一种用柚果提取物合成新橙皮苷的方法与流程

本发明属于新橙皮苷合成技术领域，涉及一种用柚果提取物合成新橙皮苷的方法。

背景技术：

新橙皮苷是一种二氢黄酮类化合物，少量存在于一些芸香科植物（酸橙、甜橙、枳壳、枳实及毛两面针等）和茜草科植物（毛钩藤等）中，分子式为c28h34o15，相对分子量为610.56，熔点为240-243°c，曾经被称为维生素p。新橙皮苷在医药领域最主要的用途是应用在胃肠类药物当中，具有化痰消积、破气除痞等功效，药理研究表明：枳实、枳壳中的新橙皮苷等黄酮类化合物对大鼠平滑肌的非生理性收缩有抑制作用，并可对抗氯化钡、乙酰胆碱引起的痉挛性收缩，此外还有抗菌消炎作用；此外，新橙皮苷有较好的耐热，耐酸性，在食品行业新橙皮苷可以直接作为甜味剂使用，在我国也有用在烟草行业抑制烟草的杂气；同时，由新橙皮苷衍生得到的新橙皮苷二氢查尔酮，其甜味相当于蔗糖的1500-1800倍，它不仅甜度高于糖精、甜蜜素或阿斯巴甜等常用的甜味剂，而且适口性更好，口感近似于白糖，更可贵的是，新橙皮苷二氢查尔酮具有良好的屏蔽苦味作用，用于苦味药片(或液体制剂)中，以此矫正化学药的强烈苦味，从而提高片剂或液体药剂的的适口性，新橙皮苷二氢查尔酮已被美国、欧洲、日本、中国等30多个国家批准作为食品添加剂使用。

随着近些年对新橙皮苷和新橙皮苷二氢查尔酮的深入研究，挖掘出他们的更多价值和用途，对新橙皮苷的需求量迅速增大，然而由于可供提取新橙皮苷的天然药用植物较少，新橙皮苷在植物中的含量也较低，再加之新橙皮苷在植物中常常与橙皮苷、柚皮苷等许多结构非常相似的黄酮类化合物共存，分离较困难，造成新橙皮苷的供应远远满足不了市场的需求。

目前文献报道的柚皮苷化学合成法，可分为一步法和两步法，一步法是用柚皮苷直接与异香兰素反应得到新橙皮苷；两步法首先是把柚皮苷水解生成根皮乙酰苯-4’-新橙皮糖苷。但是现有的合成工艺存在工艺格，操作复杂，生产周期较长，成本高等问题。

技术实现要素：

本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

为实现上述目的，本发明提供一种用柚果提取物合成新橙皮苷的方法，包括如下步骤：

1）水解：

①在搅拌条件下往柚果提取物粗品中加入纯水，再加入稀碱溶液，控制最终碱液浓度5%~20%，保温反应一段时间；

②反应完后加少量冰水使反应液温度降至35~45℃，调节ph，在温度0~20℃下析晶24h；

③过滤，水洗至洗出液澄清，抽干；

④适量热水溶解，活性炭脱色；

⑤过滤，冷藏析晶过夜，过滤，水洗至洗出液澄清，抽干后得到根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷；

2）合成：

①用有机溶剂溶解根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷后，加入冰醋酸，再加入异香兰素；

②最后再加入适量脯氨酸类似物，回流20h；

③降温至40-50℃后，过滤，水洗滤饼至洗出液无色；

④滤饼制浆浸泡后，过滤，再次水洗至洗出液无色，滤干，烘干，粉碎后得到新橙皮苷产品。

优选的是，在步骤1）①中，柚果提取物粗品与纯水的重量比为1：（5-12）。

优选的是，在步骤1）①中，所述保温反应的温度为80-120℃，反应时间为3-10h。

优选的是，在步骤1）①中，所述稀碱溶液可采用氢氧化钠、氢氧化钾等无机碱。

优选的是，在步骤1）②中，所述调节ph的酸为盐酸、硫酸等水溶性无机酸或有机酸；ph范围为2~7；所述冰水的重量为柚果提取物粗品重量的3~4倍量。

优选的是，在步骤2）①中，所述有机溶剂与根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷的质量比为（3~10）：冰醋酸与根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷的质量比为（0.1~0.25）：1；异香兰素与根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷的质量比为（0.2~0.4）：1；所述有机溶剂可采用甲醇、乙醇等常用低碳醇。

优选的是，在步骤2）②中，所述脯氨酸类似物采用甘油-l-脯氨酸，顺式-4-羟基-d-脯氨酸，顺式-4-羟基-l-脯氨酸，3,4-脱氢-l-脯氨酸，l-羟基脯氨酸,n-甲基l-脯氨酸，l-脯氨酸盐酸盐中的任一种。

优选的是，在步骤2）④中，浸泡时间为1~2h。

本发明至少包括以下有益效果：一种用柚果提取物合成新橙皮苷的方法工艺简单，直接用柚果提取物粗品，去掉了精制成柚皮苷的复杂中间步骤；冰醋酸为反应提供一个弱酸性条件，黄酮类在此条件下结构更稳定，同时酸性很弱又不至于影响催化剂的作用；同时起到一个缓冲液的作用，控制反应剧烈程度，使反应不会过分剧烈，使反应向期望的方向发展的同时减少了副反应，得到的产物品质更高，使后期处理更简单易行；将催化剂脯氨酸改成了另一种脯氨酸类似物，更好的控制反应过程，减少副反应，提高产品质量和收率；另外，保温反应后加冰水使水解产品迅速降温，提高了水解产品的质量和收率。

附图说明

图1为新橙皮苷分子结构式。

图2为本发明的新橙皮苷标准品的红外光谱图。

图3为本发明制得的新橙皮苷的红外光谱图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

实施例1：

一种用柚果提取物合成新橙皮苷的方法，包括如下步骤：

1）水解：

①在搅拌条件下往柚果提取物粗品中加入纯水，再加入稀碱溶液，控制最终碱液浓度10%，在100℃保温反应5h；

②反应完后加少量冰水使反应液温度降至40℃，调节ph，在温度0~20℃下析晶24h；

③过滤，水洗至洗出液澄清，抽干；

④适量热水溶解，活性炭脱色；

⑤过滤，冷藏析晶过夜，过滤，水洗至洗出液澄清，抽干后得到根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷；

2）合成：

①用5倍重量的有机溶剂溶解根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷后，加入0.1倍冰醋酸，0.2倍异香兰素；

②最后再加入适量脯氨酸类似物，回流20h；

③降温至40℃后，过滤，水洗滤饼至洗出液无色；

④滤饼制浆浸泡2h后，过滤，再次水洗至洗出液无色，滤干，烘干，粉碎后得到新橙皮苷产品。

本实施例中，柚果提取物粗品与纯水的重量比为1：（5~12），所述稀碱溶液可采用氢氧化钠、氢氧化钾等无机碱；所述调节ph的酸为盐酸、硫酸等水溶性无机酸或有机酸；ph范围为2~7；所述冰水的重量为柚果提取物粗品重量的3倍量；所述有机溶剂可采用甲醇、乙醇等常用低碳醇；所述脯氨酸类似物采用甘油-l-脯氨酸；

具体地，直接用柚果提取物粗品，去掉了精制成柚皮苷的复杂中间步骤；冰醋酸为反应提供一个弱酸性条件，黄酮类在此条件下结构更稳定，同时酸性很弱又不至于影响催化剂的作用；同时起到一个缓冲液的作用，控制反应剧烈程度，使反应不会过分剧烈，使反应向期望的方向发展的同时减少了副反应，得到的产物品质更高，使后期处理更简单易行；将催化剂脯氨酸改成了另一种脯氨酸类似物，更好的控制反应过程，减少副反应，提高产品质量和收率。经红外光谱定性分析，图2为新橙皮苷标准品的红外光谱图，图3为制得的新橙皮苷的红外光谱图，以波数作为横坐标，单位是cm^-1，以od值（光密度）作为纵坐标，由图2与图3可知，本发明制得的新橙皮苷各特征基团的收缩振动峰与新橙皮苷标准品各特征基团的收缩振动峰一致。本发明制得的新橙皮苷产品经高效液相色谱法（hplc）测定含量为96.28%。

实施例2：

一种用柚果提取物合成新橙皮苷的方法，包括如下步骤：

在搅拌条件下往柚果提取物粗品中加入纯水，再加入稀碱溶液，控制最终碱液浓度20%，在120℃保温反应10h；反应完后加3倍量的冰水使反应液温度降至40℃，使用盐酸调节ph至2~7，在温度0~20℃下析晶24h；过滤，水洗至洗出液澄清，抽干；适量热水溶解，活性炭脱色；过滤，冷藏析晶过夜，过滤，水洗至洗出液澄清，抽干后得到根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷；用5倍重量的有机溶剂溶解根皮乙酰苯-4’-β-新橙皮糖苷后，加入0.1倍冰醋酸，0.2倍异香兰素；最后再加入适量脯氨酸类似物，回流20h；降温至40℃后，过滤，水洗滤饼至洗出液无色；滤饼制浆浸泡2h后，过滤，再次水洗至洗出液无色，滤干，烘干，粉碎后得到新橙皮苷产品。

本实施例中，冰醋酸为反应提供一个弱酸性条件，黄酮类在此条件下结构更稳定，同时酸性很弱又不至于影响催化剂的作用；同时起到一个缓冲液的作用，控制反应剧烈程度，使反应不会过分剧烈，使反应向期望的方向发展的同时减少了副反应，得到的产物品质更高，使后期处理更简单易行。

优选地，柚果提取物粗品与纯水的重量比为1：（5~12）。

优选地，所述稀碱溶液可采用氢氧化钠、氢氧化钾等无机碱。

优选地，所述有机溶剂可采用甲醇、乙醇等常用低碳醇。

优选地，所述脯氨酸类似物采用脯氨酸类似物采用甘油-l-脯氨酸，顺式-4-羟基-d-脯氨酸，顺式-4-羟基-l-脯氨酸，3,4-脱氢-l-脯氨酸，l-羟基脯氨酸,n-甲基l-脯氨酸，l-脯氨酸盐酸盐中的任一种，将催化剂脯氨酸改成了另一种脯氨酸类似物，更好的控制反应过程，减少副反应，提高产品质量和收率。

经测试，本发明制得的新橙皮苷与新橙皮苷标准品结构一致。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。