一种酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法与流程

文档序号:24397693发布日期:2021-03-26 22:45阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将猪小肠洗净,将肠壁内容物收集。(2)在步骤(1)中得到的肠壁内容物中加入缓冲液,离心,制得β-葡萄糖醛酸苷酶粗酶液;(3)将步骤(2)中得到的粗酶液加入甘草酸溶液中,甘草酸溶液与粗酶液的体积比为4∶1-9∶1,置于水浴锅中进行生物酶转化反应;在55℃下反应10-56小时,反应结束后灭酶;(4)将步骤(3)中灭酶后的转化液离心,将上清液与沉淀分开收集;(5)将步骤(4)中收集的沉淀中加入乙醇,将沉淀中的单葡萄糖醛酸甘草次酸提取出来。(6)将步骤(5)中的提取液离心,得到的上清液收集,将有机溶剂除去后,与步骤(4)中的上清液进行合并。(7)将步骤(6)中合并后的上清液进行酸沉,向沉淀中加入无水乙醇醇溶;(8)将步骤(7)中醇溶溶液进行离心,取上清液,将上清液旋蒸去除有机溶剂,得到单葡萄糖醛酸甘草次酸粉末。2.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(2)中,选用ph值为5的0.1mol/l pbs缓冲液作为猪小肠β-葡萄糖醛酸苷酶的提取液,以料液比为1∶8,离心转速选择5000r/min浸提时间为5h,为最佳提取条件,进行共三次提取,酶活为23.41u/g。3.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(3)中甘草酸溶液浓度为5mg/ml,ph为6,甘草酸纯度为≥98%。4.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(5)中,乙醇的浓度为70%乙醇,按照料液比为1∶17.5(m∶v)加入。5.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(5)中,提取方法为加热搅拌,提取时间为5h,温度为55℃。6.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(6)中,有机溶剂乙醇通过旋转蒸发去除,温度为60℃。7.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(7)中,酸沉时加入hcl至ph=2,静置4h后离心。8.根据权利要求1所述的酶法制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法,其特征在于:步骤(7)中向酸沉沉淀中加入无水乙醇,按照料液比为1∶12.5(m∶v)加入。
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