一种用于各类案件样本法庭科学DNA分型检测的DNA免提取直接扩增试剂的制作方法

文档序号:24240879发布日期:2021-03-12 13:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种dna免提取直接扩增试剂,包括tris-hcl缓冲液、mgcl2、kcl、dntp、bsa、二硫苏糖醇、多羟基醇、两性表面活性剂、非离子表面活性剂、多聚糖和dna聚合酶。

2.如权利要求1所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:所述dna免提取直接扩增试剂由tris-hcl缓冲液、mgcl2、kcl、dntp、bsa、二硫苏糖醇、多羟基醇、两性表面活性剂、非离子表面活性剂、多聚糖和dna聚合酶组成。

3.如权利要求1或2所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:采用所述dna免提取直接扩增试剂进行直接扩增时,所述tris-hcl缓冲液在直接扩增体系中的浓度为10-30mmol/ltris-hcl缓冲液(ph8.0);所述mgcl2在直接扩增体系中的浓度为1.5-2.5mmol/l;所述kcl在直接扩增体系中的浓度为20-70mmol/l;所述dntp在直接扩增体系中的浓度为180-220μmol/l;所述bsa在直接扩增体系中的浓度为400-1200μg/ml;所述二硫苏糖醇在直接扩增体系中的浓度为1-2mmol/l;所述多羟基醇在直接扩增体系中的浓度为2-10%;所述两性表面活性剂在直接扩增体系中的浓度为1-2%;所述非离子型表面活性剂在直接扩增体系中的浓度为0.1-1.0%;所述多聚糖在直接扩增体系中的浓度为1-10%;所述dna聚合酶在直接扩增体系中的浓度为0.05-0.2u/μl。

4.如权利要求1至3任一所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:所述多羟基醇为丙三醇、乙二醇、丙二醇或己二醇。

5.如权利要求1至3任一所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:所述两性表面活性剂为n,n-二甲基-n-十二烷基甘氨酸甜菜碱。

6.如权利要求1至3任一所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:所述非离子型表面活性剂为tween20、tritonx-100、tween21、tween40、tween60、tween65、tween80、tween85、tritonx-100、np40、brij30、span20、辛基苯基-聚乙烯二醇、聚氧乙烯10油醚或n-辛酰基-n-甲基葡糖胺。

7.如权利要求1至3任一所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:所述多聚糖为多聚蔗糖。

8.如权利要求1至3任一所述的dna免提取直接扩增试剂,其特征在于:所述dna聚合酶为taqdna聚合酶。

9.权利要求1至8任一所述的dna免提取直接扩增试剂的应用,为a1)-a4)中的至少一种:

a1)对样本进行dna分型检测;

a2)对样本进行直接扩增;

a3)制备用于对样本进行dna分型检测的试剂盒;

a4)制备用于对样本进行直接扩增的试剂盒。

10.一种对样本进行dna分型检测的方法,包括如下步骤:向权利要求1至8任一所述的dna免提取直接扩增试剂中加入样本,进行直接扩增,之后进行dna分型检测。


技术总结
本发明公开了一种用于各类案件样本法庭科学DNA分型检测的DNA免提取直接扩增试剂。该DNA免提取直接扩增试剂由Tris‑HCl缓冲液、MgCl2、KCl、dNTP、BSA、二硫苏糖醇、多羟基醇、两性表面活性剂、非离子表面活性剂、多聚糖和DNA聚合酶组成。实验证明,采用本发明提供的DNA免提取直接扩增试剂进行直接扩增所获得的STR分型图谱清晰完整、平衡性好、无非特异性人工产物出现、无条带丢失或明显的抑制现象出现;对各类案件样本均表现出出色的抗抑制能力和较高的检测灵敏度。本发明具有重要的应用价值。

技术研发人员:王彦斌;姜伯玮;常昭瑞;唐丹舟;高俊薇;鹿阳
受保护的技术使用者:中国合格评定国家认可中心
技术研发日:2020.12.17
技术公布日:2021.03.12
当前第2页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1