一类取代苯甲酰哌嗪类化合物及在制备抗基孔肯雅病毒药物中的应用的制作方法

[0001]
本发明属于医药技术领域，具体地说，涉及一类取代苯甲酰哌嗪类化合物及在制备抗基孔肯雅病毒药物中的应用。


背景技术：

[0002]
基孔肯雅病毒(chikungunya virus，chikv)，属于披膜病毒科甲病毒属成员，人和非人灵长类动物是chikv的主要宿主。基孔肯雅病毒可以叫基孔肯亚热病。基孔肯雅热病是经蚊虫叮咬传播的急性发热性传染病。该病毒病过去主要分布在非洲、南亚、东南亚热带和亚热带地区，近年来，随着全球变暖和现代交通工具等因素，该病毒疫情呈不断暴发和蔓延的趋势。2009年11月19日深圳口岸首次检出输入性基孔肯雅热病例。病人感染基孔肯雅病毒后肌肉和关节会剧烈疼痛，并伴有发热、恶心、呕吐。急性期后，大多数患者的关节疼痛及僵硬状态可完全恢复。部分患者持续性关节疼痛和僵硬可达数周至数月，甚至3年以上。个别患者留有关节功能受损等后遗症，严重危害人类健康。目前针对基孔肯雅热尚无获批的疫苗及特效抗病毒药物，治疗主要是退热、镇痛等对症治疗。


技术实现要素：

[0003]
本发明的第一个目的是提供一类取代苯甲酰哌嗪类化合物。
[0004]
本发明的第二个目的是提供一种所述取代苯甲酰哌嗪类化合物及在制备抗基孔肯雅病毒药物中的应用。
[0005]
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
[0006]
本发明的第一个方面提供了一类取代苯甲酰哌嗪类化合物或其药用盐，结构为以下结构的一种：
[0007][0008][0009]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立的选自氢、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基、卤素(氟、氯、溴、碘)；
[0010]
r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
13
、r
14
、r
15
各自独立的选自氢、羟基、卤素、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基；
[0011]
或，r8、r9与c、o组成3至7元环(如1,3-二氧戊环)；
[0012]
r
16
、r
17
、r
18
、r
19
、r
20
各自独立的选自氢、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基、卤素。
[0013]
优选的，所述取代苯甲酰哌嗪类化合物为以下结构的一种：
[0014]
[0015][0016]
本发明的第二方面提供了一种取代苯甲酰哌嗪类化合物或其药用盐在制备抗基孔肯雅病毒药物中的应用，所述取代苯甲酰哌嗪类化合物具有以下结构通式：
[0017][0018]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立的选自氢、羟基、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基、卤素；
[0019]
x选自c或n；
[0020]
y选自以下基团中的一种：
[0021][0022]
r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
13
、r
14
、r
15
各自独立的选自氢、羟基、卤素、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基；
[0023]
或，r8、r9与c、o组成3至7元环(如1,3-二氧戊环)；
[0024]
r
16
、r
17
、r
18
、r
19
、r
20
各自独立的选自氢、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基、卤素。
[0025]
较优选的，所述取代苯甲酰哌嗪类化合物为以下结构中的一种：
[0026][0027]
r1、r2、r3、r4、r5各自独立的选自氢、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基、卤素；
[0028]
r6、r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
13
、r
14
、r
15
各自独立的选自氢、羟基、卤素、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基；
[0029]
或，r8、r9与c、o组成3至7元环(如1,3-二氧戊环)；
[0030]
r
16
、r
17
、r
18
、r
19
、r
20
各自独立的选自氢、c1～c10烷基、c1～c10烷氧基、卤素。
[0031]
最优选的，所述取代苯甲酰哌嗪类化合物为以下结构中的一种：
[0032]
[0033]
[0034]
[0035][0036]
由于采用上述技术方案，本发明具有以下优点和有益效果：
[0037]
本发明的取代苯甲酰哌嗪类化合物，具有较好的抗chikv作用，感染率小于50％，本发明实施例制备的化合物均表现出很好的抑制chikv作用，可以作为抗基孔肯雅病毒药物使用。
具体实施方式
[0038]
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
[0039]
本发明实施例中所使用的材料如下：采用bruker spectmspin ac-p300(瑞士bruker公司)；ac-p600型核磁共振仪(瑞士bruker公司)；agilent 6120型lc-ms联用质谱仪(美国agilent公司)；硅胶板gf254(烟台黄海化学，中国)；暗箱式紫外分析仪(zf-20d型号)；旋转蒸发仪(buchi rotavapor r-3型号)；shb-iii循环式多用真空泵；真空干燥箱(dzf-6021型)；超声波清洗器(kq-500e型)；实验所用的试剂(分析纯)和原料购于安耐吉试剂有限公司、百灵威科技有限公司、毕得医药科技有限公司、探索平台等。
[0040]
实施例1
[0041]
化合物1b-1的制备：
[0042][0043]
将3,4,5-三甲氧基苯甲酸(化合物1)(100.0mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dcm(10.0ml，二氯甲烷)使其溶解，然后依次加入1-(2-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)，dcc(124.0mg，0.6mmol，n,n'-二环己基碳酰亚胺)，dmap(244.0mg，2.0mmol)，室温条件下搅拌6h，观察到溶液由澄清变浑浊，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。过滤，滤液减压蒸干，用95％etoh重结晶后得到化合物1a-1(111.0mg，收率：56％)。
[0044]
将化合物1a-1(100.0mg，0.3mmol)置于100ml圆底三口瓶中，在无水无氧氩气保护的条件下加入无水dcm(10.0ml)，在-30℃的温度下以每秒钟两滴的恒定速度滴加bbr3的dcm溶液(6.0ml，3.0mmol)，滴加完将反应装置移到室温条件下搅拌过夜，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕，加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，然后观察是否有
固体析出，若有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干；若没有固体析出，ea萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，将有机相蒸干，用dcm或etoh重结晶后得到化合物1b-1。
[0045]
实施例2
[0046]
化合物1b-2的制备：
[0047][0048]
以1-(3-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)替换实施例1中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例1，得到化合物1a-2(123.0mg，收率：61％)。化合物1b-2的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0049]
实施例3
[0050][0051]
以1-(2,3-二氯苯基)哌嗪(140.0mg，0.6mmol)替换实施例1中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例1，得到化合物1a-3(107.0mg，收率：58％)。化合物1b-3的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0052]
实施例4
[0053][0054]
将3,4,5-三甲氧基苯甲酸(化合物1)(100.0mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入4,4'-二氟二苯甲基哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物1a-4(118.0mg，收率：60％)。
[0055]
化合物1b-4的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0056]
实施例5
[0057][0058][0059]
将3,4,5-三甲氧基苯甲酸(化合物1)(100.0mg，0.5mmol)，n-boc-哌嗪(150.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，过滤，滤饼用95％etoh重结晶后得到中间体a。称重，按照1:3的当量比将产物溶解于盐酸-乙酸乙酯溶液中，室温条件下搅拌，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕，过滤，用95％etoh重结晶后得到中间体b。
[0060]
中间体b(140.0mg，0.5mmol)，2,3-二氯苯甲酸(115.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)和diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同化合物1a-4，得化合物1a-5121.0mg(收率：59％)。
[0061]
化合物1b-5的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0062]
实施例6
[0063][0064]
以3,4-二氯苯甲酸(115.0mg，0.6mmol)替换实施例5中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例5，得到化合物1a-6(115.0mg，收率：58％)。化合物1b-6的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0065]
实施例7
[0066][0067]
以3,4,5-三氟苯甲酸(110.0mg，0.6mmol)替换实施例5中所用的2,3-二氯苯甲酸，
其他参照实施例5，得到化合物1a-7(120.0mg，收率：65％)。化合物1b-7的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0068]
实施例8
[0069][0070]
以反式肉桂酸(100.0mg，0.6mmol)替换实施例5中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例5，得到化合物1a-8(116.0mg，收率：59％)。化合物1b-8的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0071]
实施例9
[0072][0073]
以苯氧乙酸(100.0mg，0.6mmol)替换实施例5中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例5，得到化合物1a-9(130.0mg，收率：75％)。化合物1b-9的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0074]
实施例10
[0075][0076]
以2,4-二氯苯氧乙酸(135.0mg，0.6mmol)替换实施例5中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例5，得到化合物1a-10(109.0mg，收率：58％)。化合物1b-10的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0077]
实施例11
[0078][0079]
将化合物c(163.0mg，0.6mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入3,4,5-三甲氧基苯甲酸(化合物1)(100.0mg，0.5mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌2h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到1a-11(138.0mg，收率：78％)。
[0080]
化合物1b-11的制备参考实施例1中化合物1b-1的制备。
[0081]
实施例12
[0082][0083]
2,3,4-三甲氧基苯甲酸(化合物4)(100.0mg，0.5mmol)，1-(2-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)，dcc(124.0mg，0.6mmol)，dmap(244.0mg，2.0mmol)，方法同实施例1中1a-1，得到化合物1c-1(102.0mg，收率：48％)。
[0084]
化合物1c-1(100.0mg，0.3mmol)，bbr3的dcm溶液(6.0ml，3.0mmol)，方法同实施例1中化合物1b-1，得到化合物1d-1。
[0085]
实施例13
[0086][0087]
以1-(3-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)代替实施例12中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例12，得到化合物1c-2(110.0mg，收率：54％)。
[0088]
化合物1d-2的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0089]
实施例14
[0090][0091]
以1-(2,3-二氯苯基)哌嗪(140.0mg，0.6mmol)代替实施例12中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例12，得到化合物1c-3(109.0mg，收率：50％)。
[0092]
化合物1d-3的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0093]
实施例15
[0094][0095]
2,3,4-三甲氧基苯甲酸(化合物4)(100.0mg，0.5mmol)，4,4'-二氟二苯甲基哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例4中1a-4，得到化合物1c-4(117.0mg，收率：58％)。
[0096]
化合物1d-4的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0097]
实施例16
[0098][0099][0100]
取2,3,4-三甲氧基苯甲酸(化合物4)(100.0mg，0.5mmol)，n-boc-哌嗪(150.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例5中中间体b，得中间体e。
[0101]
称取中间体e(140.0mg，0.5mmol)，2,3-二氯苯甲酸(115.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例4中1a-4，得到1c-5(135.0mg，收率：79％)。
[0102]
化合物1d-5的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0103]
实施例17
[0104][0105]
以3,4-二氯苯甲酸(115.0mg，0.6mmol)代替实施例16中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例16，得到化合物1c-6(124.0mg，收率：68％)。
[0106]
化合物1d-6的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0107]
实施例18
[0108][0109]
以3,4,5-三氟苯甲酸(110.0mg，0.6mmol)代替实施例16中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例16，得到化合物1c-7(132.0mg，收率：70％)。
[0110]
化合物1d-7的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0111]
实施例19
[0112][0113]
以反式肉桂酸(100.0mg，0.6mmol)代替实施例16中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例16，得到化合物1c-8(130.0mg，收率：78％)。
[0114]
化合物1d-8的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0115]
实施例20
[0116][0117]
以苯氧乙酸(100.0mg，0.6mmol)代替实施例16中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例16，得到化合物1c-9(139.0mg，收率：75％)。
[0118]
化合物1d-9的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0119]
实施例21
[0120][0121]
以2,4-二氯苯氧乙酸(135.0mg，0.6mmol)代替实施例16中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例16，得到化合物1c-10(125.0mg，收率：70％)。
[0122]
化合物1d-10的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0123]
实施例22
[0124][0125]
称取中间体c(163.0mg，0.6mmol)，2,3,4-三甲氧基苯甲酸(化合物4)(100.0mg，0.5mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同化合物1a-4，得到1c-11(134.0mg，收率：70％)。
[0126]
化合物1d-11的制备参考实施例12中化合物1d-1的制备。
[0127]
实施例23
[0128][0129]
3,4-二甲氧基苯甲酸(化合物5)(100.0mg，0.5mmol)，1-(2-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同化合物1a-4，得到化合物2a-1(126.0mg，收率：71％)。
[0130]
化合物2a-1(100.0mg，0.3mmol)，bbr3的dcm溶液(6.0ml，3.0mmol)，方法同实施例1中化合物1b-1，得到2b-1。
[0131]
实施例24
[0132][0133]
以1-(3-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)代替实施例23中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例23，得到化合物2a-2(121.0mg，收率：60％)。
[0134]
化合物2b-2的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0135]
实施例25
[0136][0137]
以1-(2,3-二氯苯基)哌嗪)(140.0mg，0.6mmol)代替实施例23中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例23，得到化合物2a-3(135.0mg，收率：72％)。
[0138]
化合物2b-3的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0139]
实施例26
[0140][0141]
以4,4'-二氟二苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)代替实施例23中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例23，得到化合物2a-4(125.0mg，收率：50％)。
[0142]
化合物2b-4的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0143]
实施例27
[0144][0145]
3,4-二甲氧基苯甲酸(化合物5)(100.0mg，0.5mmol)，n-boc-哌嗪(150.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同化合物1a-4，用95％etoh重结晶后得到中间体g。
[0146]
中间体g(125.0mg，0.5mmol)，2,3-二氯苯甲酸(115.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同化合物1a-4，得到2a-5(128.0mg，收率：65％)。
[0147]
化合物2b-5的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0148]
实施例28
[0149][0150]
以3,4-二氯苯甲酸(115.0mg，0.6mmol)代替实施例27中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例27，得到化合物2a-6(112mg，收率：70％)。
[0151]
化合物2b-6的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0152]
实施例29
[0153][0154]
以3,4,5-三氟苯甲酸(110.0mg，0.6mmol)代替实施例27中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例27，得到化合物2a-7(126.0mg，收率：66％)。
[0155]
化合物2b-7的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0156]
实施例30
[0157][0158]
以反式肉桂酸(100.0mg，0.6mmol)代替实施例27中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例27，得到化合物2a-8(104.0mg，收率：50％)。
[0159]
化合物2b-8的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0160]
实施例31
[0161][0162]
以苯氧乙酸(100.0mg，0.6mmol)代替实施例27中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例27，得到化合物2a-9(130.0mg，收率：66％)。
[0163]
化合物2b-9的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0164]
实施例32
[0165][0166]
以2,4-二氯苯氧乙酸(135.0mg，0.6mmol)代替实施例27中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例27，得到化合物2a-10(116.0mg，收率：60％)。
[0167]
化合物2b-10的制备参考实施例23中化合物2b-1的制备。
[0168]
实施例33
[0169][0170]
2,3-二甲氧基苯甲酸(化合物6)(100.0mg，0.5mmol)，1-(2-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例4中化合物1a-4，得到2c-1(116.0mg，收率：65％)。
[0171]
称取2c-1(100.0mg，0.3mmol)，bbr3的dcm(6.0ml，3.0mmol)溶液，方法同实施例1中化合物1b-1，得到2d-1。
[0172]
实施例34
[0173][0174]
以1-(3-氯苯基)哌嗪(120.0mg，0.6mmol)代替实施例33中所用的1-(2-氯苯基)哌
嗪，其他参照实施例33，得到化合物2c-2(113.0mg，收率：60％)。
[0175]
化合物2d-2的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0176]
实施例35
[0177][0178]
以1-(2,3-二氯苯基)哌嗪(140.0mg，0.6mmol)代替实施例33中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例33，得到化合物2c-3(136.0mg，收率：77％)。
[0179]
化合物2d-3的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0180]
实施例36
[0181][0182]
以4,4'-二氟二苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)代替实施例33中所用的1-(2-氯苯基)哌嗪，其他参照实施例33，得到化合物2c-4(126.0mg，收率：50％)。
[0183]
化合物2d-4的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0184]
实施例37
[0185][0186]
2,3-二甲氧基苯甲酸(化合物6)(100.0mg，0.5mmol)，n-boc-哌嗪(150.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例4中化合物1a-4，得到中间体i。
[0187]
称取中间体i(150.0mg，0.5mmol)，2,3-二氯苯甲酸(化合物5)(115.0mg，
0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例4中化合物1a-4，得到2c-5(129.0mg，收率：70％)。
[0188]
化合物2d-5的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0189]
实施例38
[0190][0191]
以3,4,5-三氟苯甲酸(110.0mg，0.6mmol)代替实施例35中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例35，得到化合物2c-7(114.0mg，收率：72％)。
[0192]
化合物2d-7的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0193]
实施例39
[0194][0195]
以反式肉桂酸(100.0mg，0.6mmol)代替实施例35中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例35，得到化合物2c-8(126.0mg，收率：66％)。
[0196]
化合物2d-8的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0197]
实施例40
[0198][0199]
以2,4-二氯苯氧乙酸(135.0mg，0.6mmol)代替实施例35中所用的2,3-二氯苯甲酸，其他参照实施例35，得到化合物2c-10(123.0mg，收率：60％)。
[0200]
化合物2d-10的制备参考实施例33中化合物2d-1的制备。
[0201]
实施例41
[0202]
化合物(4-(2,3-dichlorophenyl)piperazin-1-yl)(3-methoxyphenyl)methanone(3b-3)的合成方法
[0203][0204]
3-甲氧基苯甲酸(化合物9)(100.0mg，0.65mmol)，1-(2,3-二氯苯基)哌嗪(139.0mg，0.8mmol)，pybop(416.3mg，0.8mmol)，diea(1.0ml，2.0mmol)，方法同实施例4中
化合物1a-4，得到3b-3(126mg，收率：79％)。
[0205]
实施例1～41制备的化合物的结构、nmr、ms和细胞感染率数据如表1所示：
[0206]
表1
[0207]
[0208]
[0209]
[0210]
[0211]
[0212]
[0213]
[0214]
[0215]
[0216]
[0217]
[0218][0219]
实施例42 mzd-8的合成方法：
[0220][0221]
将3,4-亚甲二氧基苯丙烯酸(96.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入1-氯二苯甲基哌嗪(171.7mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-8(57.7mg，收率：60％)。
[0222]
实施例43 mzd-35的合成方法：
[0223][0224]
将4-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入二苯甲基哌嗪(151.3mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-35(118.0mg，收率：60％)。
[0225]
实施例44 mzd-57的合成方法：
[0226][0227]
将4-甲基苯丙烯酸(81.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入4,4'-二氟苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-57(60.8mg，收率：75％)。
[0228]
实施例45 mzd-56的合成方法：
[0229][0230]
将4-甲基苯丙烯酸(81.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入1-氯二苯甲基哌嗪(171.7mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-56(48.7mg，收率：60％)。
[0231]
实施例46 mzd-37的合成方法：
[0232][0233]
将4-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入4,4'-二氟苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再
加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-37(66.5mg，收率：80％)。
[0234]
实施例47 mzd-36的合成方法：
[0235][0236]
将4-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入1-氯二苯甲基哌嗪(171.7mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-36(49.9mg，收率：60％)。
[0237]
实施例48 mzd-43的合成方法：
[0238][0239]
将2-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入二苯甲基哌嗪(151.3mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-43(49.9mg，收率：60％)。
[0240]
实施例49 mzd-40的合成方法：
[0241][0242]
将3-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入1-氯二苯甲基哌嗪(171.7mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-40(49.9mg，收率：60％)。
[0243]
实施例50 mzd-55的合成方法：
[0244][0245]
将4-甲基苯丙烯酸(81.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入二苯甲基哌嗪(151.3mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-55(48.7mg，收率：60％)。
[0246]
实施例51 mzd-44的合成方法：
[0247][0248]
将2-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入1-氯二苯甲基哌嗪(171.7mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-44(49.9mg，收率：60％)。
[0249]
实施例52 mzd-39的合成方法：
[0250][0251]
将3-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入二苯甲基哌嗪(151.3mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-39(49.9mg，收率：60％)。
[0252]
实施例53 mzd-9的合成方法：
[0253][0254]
将3,4-亚甲二氧基苯丙烯酸(96.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入4,4'-二氟苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否
有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-9(57.7mg，收率：60％)。
[0255]
实施例54 mzd-45的合成方法：
[0256][0257]
将2-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入4,4'-二氟苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-45(49.9mg，收率：60％)。
[0258]
实施例55 mzd-41的合成方法：
[0259][0260]
将3-氟苯丙烯酸(83.1mg，0.5mmol)置于100ml圆底烧瓶中，加入dmf(10.0ml)使其溶解，然后依次加入4,4'-二氟苯甲哌嗪(173.0mg，0.6mmol)，pybop(312.2mg，0.6mmol)，再加入diea(1.0ml，2.0mmol)，加料完毕后室温条件下搅拌4h，tlc检测(dcm：meoh＝10：1)，待反应完毕。加入水100.0ml进行淬灭，室温条件下搅拌1h，观察是否有固体析出，有固体析出，过滤，滤饼置于烘箱内烘干，用95％etoh重结晶后得到化合物mzd-41(49.9mg，收率：60％)。
[0261]
实施例42～55制备的化合物的结构、nmr、ms和细胞感染率数据如表2所示：
[0262]
表2
[0263]
[0264][0265]
实施例56
[0266]
部分化合物抗chikv作用实验方法
[0267]
(一)实验药物、试剂及材料
[0268]
1.人肝癌细胞huh7购自中国科学院上海细胞所，由中国人民解放军海军军医大学海军医学系生物医学防御教研室保存。
[0269]
2.dmem细胞完全细胞培养液，含10％胎牛血清、0.03％谷氨酰胺、非必需氨基酸、氨苄青霉素和链霉素100u/ml，调ph至7.4。
[0270]
3.细胞消化液，含0.25％胰蛋白酶，用磷酸缓冲液配制。
[0271]
(二)病毒
[0272]
基孔肯雅病毒(chikv)lr2006株，合成该病毒基因组，在非结构基因和结构基因之间插入egfp表达框(egfp启动子用chikv结构基因启动子)，制备的重组病毒lr2006-egfp在感染huh7细胞8小时以后即可见明显绿色荧光。
[0273]
(三)抗病毒活性评价
[0274]
1.细胞接种，准备多瓶生长状态良好的huh7细胞，pbs洗涤，胰酶消化，用含10％fbs的dmem培养液悬浮细胞，混匀细胞，接种于96孔板，每孔100μl细胞悬液，15000个细胞，培养12h，此时细胞100％汇合，进行药物处理和病毒感染。
[0275]
2.病毒感染，将96孔板置于4℃冰箱；按此前测定的五种病毒的滴度，分别用含10％fbs的dmem培养液将病毒稀释到每孔中病毒感染复数(moi)为0.1，充分混匀病毒，然后从4℃冰箱取出96孔板，加入病毒稀释液50μl，然后置于4℃冰箱。
[0276]
3.药物处理，96孔板每孔加入dmem完全培养液250μl，向96孔板中每孔加入适量的药物稀释液，从而使药物终溶度为10μm，摇床上充分摇摆5min后，置于37℃培养箱进行细胞培养。以dmso为阴性对照。
[0277]
4.病毒感染检测，chikv感染12h以后，用evos m7000细胞成像系统每孔拍照四个视野，计数egfp阳性细胞数量。测定10μm浓度化合物处理后细胞感染率。
[0278]
细胞感染率数据如表3所示：
[0279]
表3
[0280]
编号细胞感染率％1a-1131b-12.81c-13.51d-12.72a-142b-12.12c-13.12d-12.71a-25.71b-23.01c-24.91d-22.52a-26.42c-23.22d-23.31b-33.41c-33.81d-31.62a-34.12b-32.72c-34.72d-33.9
[0281]
从以上数据可以看出，本发明的化合物细胞感染率非常低。一般认为，感染率小于等于50％即为有效。因此，本发明实施例制备的化合物均表现出很好的抑制chikv作用，可以作为抗基孔肯雅病毒药物使用。
[0282]
以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专利的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。