本发明涉及一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法,属于水稻的育种方法技术领域。
背景技术:
我国约60%的人口以稻米为主食,因而水稻增产是我国农业可持续发展和确保粮食安全的重大课题。由于工业化、城镇化进程正在吞食着稻田,要满足人口增长对粮食需求的挑战,保证国民经济的稳步发展,根本出路在于提高单位面积的产量潜力。粮食是一种特殊的战略商品,事关国计民生、政治稳定、社会安定。一旦缺粮,吃饭问题解决不了,经济发展和社会稳定就会失去坚实的基础。目前及今后很长一段时间已不可能靠扩大水稻种植面积增加水稻产量,而且由于其他方面对土地的需求,要维持现有的水稻种植面积也非常困难,未来粮食增产总量约80%需要来自单产的提高。由于农业设施不完善,农业投入低,水稻的生长环境还很脆弱;因而水稻生产的现状可描写为脆弱的作物生长在脆弱的环境下满足人们的“温饱”需求。提高单位面积的水稻产量潜力成为了水稻生产中的主要目标。
技术实现要素:
本发明的目的在于,提供一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法,能够大幅度提高水稻的产量。
为解决上述技术问题,本发明采用如下的技术方案:
一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法,包括下述步骤:s1:提取大粒粳稻的dna,将大粒粳稻的dna导入晚稻;s2:收集步骤s1中晚稻种子种植培育作为供体;s3:提取供体的dna;s4:将供体的dna导入水稻9311母体;s5:收集步骤s4水稻9311母体的远缘杂交种子。
前述的一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法中,所述步骤s3包括下述步骤:
s31:称取供体幼苗的第一至第四个嫩叶0.2g,去除表面的dna污染,置于研钵中与液氮共研成细粉;s32:将供体细粉转入2ml离心管中,立即加入1000μl预热至65℃的ctab抽提液,于65℃温育30min,然后常温混匀;s33:放至室温,加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液,使充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min;s34:将上清液转移至新的离心管中,加入1/10体积的65℃的ctab/nacl溶液,充分混匀;s35:再次加入1000μl的氯仿/异戊醇,充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min离心5min,抽提至上清液澄清;s36:将上清液转移至新的离心管中,加入1000μlctab沉淀液,混匀,室温放置15min后,于4℃10000r/min离心5min,弃上清;s37:加入200μl的高盐te缓冲液和2μlrnasea储备液重悬沉淀,于37℃温育30min;s38:加入2000μl预冷的无水乙醇,混匀,于4℃在离心机上以10000r/min离心15min;s39:将沉淀用70%乙醇清洗两次后,晾干,加入50μlte溶解沉淀。
提取dna过程中用到的试剂:
1、2-巯基乙醇(2-me)
2、ctab抽提液:2%(w/v)ctab,100mmol/ltris·cl,ph8.0;20mmol/ledta,ph8.0;1.4mol/lnacl;
3、ctab/nacl溶液:10%ctab,0.7mol/lnacl;
4、24:1(v/v)氯仿/异戊醇
5、ctab沉淀液:1%(w/v)ctab,50mmol/ltris·cl,ph8.0;10mmol/ledta,ph8.0。
6、高盐te缓冲液:10mmol/ltris·cl,ph8.0;1mmol/ledta,ph8.0;1mol/lnacl
7、70%乙醇
8、te缓冲液:10mmol/ltris·cl,ph8.0;1mmol/ledta,ph8.0。
前述的一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法中,所述步骤s4还包括下述步骤:s41:在母体水稻开花后3小时,将颖壳剪掉三分之一;s42:去掉颖壳内雄花和已经开过的或未开过的花朵,保留正在开的花朵;s43:将供体的dna经母体花粉管导入,然后套袋。
前述的一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法中,述步骤s5后还包括步骤s6,将步骤s5中收集的远缘杂交种子选育七代后获得生长稳定的新品系种子。
与现有技术相比,能够大幅度提高水稻的产量,通过大粒粳稻的dna提升晚稻的粒径,然后将晚稻和水稻9311杂交获得高杆特大穗水稻。高杆特大穗水稻平均株高2米左右,茎杆粗壮,每穗总粒数一般在600粒左右,杆径1.6厘米左右,亩产3000斤以上。
具体实施方式
本发明的实施例1:一种高杆特大穗功能水稻的生物技术育种方法,包括下述步骤:s1:提取大粒粳稻的dna,将大粒粳稻的dna导入晚稻;s2:收集步骤s1中晚稻种子种植培育作为供体;s3:提取供体的dna;s4:将供体的dna导入水稻9311母体;s5:收集步骤s4水稻9311母体的远缘杂交种子;步骤s6:将步骤s5中收集的远缘杂交种子选育七代后获得生长稳定的新品系种子。
提取dna的方法包括下述步骤:
s31:称取供体苗的第一至第四个嫩叶0.2g,去除表面的dna污染,置于研钵中与液氮共研成细粉;
s32:将供体细粉转入2ml离心管中,立即加入1000μl预热至65℃的ctab抽提液,于65℃温育30min,然后常温混匀;
s33:放至室温,加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液,使充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min;
s34:将上清液转移至新的离心管中,加入1/10体积的65℃的ctab/nacl溶液,充分混匀;
s35:再次加入1000μl的氯仿/异戊醇,充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min离心5min,抽提至上清液澄清;
s36:将上清液转移至新的离心管中,加入1000μlctab沉淀液,混匀,室温放置15min后,于4℃10000r/min离心5min,弃上清;
s37:加入200μl的高盐te缓冲液和2μlrnasea储备液重悬沉淀,于37℃温育30min;
s38:加入2000μl预冷的无水乙醇,混匀,于4℃在离心机上以10000r/min离心15min;
s39:将沉淀用70%乙醇清洗两次后,晾干,加入50μlte溶解沉淀。
dna的导入方法包括下述步骤:
s41:在母体水稻开花后3小时,将颖壳剪掉三分之一;s42:去掉颖壳内雄花和已经开过的或未开过的花朵,保留正在开的花朵;s43:将供体dna导入颖壳内,然后套袋。
本育种方法已经试验多年,于2009年在海南种植了第一代,2010年在长沙种植第二代和第三代,2011年在长沙种植第四代,2012年在长沙东郊作晚稻种植第五代稳定,2013年晚稻品比试验,至今面积逐步扩大。水稻的株高200厘米左右,每穗总粒数600粒。