一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法与流程

文档序号:16755379发布日期:2019-01-29 17:18阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明涉及一种乳酸脱氢酶突变体基因LbLDH1及其在大肠杆菌中高效表达的发酵方法。该发明依赖于遗传资源Lactobacillus bulgaricus的乳酸脱氢酶基因,在此基础上进行点突变并对基因序列进行密码子优化后,连接到表达载体上,构建重组质粒并导入大肠杆菌中,重组乳酸脱氢酶突变体在大肠杆菌中获得了可溶性高表达,离心收集的菌体经高压均质机破菌后,粗酶液可在低温下存放5天,活性无明显衰减。通过本方法制备的重组乳酸脱氢酶突变体与未进行突变及序列优化的重组乳酸脱氢酶相比,表达量提高了五倍以上,且在高pH值下的活性损失更小,有更广的pH值适用范围。本发明在乳酸发酵制备及NAD/NADH循环中有广阔的应用前景。

技术研发人员:魏琪;邱鹏;蒋飞;张骞;王洪;罗红
受保护的技术使用者:四川自豪时代药业有限公司
技术研发日:2018.09.13
技术公布日:2019.01.29
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