一种从藤茶中提取分离二氢杨梅素的方法与流程

本发明属于天然药物提取分离领域，涉及一种从藤茶中提取分离二氢杨梅素的方法。

技术背景

二氢杨梅素又称蛇葡萄素，属于黄酮类有机化合物，分子式为c15h12o8，化学式为(2r,3r)-3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)苯并二氢吡喃-4-酮，多提取自葡萄科蛇葡萄属的一种木质藤本植物。二氢杨梅素纯品为白色针状结晶，易溶于热水，乙醇及丙酮，微溶于醋酸乙酯，不溶于氯仿、石油醚。研究表明二氢杨梅素在温度大于100℃的条件下，会发生不可逆氧化反应。二氢杨梅素在中性和偏酸性条件下稳定。二氢杨梅素是一种特殊的黄酮类化合物，近年来其药理作用受到广泛关注。近10余年来关于二氢杨梅素抗肿瘤、抗炎、抗氧化、解酒护肝、抗病原微生物、降血糖、抗疲劳和调血脂等方面的研究文献不断有更新，随着二氢杨梅素的药理作用的不断研究深入，市场对为二氢杨梅素的需求也在不断增加。

藤茶学名为显齿蛇葡萄，是葡萄科蛇葡萄属植物中的一种藤本植物，广泛分布于湖南、湖北、云南、贵州、广东、广西、江西等省区，集中或散生于400～1300m的山坡混交林中。藤茶有着悠久的药用史，对于咽喉肿痛、慢性肾炎、肝炎、胃病等常见症状治疗效果较好。对其进行化学成分分析，发现藤茶中含有丰富的黄酮类物质，其有效部位黄酮总量最高可达40％，其中二氢杨梅素单体含量可达30％左右。

目前从藤本植物中提取二氢杨梅素的工艺,主要包括溶剂(有机溶剂、热水、碱液)提取、超声技术提取、微波技术提取、超临界co2萃取法、酶法提取等。通过一步提取所得的提取液，二氢杨梅素含量虽然有所提高，但含量(hplc)一般在60％左右，仍然不能满足国家药监局对中药提取物的要求(单一成分液相含量在90％以上)，且部分提取工艺不适于工业生产。

技术实现要素：

针对以上问题，本发明目的在于提供一种从藤茶中提取分离二氢杨梅素的方法，解决现有技术中存在的产品纯度较低，工艺复杂，不适用于工业生产的问题。

本发明所要解决的技术问题采用以下技术方案来实现。

一种从藤茶中提取分离二氢杨梅素的方法，具体步骤如下：

1)称取藤茶叶，然后向其中加入溶剂，多次搅拌回流提取，合并滤液；

2)向步骤1)所述滤液中加入活性炭，进行脱色处理，过滤，保留滤液，然后浓缩滤液；

3)将步骤2)浓缩后的滤液结晶，过滤，晶体使用冷水洗涤，真空干燥。

进一步的，步骤1)所述溶剂体积用量以藤茶叶质量计为15-20ml/g；反应温度为70-80℃；每次回流提取时间为0.5-1h；回流提取次数为1-3次。

进一步的，步骤1)所述溶剂为乙醇或甲醇溶液。

进一步的，所述乙醇或甲醇溶液的浓度为70-80％。

进一步的，步骤2)所述活性炭的加入量为步骤1)所述滤液质量的20-40％，脱色温度为40-60℃，脱色时间为0.5-1h，浓缩条件为至藤茶叶原料重量的2-3倍体积。

进一步的，步骤3)所述结晶温度为0-20℃，结晶时间为8-12h，干燥温度为60-70℃，干燥时间为6-8h。

与现有技术相比，本发明有以下有益效果：

本工艺首先借助溶剂萃取法，对藤茶中的二氢杨梅素进行初步提取，通过活性炭脱色来去除提取液中的色素，最后利用二氢杨梅素难溶于常温水，易溶于热水的特性通过浓缩、结晶的纯化方式实现对产品质量的提高，得到的二氢杨梅素的液相含量在90％以上，收率高，质量稳定；且工艺简单，稳定，易于实现工业化生产。

附图说明

图1为实施例1的液相色谱图；

图2为实施例2的液相色谱图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步的详细说明。

实施例1

称取500g藤茶叶，置于圆底烧瓶中，按1g藤茶叶：15ml乙醇添加7.5l70％乙醇，水浴搅拌回流提取0.5h，过滤，保留滤液，滤渣按上述过程重复提取一次，合并两次提取液，加入20％的活性炭，于40℃下搅拌脱色0.5h，过滤得滤液，浓缩至藤茶原料重量的2倍体积，转至0-20℃下结晶8h，过滤，加适量冷水洗涤，于60℃下真空干燥8h，得二氢杨梅素99.0g，得率在19.8％，产品纯度为99.6％，液相色谱图参见图1。

实施例2

称取600g藤茶叶，置于圆底烧瓶中，按1g藤茶叶：20ml乙醇添加12l75％乙醇，水浴搅拌回流提取45min，滤渣按上述过程重复提取两次，合并三次提取液，加入30％的活性炭，于50℃下搅拌脱色45min，过滤得滤液，浓缩至藤茶原料重量的2.5倍体积，转至0-20℃下结晶10h，过滤，加适量冷水洗涤，于65℃下真空干燥7h，得二氢杨梅素112.0g，得率在18.7％，产品纯度为99.4％，液相色谱图参见图2。

实施例3

称取700g藤茶叶，置于圆底烧瓶中，按1g藤茶叶：20ml乙醇添加14l80％乙醇，水浴搅拌回流提取1h，滤渣按上述过程重复提取一次，合并两次提取液，加入40％的活性炭，于60℃下搅拌脱色1h，过滤得滤液，浓缩至藤茶原料重量的3倍体积，转至0-20℃下结晶12h，过滤，加适量冷水洗涤，于70℃下真空干燥6h，得二氢杨梅素115.0g，得率在16.4％，产品纯度为99.5％。

实施例4

称取500g藤茶叶，置于圆底烧瓶中，按1g藤茶叶：16ml乙醇添加8l70％乙醇，水浴搅拌回流提取0.8h，过滤，保留滤液，滤渣按上述过程重复提取一次，合并两次提取液，加入30％的活性炭，于45℃下搅拌脱色0.6h，过滤得滤液，浓缩至藤茶原料重量的2倍体积，转至0-20℃下结晶9h，过滤，加适量冷水洗涤，于60℃下真空干燥7h，得二氢杨梅素104.0g，得率在20.8％，产品纯度为99.3％。

高效液相色谱(hplc)测定条件：

仪器：岛津高效液相色谱仪lc-20a(带sil-20a自动进样器及labsolutiondb工作站)

色谱柱：angilent-tcc18，250mm×4.6mm，5um

波长：291nm

进样量：10ul

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种从藤茶中提取分离二氢杨梅素的方法，属于天然药物提取分离领域。具体步骤如下：1)称取藤茶叶，然后向其中加入溶剂，加热搅拌回流提取，过滤，滤渣继续回流提取，合并两次提取液；2)向所述提取液中加入活性炭，进行脱色处理，然后过滤得到滤液，将所述滤液浓缩；3)将浓缩后的材料结晶，过滤，晶体使用冷水洗涤，真空干燥。本发明工艺简单，稳定，易于实现工业化生产。

技术研发人员：季浩;闫成亮;阚建伟;窦长清;孔繁博;徐娟
受保护的技术使用者：江苏天晟药业股份有限公司
技术研发日：2018.08.23
技术公布日：2018.11.20