgaaaaccataga39360

agcattggagtatatgaatgcttatcttttcaagcagttagtaaaaaataacggtgttga39420

aggtttagaagattatgaaaatgaagttgaacgaattagaaaaagattcaaaagctaaag39480

agaggcgttggcttctctgctctatctaaaataatgaaaggagccgaacatgttagacaa39540

agtcactcaaatagaaacaattaaatatgatcgtgatgtctcatattcttatgctgctag39600

tcgtttatccacacattggactaatcataatatggcttggtctgactttatgcagaagct39660

agcacaaacagttagaactaaagaagatttaactgagtacaataaaatgtctaagtctga39720

acaagcagatataaaagacgttggcggatttgtcggtggttatttaaaagaaggtaaacg39780

acgtgctggtcaagtcatgaatcgttcaatgttaacacttgatatcgattatgctgctca39840

agatatgactgacatattatctatgttttatgattttgcatattgtttatattcaacaca39900

taagcatagagagataagtccaagactgcgtttagtgattcctttaaaacgaaatgtaaa39960

tgcagatgagtatgaagctattgggcgtaaagtcgcagatatcgttggcatggattactt40020

cgatgatacaacttatcaacctcataggttaatgtattggccttcaactagcaacgatgc40080

ggaatttttctttacgtatgaagatttacctttgttagatccagatacaatattaaatga40140

atatgttgattggactgacacattagaatggccaacgtcttcaagggaagagagtaagac40200

taaaagattagcagataagcaaggcgacccagaagaaaagccgggaattgttggtgcatt40260

ttgtagagcctatacgatagaagaagctatagaaacttttattcctgatttatacgaaaa40320

acattctactaaccgttatacctatcatgaaggttcaactgcaggtggattggtgttata40380

cgaaaataacaagtttgcctattctcatcataatacggatcccgtaagcggtatgcttgt40440

gaacagttttgatttagtacgcatacacttatatggtgctcaagatgaagaaactaaaac40500

agatactccggttaatcgactacctagttataaagcaatgcagcaaatagcgcaaaatga40560

tgaggttgttaaaaagcaattaattaatgacaaaatgtctgatgcaatgcaggatttcga40620

tgaaatagaaaatagcgatgatgcatggtctgagacgttagaaattacttcgaaaggtac40680

tttcaaagctagtatcccaaatatagaaattatattgcgtaatgatccaaatttaaaagg40740

aaaaatagcctttaacgaatttacgaaacaaattgaatgtttagggaaagtgccatggaa40800

tactaattttaagacacgtcaatggcaagacggtgatgatagcagtttaagaagttatat40860

cgaaaagatttatgacatacaccattcaggtaaaacaaaagatgccattataagcgtagc40920

aatgcaaaatgcttatcatccagtaagggattatctaaataaaatatcgtgggatggaca40980

taaacgtcttgaaaagttatttatcaaatacttaggtgttgaagacactgaagtgaatag41040

aacaactaccaaaaaagcattgactgctggaatcgctagagtaatggagcctggatgtaa41100

atttgactatatgcttacactttatggtcctcaaggtgtaggtaaatctgctttgctaaa41160

aaaattaggtggtgcatggttttctgacagtttagtttctgttacaggtaaagaagctta41220

tgaggccttacaaggcgtttggctaatggaaatggcagaacttgcagctacaagaaaagc41280

tgaagttgaagctattaagcatttcatatctaaacaagttgaccgatttcgtgttgctta41340

tgggcattatattgaagattttccaaggcaatgtattttcattggtacaactaataaagt41400

tgatttcttaagagatgaaactggtggaagacgtttttggccaatgactgtaaatccaga41460

gagagttgaagtgaactggtctaaactaaccaaagatgagattgaccaaatttgggcaga41520

agctaaacactattatgaacaaggagaagatttattccttaaccctgaactagaagaaga41580

aatgcgttcaatacaaagcaaacatactgaggaatctccatatacaggcattattgatga41640

atatcttaacacaccaattcctagcaattgggatgacttaactatctttgaacgaagacg41700

attttatcaaggtgatgttgatatgttaccaacaggaaatgtagattacgttaaaagaaa41760

taaagtctgtgcgcttgaagtgtttgttgaatgttttggtaaagataagggagatagtag41820

aggatctatggaaattagaaagatttcaaacatcttaagacaattagacaattggtctgt41880

atatgatggtaataaaagtgggaaaattcgatttggaaaagattatggtgtacagatagc41940

ttatgtaagagatgaaagtttagaggatttaatataagaaatattgaataaatatgcatt42000

ttagagtgttgtatcagatgttgcatcattttttgagtgatgcaacacgggagtgtaaaa42060

agtaatcgtaggtgttgtatcatttttggtgatgcaacattgatgaaacaaatgatacaa42120

cacctctttcctttctagctgtagggttcaaccctgtttgtttccaatgttgcatcaaat42180

tcactataaagtttaaaaagtagtgttagggagtaaaggggtataggggtaaccctctaa42240

cagctatttttaaaagtttggcaagaattgatacaacatcggaacacaaatataaatttt42300

gtatacaaggtgaataaatgaaagaatcgacattagaaaaatatttagtgaaagagataa42360

caaagctaaacggtttatgtttgaaatgggtcgcacctggaacaagaggtgtgccagata42420

gaattattattatgccagaaggaaaaacatattttgtagaaatgaagcaagaaaaaggaa42480

agttgcatcctttacaaaaatatgtgcatagacaatttgaaaatagagatcataaagtat42540

atgtgttatggaataaagaacaagtaaatacttttatcagaatggtaggtggaacatttg42600

gcgattgacttcaaaccacatagctatcaaaagtatgcaatagataaagttattgataat42660

gagaaatacggtttgtttttagatatggggctagggaaaacagtatcaacacttacagca42720

tttagtgaattgcagttgttagacactaaaaaaatgttagtcatagcacctaaacaagtt42780

gctaaagatacatgggttgatgaagttgataagtggaaccatttaaatcatctgaaagtg42840

tctttagtcttaggaacacctaaagaaagaaatgatgcattaaacacagaggctgatatc42900

tatgtaaccaataaagaaaatactaaatggttatgcgatcaatataaaaaagaatggcca42960

tttgatatggttgtaattgatgaactgtctacatttaaaagtcctaagagtcaaaggttt43020

aaatctattaaaaagaaattaccactcattaatagatttataggattaacaggaacacct43080

agcccaaatagtttacaggatttatgggctcaagtttatttgatagacagaggcgaaaga43140

cttgagtcttcattcagtcgttatcgagaaaggtactttaaaccaacacatcaagttagc43200

gaacatgtttttaactgggagctaagagacggatctgaagaaaagatatatgaacgaata43260

gaagatatatgtttaagcatgaaagcgaaagattatctagatatgcctgacagagttgat43320

actaaacaaacagtagtcttatctgaaaaagaaagaaaagtatatgcagaattagaaaaa43380

aactatattttagaatcggaagaagaaggaacagttgtagctcagaatggggcatcatta43440

agtcaaaaactacttcaactatctaacggtgcagtttatacagatgatgaagatgtaaga43500

cttatacatgataagaagttagataagttagaggaaattatagaggagtctcaaggccaa43560

ccaatattattgttttataacttcaaacatgataaagaaagaatacttcaaaggtttaag43620

gaagcaaccacattagaggattcaaactataaagaacgttggaatagtggagacattaag43680

ctgcttatagcacatccagcaagtgcagggcatggattaaacttacaacaaggtgggcac43740

attattgtttggtttggacttacatggtcattggaattataccaacaagcaaatgcaaga43800

ttatatagacaaggacaaaatcatacgactattattcatcacattatgaccgataacaca43860

atagatcaaagagtatataaagctttacaaaataaagaactaacgcaagaagaattgatg43920

aaagctattaaagcaagaatagctaagcataagtaatggaggtataagatgggaaaggca43980

tcatacgatattaagccaggtacatttaaatatattgagtcagagatatataacctacaa44040

gagaacaagaaagagataaatagattgagaatggagatacttaacccaacgaaagagcta44100

gacactaacattgtgtatggaccgttgcaaaaaggtgaaccagttagaacaactgaacta44160

atggcaacaaggttattgactaataagatgttacgaaacctagaagaaatggtcgaagca44220

gttgaaagtgaatacttaaagttacctgaagatcataagaaagtaataaggttaaagtat44280

tggaatagagataagaagctaaagatagagcaaataggagatgcatgtcacatgcatcgt44340

aatacagttactacagtacgaaagaactttgttaaagcggtagcgtatcatgcgggtatc44400

aaataacattgtgcaaagattgtgcaaaaggcctacaaatctgtagtaatatgatagtat44460

cggaaagatgtataaagttatctaaaagttatacgacataagtaaacgaggcacatcgct44520

atgcggtgtgtcttttgttatgcaatcgaagaggtgtaagagttgatcaagcgtaataac44580

atttataagcatggtcgtaagtcatatcaatacgattggttctatcattcaaaagcatgg44640

aagaagttaagagagatagcattagatagagataattatctttgtcaaatgtgtttacgc44700

gaagatattgtaacagatgcaaacattgtacatcacattatttatgttgatgaagatttt44760

aacaaagctttagacttagataatctaatgtcagtttgttatagttgtcataacaaaatt44820

catgcaaatgataaaaacaaagataaatataaaaataaaaagtttcgagttgaaaaaatt44880

taaataaaaaattataaaataatttttaatcccccctacctggtggggagttccattata44940

caccgggaaccggtgaaggcaggaacgagagcagcgcagataatttttcatgaaaggggg45000

ttttcttatgaaattaacaaaaaaacagctgaaagaatatattgaagactacaaaaaatc45060

tgacgatatgttaattaatttatatttagaaacatatgaattttattgtcg45111