本发明属于菌类栽培技术领域，特别涉及一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法。
背景技术：
20世纪80年代以后食用菌发酵技术有了迅速发展，食用菌深层发酵和中小型发酵设备研制的报道日益增多。真姬菇是一种腐生真菌，正常真姬菇菌种为固体菌种接种，从试管到生产使用，历时需184天，生长周期长，菌种传代次数多，需要大量人工进行传代接种操作，并且每一次传代操作，都增加了菌种污染的机率。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，解决现有的真姬菇培养周期长、费人工、污染风险大的问题。
本发明采用如下技术方案：
一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，包括以下步骤：
s1配制培养基：将葡萄糖12g、蛋白胨3g、硫酸镁0.3g、磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钾0.4g和豆粕粉2.4g加水至700ml并搅拌溶解均匀；
s2调节ph值；
s3装瓶灭菌：按照每瓶装入的液体量为培养瓶体积的70％，将配好的培养基装入培养瓶，封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；
s4固体菌种的液化处理：在无菌超净工作台中将固体菌种捣碎放入无菌水中洗涤静置，得固体菌种的上清液；
s5接种：灭菌完成后，等培养基温度冷却到22℃以下后，接入固体菌种上清液；
s6培养：将接种好的培养瓶放到摇床中避光密闭培养，培养4天后即可得到真姬菇的液体菌种。
进一步的，用灭过菌的接种枪将真姬菇液体菌种接入到培养基中，盖盖后用保鲜膜将瓶口再封一次；当菌丝萌发覆盖瓶口之后将所述保鲜膜去除。
进一步的，所述步骤s3中封口采用的是中间带透气孔的硅胶塞。
进一步的，所述步骤s3中的高压灭菌程序为110-120℃下保持20-30min。
进一步的，步骤s2中所述ph为6.0-6.6。
进一步的，所述步骤s5中的所述固体菌种上清液按培养基体积的10％接入培养瓶。
进一步的，步骤s6中所述摇床温度控制在20-22℃，转速为150转/分钟，湿度保持在60-70％。
本发明的优点在于：本发明专利通过技术优化，把固体菌种转为液体菌种接种，菌种生长周期55天，液体菌种制作使菌种传代次数减少5代，降低菌种传代过程中污染风险，且液体菌种使得生产人工大幅降低，占地面积小，能源节约多。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
实施例：一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，包括以下步骤：
s1配制培养基：将葡萄糖12g、蛋白胨3g、硫酸镁0.3g、磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钾0.4g和豆粕粉2.4g加水至700ml溶解并搅拌均匀；
s2调节ph值至6.0-6.6；
s3装瓶灭菌：按照每瓶装入的液体量为培养瓶体积的70％，将配好的培养基装入培养瓶，然后采用中间带透气孔的硅胶塞封口，最后，放入高压灭菌锅中110-120℃下保持20-30min灭菌；
s4固体菌种的液化处理：在无菌超净工作台中将固体菌种捣碎放入无菌水中洗涤静置，得固体菌种的上清液；
s5接种：灭菌完成后，等培养基温度冷却到22℃以下后，接入培养基体积10％的固体菌种上清液；其中，用灭过菌的接种枪将真姬菇液体菌种接入到培养基中，盖盖后用保鲜膜将瓶口再封一次；当菌丝萌发覆盖瓶口之后将所述保鲜膜去除。
s6培养：将接种好的培养瓶放到摇床中避光密闭培养，培养4天后即可得到真姬菇的液体菌种，其中，摇床温度控制在20-22℃，转速为150转/分钟，湿度保持在65-75％，二氧化碳浓度为1000-3500ppm。
显然，以上所描述的实施方式仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
1.一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1配制培养基：将葡萄糖12g、蛋白胨3g、硫酸镁0.3g、磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钾0.4g和豆粕粉2.4g加水至700ml并搅拌溶解均匀；
s2调节ph值；
s3装瓶灭菌：按照每瓶装入的液体量为培养瓶体积的70％，将配好的培养基装入培养瓶，封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；
s4固体菌种的液化处理：在无菌超净工作台中将固体菌种捣碎放入无菌水中洗涤静置，得固体菌种的上清液；
s5接种：灭菌完成后，等培养基温度冷却到22℃以下后，接入固体菌种上清液；
s6培养：将接种好的培养瓶放到摇床中避光密闭培养，培养4天后即可得到真姬菇的液体菌种。
2.根据权利要求1所述的一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于：用灭过菌的接种枪将真姬菇液体菌种接入到培养基中，盖盖后用保鲜膜将瓶口再封一次；当菌丝萌发覆盖瓶口之后将所述保鲜膜去除。
3.根据权利要求1所述的一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于：所述步骤s3中封口采用的是中间带透气孔的硅胶塞。
4.根据权利要求1所述的一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于：所述步骤s3中的高压灭菌程序为110-120℃下保持20-30min。
5.根据权利要求1所述的一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于：步骤s2中所述ph为6.0-6.6。
6.根据权利要求1所述的一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于：所述步骤s5中的所述固体菌种上清液按培养基体积的10％接入培养瓶。
7.根据权利要求1所述的一种真姬菇液体菌种培养基及其制备方法，其特征在于：步骤s6中所述摇床温度控制在20-22℃，转速为150转/分钟，湿度保持在60-70％，二氧化碳浓度为1000-3500ppm。