一种水解蛋白口服液的制备方法与流程

本发明涉及水解蛋白口服液制备
技术领域：
，特别涉及一种水解蛋白口服液的制备方法。
背景技术：
：水解蛋白是动植物蛋白通过酶水解反应得到的一种复方生化药品，其主要成分为人体所需的多种氨基酸、短肽及多种微量元素，用于低蛋白血症以及各种疾病所致的营养不良，全身衰竭，亦可用于烧伤、骨折及术后的伤口愈合不良。水解蛋白提取物需经过滤浓缩纯化得到澄清浓缩液，再制成口服液或口服散剂。在生产过程中水解蛋白浓缩液的澄清度一直是产品质量控制的关键点，澄清度好的水解蛋白原料生产出的口服液质量稳定，不会出现絮状物或沉淀，反之澄清度不好会影响产品的有效期。现生产工艺的水解蛋白需要经过两次浓缩，并且在浓缩完成后采用蝶式固液分离+低温自然沉降+管式固液分离的方法，取出不溶性物质，并且为了得到较为澄清的浓缩液，需要沉降+管式离心反复循环操作4-5次，采用这种方法，使得能源消耗大，制备时间长，产量受到限制。技术实现要素：本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种生产效率高的水解蛋白浓缩液的制备方法。本发明解决上述问题所采用的技术方案是，一种水解蛋白口服液的制备方法，包括以下步骤：s1制备水解蛋白浓缩原液，包括以下步骤：豆粕清洗：将食用豆粕清洗，得到清洗后的豆粕；碱提酸沉：将清洗后的豆粕中加入饮用水并搅拌、加热，加入氢氧化钠溶液搅拌进行碱提，静置得到上层碱液，重复碱提步骤，将两次碱提得到的碱液合并，加盐酸溶液调料液进行酸沉，静置；蛋白清洗：去除碱提酸沉后的上层液，加水清洗得到大豆蛋白液；投料水解：将得到的大豆蛋白液加饮用水、处方量牛肉及鸡蛋，猪胰脏，加入氧化钙，保温水解，静置分层；过滤灭活：投料水解后进行固液分离，并进行灭活处理；沉降：过滤灭活后进行沉降处理；减压浓缩：将沉降后的上层液进行减压浓缩，得到水解蛋白浓缩原液；s2超滤：将水解蛋白浓缩原液通过超滤设备进行三级超滤，所述超滤设备包括原料桶、集料桶、一级超滤柱、二级超滤柱以及三级超滤柱，所述水解蛋白浓缩原液放置于所述原料桶内并依次经过一级超滤柱、二级超滤柱以及三级超滤柱到达集料桶内完成超滤，得到滤液；所述一级超滤柱、二级超滤柱以及三级超滤柱分别设置有一级超滤膜、二级超滤膜以及三级超滤膜，所述一级超滤膜的截留分子量为30000～70000道尔顿，所述二级超滤膜的截留分子量为6000～10000道尔顿，所述三级超滤膜的截留分子量为3400～3700道尔顿；s3灭活：将步骤s2超滤后的滤液进行灭活处理；s4沉降：将步骤s3中灭活处理后的滤液沉降处理，得到水解蛋白浓缩液；s5利用步骤s4中得到的水解蛋白浓缩液制备水解蛋白口服液配置液，并进行灭菌处理，得到水解蛋白口服液。在一些实施例中，步骤s1中水解蛋白浓缩原液的制备包括以下步骤：豆粕清洗：在水解罐中加处方量低温食用豆粕，搅拌清洗，静置，弃去上层液，得到清洗后的豆粕；碱提酸沉：往清洗后的豆粕内加入饮用水，搅拌，并采用蒸汽加热至料液温度达到58℃～62℃，加入氢氧化钠溶液调节ph至8.0～8.5，继续搅拌，然后静置，抽取上层碱提液到另一水解罐中，并重复碱提步骤，将两次碱提液合并，加1:1盐酸溶液调料液调ph达到4.4～4.6，开启蒸汽加热至沸腾，保持15分钟，关闭蒸汽，静置分层；蛋白清洗：弃去上层液，加饮用水清洗至ph为5.0～7.0得到大豆蛋白液；投料水解：将得到的大豆蛋白液加饮用水、处方量牛肉及鸡蛋，搅拌，开启蒸汽加热至沸腾，降温至40℃～50℃，加处方量猪胰脏，加入氧化钙配制液调节水解液ph到6.5～7.5，水解液在53℃～57℃保温水解9小时后静置。过滤灭活：水解完成后使用离心机将固液分离，所得离心液转至灭活灌内，开启蒸汽加热煮沸灭活30分钟；沉降：将已灭活的水解液转移至沉降罐内，低温静置沉降，沉降温度为0℃～5℃，沉降48小时以上；减压浓缩：将沉降水解上层液转移至单效浓缩器内，进行减压浓缩，得到水解蛋白浓缩原液。在一些实施例中，减压浓缩后的浓缩液中药液比重达到1.05～1.10g/ml。在一些实施例中，减压浓缩后的浓缩液中药液比重达到1.03～1.04g/ml，步骤s2超滤后，s3灭活之前进行二次浓缩，二次浓缩后的浓缩液中药液比重达到1.05～1.10g/ml。在一些实施例中，所述水解蛋白口服液的制备方法还包括管式离心步骤：将步骤s4中得到的水解蛋白浓缩液管式离心，将管式离心后的离心液重复步骤s3与步骤s4。在一些实施例中，所述超滤设备还包括设置于所述一级超滤柱与二级超滤柱之间的一级滤液桶以及设置于所述二级超滤柱与三级超滤柱之间的二级滤液桶，所述一级超滤柱与原料桶之间、二级超滤柱与一级滤液桶之间以及三级超滤柱与二级滤液桶之间均设置有回液管道，所述一级超滤柱中的滤渣通过所述回液管道回到原料桶内，所述二级超滤柱中的滤渣用过所述回液管道回到一级滤液桶内，所述三级超滤柱中的滤渣通过所述回液管道回到二级滤液桶，步骤s2中还包括回液处理，将原料桶、一级滤液桶以及二级滤液桶中的滤渣加水后再次超滤。在一些实施例中，两个所述一级超滤柱内一级超滤膜的截留分子量分别为30000道尔顿以及70000道尔顿，两个所述二级超滤柱内二级超滤膜的截留分子量分别为6000道尔顿以及10000道尔顿，所述水解蛋白把浓缩液先依次经过截留分子量为70000道尔顿以及30000道尔顿的一级超滤膜完成一级超滤，随后依次经过截留分子量为10000道尔顿以及6000道尔顿的二级超滤膜完成二级超滤。在一些实施例中，两个所述一级超滤柱内一级超滤膜的截留分子量分别为30000道尔顿以及70000道尔顿，两个所述二级超滤柱内二级超滤膜的截留分子量分别为6000道尔顿以及10000道尔顿，所述水解蛋白把浓缩液先依次经过截留分子量为70000道尔顿以及30000道尔顿的一级超滤膜完成一级超滤，随后依次经过截留分子量为10000道尔顿以及6000道尔顿的二级超滤膜完成二级超滤。在一些实施例中，水解蛋白口服液配置液的制备方法为：将水解蛋白浓缩液加入配制罐内，加入处方量蔗糖及纯化水，搅拌，加热煮沸后加入处方量羟苯乙酯，煮沸15分钟，停止加热，降温至50℃，加处方量薄荷脑，加纯化水，开搅拌器，进行循环过滤，得到水解蛋白口服液配置液。在一些实施例中，步骤s6中的灭菌方法为：将步骤s5中得到的水解蛋白口服液配置液进行灌封，放置于100℃的环境中30分钟，得到水解蛋白口服液。本发明的有益效果在于：相比于现有的采用多次管式离心+沉降的方法来制备水解蛋白浓缩液，本发明采用三级超滤的方式进行提纯，一级超滤柱的目的在于滤掉水解蛋白中的变性蛋白，细胞碎片，氧化聚合物等本身存在的较大物质，但是由于水解蛋白的独有特性，在经过一级超滤后，会有部分成分再带电荷从而形成聚合物，二级超滤与三级超滤则是再次提高滤液的纯度，即保证了水解蛋白浓缩液的澄清度，又大大提高了水解蛋白浓缩液的生产效率，缩短了生产周期，同时制备出的水解蛋白浓缩液的各项指标均合格，满足了水解蛋白口服液对水解蛋白浓缩液的要求。附图说明图1为本发明实施例一种水解蛋白浓缩液专用超滤设备的整体结构示意图；图2为本发明另一实施例的整体结构示意图；图中，1、原料桶；2、高压泵；3、回液泵；4、一级超滤柱；5、二级超滤柱；6、三级超滤柱；7、第一原液腔；8、一级超滤膜；9、第一滤液腔；10、第二原液腔；11、二级超滤膜；12、第二滤液腔；13、第三滤液腔；14、三级超滤膜；15、第三原液腔；16、一级滤液通；17、二级滤液桶；18、集料桶；19、回液管道；20、出液管道。具体实施方式下面结合附图对本发明的实施例作进一步描述。针对本发明水解蛋白口服液的制备方法，本实施例中提供一种应用于本发明的超滤设备。参照图1，一种水解蛋白浓缩液专用超滤设备，包括原料桶1以及集料桶18，原料桶1用于盛放待超滤的水解蛋白半浓缩液，这里的半浓缩液指的是只经过了一次浓缩后的水解蛋白。所述原料桶1与集料桶18之间连接有超滤柱，所述超滤柱内设置有超滤膜，所述超滤柱包括依次连接的一级超滤柱4、二级超滤柱5以及三级超滤柱6，所述一级超滤柱4、二级超滤柱5以及三级超滤柱6内分别设置有一级超滤膜8、二级超滤膜11以及三级超滤膜14。所述一级超滤膜8的截留分子量为30000～70000道尔顿，这个数值范围能保证水解蛋白中的变性蛋白，细胞碎片，氧化聚合物等本身存在的较大物质均无法通过一级超滤膜8，可以选用任意数值，但是考虑到在超滤较多水解蛋白后较大物质会将超滤膜的部分孔径进行堵塞而影响超滤的效率，可以采用两个规格不同的一级超滤柱相连接的形式进行一级超滤，参照图2，这是一种在实际生产中的实施例，两个一级超滤柱4相连接来构成一级超滤，其连接方式为将第一个一级超滤柱4超滤后的滤液泵入第二个一级超滤柱4内再次进行一级超滤。作为较好的实施例，位于左边的一级超滤柱4内的一级超滤膜8的截留分子量为70000，位于右边的一级超滤柱4内的一级超滤膜8的截留分子量为30000。。所述二级超滤膜11的截留分子量为6000～10000道尔顿，所述三级超滤膜14的截留分子量为3400～3700道尔顿，由于二级超滤膜11与三级超滤膜14的作用在于滤掉因再带电荷从而形成聚合物，因此二级超滤膜11与三级超滤膜14的数值范围的含义在于根据聚合物的普遍大小进行设定，由于聚合物的大小不定，因此也可以采用类似一级超滤的形式设置多个二级超滤柱等方式。参照图2，在本实施例中，位于左边的二级超滤柱5内的二级超滤膜11的截留分子量为10000，位于右边的二级超滤柱5内的二级超滤膜11的截留分子量为6000。所述原料桶1、一级超滤柱4、二级超滤柱5、三级超滤柱6以及集料桶18均通过出液管道20依次连接，且所述出液管道20上均设置有高压泵2，高压泵2的作用在于将水解蛋白半浓缩液泵入下一级设备中，同时也通过水解蛋白半浓缩液对超滤膜施加一个外压的力。值得说明的是，以下对本实施例的说明中，涉及多个高压泵2，为了使得说明更加简洁，以下对于高压泵2的说明并未进行文字区分，可以根据图示及实际来确定所说高压泵2为设置于哪一处的。所述一级超滤柱4与二级超滤柱5之间的出液管道20上设置有一级滤液桶16，经一级超滤柱4超滤后的滤液流至一级滤液通16暂时储存。所述一级超滤柱4与二级超滤柱5之间的高压泵2设置于所述一级滤液桶16与二级超滤柱5之间，这里的高压泵2用于将一级滤液桶16内的滤液泵至二级滤液柱5内。所述二级超滤柱5与三级超滤柱6之间的出液管道20上设置有二级滤液桶17，二级滤液桶17的作用与一级滤液桶16的作用类似，用于暂时存储经二级滤液柱5超滤后的滤液。所述二级超滤柱5与三级超滤柱6之间的所述高压泵2设置于所述二级滤液桶17与三级超滤柱6之间。这里的高压泵2用于将二级滤液桶17内的滤液泵至三级超滤柱6内。所述一级超滤柱4与原料桶1之间、所述二级超滤柱5与一级滤液桶16之间、所述三级超滤柱6与二级滤液桶17之间均设置有回液管道19，所述回液管道19上还设置有回液泵3。具体的，所述回液管道19与所述超滤柱4的外周壁连接且与所述超滤柱4的内部连通。本实施例出现的回液管道19与回液泵3之间的工作原理均相同。下面以一级超滤柱4与原料桶1之间的回液管道19和回液泵3的工作原理为例进行说明，在经过一段时间的超滤后，一级超滤柱4内将会存在大量滤渣，并且这些大量的滤渣会渐渐将一级超滤膜8进行堵塞，因此，为了保证超滤的效率，启动回液泵3，回液泵3会将滤渣进行回液处理，即将滤渣泵至原料桶1内，随后工作人员可根据滤渣的数量进行相应的加水处理，并再次循环超滤。采用这种方式的回液循环超滤，不仅保证了资源的利用率，同时也避免了滤渣堵塞滤膜，保证了超滤的效率。回液管道19与回液泵3除上述作用外，还具有另一作用。当超滤完成需要进行超滤膜的清洗时，结合出液管道20与高压泵2的作用，可将超滤膜进行清洗并将废水排出。下面以一级超滤柱4与原料桶1之间的回液管道19和回液泵3为例进行说明。在超滤完成需要进行清洗时，将原料桶1放入碱液，并通过高压泵2将碱液泵入一级超滤柱4内，并静置一段时间，静置完成后，回液泵3将一级超滤柱4内的碱液通过回液管道19泵出，随后采用相同的原理，在原料桶1内注入清水对一级超滤柱4内的一级超滤膜8进行清水冲洗。上述以一级超滤柱4与原料桶1之间的回液管道19与回液泵3的回液原理与清洗原理做了说用，其他的回液管道19与回液泵3的原理均与上述原理相同，在此不再赘述。所述超滤膜为管式超滤膜，所述一级超滤膜8、二级超滤膜11以及三级超滤膜14的内部分别成型有第一滤液腔9、第二滤液腔12以及第三滤液腔13，所述一级超滤膜8与一级超滤柱4之间成型有第一原液腔7，所述二级超滤膜11与二级超滤柱5之间成型有第二原液腔10，所述三级超滤膜14与三级超滤柱6之间成型有第三原液腔15。所述原料桶1与所述第一原液腔7连接，所述第一滤液腔9与所述第二原液腔12连接，所述第二滤液腔12与所述第三原液腔15连接，所述第三滤液腔13与所述集料桶18连接。这种设计方式为外压式，原料从原液腔通过超滤膜进入滤液腔内。具体的，以一级超滤柱4为例，回液管道19与第一原液腔7连接，出液管道20与第一滤液腔9连接。作为较好的设计方式，所述超滤膜的底部与所述出液管道20连通。即第一滤液腔9的底部与出液管道20连接，经过一级超滤后的滤液从第一滤液腔9的底部进入出液管道20内，同理，二级超滤柱5以及三级超滤柱6均与上述原理相同。所述超滤膜的两端与所述超滤柱固定连接。其连接方式可以不限，为了方便实际生产中能方便对设备的维修，可采用螺纹连接的方式，方便对超滤膜进行拆卸。利用如图2所示的实施例，下面对本发明一种水解蛋白口服液的制备方法做具体说明。一种水解蛋白口服液的制备方法，包括以下步骤：s1制备水解蛋白浓缩原液；s2超滤：将s1制备的水解蛋白浓缩原液进行超滤；s3灭活：将步骤s2超滤后的滤液进行灭活处理；s4沉降：将步骤s3中灭活处理后的滤液沉降处理，得到水解蛋白浓缩液；s5利用步骤s4中得到的水解蛋白浓缩液制备水解蛋白口服液配置液，并进行灭菌处理，得到水解蛋白口服液。。步骤s1中，具体的，制备水解蛋白浓缩原液的原料为：牛肉、低温食用豆粕、猪胰脏、鸡蛋、氢氧化钠、盐酸、氧化钙、饮用水。制备水解蛋白浓缩液约1000l的工艺处方为：利用上述工艺处方制备水解蛋白浓缩原液的步骤为：豆粕清洗：在水解罐中加处方量低温食用豆粕，搅拌清洗，静置，弃去上层液，得到清洗后的豆粕；碱提酸沉：往清洗后的豆粕内加入饮用水，搅拌，并采用蒸汽加热至料液温度达到58℃～62℃，加入10％氢氧化钠溶液调节ph至8.0～8.5，继续搅拌，约20分钟，然后静置30分钟，抽取上层碱提液到另一水解罐中，并重复碱提步骤，将两次碱提液合并，加1:1盐酸溶液调料液调ph达到4.4～4.6，开启蒸汽加热至沸腾，保持15分钟，关闭蒸汽，静置分层；蛋白清洗：弃去上层液，加饮用水清洗至ph为5.0～7.0得到大豆蛋白液；投料水解：将得到的大豆蛋白液加饮用水、处方量牛肉及鸡蛋，搅拌，开启蒸汽加热至沸腾，降温至40℃～50℃，加处方量猪胰脏，加入氧化钙配制液调节水解液ph到6.5～7.5，水解液在53℃～57℃保温水解9小时后静置分层；过滤灭活：水解完成后使用离心机将固液分离，所得离心液转至灭活灌内，开启蒸汽加热煮沸灭活30分钟；沉降：将已灭活的水解液转移至沉降罐内，低温静置沉降，沉降温度为0℃～5℃，沉降48小时以上，沉降罐上可以贴上标签注明品名、批号、罐号、生产日期、操作时间、数量等信息，便于跟进。减压浓缩：将沉降水解上层液转移至单效浓缩器内，进行减压浓缩，得到水解蛋白浓缩原液。步骤s2中体的，将水解蛋白浓缩原液移至原料桶1内，高压泵2工作，将原料桶1内的原料通过出液管道20泵入第一个一级超滤柱4内，此时原料处于第一原液腔7内，在高压泵2的作用下，一级滤液通过一级超滤膜8进入第一滤液腔9内，第一滤液腔9内的一级滤液进入第二个一级超滤柱4内，与第一个一级超滤柱4的工作原理类似，两个一级超滤柱4完成一级超滤，值得说明的是，第一个一级超滤柱4内的一级超滤膜8的截留分子量为70000道尔顿，第二个一级超滤柱4内的一级超滤膜8的截留分子量为30000道尔顿。一级超滤完成后的一级滤液流至一级滤液桶16内，与一级超滤类似，继续完成二级超滤一级三级超滤，在超滤过程中，同理，第一个二级超滤柱4内的一级超滤膜8的截留分子量为10000道尔顿，第二个二级超滤柱4内的一级超滤膜8的截留分子量为6000道尔顿。作为较好的实施例，本发明在超滤过程中还包括回液处理步骤，回液泵3将第一原液腔9、第二原液腔10以及第三原液腔15内的滤渣通过回液管道19分别泵入原料桶1、一级滤液桶16以及二级滤液桶17中，根据原料桶1、一级滤液桶16以及二级滤液桶17中的滤渣数量加入适当清水水后再次超滤。这种回液处理一是有效防止滤渣堵塞超滤膜，影响超滤的效率，二是能有效利用资源，避免造成药液的浪费。另外，较好的，所述水解蛋白口服液的制备方法还包括管式离心步骤：将步骤s4中得到的水解蛋白浓缩液管式离心，将管式离心后的离心液重复步骤s3与步骤s4。步骤s5可以根据在s4完成后是否仍有沉淀物析出来决定是否操作。具体的，步骤s3中，灭活处理的方式为蒸汽加热煮沸灭活，灭活处理的时间为30分钟。步骤s4中的沉降处理为低温沉降处理，沉降温度为0℃～5℃，沉降时间为48小时以上。下面针对水解蛋白浓缩液的制备方法的两种实施例进行对比说明。实施例一：在水解蛋白浓缩原液的制备中，减压浓缩后的浓缩液中药液比重达到1.05～1.10g/ml。实施例二：在水解蛋白浓缩原液的制备中，减压浓缩后的浓缩液中药液比重达到1.03～1.04g/ml，步骤s2超滤后，s3灭活之前进行二次浓缩，二次浓缩后的浓缩液中药液比重达到1.05～1.10g/ml。在制备原料等其他条件相同的情况下，针对上述两个实施例，对超滤做出实验数据统计，得到如下表格：从上述表格可以得到：实施例一超滤时间更短。上述表格中，对于澄清度的判断方法为采用浊度标准液进行检测。对上述两种实施例的物质含量进行测定，得到如下表格：实施例一总氮％氨基氮％ph性状颜色浓缩原液2.93552.36.471050l浑浊超滤后混合液2.41048.9626.41清亮无沉淀最终浓缩液2.3606.2清亮无沉淀实施例二上述实验的百分比数据均为质量百分比，水解蛋白浓缩液的产品质量标准要求为：1.总氮≥2.3％，氨基氮51％～60％，ph5.2～6.8。2.滤液必须澄清，无可见异物。通过上述表格可得：最终浓缩液均达到了产品标准。区别点在于：实施例一的总氮量少于实施例二。综上，实施例一相比于实施例二，其制备时间更短，但是总氮含量较低。因此在实际的生产过程中可以根据需要选择合适的方式进行制备。下面对利用上述水解蛋白浓缩液制备水解蛋白口服液的方法做具体说明。制备10000支规格为10ml的水解蛋白口服液处方为：名称处方量作用水解蛋白浓缩液100l主药蔗糖16kg矫味剂薄荷脑10g矫味剂羟苯乙酯80g防腐剂纯化水适量溶剂上述处方为在水解蛋白浓缩液的总氮含量为2.3％～2.5％(g/ml)时，以水解蛋白浓缩液的量为主药量，计算其他原料的添加量。当水解蛋白浓缩液中总氮的含量超过2.5％时，主药量的计算方式为：主药量＝(水解蛋白浓缩液量*总氮含量)/2.5％水解蛋白口服液配置液的制备方法为：将水解蛋白浓缩液加入配制罐内，加入处方量蔗糖及纯化水适量，搅拌，加热煮沸后加入处方量羟苯乙酯，煮沸15分钟，停止加热，降温至50℃，加处方量薄荷脑，加纯化水，开搅拌器，启动循环泵，循环过滤15分钟，得到水解蛋白口服液配制液。步骤s6中的灭菌方法为：将步骤s5中得到的水解蛋白口服液配制液进行灌封，放置于100℃的环境中30分钟，得到水解蛋白口服液。随后可进行捡漏、灯检、贴签印字、包装、赋码等步骤。相比于现有的采用多次管式离心+沉降的方法来制备水解蛋白浓缩液，本发明采用三级超滤的方式进行提纯，一级超滤柱的目的在于滤掉水解蛋白中的变性蛋白，细胞碎片，氧化聚合物等本身存在的较大物质，但是由于水解蛋白的独有特性，在经过一级超滤后，会有部分成分再带电荷从而形成聚合物，二级超滤与三级超滤则是再次提高滤液的纯度，即保证了水解蛋白浓缩液的澄清度，又大大提高了水解蛋白浓缩液的生产效率，缩短了生产周期，同时制备出的水解蛋白浓缩液的各项指标均合格，满足了水解蛋白口服液对水解蛋白浓缩液的要求。当前第1页12