1.一种鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:具体步骤如下:
s1:鱼皮预处理;
s2:酶解膜循环分离;
s3:脱色及脱腥处理;
s4:冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:鱼皮预处理的具体步骤如下:
s11:取新鲜鱼皮及鱼鳞洗净,向其中加入20-25倍体积的清洗剂,控制温度在0-10℃浸泡8-10h,去除鱼皮中脂肪等非胶原蛋白成分,蒸馏水冲洗至中性;
s12:向处理后的鱼皮及鱼鳞中加入液氮研磨至粉末状。
3.根据权利要求2所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:清洗剂采用浓度为0.08-0.1mol/l的naoh与浓度为0.03-0.05mol/l的na2co3混合液。
4.根据权利要求1所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:酶解膜循环分离的具体步骤如下:
s21:准备反应罐a和反应罐b,鱼皮鱼鳞粉末与水按1:2混合,加入反应罐a中,向反应罐a中加入以壳聚糖为载体的固定化中性蛋白酶、菠萝蛋白酶混合物,调节反应温度至50-53℃,ph8.5-9.0;
s22:反应罐a反应30-40min后,将混合液依次通入至蠕动泵a、b、c,调节蠕动泵a流量200ml/min,蠕动泵b、c流量100ml/min,过中空纤维膜a,分子截留大小为20kd,过滤体积/膜面积比为450ml/m2,滤膜加压0.01mpa,调节反应温度37-40℃,ph7.0-7.5;
s23:反应罐b中加入壳聚糖固定化碱性蛋白酶,控制反应温度在50-55℃,ph8.5-9.0进行二次酶解;
s24:将混合液输送至蠕动泵c20-25min后,将混合液依次输送至蠕动泵d、e、f中,调节蠕动泵d流量100ml/min,蠕动泵e、f流量50ml/min,过中空纤维膜b,分子截留大小5kd,过滤体积/膜面积比350ml/m2,滤膜加压0.01mpa,调节反应温度37-40℃,ph7.0-7.5;
s25:过中空纤维膜c,分子截留大小2kd,过滤体积/膜面积比300ml/m2,设置压力0.01mpa,调节反应温度37-40℃,ph7.0-7.5;
s26:截取目标分子量为2-5kd的胶原蛋白,进行后续处理。
5.根据权利要求4所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:步骤s21中固定化碱性蛋白酶及木瓜蛋白酶混合物的添加量为3.5-4%,且固定化碱性蛋白酶及木瓜蛋白酶的比例为1:1.2。
6.根据权利要求4所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:步骤s23中添加的壳聚糖固定化碱性蛋白酶的量为2.5-3%。
7.根据权利要求1所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:脱色及脱腥处理的具体步骤如下:
s31:调节ph至4.0,加入0.55%活性炭,控制温度在40℃下,脱色35-40min;
s32:过超滤去除活性炭,并加入1-1.2%酵母,ph为4.5,在35℃条件下发酵30-35min;
s33:高温灭菌并微滤去除残存酵母,获得胶原蛋白溶液。
8.根据权利要求1所述的鱼皮一定范围分子量胶原蛋白制备方法,其特征在于:冷冻干燥的具体步骤为:将脱色及脱腥处理所得的胶原蛋白溶液进行冷冻干燥处理,获得分子量2-5kd胶原蛋白粉末。