本发明涉及医药
技术领域：
。更具体地说，本发明涉及一种用于制备治疗肝癌药物的芳基钌配合物及其制备方法和用途。
背景技术：
：化疗是癌症治疗的主要手段之一。1978年，barnettrosenberg发现顺铂抗肿瘤药的特性，顺铂已成为目前最常用的抗肿瘤药物之一。顺铂的发现激发了广大科技工作者对于铂类金属药物的研究，卡铂、奥沙利铂等几代铂配合物被合成出来并应用于临床，但这些药物不可避免地仍带有顺铂类似的缺点，而且目前运用于临床化疗或辅助的数十种抗肿瘤药物，仅对部分肿瘤的治疗具有较好的治愈效果。因此，制备新的金属配合物抗肿瘤药物，为肿瘤疾病的治疗可以提供更多更好的选择，已成为目前的研究热点。技术实现要素：本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本发明还有一个目的是提供一种用于制备治疗肝癌药物的芳基钌配合物，其含有苯并咪唑和吲唑杂环，具有良好的生物活性；有大共轭体系，分子更稳定。为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种用于制备治疗高血压药物的芳基钌配合物，该芳基钌配合物的化学名称为：(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)，结构式为：理化性质：棕色晶体，易溶于水和有机溶剂，其核磁共振氢谱数据为1hnmr(cdcl3溶剂):δ8.33(s,1h),8.29(d,j＝1.4hz,1h),7.60(dd,j＝7.5,1.4hz,1h),7.51(dd,j＝7.5,1.5hz,2h),7.15(t,1h),7.09(d,j＝1.6hz,1h),6.65(dd,j＝7.5,1.6hz,1h),5.29(d,1h,j＝5.7hz),5.09(d,1h,j＝5.7hz),4.71(d,1h,j＝5.7hz),4.55(s,2h),4.37(d,j＝3.1hz,2h),3.98(t,2h),3.91(d,1h,j＝5.7hz),3.86–3.76(m,4h),3.63–3.51(m,4h),3.39–3.29(m,3h),2.76(t,1h),2.73-2.61(m,1h),2.56(dd,j＝5.4,3.6hz,2h),2.31(dd,j＝5.4,3.5hz,2h),1.96(s,3h),1.18-1.08(m,6h)ppm。本发明还提供上述芳基钌配合物的制备方法，具体包括以下步骤：步骤一、将2-(4-哌啶基)苯并咪唑与n-溴代丁二酰亚胺反应制得2-(4-哌啶基)-5-溴-苯并咪唑，其结构式为；步骤二、将2-(4-哌啶基)-5-溴-苯并咪唑与6-溴吲唑、二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌、二乙二醇双(2-丙炔基)醚以及氯化锌反应制得(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)。优选的是，二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌的制备方法为：将rucl3·xh2o和γ-松油烯溶于无水乙醇，加热回流搅拌后，静置析出得到二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌，其结构式为：优选的是，所述芳基钌配合物通过一锅法制备，其中步骤一的具体过程为：取2-(4-哌啶基)苯并咪唑，加入四氯化碳溶剂、偶氮二异丁腈、n-溴代丁二酰亚胺，加热回流反应22～26h，旋蒸除去溶剂即得2-(4-哌啶基)-5-溴-苯并咪唑。优选的是，步骤二的具体过程为：将2-(4-哌啶基)-5-溴-苯并咪唑与6-溴吲唑、二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌一起溶于无水甲苯，边搅拌边滴加naoh溶液和乙二胺，再加入三乙胺和碳酸铯，然后通入氮气，加入四(三苯基膦)钯、碘化铜以及二乙二醇双(2-丙炔基)醚，加热至75～85℃反应22～26h后，加入氯化锌和盐酸，析出棕色固体即为(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)。本发明还提供上述芳基钌配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明还提供上述芳基钌配合物在制备治疗高血压药物中的应用。本发明还提供一种负载有上述芳基钌配合物植入材料的制备方法，包括以下步骤：步骤一、配制甲基丙烯酸、偶氮二异丁腈与乙醇的混合溶液，同时配制芳基钌配合物、环孢菌素、二氯甲烷的混合溶液；步骤二、将医用聚氨酯浸泡于乙烯基三甲氧基硅烷-乙醇溶液中，取出洗净后再浸泡于甲基丙烯酸、偶氮二异丁腈与乙醇的混合溶液中，升温至95～105℃反应25～35min步骤三、将芳基钌配合物、环孢菌素、二氯甲烷的混合溶液滴于经步骤二处理的医用聚氨酯表面，再将医用聚氨酯置于95～105℃下反应25～35min，反应完成后洗净、干燥。优选的是，，包括以下步骤：步骤一、将甲基丙烯酸和偶氮二异丁腈按物质的量比为300～500：1的比例加入体积分数为25～35％的乙醇-水溶液中并搅拌均匀，配制成甲基丙烯酸、偶氮二异丁腈与乙醇的混合溶液，将芳基钌配合物加入质量浓度为0.3～0.5mg/ml的环孢菌素-二氯甲烷溶液中，至芳基钌配合物的质量浓度为0.5～1.5mg/ml，配制成芳基钌配合物、环孢菌素、二氯甲烷的混合溶液；步骤二、取医用聚氨酯浸泡于体积分数为3～7％的乙烯基三甲氧基硅烷-乙醇溶液中，浸泡0.5～1小时后用蒸馏水洗净、干燥，再将医用聚氨酯浸入甲基丙烯酸、偶氮二异丁腈与乙醇的混合溶液中，并在95～105℃下反应25～35min，反应过程中通入氮气保护，反应完成后将医用聚氨酯用蒸馏水洗净、干燥；步骤三、将芳基钌配合物、环孢菌素、二氯甲烷的混合溶液滴于经步骤二处理的医用聚氨酯表面，再将医用聚氨酯置于95～105℃下反应25～35min，反应完成后将医用聚氨酯置于蒸馏水中超声5～15min，取出置于75～85℃真空干燥。优选的是，所述医用聚氨酯在步骤二前依次用丙酮、乙醇和蒸馏水各超声30分钟。本发明至少包括以下有益效果：1、本发明的芳基钌配合物可用于制备治疗癌症和高血压的药物，可制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂的形式使用。2、本发明用一锅法制备芳基钌配合物，制备方法简单，具有成本低的优势，反应中间过程无需分离提纯操作，更加绿色。3、本发明的芳基钌配合物含有苯并咪唑和吲唑杂环，具有良好的生物活性，且还含有大共轭体系，分子更稳定。4、本发明的芳基钌配合物具有乙二醇结构，增强其疏水作用，有利于穿透癌细胞细胞膜，增强其抗肿瘤活性。5、环孢菌素的环状结构可使芳基钌配合物部分嵌入环内，达到缓释和长效活性的作用。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。本发明提供一种用于制备治疗肝癌药物的芳基钌配合物，该芳基钌配合物的化学名称为：(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)，结构式为：本发明还提供上述芳基钌配合物的制备方法。<实施例1>上述芳基钌配合物通过一锅法制备，具体包括以下步骤：称取196mg2-(4-哌啶基)苯并咪唑，加15ml四氯化碳溶剂，加入0.5mg偶氮二异丁腈，172mgn-溴代丁二酰亚胺，加热回流反应22h。旋蒸除去溶剂，加入115mg6-溴吲唑，和26.5mg二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌共同溶于10ml无水甲苯，搅拌滴加0.1mlnaoh和0.05ml乙二胺，加入1mg碳酸铯，4ml三乙胺，通氮气30min，加入10mg四(三苯基膦)钯、1.4mgcui、57mg二乙二醇双(2-丙炔基)醚，加热至75度反应22小时后，加入0.5mg氯化锌和0.5ml盐酸，析出棕色固体，即为产物(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)。其中，二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌的制备方法为：称取0.366g钌质量分数为37％的rucl3·xh2o和3ml纯度95％的γ-松油烯溶于10ml无水乙醇，加热回流搅拌6小时，静置析出得到二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌。<实施例2>上述芳基钌配合物通过一锅法制备，具体包括以下步骤：称取201mg2-(4-哌啶基)苯并咪唑，加20ml四氯化碳溶剂，加入1mg偶氮二异丁腈，177mgn-溴代丁二酰亚胺，加热回流反应24h。旋蒸除去溶剂，加入120mg6-溴吲唑，和31.5mg二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌共同溶于15ml无水甲苯，搅拌滴加0.2mlnaoh和0.1ml乙二胺，加入3mg碳酸铯，6ml三乙胺，通氮气30min，加入15mg四(三苯基膦)钯、1.9mgcui、62mg二乙二醇双(2-丙炔基)醚，加热至80度反应24小时后，加入1mg氯化锌和1ml盐酸，析出棕色固体，即为产物(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)。其中，二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌的制备方法为：称取0.366g钌质量分数为37％的rucl3·xh2o和3ml纯度95％的γ-松油烯溶于10ml无水乙醇，加热回流搅拌6小时，静置析出得到二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌。本实施例制得的芳基钌配合物，其核磁共振氢谱数据为1hnmr(cdcl3溶剂):δ8.33(s,1h),8.29(d,j＝1.4hz,1h),7.60(dd,j＝7.5,1.4hz,1h),7.51(dd,j＝7.5,1.5hz,2h),7.15(t,1h),7.09(d,j＝1.6hz,1h),6.65(dd,j＝7.5,1.6hz,1h),5.29(d,1h,j＝5.7hz),5.09(d,1h,j＝5.7hz),4.71(d,1h,j＝5.7hz),4.55(s,2h),4.37(d,j＝3.1hz,2h),3.98(t,2h),3.91(d,1h,j＝5.7hz),3.86–3.76(m,4h),3.63–3.51(m,4h),3.39–3.29(m,3h),2.76(t,1h),2.73-2.61(m,1h),2.56(dd,j＝5.4,3.6hz,2h),2.31(dd,j＝5.4,3.5hz,2h),1.96(s,3h),1.18-1.08(m,6h)ppm。<实施例3>上述芳基钌配合物通过一锅法制备，具体包括以下步骤：称取206mg2-(4-哌啶基)苯并咪唑，加25ml四氯化碳溶剂，加入1.5mg偶氮二异丁腈，182mgn-溴代丁二酰亚胺，加热回流反应26h。旋蒸除去溶剂，加入125mg6-溴吲唑，和36.5mg二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌共同溶于20ml无水甲苯，搅拌滴加0.3mlnaoh和0.15ml乙二胺，加入5mg碳酸铯，8ml三乙胺，通氮气30min，加入20mg四(三苯基膦)钯、2.4mgcui、67mg二乙二醇双(2-丙炔基)醚，加热至85度反应26小时后，加入1.5mg氯化锌和1.5ml盐酸，析出棕色固体，即为产物(2-(4-(n-(5-二乙二醇双(2-丙炔基)醚基)吲唑基哌啶基))苯并咪唑基)一甲基异丙基苯合钌(ii)。其中，二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌的制备方法为：称取0.366g钌质量分数为37％的rucl3·xh2o和3ml纯度95％的γ-松油烯溶于10ml无水乙醇，加热回流搅拌6小时，静置析出得到二氯化二氯二甲基异丙基苯合二钌。<实施例4>一种负载有上述芳基钌配合物的植入材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将2mol甲基丙烯酸和5mmol偶氮二异丁腈加入50ml水和15ml乙醇中，搅拌均匀，配制成甲基丙烯酸、偶氮二异丁腈与乙醇的混合溶液，将2mg环孢菌素溶于5ml二氯甲烷，加入5mg芳基钌配合物，搅拌均匀，配制成芳基钌配合物、环孢菌素、二氯甲烷的混合溶液；步骤二、取医用聚氨酯依次用丙酮、乙醇和蒸馏水各超声30分钟，除去表面油脂，再将医用聚氨酯浸泡于体积分数为5％的乙烯基三甲氧基硅烷-乙醇溶液中，浸泡1小时后用蒸馏水洗净、干燥，再将医用聚氨酯浸入甲基丙烯酸、偶氮二异丁腈与乙醇的混合溶液中，并在100℃下反应30min，反应过程中通入氮气保护，反应完成后将医用聚氨酯用蒸馏水洗净、干燥；步骤三、将芳基钌配合物、环孢菌素、二氯甲烷的混合溶液滴于经步骤二处理的医用聚氨酯表面，再将医用聚氨酯置于100℃下反应30min，反应完成后将医用聚氨酯置于蒸馏水中超声10min，取出置于80℃真空干燥，到负载芳基钌配合物的医用聚氨酯。<体外抗肿瘤活性实验>采用mtt方法，进行体外细胞毒性测定。将实施例2得到的芳基钌配合物与胃癌sgc7901细胞株和肝癌bel-7404细胞株分别作用时间72小时，结果如表1所示。表1芳基钌配合物对肿瘤细胞株的半数有效浓度(ic50)从表1的结果可以看出，本发明的芳基钌配合物具有强的抗肿瘤活性。本发明为研究开发新的抗肿瘤药物提供了新的思路。<血管紧张素转化酶(ace)抑制活性实验>配制0.2mol/lnacl的硼酸盐缓冲液(硼酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/l)，调节ph至8.3，将底物马尿酸-组氨酸-亮氨酸溶解于nacl的硼酸盐缓冲液中,至浓度为5.0mmol/l。取100μl上述马尿酸-组氨酸-亮氨酸溶液与100μl浓度为0.1g/l的芳基钌配合物(实施例2制得)-水溶液混合,再加入150μl0.1u/ml血管紧张素转化酶溶液(溶于0.1mol/l含0.2mol/lnacl底物的硼酸盐缓冲液中,ph＝8.3)，于37℃反应60min。加入250μl浓度为1.0mol/lhcl终止反应,然后加入乙酸乙酯1.5ml进行萃取,强烈振荡1min,在3000r/min下离心5min。取酯层0.5ml,加入1.0ml乙酸酐和2.0ml0.5％的二氨基联苯胺显色剂，40℃显色30min,在459nm处测定其吸光值。根据以下公式计算抑制率：ace抑制率＝[(a-s)/(a-c)]×100％其中a为以水代替抑制剂所测定的吸光值，s为添加抑制剂所测定的吸光值，c为加乙酸乙酯、乙酸酐和显色剂的参比吸光值。表2芳基钌配合物的ace抑制率(％)抑制剂ace抑制率(％)芳基钌配合物81.7％从计算结果可知，本发明中芳基钌配合物具有很好的ace抑制作用。<芳基钌配合物的缓释实验>将实施例4制得的负载芳基钌配合物的医用聚氨酯放入100mlpbs溶液中，磁力搅拌.每隔一段时间，吸取缓释液，在紫外分光光度计下测定其吸光度；经测定后的液体倒入烧杯中继续搅拌，使其保持缓释液的体积不变；最后，根据吸光度计算质量浓度，进而得到药物随时间变化的释放量。表3为不同时间的药物释放率。表3不同时间的药物释放率可见，负载芳基钌配合物的医用聚氨酯具有缓慢释放的效果，可作为植入材料达到长效作用。尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。当前第1页12