猪δ冠状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法及其应用与流程

文档序号:17395551发布日期:2019-04-13 00:47阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明涉及生物分子学领域,特别是指猪δ冠状病毒TaqMan荧光定量RT‑PCR检测方法及其应用。设计一对引物用于扩增PDCoV M基因。将测序正确的基因片段克隆入pMD18‑T载体,并构建重组质粒作为标准品模板,在M基因序列内,设计合成一对特异性引物与TaqMan探针,通过反应条件和反应体系的优化,建立快速检测PDCoV的TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测方法,并对其敏感性、特异性与重复性进行验证。本发明能有效扩增1.0×101‑1.0×109拷贝/μL的PDCoV标准质粒以及其它阳性样品,并且呈现良好的线性关系。该方法的检测灵敏度为1.0×101拷贝/μL;该方法具有良好的特异性、重复性。

技术研发人员:郑兰兰;魏战勇;王松山;朱静静;王盼;梁青青;李炳晓
受保护的技术使用者:河南农业大学
技术研发日:2018.12.22
技术公布日:2019.04.12
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