吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的制作方法

吲哚胺2,3
‑
双加氧酶抑制剂
技术领域
1.本发明涉及调节或抑制吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)活性的化合物，含有所述化合物的药物组合物，和利用本发明化合物治疗增殖性疾病(例如癌症)、感染性疾病、免疫相关疾病和/或炎性疾病的方法。


背景技术：

2.色氨酸是人体的一种必需氨基酸，从饮食中获得的色氨酸一部分用来合成蛋白质以及神经递质5
‑
羟色胺，其余部分主要通过犬尿氨酸途径进行代谢，通过一系列步骤代谢形成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)。吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)是一种含有血红素的单体氧化还原酶，催化色氨酸降解为n
‑
甲酰基
‑
犬尿氨酸，是色氨酸的犬尿氨酸代谢途径的第一个步骤，也是整个反应途径的限速酶。ido1在人和动物的许多组织和细胞，尤其是小肠、生殖道、胎盘、树突状细胞、巨噬细胞及肿瘤细胞等均可见表达。在正常状态下呈低水平表达，在炎症和感染过程中表达显著增加，并且ifn
‑
γ可以诱导其表达。除了ifn
‑
γ，其它细胞因子如ifn
‑
α，ifn
‑
β，il
‑
10，il
‑
6，il
‑
4，il
‑
1和tgf
‑
β也可以调节ido1的表达。
3.ido通路是机体诱导外周免疫耐受的内源性机制之一。小鼠实验证明，当ido被基因敲除或者其功能活性被抑制后，可以破坏母体对胎儿的免疫耐受、肠道黏膜免疫耐受、机体对凋亡细胞的耐受以及其它获得性的外周耐受。因此，在gvhd模型、自生免疫病或者感染过程中，阻断或者删除ido的活性能够导致炎症的恶化，并加重疾病进程。值得注意的是，ido
‑
/
‑
小鼠不会产生自发的自身免疫性疾病或者淋巴增生障碍。该结果提示虽然ido通路在机体对外来抗原的免疫耐受中发挥重要的作用，但是在维持机体对自身抗原的免疫耐受中似乎不起作用。
4.当组织细胞中的ido1表达水平提高时，大量的色氨酸经过犬尿氨酸途径代谢，色氨酸含量降低，色氨酸的缺乏导致空载trna的大量聚集，应激反应激酶gcn2收到空载trna的信号后，直接抑制t细胞的活化和增殖；而犬尿氨酸途径产生的犬尿氨酸、犬尿喹啉酸、3
‑
羟基犬尿氨酸和3
‑
羟氨苯甲酸等代谢产物对免疫系统具有一定的抑制作用。比如，代谢产物犬尿氨酸与芳香烃受体ahr结合后，不仅能够直接抑制t细胞的存活，也可以通过促进调节性t细胞(tregs)的分化而抑制效应t细胞的功能。因此，ido表达上调可以使局部微环境从免疫激活状态转变成免疫耐受状态。
5.在不同肿瘤类型的原发瘤和转移瘤中均可检测到ido的表达。ido的表达与患者生存期下降，疾病分期严重，肿瘤发生转移，肿瘤浸润淋巴细胞下降，foxp3+tregs细胞增多呈正相关。已证明ido过度表达是降低患有黑色素瘤、胰腺癌、结直肠和子宫内膜癌等的患者存活率的独立预后因素。
6.从药理学的角度来看，ido是开发治疗各种免疫相关异常(包括癌症)的小分子抑制剂的良好靶标。在靶标ido的众多制药公司中，incyte在开发用于癌症治疗的ido抑制剂方面处于领先地位。incyte于2004年启动了一项旨在寻找小分子ido1抑制剂的项目，重点研究羟色胺类化合物系列，其中色氨酸竞争性抑制剂epacadostat(incb024360，
wo2010005958a2)是作为先导临床试剂开发的。epacadostat已进入针对黑色素瘤，非小细胞肺癌和多种实体瘤的ii/iii期试验阶段。bms986205(wo2016073770)是flexus inc.授权给bristol
‑
myers squibb进行临床开发的ido抑制剂。该化合物作为具有高活性的不可逆抑制剂，相对于epacadostat具有更优异的细胞活性和药代动力学表现。bms986205与nivolumab联合疗法已进入黑素瘤患者的i/ii期临床研究(nct02658890)，bcg无应答的膀胱癌患者的ii期临床研究(nct03519256)和肌层浸润性膀胱癌iii期试验阶段(nct03661320)。另外，一些其他的ido小分子抑制剂也正在开发中，例如wo2018028491a1、cn107663159a、cn103070868b、wo2016155545a1等所报道。
7.考虑到ido在一系列不同疾病中发挥的作用，目前仍然需要寻找有效的新型ido抑制剂及其相关组合物和应用。


技术实现要素：

8.本发明的目的在于提供作为吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)抑制剂的新的化合物、含有所述化合物的药物组合物，和所述化合物在制备治疗和/或预防全部或部分由吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)介导的疾病、病症或病状的药物中的应用。
9.本发明提供式(i)所示化合物
[0010][0011]
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，其中：
[0012]
j为c，
‑
o
‑
或键；
[0013]
r1为烷基，r2为h或烷基，或者r1和r2均不存在；
[0014]
r3和r4各自独立地为h，卤素，氰基，烷基或卤代烷基；
[0015]
z为o，y为芳基或环烷基；或者，z为n，y为芳基或杂芳基，且y与z通过共价键直接连接形成杂芳基；
[0016]
g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
(ch2)
n
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o(ch2)
n
‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh
‑
，
‑
(ch2)
n n(烷基)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(烷基)(ch2)
n
‑
，
‑
c(烷基)2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhc(烷基)2‑
，
‑
(ch2)
n nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh(ch2)
n
‑
，
‑
c(烷基)2n(烷基)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(烷基)c(烷基)2‑
，杂芳基，亚烯基或亚炔基；
[0017]
n为1或2；
[0018]
q为任选被取代的芳基或杂芳基，任选被取代的杂环基，任选被取代的烷基或环烷基。
[0019]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，g为键时，q不为苯基。
[0020]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，j为c或
‑
o
‑
。
[0021]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，j为c，r1为c1‑2烷基，优选为甲基；r2为h或c1‑2烷基；或者j为
‑
o
‑
或键，r1和r2均不存在。
[0022]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，r3和r4各自独立地为h，卤素，氰基，c1‑6烷基或c1‑2卤代烷基；其中卤素优选为f、cl、br；c1‑2卤代烷基优选为单卤代、二卤代或三卤代烷基，更优选为三氟甲基。
[0023]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，z为o，y为c6‑
10
芳基或c3‑8环烷基，优选为苯基、萘基或双环[1.1.1]戊烷基；或者，z为n，y为c6‑
10
芳基或5
‑
10元杂芳基，且y与z通过共价键直接连接形成8
‑
13元杂芳基，优选地，z为n，y为苯基，且y与z通过共价键直接连接形成苯并咪唑
‑2‑
基。
[0024]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
ch2oc(o)
‑
，
‑
c(o)och2‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh
‑
，
‑
ch
2 n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(ch3)ch2‑
，
‑
c(ch3)2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhc(ch3)2‑
，
‑
ch2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhch2‑
，
‑
c(ch3)2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(ch3)c(ch3)2‑
，5
‑
10元杂芳基，c2‑4亚烯基或c2‑4亚炔基。优选地，g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
ch2oc(o)
‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
ch2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(ch3)2nhc(o)
‑
，
‑
ch2nhc(o)
‑
，
‑
c(ch3)2n(ch3)c(o)
‑
，噁唑基或亚乙炔基。
[0025]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，q为任选被取代的c6‑
10
芳基或5
‑
10元杂芳基，任选被取代的3
‑
13元杂环基，任选被取代的c1‑6烷基或c3‑8环烷基；当g为键时，q不为苯基。优选地，q为任选被取代的选自如下组的基团：苯基，萘基，异丙基，叔丁基，喹啉基，苯并噁唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，吲哚基，2,3
‑
二氢异吲哚基，苯并呋喃基，环丙基。优选地，所述任选被取代的基团被选自如下组的取代基所取代：卤素、c1‑6烷基、c1‑6烷氧基、c1‑6卤代烷基；所述卤素优选为f、cl、br；所述c1‑6烷基优选为甲基；所述c1‑6烷氧基优选为甲氧基；所述c1‑6卤代烷基优选为三氟甲基。
[0026]
根据本发明式(i)化合物的一些实施方案，q为氟代喹啉基，氯代喹啉基，优选6
‑
氟代喹啉基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉基，更优选6
‑
氟代喹啉
‑2‑
基，6
‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基。在另一些实施方案中，q为苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、吲哚基，优选苯并噁唑
‑2‑
基，苯并咪唑
‑2‑
基，1
‑
甲基
‑
苯并咪唑
‑2‑
基，苯并噻唑
‑2‑
基，2
‑
吲哚基，苯并呋喃
‑2‑
基。
[0027]
本发明提供式(ii)所示化合物
[0028][0029]
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，其中
[0030]
r3和r4各自独立地为h，卤素，氰基，烷基或卤代烷基；
[0031]
z为o，y为芳基或环烷基；或者，z为n，y为芳基或杂芳基，且y与z通过共价键直接连接形成杂芳基；
[0032]
g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
(ch2)
n
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o(ch2)
n
‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh
‑
，
‑
(ch2)
n
n(烷基)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(烷基)(ch2)
n
‑
，
‑
c(烷基)2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhc(烷基)2‑
，
‑
(ch2)
n
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh(ch2)
n
‑
，
‑
c(烷基)2n(烷基)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(烷基)c(烷
基)2‑
，杂芳基，亚烯基或亚炔基；
[0033]
n为1或2；
[0034]
q为任选被取代的芳基或杂芳基，任选被取代的杂环基，任选被取代的烷基或环烷基。
[0035]
根据本发明式(ii)化合物的一些实施方案，r3和r4各自独立地为h，卤素，氰基，c1‑6烷基或c1‑2卤代烷基；其中卤素优选为f、cl、br；c1‑2卤代烷基优选为单卤代、二卤代或三卤代烷基，更优选为三氟甲基。
[0036]
根据本发明的式(ii)化合物的一些实施方案，z为o，y为c6‑
10
芳基或c3‑8环烷基，优选为苯基、萘基或双环[1.1.1]戊烷基；或者，z为n，y为c6‑
10
芳基或5
‑
10元杂芳基，且y与z通过共价键直接连接形成8
‑
13元杂芳基，优选地，z为n，y为苯基，且y与z通过共价键直接连接形成苯并咪唑
‑2‑
基。
[0037]
根据本发明式(ii)化合物的一些实施方案，g为
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
ch2oc(o)
‑
，
‑
c(o)och2‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
ch2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(ch3)ch2‑
，
‑
c(ch3)2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhc(ch3)2‑
，
‑
ch2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhch2‑
，
‑
c(ch3)2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(ch3)c(ch3)2‑
，5
‑
10元杂芳基，c2‑4亚烯基或c2‑4亚炔基。优选地，g为
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
ch2oc(o)
‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
ch2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(ch3)2nhc(o)
‑
，
‑
ch2nhc(o)
‑
，
‑
c(ch3)2n(ch3)c(o)
‑
，噁唑基或亚乙炔基。
[0038]
根据本发明式(ii)化合物的一些实施方案，q为任选被取代的c6‑
10
芳基或5
‑
10元杂芳基，任选被取代的3
‑
13元杂环基，任选被取代的c1‑6烷基或c3‑8环烷基；优选地，q为8
‑
10元双环杂芳基；更优选地，q为任选被取代的选自如下组的基团：苯基，萘基，异丙基，叔丁基，喹啉基，苯并噁唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，吲哚基，2,3
‑
二氢异吲哚基，苯并呋喃基，环丙基。优选地，所述任选被取代的基团被选自如下组的取代基所取代：卤素、c1‑6烷基、c1‑6烷氧基、c1‑6卤代烷基；所述卤素优选为f、cl、br；所述c1‑6烷基优选为甲基；所述c1‑6烷氧基优选为甲氧基；所述c1‑6卤代烷基优选为三氟甲基。
[0039]
根据本发明式(ii)化合物的一些实施方案，q为氟代喹啉基，氯代喹啉基，优选6
‑
氟代喹啉基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉基，更优选6
‑
氟代喹啉
‑2‑
基，6
‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基。在另一些实施方案中，q为苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、吲哚基，优选苯并噁唑
‑2‑
基，苯并咪唑
‑2‑
基，1
‑
甲基
‑
苯并咪唑
‑2‑
基，苯并噻唑
‑2‑
基，2
‑
吲哚基，苯并呋喃
‑2‑
基。
[0040]
本发明提供式(iii)所示化合物
[0041][0042]
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，其中：
[0043]
j为c，
‑
o
‑
或键；
[0044]
r1和r2各自独立地为h，烷基，或者r1和r2均不存在；
[0045]
r3和r4各自独立地为h，卤素，氰基，烷基或卤代烷基；
[0046]
z为o，y为芳基或环烷基；或者，z为n，y为芳基或杂芳基，且y与z通过共价键直接连接形成杂芳基；
[0047]
g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
(ch2)
n
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o(ch2)
n
‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh
‑
，
‑
(ch2)
n
n(烷基)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(烷基)(ch2)
n
‑
，
‑
c(烷基)2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhc(烷基)2‑
，
‑
(ch2)
n
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh(ch2)
n
‑
，
‑
c(烷基)2n(烷基)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(烷基)c(烷基)2‑
，杂芳基，亚烯基或亚炔基；
[0048]
n为1或2；
[0049]
q为任选被取代的芳基或杂芳基，任选被取代的杂环基，任选被取代的烷基或环烷基。
[0050]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，j为c或键。
[0051]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，j为c，r1为h或c1‑2烷基，优选为甲基；r2为h或c1‑2烷基；或者j为
‑
o
‑
或键，r1和r2均不存在。
[0052]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，r3和r4各自独立地为h，卤素，氰基，c1‑6烷基或c1‑2卤代烷基；其中卤素优选为f、cl、br；c1‑2卤代烷基优选为单卤代、二卤代或三卤代烷基，更优选为三氟甲基。
[0053]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，z为o，y为c6‑
10
芳基或c3‑8环烷基，优选为苯基、萘基或双环[1.1.1]戊烷基；或者，z为n，y为c6‑
10
芳基或5
‑
10元杂芳基，且y与z通过共价键直接连接形成8
‑
13元杂芳基，优选地，z为n，y为苯基，且y与z通过共价键直接连接形成苯并咪唑
‑2‑
基。
[0054]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
ch2oc(o)
‑
，
‑
c(o)och2‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nh
‑
，
‑
ch
2 n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(ch3)ch2‑
，
‑
c(ch3)2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhc(ch3)2‑
，
‑
ch2nhc(o)
‑
，
‑
c(o)nhch2‑
，
‑
c(ch3)2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(o)n(ch3)c(ch3)2‑
，5
‑
10元杂芳基，c2‑4亚烯基或c2‑4亚炔基。优选地，g为键，
‑
o
‑
，
‑
c(o)
‑
，
‑
oc(o)
‑
，
‑
c(o)o
‑
，
‑
ch2oc(o)
‑
，
‑
nhc(o)
‑
，
‑
ch2n(ch3)c(o)
‑
，
‑
c(ch3)2nhc(o)
‑
，
‑
ch2nhc(o)
‑
，
‑
c(ch3)2n(ch3)c(o)
‑
，噁唑基或亚乙炔基。
[0055]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，q为任选被取代的c6‑
10
芳基或5
‑
10元杂芳基，任选被取代的3
‑
13元杂环基，任选被取代的c1‑6烷基或c3‑8环烷基；当g为键时，q不为苯基。优选地，q为任选被取代的选自如下组的基团：苯基，萘基，异丙基，叔丁基，喹啉基，苯并噁唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，吲哚基，2,3
‑
二氢异吲哚基，苯并呋喃基，环丙基。优选地，所述任选被取代的基团被选自如下组的取代基所取代：卤素、c1‑6烷基、c1‑6烷氧基、c1‑6卤代烷基；所述卤素优选为f、cl、br；所述c1‑6烷基优选为甲基；所述c1‑6烷氧基优选为甲氧基；所述c1‑6卤代烷基优选为三氟甲基。
[0056]
根据本发明式(iii)化合物的一些实施方案，q为氟代喹啉基，氯代喹啉基，优选6
‑
氟代喹啉基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉基，更优选6
‑
氟代喹啉
‑2‑
基，6
‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基。在另一些实施方案中，q为苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、吲哚基，优选苯并噁唑
‑2‑
基，苯并咪唑
‑2‑
基，1
‑
甲基
‑
苯并咪唑
‑2‑
基，苯并噻唑
‑2‑
基，2
‑
吲哚基，苯并呋喃
‑2‑
基。
[0057]
本发明提供了结构如下的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的
盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物：
[0058]
[0059]
[0060]
[0061]
[0062]
[0063]
[0064]
[0065][0066]
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其包含上述化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0067]
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其包含上述式(i)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0068]
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其包含上述式(ii)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0069]
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其包含上述式(iii)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐、前药、水合物、溶剂合物、同位素标记衍生物，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0070]
根据本发明的一些实施方案，上述药物组合物还包含一种或多种其他治疗剂。
[0071]
根据本发明的一些实施方案，所述其他治疗剂选自化学治疗剂、信号转导抑制剂、抗感染剂、免疫调节剂和/或炎症调节剂。
[0072]
根据本发明的一些实施方案，所述其他治疗剂为免疫检查点抑制剂。所述免疫检查点抑制剂优选pd
‑
1抗体和/或pd
‑
l1抗体。所述pd
‑
1抗体包括但不限于已知的单抗药物。所述pd
‑
l1抗体包括但不限于已知的抗体药物。
[0073]
本发明还涉及上述化合物或药物组合物在制备药物中的应用，所述药物用于抑制吲哚胺2,3
‑
双加氧酶活性。
[0074]
本发明还涉及上述化合物或药物组合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗和/或预防全部或部分由吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)介导的疾病、病症或病状。根据本发明的一些实施方案，所述疾病、病症或病状为增殖性疾病、感染性疾病、免疫相关疾病和/或炎性疾病。所述增殖性疾病包括但不限于癌症。所述感染性疾病包括但不限于病毒感染。所述应用进一步包括所述化合物或药物组合物与化学治疗剂、放射治疗、移植疗法、疫苗、细胞因子疗法、信号转导抑制剂、抗感染剂、免疫调节剂和/或炎症调节剂的组合或联用。
[0075]
本发明还涉及上述化合物或药物组合物用于治疗和/或预防全部或部分由吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)介导的多种疾病，病症或病状的用途。根据本发明的一些实施方案，所述疾病、病症或病状为增殖性疾病、感染性疾病、免疫相关疾病和/或炎性疾病，所述增殖性疾病包括但不限于癌症，所述感染性疾病包括但不限于病毒感染。所述用途进一步包括给所述疾病、病症或病状的患者施用化学治疗剂、放射治疗、移植疗法、疫苗、细胞因子疗法、信号转导抑制剂、抗感染剂、免疫调节剂和/或炎症调节剂。
[0076]
免疫调节异常与宿主免疫系统的肿瘤逃避紧密相关，引起肿瘤生长及发展。包含化学疗法和放射疗法的传统治疗方法对于患者而言一般难以忍受且由于肿瘤进化以经受住这些治疗而变得较不有效。通过利用患者的自身免疫系统来鉴定及消除肿瘤细胞，免疫疗法具有毒性降低的益处。由于免疫调节酶吲哚胺2,3
‑
双加氧酶的上调包括一种通过肿瘤控制以促进生长的机制，抑制酶活性的药剂(例如小分子化合物)呈现用于预防和/或治疗的有前景的途径。大量实验资料表明ido抑制在免疫抑制、肿瘤耐受和/或排斥、慢性感染、hiv感染及自身免疫等疾病或病症中的作用。对于患有神经或神经精神疾病或病症(诸如抑郁)的患者，ido的抑制也可作为重要的治疗策略。本发明化合物、组合物和方法提供一类新的ido调节剂及其应用。
[0077]
除非另有说明，否则当本文描述本发明化合物的用途时，应理解这些化合物可以
是组合物(例如药物组合物)的形式。
[0078]
如下所述，尽管认为本发明化合物通过抑制ido实现它们的活性，但实施本发明并不需要精确理解化合物的基础作用机理。本发明化合物可替代地通过抑制色氨酸
‑
2,3
‑
双加氧酶(tdo)活性来实现其活性。本发明化合物还可通过抑制ido和tdo两者的功能来实现其活性。尽管本发明化合物在本文中通常称为ido抑制剂，但应理解术语“ido抑制剂”包括通过单独抑制ido或tdo起作用的化合物，和/或通过抑制ido和tdo两者起作用的化合物。
[0079]
在本发明的一些实施方案中，本发明涉及治疗或预防受试者(例如人)的癌症的方法，包括给受试者施用治疗有效量的至少一种本发明所述的ido抑制剂。本发明涉及治疗或预防受试者的癌症的方法，包括向受试者施用有效量的逆转或阻止ido介导的免疫抑制进程的ido抑制剂。在一些实施方案中，ido介导的免疫抑制由抗原呈递细胞(apc)介导。
[0080]
可使用本发明所述的化合物和/或组合物治疗的癌症的实例包括但不限于：前列腺癌，结肠直肠癌，胰腺癌，子宫颈癌，胃癌，子宫内膜癌，脑癌，肝癌，膀胱癌，卵巢癌，睾丸癌，头癌，颈癌，皮肤癌(包括黑色素瘤和基底癌)，间皮内膜癌，白细胞癌(包括淋巴瘤和白血病)，食道癌，乳腺癌，肌肉癌，结缔组织癌，肺癌(包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌)，肾上腺癌，甲状腺癌，肾癌，骨癌，胶质母细胞瘤，间皮瘤，肾细胞癌，肉瘤，绒毛膜癌，皮肤基底细胞癌和睾丸精原细胞瘤。在本发明的一些实施方案中，癌症是黑色素瘤，结肠癌，胰腺癌，乳腺癌，前列腺癌，肺癌，白血病，脑肿瘤，淋巴瘤，肉瘤，卵巢癌或卡波西氏肉瘤。
[0081]
本发明涉及治疗接受骨髓移植或外周血干细胞移植的受试者的方法，通过施用足以增加对肿瘤抗原的延迟型超敏反应，延迟移植后恶性肿瘤的复发时间，增加移植后无复发存活时间和/或增加移植后长期存活率的治疗有效量的本发明所述的ido抑制剂来实施治疗。
[0082]
在本发明的一些实施方案中，本发明涉及治疗或预防受试者(例如人)的感染性病症(例如，病毒感染)的方法，包括向受试者施用治疗有效量的至少一种ido抑制剂(例如，本发明的新型ido抑制剂)。在一些实施方案中，感染性疾病是病毒感染(例如，慢性病毒感染)，细菌感染或寄生虫感染。在一些实施方案中，病毒感染是人免疫缺陷病毒或巨细胞病毒。在某些实施方案中，细菌感染是分枝杆菌感染(例如，麻风分枝杆菌(mycobacterium leprae)或结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis))。在某些实施方案中，寄生虫感染是杜氏利什曼虫(leishmaniadonovani)、热带利什曼虫(leishmania tropica)、硕大利什曼虫(leishmania major)、埃塞俄比亚利什曼虫(leishmania aethiopica)、墨西哥利什曼虫(leishmania mexicana)、恶性疟原虫(plasmodium falciparum)、间日疟原虫(plasmodium vivax)、卵形疟原虫(plasmodium ovale)或三日疟原虫(plasmodium malariae)感染。在进一步的实施方案中，感染性疾病是真菌感染。
[0083]
在本发明的一些实施方案中，本发明涉及治疗或预防受试者(例如人)的免疫和发炎相关疾病，病症或病状的方法，包括给予受试者治疗有效量的至少一种ido抑制剂(例如，优选本发明的新型ido抑制剂)。
[0084]
本发明所述免疫和发炎相关疾病，病症或病状包括但不限于关节炎(例如类风湿性关节炎)、肾衰竭、狼疮、哮喘、牛皮癣、结肠炎、胰脏炎、过敏、纤维化、外科并发症(例如其中发炎细胞因子防止愈合)、贫血和肌肉纤维疼痛。可与慢性发炎相关的其他疾病和病症包括阿兹海默氏病(alzheimer's disease)、充血性心脏衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、动脉硬
化、骨质疏松、帕金森氏病(parkinson's disease)、感染、发炎性肠病(例如克罗恩氏病(crohn's disease)和溃疡性结肠炎)、过敏性接触性皮炎和其他湿疹、全身性硬化症、移植和多发性硬化。在其他免疫相关病症中，预期抑制ido功能还可在免疫耐受性和预防子宫内胎儿排斥反应中起作用。
[0085]
本发明所述ido抑制剂的候选适应症还包括通过调节ido活性可全部或部分治疗或预防的其他疾病，病症和病状。
[0086]
本发明进一步涉及本发明所述的ido抑制剂与一种或多种其他治疗剂组合的用途。一种或多种其他治疗剂可具有一些ido调节活性和/或它们可通过不同的作用机制起作用。在一些实施方案中，此类治疗剂包括放射治疗(例如，局部放射疗法或全身放射疗法)和/或非药理学性质的其他治疗方式。当使用组合疗法时，ido抑制剂和一种其他治疗剂可以是单一组合物或多种组合物的形式，并且治疗方式可以为同时，依次或通过一些其他方案给药。举例来说，本发明涉及一种治疗方案，其中在放射治疗之后进行化学治疗。联合疗法可具有累加或协同效应。
[0087]
在本发明的一些实施方案中，还包括本发明所述的ido抑制剂与骨髓移植，外周血干细胞移植或其他类型的移植疗法组合的用途。
[0088]
在一些实施方案中，本发明的ido抑制剂可与免疫抑制剂组合以减少免疫效应细胞的数目。
[0089]
在一些实施方案中，本发明涉及本发明所述的ido抑制剂与免疫检查点抑制剂联合使用的用途。阻断免疫检查点，导致抗原特异性t细胞应答扩增已被证明是人类癌症治疗中的一种有前景的方法。被阻断的是一些在肿瘤微环境中被选择性上调的免疫检查点(配体和受体)，包括pd
‑
1(程序性细胞死亡蛋白1)、pd
‑
l1(pd
‑
1配体)、btla(b和t淋巴细胞衰减剂)、ctla4(细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4)、tim3(t细胞膜蛋白3)、lag3(淋巴细胞活化基因3)、a2ar(腺苷a2a受体a2ar)和杀伤细胞抑制性受体。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂为pd
‑
1抗体，其包括但不限于已知的单抗药物。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂为pd
‑
l1抗体，其包括但不限于已知的抗体药物。
[0090]
在一些实施方案中，本发明提供了治疗受试者的癌症的方法，包括向受试者施用治疗有效量的至少一种ido抑制剂和至少一种化学治疗剂。
[0091]
本发明所述化学治疗剂包括但不限于烷基化剂(例如，氮芥(如苯丁酸氮芥，环磷酰胺，异环磷酰胺，二氯甲基二乙胺，美法仑和尿嘧啶氮芥)；氮丙啶(如噻替派)；白藜芦醇酯(如白消安)；核苷类似物(如吉西他滨)；亚硝基脲(如卡莫司汀、洛莫司汀和链脲佐菌素)；拓扑异构酶1抑制剂(如伊立替康)；铂络合物(如顺铂和卡铂)；生物还原烷基化剂(如丝裂霉素，丙卡巴肼，达卡巴嗪和六甲蜜胺))；dna链断裂剂(例如博来霉素)；拓扑异构酶ii抑制剂(例如安吖啶、更生霉素、柔红霉素、伊达比星、米托蒽醌、多柔比星、依托泊苷及替尼泊苷)；dna小沟结合剂(例如普卡霉素(plicamydin))；抗代谢物(例如，叶酸拮抗剂(如甲氨蝶呤和三甲曲沙)；嘧啶拮抗剂(如氟尿嘧啶，氟脱氧尿苷，cb3717，阿扎胞苷，阿糖胞苷，氟尿苷)；嘌呤拮抗剂(如巯基嘌呤，6
‑
硫鸟嘌呤，氟达拉滨，喷司他丁)；天冬酰胺酸酶；和核糖核苷酸还原酶抑制剂(如羟基脲))；微管蛋白相互作用剂(例如长春新碱，雌莫司汀，长春碱，多西他赛，埃坡霉素衍生物和紫杉醇)；激素药(例如雌激素，结合雌激素，乙炔雌二醇，己烯雌酚，氯烯雌醚(chlortrianisen)，依德斯尔(idenestrol)，孕激素(如己酸羟孕酮，甲
羟孕酮和甲地孕酮)和雄激素(如睾酮，丙酸睾酮，氟甲睾酮和甲基睾酮))；肾上腺皮质类固醇(例如泼尼松，地塞米松，甲基强的松龙和泼尼松龙)；促黄体激素释放剂或促性腺激素释放激素拮抗剂(例如醋酸亮丙瑞林和醋酸戈舍瑞林)；和抗激素抗原(例如他莫昔芬，抗雄激素剂(如氟他胺)和抗肾上腺剂(如米托坦和氨鲁米特))。本发明还涉及ido抑制剂与本领域已知的其他药剂(例如三氧化二砷)以及将来开发的其他化学治疗剂联合使用的用途。
[0092]
本发明一些实施方案中涉及用于治疗癌症的方法，施用治疗有效量的本发明的ido抑制剂与至少一种化学治疗剂的组合比通过单独施用任一者观测到的癌症存活率更高。本发明进一步的实施方案涉及用于治疗癌症的方法，施用治疗有效量的本发明的ido抑制剂与至少一种化学治疗剂的组合比通过单独施用任一者观测到肿瘤尺寸的减小更多和/或肿瘤生长的减慢更多。
[0093]
在进一步的实施方案中，本发明涉及治疗或预防受试者癌症的方法，包括给受试者施用治疗有效量的至少一种本发明的ido抑制剂和至少一种信号转导抑制剂(sti)。
[0094]
本发明所述信号转导抑制剂(sti)包括但不限于bcr/abl激酶抑制剂，表皮生长因子(egf)受体抑制剂，her
‑
2/neu受体抑制剂和法呢基转移酶抑制剂(fti)。
[0095]
本发明还涉及增加受试者中肿瘤细胞排斥的方法，包括联合施用本发明的ido抑制剂和至少一种化学治疗剂和/或放射疗法，其中所得到的肿瘤细胞排斥大于通过仅施用ido抑制剂，化学治疗剂或放射疗法任一种获得的肿瘤细胞排斥。
[0096]
在进一步的实施方案中，本发明提供了治疗受试者的癌症的方法，包括给受试者施用治疗有效量的至少一种本发明的ido抑制剂和至少一种除ido抑制剂以外的免疫调节剂。
[0097]
本发明所述免疫调节剂包括但不限于cd40l，b7，b7rp1，抗cd40，抗cd38，抗icos，4
‑
ibb配体，树突细胞癌疫苗，il2，il12，elc/ccl19，slc/ccl21，mcp
‑
1，il
‑
4，il
‑
18，tnf，il
‑
15，mdc，ifn
‑
α/
‑
β，m
‑
csf，il
‑
3，gm
‑
csf，il
‑
13和抗il
‑
10。
[0098]
本发明涉及治疗或预防受试者(例如人)的感染性疾病(例如，病毒感染)的方法，包括向受试者施用治疗有效量的至少一种本发明的ido抑制剂和治疗有效量的抗感染剂。
[0099]
本发明所述抗感染剂包括但不限于抗病毒剂、抗寄生虫剂和抗细菌剂。本发明所述抗病毒剂包括靶向各种病毒生命
‑
周期阶段且具有不同作用机制的抗病毒剂，包括但不限于：病毒脱壳的抑制剂(例如金刚胺及金刚乙胺)；逆转录酶抑制剂(例如阿昔洛韦(acyclovir)、齐多夫定及拉米夫定(lamivudine))；靶向整合酶的药剂；阻断转录因子与病毒dna的连接的药剂；影响转译的药剂(例如反义分子)(例如福米韦生(fomivirsen))；调节转译/核糖核酸酶功能的药剂；蛋白酶抑制剂；病毒装配调节剂(例如利福平)；抗逆转录病毒剂，诸如核苷类似物逆转录酶抑制剂(例如迭氮胸苷(azt)、ddl、ddc、3tc、d4t)；非核苷逆转录酶抑制剂(例如依法韦仑(efavirenz)、奈韦拉平(nevirapine))；核苷酸类似物逆转录酶抑制剂；及防止病毒粒子释放的药剂(例如扎那米韦(zanamivir)和奥司他韦(oseltamivir))。某些病毒感染(例如hiv)的治疗和/或预防经常需要一组抗病毒剂(“混合物(cocktail)”)。本发明所述抗寄生虫剂包括但不限于噻苯达唑、双羟萘酸噻嘧啶、甲苯咪唑、吡喹酮、氯硝柳胺、双硫酸醇、羟胺硝喹、美曲磷酯、伊维菌素、阿苯达唑、依氟鸟氨酸、美拉胂醇、喷他脒、苄硝唑、硝呋莫司和硝基咪唑，以及本领域可用于治疗寄生虫病症的其他药剂。本发明所述抗细菌剂包括但不限于靶向细菌细胞壁(例如头胞菌素和青霉素)或细胞
膜(例如多黏菌素)或干扰必需细菌酶(例如磺酰胺、利福霉素和喹啉)的抗细菌剂，靶向蛋白质合成的抗细菌剂(例如四环素和大环内酯)，杀细菌的抗细菌剂(例如氨基糖苷)，以及本领域技术人员能够选择的适合于在特定细菌感染中使用的抗细菌剂。
[0100]
在本发明的一些实施方案中，其他治疗剂是细胞因子，包括例如粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子(gm
‑
csf)或flt3
‑
配体。本发明还涉及本发明的ido抑制剂用于(单独或作为组合疗法的组分)治疗或预防病毒感染(例如，慢性病毒感染)的用途。所述病毒包括但不限于丙型肝炎病毒(hcv)，人乳头瘤病毒(hpv)，巨细胞病毒(cmv)，埃
‑
巴二氏病毒(epstein
‑
barr virus，ebv)，水痘带状疱疹病毒，柯萨奇病毒(coxsackie virus)和人类免疫缺陷病毒(hiv)。
[0101]
本发明涉及治疗或预防受试者(例如人)的免疫和发炎相关疾病、病症和病状的方法，包括向受试者施用治疗有效量的至少一种本发明的ido抑制剂和治疗有效量的炎症调节剂。
[0102]
本发明所述炎症调节剂包括但不限于非类固醇消炎药(nsaid)，诸如阿司匹林、布洛芬及其他丙酸衍生物(阿明洛芬、苯噁洛芬、布氯酸、卡洛芬、芬布芬、非诺洛芬、氟洛芬、氟比洛芬、吲哚洛芬、酮基布洛芬、咪洛芬、萘普生、奥沙普嗪、吡洛芬、普拉洛芬、舒洛芬、噻洛芬酸及硫噁洛芬)，乙酸衍生物(吲哚美辛、阿西美辛、阿氯芬酸、环氯茚酸、双氯芬酸、芬氯酸、芬克洛酸(fenclozicacid)、芬替酸、弗洛芬克(fuirofenac)、异丁芬酸(ibufenac)、伊索克酸、噁平酸、舒林酸、硫平酸、托美丁、齐多美辛及佐美酸)，芬那酸衍生物(氟芬那酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、氟尼酸及托芬那酸)，联苯羧酸衍生物(二氟尼柳及氟苯柳)，昔康(oxicam)(伊索昔康、吡罗昔康、舒多昔康及替诺昔康)，水杨酸盐(乙酰基水杨酸、柳氮磺胺吡啶)和二氢吡唑酮(阿帕宗、苯哌隆、非普拉宗、莫非布宗、羟布宗、苯基丁氮酮)以及环加氧酶
‑
2(cox
‑
2)抑制剂。
[0103]
在另外的实施方案中，通过共同施用疫苗与治疗有效量的本发明的ido抑制剂来实现感染性疾病的治疗。在一些实施方案中，疫苗是抗病毒疫苗，包括例如抗hiv疫苗。在一些实施方案中，疫苗对结核病或疟疾有效。在一些实施方案中，疫苗是肿瘤疫苗(例如对黑色素瘤有效的疫苗)。肿瘤疫苗可包含遗传修饰的肿瘤细胞或遗传修饰的细胞系，包括已经转染以表达粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子(gm
‑
csf)的遗传修饰的肿瘤细胞或遗传修饰的细胞系。在特定的实施方案中，疫苗包括一种或多种免疫原性肽和/或树突细胞。
[0104]
在一些实施方案中，本发明涉及将本发明的ido抑制剂与一种或多种抗微生物剂组合的方法。
[0105]
在某些实施方案中，通过施用本发明的ido抑制剂和至少一种另外的治疗剂组合来治疗感染，在施用ido抑制剂和另外的治疗剂之后观察到的感染症状与单独施用其中一种后观察到的相同感染症状相比得到改善。在一些实施方案中，观察到的感染症状可以是病毒载量的减少，cd4
+
t细胞数量的增加，机会性感染的减少，存活时间的增加，慢性感染的根除或以上现象的组合。
[0106]
本发明也提供药学上可接受的组合物，其包含治疗有效量的一种或多种式(i)或式(ii)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，所述化合物与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂，和任选的一种或多种上述其他治疗剂一起配制。药物组合物可用于本发明的方法中，例如药物组合物可离体或体内向受试者施用以
便实践本发明所描述的治疗和预防方法及用途。本发明的药物组合物可经调配以与预期方法或给药途径相容。此外，本发明的药物组合物可与如本发明所描述的其他治疗剂或化合物联合使用以便治疗或预防如由本发明涵盖的疾病、病症和病状。
[0107]
本发明化合物可通过适宜的方法给药用于本发明所述的任一种用途，例如口服，例如片剂、胶囊剂(二者中的每一种均包括持续释放或定时释放处方)、丸剂、散剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、混悬液(包括纳米混悬液、微米混悬液、喷雾干燥分散剂)、糖浆剂和乳剂；舌下给药；含服；胃肠外，例如通过皮下、静脉内、肌内或胸骨内的注射，或输注技术(例如作为无菌可注射水溶液或非水溶液或混悬液)；经鼻，包括对鼻粘膜给药，例如通过吸入喷雾；局部，例如以乳膏或软膏的形式；或经直肠，例如以栓剂的形式。它们可单独给药，但通常会与根据所选择的给药途径和标准药学操作选择的药学载体一起给药。
[0108]
术语“药学上可接受的”指在合理的医学判断范围内适合与人类和动物的组织接触使用而无过度的毒性、刺激、过敏反应或其它的问题或并发症，与合理的收益/风险比相当的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0109]
术语“药学上可接受的载体”指本领域通常可接受的用于将生物活性药剂递送给动物、特别是哺乳动物的介质，根据给药方式和剂型的性质包括例如佐剂、赋形剂或赋形物，例如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调节剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、助悬剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、抗菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分散剂。药学上可接受的载体在本领域普通技术人员的眼界范围内根据大量因素配制。其包括但不限于：配制的活性药剂的类型和性质，要将含有该药剂的组合物给药的对象，组合物的预期给药途径，和目标治疗适应症。药学上可接受的载体包括含水介质和非水介质这两者以及多种固体和半固体剂型。除了活性药剂以外，这样的载体包括许多不同的成分和添加剂，因多种原因(例如稳定活性药剂、粘合剂等)在处方中包括的这样的另外的成分对于本领域普通技术人员是众所周知的。
[0110]
用于本发明化合物的给药方案当然可根据已知的因素改变，例如具体药剂的药效学特征及其给药的模式和途径，接受者的物种、年龄、性别、健康、医学状况和体重，症状的性质和程度，共存的治疗的种类，治疗的频率，给药的途径，患者的肾脏和肝脏的功能，和需要的效果。
[0111]
作为一般指南，当用于指明的效果时，各种活性成分的日口服剂量在每日约0.001
‑
约5000mg之间的范围内，优选在每日约0.01
‑
约1000mg之间，最优选在每日约0.1
‑
约250mg之间，在恒速输注的过程中静脉内最优选的剂量在约0.01
‑
约10mg/kg/分钟的范围内。本发明化合物可以单日剂量给药，或者可将总日剂量以每日2、3或4次的分剂量给药。
[0112]
定义
[0113]
术语“ido抑制剂”包括能够抑制吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(ido)的活性并由此逆转ido介导的免疫抑制的药剂。ido抑制剂可抑制ido1和/或ido2(indol1)。ido抑制剂可为可逆的或不可逆的ido抑制剂。“可逆的ido抑制剂”为在催化部位或非催化部位可逆地抑制ido酶活性的化合物，“不可逆的ido抑制剂”包括通过与酶形成共价键来不可逆地破坏ido酶活性的化合物。术语“ido抑制剂”还包括能够抑制色氨酸
‑
2,3
‑
双加氧酶(tdo)活性的化合物。本发明的术语“ido抑制剂”应理解为包括通过单独抑制ido或tdo起作用的化合物，和/或通过抑制ido和tdo两者起作用的化合物。
[0114]
每一个由
“‑
基团
‑”
表示的g基团是指左边与q基团连接，右边与金刚烷的环碳原子
连接。
[0115]
术语“任选”是指随后所描述的事件或环境可以发生，也可以不发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。
[0116]
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即＝o)时，意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。优选地，所述取代基选自卤素、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、卤代烷基、卤代烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、羟基烷氧基、硝基、氰基、氨基、烷基氨基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、芳基氧基、杂芳基氧基、环烷基氧基、杂环基氧基。
[0117]
当任何变量(例如r)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0
‑
2个r所取代，则所述基团可以任选地至多被两个r所取代，并且每种情况下的r都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
[0118]
当其中一个变量选自键时，表示其连接的两个基团直接相连，比如a
‑
l
‑
b中l代表键，表示该结构实际上是a
‑
b。
[0119]
当一个取代基的键可以交叉连接到一个环上的多个原子时，这种取代基可以与这个环上的任意原子相键合。例如，结构单元表示取代基r可以在苯环上的任意一个位置发生取代。
[0120]
当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到化学结构通式中被取代的基团上时，这种取代基可以通过其任何原子相键合。例如，吡啶作为取代基，是指吡啶环上任意一个碳原子连接到被取代的基团上。
[0121]
术语“烷基”或“亚烷基”是指具有特定数量的碳原子的支链和直链的饱和脂族烃基。优选c1‑
10
的烷基或亚烷基，更优选c1‑6的烷基或亚烷基，进一步优选c1‑4的烷基或亚烷基，最优选c1‑2的烷基或亚烷基。烷基的实例包括但不限于：甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、叔丁基)、戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)和己基(例如正己基、2
‑
甲基戊基)。亚烷基的实例包括但不限于亚甲基(
‑
ch2‑
)、亚乙基(
‑
ch2ch2‑
)。
[0122]
术语“烯基”或“亚烯基”指在链的任何位点上具有一个或多个碳碳双键的烷基或亚烷基。优选c2‑6烯基或亚烯基，更优选c2‑4烯基或亚烯基，最优选c2‑3烯基或亚烯基。烯基的实例包括但不限于乙烯基，丙烯基，1
‑
丙烯基，2
‑
丙烯基，丁烯基，戊烯基，己烯基，丁间二烯基，戊间二烯基，己间二烯基。亚烯基的实例包括但不限于亚乙烯基、亚丙烯基。
[0123]
术语“炔基”或“亚炔基”指在链的任何位点上具有一个或多个碳碳三键的烷基或亚烷基。优选c2‑6炔基或亚炔基，更优选c2‑4炔基或亚炔基，最优选c2‑3炔基或亚炔基。炔基的实例包括但不限于乙炔基，丙炔基，1
‑
丙炔基，2
‑
丙炔基，丁炔基，戊炔基。亚炔基的实例包括但不限于亚乙炔基、亚丙炔基。
[0124]
术语“芳基”是指不饱和的、通常为芳族的烃基，其可为单环或稠合在一起的多个环。优选c6‑
14
芳基、更优选c6‑
10
芳基。优选单环芳基、双环芳基、三环芳基。芳基的实例包括但
不限于苯基、萘基、蒽基。
[0125]
术语“杂芳基”是指稳定的单环或稠合多环的芳族烃，其包含至少1个杂原子环成员(例如硫、氧或氮)。优选5
‑
13元杂芳基，更优选5
‑
10元杂芳基、进一步优选8
‑
13元杂芳基。优选单环杂芳基、双环杂芳基、三环杂芳基。杂芳基的实例包括但不限于5或6元单环杂芳基、7、8、9或10元双环杂芳基。优选包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自n、o和s的环杂原子。杂芳基的实例包括但不限于吡唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、吡咯基、咪唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡啶基、吡喃基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、苯并吡唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基。优选地杂芳基的实例包括噁唑基、苯并噁唑
‑2‑
基，苯并咪唑
‑2‑
基，苯并噻唑
‑2‑
基，2
‑
吲哚基，苯并呋喃
‑2‑
基。被取代的杂芳基的实例包括氟代喹啉基，氯代喹啉基、甲氧基氟代喹啉基、甲基苯并咪唑基，优选6
‑
氟代喹啉基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉基，1
‑
甲基
‑
苯并咪唑基，更优选6
‑
氟代喹啉
‑2‑
基，6
‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
氯
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基，2
‑
甲氧基
‑6‑
氟代喹啉
‑4‑
基，1
‑
甲基
‑
苯并咪唑
‑2‑
基。
[0126]
术语“杂环基”包括任何稳定的单环或多环的，饱和或部分不饱和的烃基，环中有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。杂原子选自b、o、n和s。优选3
‑
13元杂环基、更优选3
‑
11元杂环基，进一步优选3
‑
8元杂基，进一步优选3
‑
6元杂环基、进一步优选5
‑
11元杂环基，进一步优选5
‑
6元杂环基。优选单环杂环基、双环杂环基、三环杂环基。杂环基包括含有至少一个杂原子的稠环烃基、桥环烃基和螺环烃基。杂环基的实例包括但不限于5或6元单环杂环基，7、8、9或10元双环杂环基。优选包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自n、o和s的环杂原子。杂环基的实例包括但不限于哌嗪基、哌啶基、吗啉基、吡咯烷基、含有1
‑
3个选自o或n的杂原子的7
‑
10元双环桥环或双环螺环杂环基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、氮杂环丁基、四氢吡咯基、二氢吡咯基、四氢噻吩基、二氢噻吩基、2,3
‑
二氢异吲哚基。
[0127]
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
[0128]
术语“烷氧基”是指
‑
o
‑
烷基。
[0129]
术语“卤代烷基”包括单卤代烷基和多卤代烷基。优选c1‑
10
的卤代烷基，更优选c1‑6的卤代烷基，进一步优选c1‑4的卤代烷基，最优选c1‑2的卤代烷基。卤代烷基的实例包括但不限于三氟甲基、三氯甲基、2，2，2
‑
三氟乙基、五氟乙基、五氯乙基、4
‑
氯丁基和3
‑
溴丙基。
[0130]
术语“环烷基”包括任何稳定的单环或多环的，饱和或部分不饱和的烃基。优选c3
‑
13环烷基、更优选c3
‑
11环烷基，进一步优选c3
‑
8环烷基，进一步优选c3
‑
6环烷基、进一步优选c5
‑
11环烷基，进一步优选c5
‑
6环烷基。优选单环、双环或三环环烷基。环烷基包括稠环烷基、桥环烷基和螺环烷基。环烷基的实例包括但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片烷基、[2.2.2]二环辛烷基、[4.4.0]二环癸烷基、双环[1.1.1]戊烷基等。
[0131]
术语“互变异构体”是指两个异构体通过官能团的改变，使两个异构体迅速地相互转化构成处于动态平衡的混合物，这两个异构体称为互变异构体。
[0132]
术语“立体异构体”是指分子式相同，构造也相同，但由于分子中原子或基团在空间的排布位置不同而产生的异构体。立体异构体包括构型异构体和构象异构体，构型异构体又包括顺反异构体和对映异构体、非对映异构体。术语“对映异构体”也称为“手性异构体”“镜像异构体”，相互之间互为镜像对映，但不能重合。术语“外消旋体”是指等量的对映
异构体组成的混合物。
[0133]
术语“药学上可接受的盐”是指公开的化合物的衍生物，其中通过制备其酸或碱盐来修饰母体化合物。这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。药学上可接受的盐的实例包括但不限于：碱基(例如胺)的无机或有机酸盐，和酸基(例如羧酸)的碱或有机盐。药学上可接受的盐包括例如由无毒性的无机或有机酸形成的母体化合物的常规的无毒性盐或季铵盐。例如，这样的常规的无毒性的盐包括由无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸)得到的盐，和由有机酸(例如醋酸、丙酸、棕酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、巴莫酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺酰胺酸、2
‑
乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羟乙基磺酸等)制备的盐。
[0134]
术语“前药”是指在体内通过代谢方式(例如通过水解)可转化成所公开的化合物或活性成分的化合物。前药可以通过本领域技术人员已知的技术制备。
[0135]
术语“溶剂合物”是指由溶质和溶剂形成的可变化学计量的复合物。用于本发明的目的的这类溶剂可能不干扰溶质的生物活性。适合溶剂的实例包括但不限于水。水是溶剂分子的溶剂合物通常称作“水合物”。水合物包括含有化学计量的水的组合物，以及含有可变量的水的组合物。
[0136]
术语“同位素标记衍生物”是指本发明所描述的化合物，其中一个或多个原子被一个原子替换或取代，该原子的原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的(即自然发生的)原子质量或质量数。
[0137]
术语“任选”是指随后所描述的事件或环境可以发生，也可以不发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被卤素取代的芳基”表示卤素可以存在，也可以不存在，包括芳基被卤素取代的情形和芳基未被卤素取代的情形。
[0138]
术语“患者”指通过本发明的方法治疗的有机体。这样的有机体优选包括但不限于哺乳动物(例如鼠类、猴、马、牛、猪、犬、猫等)，最优选指人。
[0139]
术语“有效量”指例如由研究员或临床医师寻找的诱发组织、系统、动物或人的生物学或医学反应的药物或药剂(即本发明化合物)的量。
[0140]
术语“治疗有效量”指与未接受这样的量的相应对象比较，导致改善治疗、治愈、预防或改善疾病、病症或副作用，或减少疾病或病症的发展速度的量。有效量可以以1次或多次的给药、应用或剂量来给药，并不意欲限定于具体的处方或给药途径。该术语也包括在其范围内有效增强正常生理功能的量。
附图说明
[0141]
图1表示化合物1c的晶体结构。
[0142]
图2表示化合物2a富马酸盐的晶体结构。
[0143]
图3表示化合物17a的晶体结构。
具体实施方式
[0144]
本发明化合物可以通过本领域技术人员已知的多种合成方法来制备，包括可由在化学文献中已知或市售的原料通过以下方案中说明的方法、其与其他化学合成方法的结合
所形成的实施方式以及本领域技术人员所熟知的等同替换方式来制备。优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。溶剂、温度、压力和其它的反应条件可由本领域普通技术人员容易地选择。反应在适合于所使用的试剂和材料且适合于发生的转化的溶剂或溶剂混合物中进行。有机合成领域技术人员应理解的是，分子上存在的官能团应符合所提出的转化。这常常需要判断以修正合成步骤的顺序或另外选择特定的工艺方案以得到所需要的本发明化合物。以下方案和实施例为示例性的，只是为了举例而提供，本发明不应理解为局限于这些实施例，也并不意味着限制本领域技术人员可用来制备本发明公开的化合物的可能技术，应理解本发明包括相对于本发明公开的实施方式是显而易见的任何和所有变体。另外，合成中的不同步骤可以交替的顺序或得到所需要的化合物的顺序执行。此外，以下方案中作为离散步骤的反应的表示并不排除它们的串联执行，或通过在相同的反应容器中嵌套多个步骤或通过执行多个步骤而不纯化或表征中间体。另外，通过以下方法制备的许多化合物可进一步使用本领域技术人员已知的常规化学作用进行修饰。本发明中引用的所有文件均以引用的方式将其完全并入本发明中。
[0145]
制备实施例
[0146]
实施例1(合成方法i)
[0147]
(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1a,(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1b，(s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1c和(r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1d
[0148][0149]
步骤1.
[0150][0151]
在常温下，将4
‑
氧代金刚烷
‑1‑
甲酸(5克，25.7毫摩尔，1当量)和6
‑
氟喹啉(1.9克，12.9毫摩尔，0.5当量)溶解在乙腈(40毫升)中，在搅拌下加入硝酸银(656毫克，3.9毫摩尔，0.15当量)、过硫酸钾(6.5克，25.7毫摩尔，1.0当量)和硫酸铜(234毫克，1.3毫摩尔，0.05当量)，所得混合物在80℃下搅拌3小时。反应结束后，在剧烈搅拌下用水(500毫升)猝灭反应，然后用乙酸乙酯(3
×
300毫升)萃取，有机相合并，用饱和食盐水洗一次后用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂，粗品用硅胶柱层析纯化，用0
→
50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅黄色固体产物化合物1
‑
1(1.6克，产率21％)。ms(esi,m/z):296[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.13(d,j＝8.9hz,2h),7.54
‑
7.41(m,3h),2.75
‑
2.47(m,2h),2.38
‑
2.23(m,7h),2.19
‑
2.10(m,4h)。
[0152]
步骤2.
[0153][0154]
在冰浴冷却和氮气保护下，往磷酰基乙酸三乙酯(cas号：867
‑
13
‑
0，1.3克，5.7毫摩尔，1.3当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中分批加入氢化钠(264毫克,6.6毫摩尔,1.5当量,60％的矿物油混合物)，所得混合物在冰浴下搅拌30分钟，随后滴加化合物1
‑
1(1.3克，4.4毫摩尔，1当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液。滴加完成后，移除冰浴并自然恢复至室温搅拌1小时。反应结束后，加入30毫升水稀释，并用乙酸乙酯(3
×
80毫升)萃取。有机相合并，用饱和食盐水(2
×
100毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗品用硅胶柱层析进行分离，流动相用0
→
15％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到无色油状产物1
‑
2(1.5克，产率93％)。ms(esi,m/z):366[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.06(d,j＝8.8hz,2h),7.53
‑
7.36(m,3h),5.70
‑
5.67(m,1h),4.19(q,j＝7.1hz,2h),2.28
‑
2.16(m,6h),2.09
‑
1.90(m,4h),1.62
‑
1.57(m,3h),1.32(t,j＝7.1hz,3h)。
[0155]
步骤3.
[0156][0157]
在氮气保护下，往化合物1
‑
2(1.5克,4.1毫摩尔,1.0当量)的乙醇(15毫升)溶液中加入钯/碳(306毫克,0.3毫摩尔,0.07当量,10％含量)。所得混合物在氢气(1大气压)氛围下室温反应2小时。反应结束后，反应混合物过滤并用乙醇(3
×
10毫升)洗涤滤饼。滤液浓缩干燥后得到无色油状产物1
‑
3(1.3克顺反异构体混合物,粗品，产率86％)。所得产物不经过进一步分离直接用于下一步反应。ms(esi,m/z):368[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.07
‑
8.05(m,2h),7.54
‑
7.40(m,3h),4.20
‑
4.14(m,2h),2.58
‑
2.53(m,2h),2.39
‑
1.89(m,13h),1.67
‑
1.64(m,1h),1.32
‑
1.27(m,3h)。
[0158]
步骤4.
[0159][0160]
在氮气保护下，在
‑
78℃下，往二异丙基胺(0.3毫升,2.1毫摩尔,1.5当量)的四氢
呋喃(5毫升)溶液中逐滴加入正丁基锂(2.5摩尔/升,0.9毫升,2.2毫摩尔,1.6当量)。随后，滴加化合物1
‑
3(500毫克,1.4毫摩尔,1.0当量)的四氢呋喃(5毫升)溶液，10分钟滴完，搅拌30分钟后，滴加碘甲烷(251毫克,1.8毫摩尔,1.3当量)。所得混合物在
‑
78℃下继续搅拌30分钟后用饱和氯化铵水溶液(10毫升)进行猝灭并恢复常温继续搅拌30分钟，猝灭完的混合物用乙酸乙酯(3
×
80毫升)进行萃取。合并有机相，用饱和食盐水(150毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥并过滤，滤液减压浓缩干燥。粗品用硅胶柱层析进行分离，流动相用0
→
10％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅黄色油状产物1
‑
4(4个立体异构体混合物，400毫克，产率77％)。ms(esi,m/z):382[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.09
‑
8.04(m,2h),7.54
‑
7.40(m,3h),4.21
‑
4.14(m,2h),2.90
‑
2.83(m,1h),2.32
‑
1.83(m,13h),1.67
‑
1.61(m,1h),1.31
‑
1.25(m,3h),1.21
‑
1.18(m,3h)。
[0161]
步骤5.
[0162][0163]
在常温下，往搅拌下的化合物1
‑
4(420毫克,1.1毫摩尔,1.0当量)的四氢呋喃/甲醇/水(1:1:1，4.5毫升)溶液中，加入氢氧化锂(185毫克,7.7毫摩尔,7.0当量)。所得混合物在60℃下反应16小时。反应结束后，反应液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗品用浓度为1摩尔/升的稀盐酸(8毫升)进行酸化后减压浓干，得到淡黄色固体产物1
‑
5(4个立体异构体混合物，650毫克,粗品)。所得到的粗产物不经进一步分离，直接用于下一步反应。ms(esi,m/z):354[m+1]
+
。
[0164]
步骤6.
[0165]
(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1a,(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1b，(s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1c和(r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
(1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺1d
[0166]
在室温和氮气保护下，往化合物1
‑
5(388毫克，1.1毫摩尔，1当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(5毫升)溶液中加入2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(626毫克，1.7毫摩尔，1.5当量)。在室温下搅拌20分钟后加入对氯苯胺(182毫克，1.4毫摩尔，1.3当量)和二异丙基乙基胺(0.6毫升，4.4毫摩尔，3当量)。所得混合物在室温继续搅拌16小时，反应结束后将混合物在减压下浓缩。所得粗产物用反相快速色谱柱(c18柱)进行纯化(用5
→
95％乙腈/水流动相梯度洗脱20分钟；检测器uv254纳米)。将所得馏分进行减压浓缩得到两个顺反异构体产物：峰a(100毫克，产率20％)为灰白色固体；峰b(100毫克，产率20％)为灰白色固体。ms(esi，m/z):463[m+1]
+
。然后将它们各自进行手性分离。峰a产品的
手性拆分制备，用高压液相手性柱chiralpak
‑
ig，2.0x25cm(5μm)；流动相a：正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液)，流动相b：异丙醇；流速：20毫升/分钟；用20％b流动相洗脱10.5分钟，检测器:uv220纳米。得到两个产品；保留时间(rt1＝5.6分钟)短的产品为化合物1a(20毫克)，为类白色固体；保留时间(rt2＝7.5分钟)长的产品为化合物1b(26毫克)，呈灰白色固体。
[0167]
1a:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.24(d,j＝8.8hz,1h),8.13
‑
8.07(m,1h),7.72
‑
7.67(m,1h),7.62
‑
7.51(m,4h),7.33
‑
7.28(m,2h),2.96
‑
2.90(m,1h),2.45
‑
2.43(m,1h),2.25
‑
1.86(m,13h),1.23(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
116.60。
[0168]
1b:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.24(d,j＝8.8hz,1h),8.13
‑
8.07(m,1h),7.72
‑
7.67(m,1h),7.62
‑
7.51(m,4h),7.33
‑
7.28(m,2h),2.96
‑
2.90(m,1h),2.45
‑
2.43(m,1h),2.25
‑
1.86(m,13h),1.23(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
116.60。
[0169]
将峰b产品进行手性拆分制备，使用高压液相手性柱chiral art cellulose
‑
sb,30.0mm x 250mm(5μm)；流动相a：正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液)，流动相b：异丙醇；流速：40毫升/分钟；梯度：用10％b流动相洗脱20分钟；得到两个产品；它们的保留时间分别为rt1:13.4分钟，rt2:15.5分钟，检测：uv220纳米。较短保留时间(13.4分钟)的产品为化合物1c(9.5毫克)，为类白色固体；较长保留时间(15.5分钟)的产品为化合物1d(9.3毫克)，为灰白色固体。
[0170]
1c:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.18(br,1h),8.28(d,j＝8.7hz,1h),8.00(dd,j＝9.3,5.5hz,1h),7.73
‑
7.54(m,5h),7.35(d,j＝8.7hz,2h),2.96
‑
2.83(m,1h),2.00
‑
1.81(m,12h),1.60
‑
1.50(m,2h),1.12(d,j＝6.5hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.15。
[0171]
1d:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.18(br,1h),8.28(d,j＝8.7hz,1h),7.99(dd,j＝9.1,5.4hz,1h),7.73
‑
7.54(m,5h),7.35(d,j＝8.7hz,2h),2.96
‑
2.83(m,1h),2.00
‑
1.81(m,12h),1.60
‑
1.50(m,2h),1.12(d,j＝6.3hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.15。
[0172]
通过单晶x
‑
射线衍射(仪器型号xtalab pro 007hf(mo)，制造商rigaku)分析确定化合物1c的立体构型。解析结果数据见表1；晶体结构见图1。
[0173]
表1：化合物1c的单晶解析数据
[0174][0175][0176]
实施例2(合成方法ii)
[0177]
(s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2a，(r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2b，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r,3s，5s，7s)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2c，和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r,3s，5s，7s)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2d
[0178][0179]
步骤1.
[0180][0181]
在冰浴下，往搅拌的磷酰基乙酸三乙酯(263毫升,1324毫摩尔,2.2当量)的四氢呋喃(2.5升)溶液中加入氢化钠(53克,1324毫摩尔,2.2当量,60％的矿物油混合物)。在冰浴下搅拌30分钟后，分批加入5
‑
羟基金刚烷
‑2‑
酮(10克,602毫摩尔,1当量)。所得混合物恢复常温搅拌30分钟。反应结束后，反应液用冰浴冷却并用饱和氯化铵水溶液(1.5升)进行猝灭，随后用乙酸乙酯(3
×
300毫升)进行萃取。有机相合并，用无水硫酸钠干燥，过滤，所得滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品用硅胶柱层析进行分离，流动相用0
→
30％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到类白色油状产物2
‑
1(140克,产率98％)。ms(esi,m/z):237[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ5.62(s,1h),4.24(br,1h),4.16(q,j＝7.1hz,2h),2.62(br,1h),2.27(br,1h),1.90
‑
1.73(m,11h),1.29(t,j＝7.1hz,3h)。
[0182]
步骤2.
[0183][0184]
在氮气保护下，往搅拌的化合物2
‑
1(140克,592毫摩尔,1.0当量)的乙醇(1升)溶
液中加入氢氧化钯/碳(28克,199毫摩尔,0.3当量,20％重量比)，所得混合物在氢气氛围(1个大气压)下反应5小时。反应结束后，反应液用硅藻土进行过滤并用乙酸乙酯(2
×
100毫升)洗涤滤饼。减压旋蒸除去溶剂，所得粗产物用硅胶柱层析纯化，流动相用0
→
50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到淡黄色油状产物2
‑
2(顺反异构体混合物，140克,产率99％)。ms(esi,m/z):239[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.17
‑
4.11(m,2h),2.46
‑
2.40(m,2h),2.21
‑
2.11(m,2h),2.00
‑
1.95(m,2h),1.85
‑
1.70(m,8h),1.56
‑
1.53(m,1h),1.44
‑
1.41(m,1h),1.29
‑
1.25(m,3h)。
[0185]
步骤3.
[0186][0187]
在氮气保护下，在室温下往搅拌的6
‑
氟喹啉
‑4‑
醇(34.2克,210毫摩尔,1.0当量)和三苯基膦(82.5克,315毫摩尔,1.5当量)的甲苯(1升)溶液中，加入化合物2
‑
2(50克,210毫摩尔,1.0当量)，随后在回流下滴加偶氮二甲酸二异丙酯(63.6克,315毫摩尔,1.5当量)，2小时滴加完成，所得混合物在回流下反应16小时。反应结束后，反应液冷却至室温并通过减压旋蒸除去溶剂，加入水(1升)并用二氯甲烷(3
×
300毫升)进行萃取。合并有机相，用饱和食盐水(700毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析纯化，流动相用5
→
20％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到棕色油状产物2
‑
3(顺反异构体混合物，24克,产率29％)。ms(esi,m/z):384[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.63
‑
8.61(m,1h),8.00
‑
7.95(m,1h),7.84
‑
7.79(m,1h),7.58
‑
7.52(m,1h),7.28
‑
7.23(m,1h),4.18
‑
4.11(m,2h),2.54
‑
2.51(m,2h),2.30
‑
2.08(m,10h),1.93
‑
1.77(m,4h),1.28
‑
1.24(m,3h)。
[0188]
步骤4.
[0189][0190]
在氮气保护下，在冰盐浴冷却下往搅拌的二异丙胺(13毫升,91.5毫摩尔,1.3当量)的四氢呋喃(0.4升)溶液中，滴加正丁基锂(2.5摩尔/升的正己烷溶液,36.6毫升,91.5毫摩尔,1.3当量)，30分钟滴完。降温至
‑
78℃，滴加化合物2
‑
3(27克,70.4毫摩尔,1当量)的四氢呋喃(100毫升)溶液，30分钟滴完，随后滴加碘甲烷(12克,85毫摩尔,1.2当量)。所得混合物继续在
‑
78℃下反应3小时。自然恢复温度至0℃并用饱和氯化铵水溶液(400毫升)进行猝灭，随后用乙酸乙酯(3
×
200毫升)进行萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
50％乙酸乙
酯/石油醚梯度洗脱，得到淡黄色油状产物2
‑
4(4个立体异构体混合物，27克,产率97％)。ms(esi,m/z):398[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.65
‑
8.62(m,1h),8.01
‑
7.96(m,1h),7.86
‑
7.81(m,1h),7.60
‑
7.53(m,1h),7.30
‑
7.25(m,1h),4.20
‑
4.12(m,2h),2.87
‑
2.77(m,1h),2.42
‑
1.57(m,14h),1.30
‑
1.24(m,3h),1.19
‑
1.16(m,3h)。
[0191]
步骤5.
[0192][0193]
在常温下，往搅拌的化合物2
‑
4(30克,76毫摩尔,1.0当量)的甲醇/水(体积比3:1，400毫升)溶液中加入氢氧化锂(12.7克,528毫摩尔,7当量)。所得混合物在65℃下搅拌16小时。反应结束后，反应液通过减压旋蒸除去溶剂，随后在0℃用稀盐酸(6摩尔/升,104毫升)进行酸化。所得固体通过过滤进行分离，滤饼用水(2
×
100毫升)进行洗涤，干燥得第一批产品。合并滤液，用3:1三氯甲烷/异丙醇(3x200毫升)进行萃取。合并有机相，用无水硫酸钠进行干燥和过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂得到第二批产品。合并第一批和第二批产品得黄色固体产物2
‑
5(4个立体异构体混合物，25克,产率90％)。ms(esi,m/z):370[m+1]
+
.
[0194]
步骤6.
[0195]
(s和r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5s，7s)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺的顺反异构体2
‑
6和(s和r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2
‑6’
[0196][0197]
在室温下，将化合物2
‑
5(18克,48.7毫摩尔,1.0当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(28克,73毫摩尔,1.5当量)溶于n,n
‑
二甲基甲酰胺(150毫升)中。所得混合物在65℃下搅拌30分钟后分别加入二异丙基乙基胺(19克,146毫摩尔,3.0当量)和对氯苯胺(8.7克,68毫摩尔,1.4当量)，随后继续在65℃下继续反应16小时。反应结束后，在室温下用水(300毫升)猝灭反应，并用乙酸乙酯(3x200毫升)进行萃取。合并有机相，用水(200毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用50
→
100％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，所得馏分通过减压旋蒸除去溶剂，分别得到2
‑
6(白色固体，外消旋混合物，9克，产率39％)，和2
‑6’
(白色固体，外消旋混合物，6克，产率26％)。
[0198]2‑
6:ms(esi,m/z)479[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.63(d,j＝5.4hz,1h),7.98
(dd,j＝9.3,5.2hz,1h),7.84(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),7.62
‑
7.54(m,3h),7.34
‑
7.30(m,3h),2.90
‑
2.83(m,1h),2.42
‑
2.28(m,8h),2.12
‑
2.02(m,3h),1.93
‑
1.89(m,1h),1.68
‑
1.61(m,2h),1.24(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
115.61。
[0199]2‑6’
:ms(esi,m/z)479[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.64(d,j＝5.3hz,1h),7.99(dd,j＝9.3,5.2hz,1h),7.87(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),7.61
‑
7.55(m,3h),7.34
‑
7.31(m,3h),2.90
‑
2.82(m,1h),2.50
‑
1.77(m,14h),1.22(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
115.59。
[0200]
步骤7.
[0201]
(s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2a，(r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2b，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r,3s，5s，7s)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2c，和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r,3s，5s，7s)
‑5‑
((6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)氧基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺2d
[0202]
对在步骤6中得到的2
‑
6(45毫克)进行手性制备(高压液相)：手性柱chiralpak ad
‑
h,2x25cm(5μm)；流动相a正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b异丙醇；流速20毫升/分钟；用25％b洗脱15分钟；检测器uv223纳米；得到两个产品，较短保留时间(rt1＝5.4分钟)的产品为化合物2a(15毫克)，为类白色固体；较长保留时间(rt2＝10.7分钟)的产品为化合物2b(12毫克)，为类白色固体。
[0203]
2a:ms(esi,m/z)479[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.63(d,j＝5.3hz,1h),7.98(dd,j＝9.2,5.2hz,1h),7.84(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),7.61
‑
7.53(m,3h),7.33
‑
7.28(m,3h),2.90
‑
2.82(m,1h),2.40
‑
2.26(m,8h),2.11
‑
2.02(m,3h),1.92
‑
1.89(m,1h),1.66
‑
1.60(m,2h),1.23(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
115.60；[α]
25589nm
＝
–
16.60(c＝1.072g/100ml,dmf)。
[0204]
2b:ms(esi,m/z)479[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.63(d,j＝5.3hz,1h),7.98(dd,j＝9.2,5.2hz,1h),7.84(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),7.61
‑
7.53(m,3h),7.33
‑
7.28(m,3h),2.90
‑
2.82(m,1h),2.40
‑
2.26(m,8h),2.11
‑
2.02(m,3h),1.92
‑
1.89(m,1h),1.66
‑
1.60(m,2h),1.23(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
115.61；[α]
25589nm
＝14.96(c＝1.096g/100ml,dmf)。
[0205]2‑6’
(80毫克)的手性制备(高压液相)：手性柱chiralpak id,2x25cm(5μm)；流动相a正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b异丙醇；流速20毫升/分钟；用30％b洗脱12分钟；检测器uv223纳米；得到两个产物，较短保留时间(rt1＝5.8分钟)的产品为化合物2c(27毫克)，为类白色固体；较长保留时间(rt2＝8.8分钟)的产品为化合物2d(28毫克)，为类白色固体。
[0206]
2c:ms(esi,m/z)479[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.09(s,1h),8.69(d,j＝5.1hz,1h),8.02(dd,j＝9.2,5.4hz,1h),7.81(dd,j＝10.0,2.9hz,1h),7.68
‑
7.61(m,3h),7.37
‑
7.30(m,3h),2.84
‑
2.76(m,1h),2.39
‑
1.57(m,14h),1.10(d,j＝6.6hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
114.04。
[0207]
2d:ms(esi,m/z)479[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.64(d,j＝5.4hz,1h),7.99(dd,j＝9.3,5.2hz,1h),7.87(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),7.60
‑
7.54(m,3h),7.34
‑
7.29(m,
3h),2.91
‑
2.81(m,1h),2.50
‑
2.12(m,9h),2.00
‑
1.76(m,5h),1.22(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
115.59。
[0208]
通过对2a富马酸盐单晶x
‑
射线衍射(仪器型号xtalab pro 007hf(mo)，制造商rigaku)分析确定化合物2a的立体构型。解析结果数据以及晶体结构见表2和图2。
[0209]
表2：化合物2a富马酸盐的单晶解析数据
[0210][0211][0212]
实施例3(合成方法iii)
[0213]
(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3a，(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3b，(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3c和(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或
2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3d
[0214][0215]
步骤1.
[0216][0217]
在氮气保护和冰浴条件下，往搅拌的磷酰基乙酸三乙酯(1.52克,6.8毫摩尔,1.2当量)的无水四氢呋喃(10毫升)溶液中，分五批加入氢化钠(272毫克,6.8毫摩尔,1.2当量,60％的矿物油混合物)。随后在氮气保护下，用导管缓慢将其转移至在冰浴条件下搅拌的金刚烷
‑
2,6
‑
二酮(930毫克,5.7毫摩尔,1当量)的无水四氢呋喃(15毫升)溶液中，转移结束后，继续在此温度下反应3小时。随后加入50毫升饱和的氯化铵水溶液将反应猝灭，并用二氯甲烷(3
×
50毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品用硅胶柱层析进行纯化，用0
→
20％乙酸乙酯/石油醚流动相梯度洗脱，得到类白色固体产物3
‑
1(660毫克,产率47％)。ms(esi,m/z):235[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ5.77(s,1h),4.13
‑
4.06(m,3h),2.61
‑
2.47(m,3h),2.14
‑
1.98(m,8h),1.22(t,j＝7.1hz,3h)。
[0218]
步骤2.
[0219][0220]
在氮气保护和干冰丙酮浴冷却下，往4
‑
溴
‑6‑
氟喹啉(764毫克,3.4毫摩尔,1.2当量)的无水四氢呋喃(10毫升)溶液中滴加正丁基锂的正己烷溶液(1.35毫升,3.4毫摩尔,1.2当量)。随后在
–
78℃滴加化合物3
‑
1(660毫克,2.8毫摩尔,1.0当量)的无水四氢呋喃(10毫升)溶液。滴加完成后，继续在
–
78℃下反应4小时。反应结束后，用饱和氯化铵水溶液(50毫升)进行猝灭，随后用二氯甲烷(3
×
50毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水进行洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品用硅胶柱层析进行纯化，用0
→
33％的乙酸乙酯/石油醚流动相梯度洗脱，得到浅黄色固体产物3
‑
2(415毫克,产率39％)。ms(esi,m/z):382[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ8.87
‑
8.85(m,1h),8.47
‑
8.42(m,1h),8.13
‑
8.08(m,1h),7.69
‑
7.60(m,2h),5.80
‑
5.76(m,1h),5.60
‑
5.55(m,1h),4.11
‑
3.90(m,3h),2.81
‑
2.76(m,4h),2.50
‑
2.36(m,1h),1.82
‑
1.61(m,6h),1.23
‑
1.16(m,3h)。
[0221]
步骤3.
[0222][0223]
往100毫升圆底烧瓶中加入化合物3
‑
2(565毫克,1.5毫摩尔,1.0当量)和吡啶(3毫升)，随后置于冰盐浴中，在搅拌下，滴加二氯亚砜(0.6毫升,7.7毫摩尔,5.2当量)。滴加完成后，在
–
10
→
0℃下继续搅拌2小时。反应结束后，在0℃下滴加30毫升水猝灭反应，用二氯甲烷(3
×
20毫升)进行萃取。合并有机相，用饱和食盐水进行洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，用0
→
50％的乙酸乙酯/石油醚流动相梯度洗脱，得到淡黄色固体产物3
‑
3(330毫克,产率56％)。ms(esi,m/z):400[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.92
‑
8.89(m,1h),8.32
‑
8.20(m,2h),7.63
‑
7.49(m,2h),5.67
‑
5.59(m,1h),4.23
‑
4.11(m,3h),3.54(br,1h),3.07
‑
2.99(m,3h),2.66
‑
2.58(m,1h),2.14
‑
1.73(m,6h),1.34
‑
1.28(m,3h)。
[0224]
步骤4.
[0225][0226]
在氮气保护下，在常温下，往100毫升的圆底烧瓶里加入化合物3
‑
3(300毫克,0.8毫摩尔,1.0当量)的乙醇(20毫升)溶液和钯/碳(60毫克,0.6毫摩尔,0.8当量)，通过水泵抽真空换氢气使反应体系转换成氢气氛围，随后在氢气氛围下反应2小时。反应结束后，反应液过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，用0
→
50％的乙酸乙酯/石油醚流动相梯度洗脱，得到黄色固体产物3
‑
4(265毫克,产率97％)。ms(esi,m/z):366[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ8.86
‑
8.85(m,1h),8.14
‑
8.09(m,1h),7.77
‑
7.64(m,3h),5.66
‑
5.63(m,1h),4.18
‑
3.87(m,4h),2.66
‑
2.40(m,5h),2.17
‑
2.12(m,2h),2.00
‑
1.91(m,2h),1.74
‑
1.64(m,2h),1.24
‑
1.17(m,3h)。
[0227]
步骤5.
[0228][0229]
在氮气保护和室温下，往100毫升的圆底烧瓶中，加入化合物3
‑
4(410毫克,0.15毫摩尔,1.0当量)的乙醇/二氯甲烷(15毫升，2/1)溶液和二氧化铂(40毫克,0.18毫摩尔,1.2当量)。通过水泵抽真空换氢气使反应体系转换成氢气氛围，随后在氢气氛围下反应2小时。反应结束后，将反应液过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，用0
→
20％的乙酸乙酯/石油醚流动相梯度洗脱，得到黄色固体产物3
‑
5(顺反异构体混合物，340毫克,产率82％)。ms(esi,m/z):368[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ8.84
‑
8.82(m,1h),8.12
‑
8.07(m,1h),7.68
‑
7.62(m,3h),4.10
‑
4.00(m,2h),3.67(br,1h),2.51
‑
2.48(m,1h),2.31
‑
1.94(m,9h),1.85(br,1h),1.73
‑
1.64(m,4h),1.21
‑
1.16(m,3h)。
[0230]
步骤6.
[0231]
[0232]
在氮气保护下，在
‑
78℃(干冰丙酮浴)下，往化合物3
‑
5(320毫克,0.87毫摩尔,1.0当量)的四氢呋喃(5毫升)溶液中滴加二异丙基氨基锂(6毫升,1.5毫摩尔,1.7当量)。在
–
78℃下继续反应30分钟后滴加碘甲烷(173毫克,1.3毫摩尔,1.4当量)，10分钟滴完，随后继续在
–
78℃下搅拌1小时。反应结束后，用30毫升饱和氯化铵水溶液猝灭，随后恢复常温搅拌30分钟，并用二氯甲烷(3
×
20毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品反相快速色谱柱(c18柱)纯化，在10分钟内用30
→
85％的乙腈/水流动相梯度洗脱；检测器,uv254纳米，得到类白色固体产物3
‑
6(4个立体异构体的混合物，220毫克，产率66％)。ms(esi,m/z):382[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ8.84
‑
8.81(m,1h),8.12
‑
8.07(m,1h),7.68
‑
7.63(m,3h),4.16
‑
4.00(m,2h),3.67(br,1h),2.84
‑
2.74(m,1h),2.31
‑
1.57(m,13h),1.23
‑
1.04(m,6h)。
[0233]
步骤7.
[0234][0235]
在常温下，往25毫升的圆底烧瓶中，加入化合物3
‑
6(200毫克,0.5毫摩尔,1.0当量)、氢氧化锂(100毫克,4.2毫摩尔,8.0当量)和甲醇/四氢呋喃/水(1:1:1，2.1毫升)，所得混合物在50℃下反应16小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂，并用4.2毫升稀盐酸猝灭(1摩尔/升)，所得水溶液用氯仿/异丙醇(3:1；3
×
20毫升)进行萃取。合并有机相，用饱和食盐水进行洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。得到粗产品3
‑
7(4个立体异构体的混合物，175毫克)，所得粗产品不经进一步分离直接用于下一步反应。ms(esi,m/z):354[m+1]
+
。
[0236]
步骤8.
[0237][0238]
在氮气保护下，往25毫升的圆底烧瓶中，加入化合物3
‑
7(175毫克,0.5毫摩尔,1.0当量)，2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(263毫克,0.7毫摩尔,1.4当量)和n,n
‑
二甲基甲酰胺(2毫升)，所得混合物在常温下搅拌15分钟后，先后加入对氯苯胺(82毫克,0.6毫摩尔,1.3当量)和二异丙基乙基胺(0.24毫升,1.7毫摩尔,2.8当量)，随后继续在常温下反应16小时。反应液通过减压旋蒸进行浓缩，所得粗产品通过反相快速色谱柱(c18柱)进行纯化，在30分钟内用30
→
95％的乙腈/水流动相进行洗脱；检测器,uv254纳米；得到顺反异构体3
‑
8(外消旋体混合物，极性较大，75毫克,产率33％)和顺反异构体3
‑8’
(外消旋体混合物，极性较小，60毫克，产率26％)。ms(esi,m/z):463[m+1]
+
。
[0239]
步骤9.
[0240]
(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3a，(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3b，(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3c，和(r或s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r、2s或2r、3s、5r、6s或6r、7s)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺3d
[0241]
通过步骤8所得到的3
‑
8(75毫克)的手性制备用高压液相手性柱(r,r)
‑
whelk
‑
o1
‑
kromasil(02),5x25cm(5μm)；流动相a：正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b：异丙醇；流速:20毫升/分钟；洗脱：50％b，15分钟；检测：uv254纳米；rt1:6.3分钟；rt2:8.7分钟；每次进样体积:0.8毫升；循环次数:4，得到两个产品。较短保留时间(6.3分钟)的产品为化合物3a(18毫克)，呈白色固体；较长保留时间(8.7分钟)的产品为化合物3b(15毫克)，呈白色固体。
[0242]
3a:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h
‑
nmr(400mhz,cd3od)δ8.76(d,j＝4.7hz,1h),8.09(dd,j＝9.2,5.7hz,1h),7.74(d,j＝4.8hz,1h),7.68(dd,j＝10.8,2.8hz,1h),7.62
‑
7.55(m,3h),7.32
‑
7.28(m,2h),3.74(s,1h),2.99
‑
2.91(m,1h),2.45
‑
2.40(m,3h),2.23
‑
2.02(m,7h),1.85
‑
1.75(m,3h),1.24(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
114.05。
[0243]
3b:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h
‑
nmr(400mhz,cd3od)δ8.76(d,j＝4.7hz,1h),8.09(dd,j＝9.2,5.7hz,1h),7.74(d,j＝4.8hz,1h),7.68(dd,j＝10.8,2.8hz,1h),7.62
‑
7.55(m,3h),7.32
‑
7.28(m,2h),3.74(s,1h),2.99
‑
2.91(m,1h),2.45
‑
2.40(m,3h),2.23
‑
2.02(m,7h),1.85
‑
1.75(m,3h),1.24(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
114.04。
[0244]
通过步骤8所得到的3
‑8’
(60毫克)的手性制备用高压液相手性柱chiralpak ie,2x25cm(5μm)；流动相a：正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b：异丙醇；流速:20毫升/分钟；梯度:50％b，15分钟；检测：uv254纳米；rt1:6.3分钟；rt2:8.9分钟；每次进样体积:0.5毫升；循环次数:3，得到两个产品。较短保留时间(6.3分钟)的产品为化合物3c(13毫克)，呈白色固体；较长保留时间(8.9分钟)的产品为化合物3d(13毫克)，呈白色固体。
[0245]
3c:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h
‑
nmr(400mhz,cd3od)δ8.79(d,j＝4.7hz,1h),8.09(dd,j＝9.2,5.6hz,1h),7.77(d,j＝4.8hz,1h),7.68
‑
7.57(m,4h),7.36
‑
7.32(m,2h),3.73(s,1h),2.99
‑
2.91(m,1h),2.45
‑
2.39(m,3h),2.32
‑
2.23(m,2h),2.10
‑
2.02(m,4h),1.92
‑
1.78(m,4h),1.21(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
114.04。
[0246]
3d:ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h
‑
nmr(400mhz,cd3od)δ8.79(d,j＝4.7hz,1h),8.09(dd,j＝9.2,5.6hz,1h),7.77(d,j＝4.8hz,1h),7.68
‑
7.57(m,4h),7.36
‑
7.32(m,2h),3.73(s,1h),2.99
‑
2.91(m,1h),2.45
‑
2.39(m,3h),2.32
‑
2.23(m,2h),2.10
‑
2.02(m,4h),1.92
‑
1.78(m,4h),1.21(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
114.03。
[0247]
实施例4(合成方法iv)
[0248]
顺或反
‑
(1r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)氨基甲酸酯4a顺或反
‑
(1r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)氨基甲酸酯4b
[0249][0250]
步骤1.
[0251][0252]
把化合物1
‑
1(200毫克,0.68毫摩尔,1.0当量)和乙醇(10毫升)在室温下合并然后在冰浴中冷却。在0℃下，加入硼氢化钠(38毫克,1.0毫摩尔,1.5当量)，随后恢复至常温反应1小时。反应结束后，在常温下用饱和氯化铵水溶液(50毫升)猝灭，用二氯甲烷(3
×
30毫升)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠进行干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，用0
→
30％乙酸乙酯/石油醚流动相梯度洗脱，得到白色固体产物4
‑
1(顺反异构体混合物，200毫克,产率99％)。ms(esi,m/z):298[m+1]
+
。
[0253]
步骤2.
[0254]
顺或反
‑
(1r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)氨基甲酸酯4a顺或反
‑
(1r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)氨基甲酸酯4b
[0255]
在常温下，往10毫升封管中加入化合物4
‑
1(110毫克，0.37毫摩尔，1.0当量),甲苯(3毫升)和4
‑
氯苯基异氰酸酯(68毫克,0.44毫摩尔,1.2当量)，随后在常温下反应1小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品用反相快速色谱柱(c18柱)纯化，在20分钟内用5
→
95％的乙腈/水流动相梯度洗脱，检测器,紫外254纳米。所得到白色固体(85毫克，51％)进一步用手性制备用高压液相进行顺反异构体的分离纯化：手性柱xbridge phenyl obd column,19x150mm,5μm；流动相a水(0.05％氨水),流动相b乙腈；流速25毫升/分钟；梯度69
→
71％b洗脱15分钟；检测器,uv254纳米；在rt1:8.60分钟和rt2:9.15分钟处得到两个产品。较短保留时间(8.60分钟)的产品为化合物4a(34毫克)，呈类白色固体。较长保留时间(9.15分钟)的产品为化合物4b(25毫克)，呈类白色固体。
[0256]
4a:ms(esi,m/z)451.15[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.23(d,j＝8.8hz,1h),8.08(dd,j＝8.8,5.4hz,1h),7.67(d,j＝8.8hz,1h),7.59
‑
7.45(m,4h),7.33
‑
7.25(m,2h),5.05
‑
5.00(m,1h),2.35
‑
2.21(m,8h),2.21
‑
2.13(m,3h),1.77
‑
1.69(m,2h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
116.96。
[0257]
4b:ms(esi,m/z)451.15[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.23(d,j＝8.8hz,1h),8.09(dd,j＝8.8,5.4hz,1h),7.68(d,j＝8.7hz,1h),7.58
‑
7.44(m,4h),7.31
‑
7.23(m,2h),4.99
‑
4.94(m,1h),2.55
‑
2.45(m,2h),2.37
‑
2.30(m,2h),2.18
‑
2.14(m,3h),2.06
‑
1.90(m,6h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.01。
[0258]
实施例5(合成方法v)
[0259]
顺或反
‑
(1r，3r，5r，7r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
甲酰胺5a
顺或反
‑
(1r，3r，5r，7r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
甲酰胺5b
[0260][0261]
步骤1
[0262][0263]
在氮气保护和
–
78℃下，往4
‑
溴
‑6‑
氟喹啉(4.6克,20.4毫摩尔,1当量)的四氢呋喃(70毫升)溶液中滴加正丁基锂的正己烷溶液(9.7毫升,24.4毫摩尔,1.2当量)，滴加完成后在
–
78℃下搅拌30分钟，随后滴加金刚烷
‑
2,6
‑
二酮(4.0克,24.4毫摩尔,1.2当量)的四氢呋喃(30毫升)溶液，滴加完成后恢复室温搅拌2小时。反应结束后，在室温下滴加饱和氯化铵(30毫升)猝灭反应，用乙酸乙酯(3
×
100毫升)进行萃取。合并有机相，用饱和食盐水(200毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥，过滤，滤液通过减压蒸馏除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用50
→
100％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到浅黄色固体产物5
‑
1(1.8克,产率28％)。ms(esi,m/z):312[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ8.87(d,j＝4.6hz,1h),8.46(dd,j＝12.2,2.9hz,1h),8.12(dd,j＝9.3,6.2hz,1h),7.74(d,j＝4.7hz,1h),7.65(ddd,j＝9.2,7.9,2.9hz,1h),5.95(s,1h),2.95
‑
2.75(m,4h),2.45
‑
2.25(m,2h),1.99
‑
1.88(m,4h),1.86
‑
1.78(m,2h)。
[0264]
步骤2
[0265][0266]
在氮气保护和0℃下，往化合物5
‑
1(1.8克,5.8毫摩尔,1当量)的二氯甲烷(20毫
升)溶液中，滴加三乙胺(2.9克,28.9毫摩尔,5当量)，随后在0℃下滴加甲基磺酰氯(3.3克,28.9毫摩尔,5当量)，滴加完成后，恢复常温搅拌1小时。反应结束后，在0℃下用饱和氯化铵进行猝灭，用二氯甲烷(3
×
50毫升)进行萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
50毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得到的粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
10％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱，得到浅黄色油状产物5
‑
2(1.0克,产率52％)。ms(esi,m/z):330[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.93(d,j＝4.8hz,1h),8.32
‑
8.20(m,2h),7.64(d,j＝4.8hz,1h),7.58
‑
7.50(m,1h),3.64
‑
3.58(m,1h),3.24
‑
3.12(m,2h),3.10
‑
3.05(m,1h),2.83
‑
2.73(m,1h),2.73
‑
2.68(m,1h),2.49
‑
2.44(m,1h),2.32
‑
2.16(m,2h),2.15
‑
2.07(m,1h),1.96
‑
1.88(m,1h),1.57
‑
1.49(m 1h)。
[0267]
步骤3
[0268][0269]
在氮气保护下，往化合物5
‑
2(1.1克,3.3毫摩尔,1当量)的乙醇(15毫升)溶液中，加入钯/碳(400毫克,3.8毫摩尔,1.13当量，10％含量)，随后在室温下滴加三乙胺(675毫克,6.7毫摩尔,2.0当量)，所得混合物在1个大气压的氢气氛围下反应2小时。反应结束后，用硅藻土过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂，得到浅黄色固体产物5
‑
3(600毫克,产率61％)。ms(esi,m/z):296[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ8.87(d,j＝4.6hz,1h),8.13(dd,j＝9.2,5.9hz,1h),7.82(dd,j＝11.1,2.8hz,1h),7.76
‑
7.65(m,2h),3.99
‑
3.96(m,1h),2.60
‑
2.54(m,2h),2.47
‑
2.15(m,6h),2.14
‑
2.08(m,2h),1.90
‑
1.82(m,2h)。
[0270]
步骤4
[0271][0272]
在氩气保护和在0℃下，往(甲氧基甲基)三苯基氯化磷(1.7克,5.1毫摩尔,5.0当量)的四氢呋喃(7毫升)溶液中，加入叔丁醇钾(570毫克,5.1毫摩尔,5.0当量)，在0℃下搅拌30分钟后滴加化合物5
‑
3(300毫克,1.0毫摩尔,1当量)的四氢呋喃(3毫升)溶液，随后恢复到常温搅拌2小时。反应结束后，在室温下用饱和氯化铵(10毫升)进行猝灭，用乙酸乙酯(3
×
50毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
60毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
70％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物5
‑
4(250毫克,产率76％)。ms(esi,m/
z):324[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.85(s,1h),8.16(dd,j＝9.2,5.8hz,1h),7.67
‑
7.41(m,3h),5.84(d,j＝6.7hz,1h),3.73
‑
3.66(m,1h),3.58(d,j＝3.6hz,3h),2.60
‑
2.42(m,3h),2.31
‑
2.01(m,7h),1.79
‑
1.67(m,2h)。
[0273]
步骤5
[0274][0275]
在室温下，往化合物5
‑
4(230毫克,0.7毫摩尔,1当量)的四氢呋喃(8毫升)溶液中加入浓度为4摩尔/升的稀盐酸(8毫升)，随后在室温下搅拌1小时。反应结束后，反应液用饱和碳酸氢钠调节ph至8，用乙酸乙酯(3
×
50毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
60毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
60％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅黄色油状产物5
‑
5(顺反异构体混合物，210毫克,产率95％)。ms(esi,m/z):310[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ9.80(s,1h),8.85(d,j＝4.6hz,1h),8.15(dd,j＝9.1,5.8hz,1h),7.61
‑
7.42(m,3h),3.62
‑
3.58(m,1h),2.72
‑
2.25(m,6h),2.22
‑
1.91(m,5h),1.80
‑
1.68(m,2h)。
[0276]
步骤6
[0277][0278]
在0℃下，往化合物5
‑
5(200毫克,0.6毫摩尔,1.0当量)和2
‑
甲基
‑2‑
丁烯(453毫克,6.5毫摩尔,10当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中，加入磷酸二氢钠(155毫克,1.3毫摩尔,2.0当量)和次氯酸钠(175毫克,1.9毫摩尔,3.0当量)的水溶液(10毫升)，随后在0℃下搅拌2小时。反应结束后，用浓度为1摩尔/升的稀盐酸调节ph至6，用乙酸乙酯(3
×
80毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(100毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂得到粗产品5
‑
6(顺反异构体混合物，200毫克)。粗产品不经进一步纯化，直接用去下一步反应。ms(esi,m/z):326[m+1]
+
。
[0279]
步骤7.
[0280]
顺或反
‑
(1r，3r，5r，7r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
甲酰胺5a顺或反
‑
(1r，3r，5r，7r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑6‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
甲酰胺5b
[0281]
在常温下，往搅拌的化合物5
‑
6(60毫克,0.2毫摩尔,1.0当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三
氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(105毫克,0.3毫摩尔,1.5当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(2毫升)溶液中，加入二异丙基乙基胺(72毫克,0.6毫摩尔,3.0当量)，继续搅拌15分钟后，加入对氯苯胺(35毫克,0.3毫摩尔,1.5当量)，所得混合物继续在室温下搅拌16小时。反应结束后，加入40毫升水猝灭反应，用乙酸乙酯(3
×
40毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(40毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过反相快速色谱柱(c18柱)纯化，在40分钟内用30
→
95％的乙腈/水流动相梯度洗脱；检测器,uv254纳米。所得到的白色固体产物(顺反异构体混合物，68毫克,产率85％)用手性柱进行顺反异构体的分离：高压液相手性制备柱chiralpak ie,2x25cm,5μm；流动相a正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b乙醇；流速20毫升/分钟；用35％b洗脱13分钟；检测，uv208纳米；rt1:7.3分钟；rt2:10.5分钟；得到2个产品。较短保留时间(7.3分钟)的产品为化合物5a(顺式或反式异构体，20毫克)；较长保留时间(10.5分钟)的产品为化合物5b(顺式或反式异构体，20毫克)。
[0282]
5a:ms(esi,m/z):435[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.80(d,j＝4.7hz,1h),8.10(dd,j＝9.2,5.6hz,1h),7.77(d,j＝4.8hz,1h),7.69(dd,j＝10.8,2.8hz,1h),7.64
‑
7.55(m,3h),7.35
‑
7.27(m,2h),3.77
‑
3.73(m,1h),2.84
‑
2.79(m,1h),2.57
‑
2.29(m,6h),2.26
‑
2.07(m,4h),2.02
‑
1.94(m,1h),1.88
‑
1.80(m,1h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
113.96。
[0283]
5b:ms(esi,m/z):435[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.80(d,j＝4.7hz,1h),8.10(dd,j＝9.2,5.7hz,1h),7.80
‑
7.64(m,2h),7.64
‑
7.53(m,3h),7.31(d,j＝8.6hz,2h),3.77
‑
3.73(m,1h),2.83
‑
2.79(m,1h),2.57
‑
2.29(m,6h),2.26
‑
2.07(m,4h),2.02
‑
1.93(m,1h),1.87
‑
1.79(m,1h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
113.95。
[0284]
实施例6(合成方法vi)
[0285]
顺或反
‑
(1s，3r，5s，7s)
‑4‑
(2
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑2‑
氧乙基)金刚烷
‑1‑
苯甲酸酯6a和顺或反
‑
(1s，3r，5s，7s)
‑4‑
(2
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑2‑
氧乙基)金刚烷
‑1‑
苯甲酸酯6b
[0286][0287]
步骤1
[0288][0289]
往化合物2
‑
2(300毫克,1.3毫摩尔,1.0当量)的甲醇(1.5毫升)溶液中，加入氢氧化锂(90毫克,3.8毫摩尔,3.0当量)的水(1.5毫升)溶液，随后在常温下搅拌2小时。反应结束后在常温下用水猝灭反应，所得混合物用2摩尔/升的稀盐酸调节ph到2。过滤，滤饼用水
(3
×
25毫升)洗涤。固体通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用10
→
35％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到无色的油状产物6
‑
1(顺反异构体混合物，238毫克,产率90％)。1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ12.01(s,1h),4.36
‑
4.31(m,1h),2.35
‑
2.21(m,2h),2.07
‑
1.78(m,4h),1.75
‑
1.50(m,8h),1.42
‑
1.21(m,2h)。
[0290]
步骤2
[0291][0292]
在氮气保护和在常温下，往搅拌的化合物6
‑
1(200毫克,1.0毫摩尔,1.0当量)，对氯苯胺(182毫克,1.4毫摩尔,1.5当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(542毫克,1.4毫摩尔,1.5当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(10毫升)。滴加二异丙基乙基胺(430毫克,3.3毫摩尔,3.5当量)，随后在80℃下反应2小时。反应结束后，将反应混合物导入冰水中进行猝灭，然后用乙酸乙酯(3
×
20毫升)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠进行干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用10
→
35％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到黄色油状产物6
‑
2(顺反异构体混合物，250毫克,产率82％)。ms(esi,m/z):320[m+1]
+
。
[0293]
步骤3.
[0294]
顺或反
‑
(1s，3r，5s，7s)
‑4‑
(2
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑2‑
氧乙基)金刚烷
‑1‑
苯甲酸酯6a和顺或反
‑
(1s，3r，5s，7s)
‑4‑
(2
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑2‑
氧乙基)金刚烷
‑1‑
苯甲酸酯6b
[0295]
在氮气保护和在室温下，将化合物6
‑
2(110毫克,0.毫摩尔,1.0当量),三乙胺(104毫克,1.0毫摩尔,3.0当量)和4
‑
二甲基氨基吡啶(0.8毫克,0.01毫摩尔,0.2当量)的甲苯(1毫升)溶液搅拌1分钟后，加入苯甲酰氯(73毫克,0.5毫摩尔,1.5当量)，随后在110℃下搅拌4小时。反应结束后，在常温下加入水猝灭反应，用乙酸乙酯(3
×
30毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用10
→
35％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱。得到一白色固体产物(顺反异构体混合物，53毫克,产率32％)。然后通过制备薄层色谱硅胶板将顺反异构体进行分离：流动相用0
→
20％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到两个化合物；极性小的白色固体产物为6a(6.8毫克)；极性大的白色固体产物为6b(3.3毫克)。
[0296]
6a:ms(esi,m/z),424[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.04
‑
7.97(m,2h),7.61
‑
7.41(m,5h),7.34
‑
7.27(m,2h),2.72
‑
2.65(m,2h),2.60
‑
2.55(m,2h),2.42
‑
2.32(m,1h),2.30
‑
2.25(m,1h),2.20
‑
2.12(m,4h),2.00
‑
1.92(m,2h),1.90
‑
1.77(m,4h)。
[0297]
6b:ms(esi,m/z),424[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.04
‑
7.97(m,2h),7.59
‑
7.39(m,5h),7.35
‑
7.28(m,2h),2.57
‑
2.50(m,2h),2.48
‑
2.29(m,7h),2.27
‑
2.20(m,1h),2.17
‑
2.10(m,2h),1.92
‑
1.82(m,2h),1.67
‑
1.57(m,2h)。
[0298]
实施例7(合成方法vii)
[0299]
(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7a，(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨
基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7b，(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7c和(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7d
[0300][0301]
步骤1
[0302][0303]
往4
‑
氧代金刚烷
‑1‑
甲酸(30克，155毫摩尔，1当量)的二氯甲烷(150毫升)溶液中，滴加草酰氯(29.2克，232毫摩尔，1.5当量)和n,n
‑
二甲基甲酰胺(1毫升，20毫摩尔，0.13当量)，所得到的混合物在常温和氮气保护下搅拌2小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂，所得到的残余物用二氯甲烷(10毫升)进行溶解。随后在0℃下滴加叔丁醇钾(186毫升,1摩尔/升的四氢呋喃溶液,18毫摩尔,1.2当量)，滴加完成后，恢复至常温搅拌2小时。反应结束后，在0℃下用水(500毫升)猝灭反应，并用二氯甲烷(3
×
400毫升)进行萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
8％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到浅黄色固体产物7
‑
1(35克,产率91％)。1h
‑
nmr(400mhz,cdcl3)δ2.62
‑
2.55(m,2h),2.23
‑
1.95(m,11h),1.44(s,9h)。
[0304]
步骤2
[0305][0306]
在0℃下和在氮气保护下，往磷酰基乙酸三乙酯(cas号：867
‑
13
‑
0，40.6克,181毫摩尔,1.3当量)的四氢呋喃(250毫升)溶液中，分批加入氢化钠(6.7克,279毫摩尔,60％的矿物油混合物,2当量)，然后恢复常温搅拌30分钟。随后在0℃下，加入化合物7
‑
1(34.9克,139毫摩尔,1当量)的四氢呋喃(150毫升)溶液，恢复常温搅拌2小时。反应结束后，在0℃下用500毫升饱和氯化铵水溶液猝灭反应，并用乙酸乙酯(3
×
200毫升)进行萃取。合并有机相，用无水硫酸钠进行干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
30％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到黄色油状产物7
‑
2(23.7克,产率53％)。1h
‑
nmr(400mhz,cdcl3)δ5.63(s,1h),4.17(q,j＝7.1hz,2h),2.53(s,1h),2.19
‑
1.77(m,12h),1.44(s,9h),1.30(t,j＝7.1hz,3h)。
[0307]
步骤3
[0308][0309]
在常温下和氮气保护下，往搅拌的化合物7
‑
2(23.7克,74.0毫摩尔,1.0当量)的乙醇(200毫升)溶液中，加入钯/碳(5.0克,47.0毫摩尔,0.6当量)，随后把反应体系置换成氢气氛围，并在常温和1个大气压的氢气氛围下反应1小时。反应结束后，将反应液过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品7
‑
3(顺反异构体混合物，24克)不经进一步分离，直接用于下一步反应。1h
‑
nmr(400mhz,cdcl3)δ4.2
‑
4.09(m,2h),2.50
‑
2.41(m,2h),2.06
‑
1.91(m,4h),1.87
‑
1.75(m,8h),1.70
‑
1.60(m,2h),1.44(d,j＝0.9hz,9h),1.27(t,j＝7.1hz,3h)。
[0310]
步骤4
[0311][0312]
在干冰丙酮浴下(约
–
70℃)，往化合物7
‑
3(24.0克,74.5毫摩尔,1.0当量)的四氢呋喃(100毫升)溶液中，滴加二异丙基氨基锂(65毫升，1.5摩尔/升的四氢呋喃溶液，97毫摩尔，1.3当量)，并在
–
70℃下继续搅拌1小时。随后滴加碘甲烷(13.8克,97毫摩尔,1.3当量)的四氢呋喃(50毫升)溶液，继续在
–
70℃下搅拌1小时后，恢复常温搅拌1小时。反应结束后，将反应液倒入冷的饱和氯化铵水溶液(800毫升)进行猝灭，并用乙酸乙酯(3
×
600毫升)进
行萃取。合并有机相，用无水硫酸钠进行干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
80％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到黄色油状产物7
‑
4(4个立体异构体混合物，19克,2步反应产率76％)。1h
‑
nmr(300mhz,cdcl3)δ4.20
‑
4.08(m,2h),2.83
‑
2.65(m,1h),2.10
‑
1.60(m,14h),1.46
‑
1.42(m,9h),1.27(t,j＝7.1hz,3h),1.16
‑
1.10(m 3h)。
[0313]
步骤5
[0314][0315]
往搅拌的化合物7
‑
4(19.0克,56.5毫摩尔,1.0当量)的甲醇(90毫升)和水(30毫升)溶液中，加入氢氧化锂(6.8克,282毫摩尔,5当量)，所得混合物在70℃下反应8小时。反应结束后，混合物通过减压旋蒸除去溶剂。加入水(400毫升)，用1摩尔/升的稀盐酸调节混合物的ph到7，并用二氯甲烷(3
×
500毫升)进行萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产物7
‑
5(4个立体异构体混合物，19克)不经进一步分离，直接用于下一步反应。
[0316]
步骤6.
[0317][0318]
在常温和在氮气保护下，往化合物7
‑
5(4.0克,13毫摩尔,1当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(7.4克,20毫摩尔,1.5当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(50毫升)溶液中，加入二异丙基乙基胺(5.0克,39毫摩尔,3.0当量)。所得混合物在常温下搅拌15分钟后，加入对氯苯胺(2.5克,20毫摩尔,1.5当量)并在70℃下搅拌4小时。反应结束后，加入300毫升水进行稀释，并用乙酸乙酯(3
×
300毫升)萃取。合并有机相，用300毫升饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用10
→
20％乙酸乙酯/石油醚梯度进行洗脱，得到2个顺反异构体产：7
‑
6(极性小，外消旋混合物，2.3克，产率42％)，呈浅黄色固体；7
‑6’
(极性大，外消旋混合物，0.7克，产率13％)，呈浅黄色固体。
[0319]7‑
6:ms(esi,m/z):418[m+1]
+
；1h
‑
nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.04(s,1h),7.67
‑
7.60(m,2h),7.37
‑
7.30(m,2h),2.83
‑
2.70(m,1h),2.05
‑
1.58(m,14h),1.37(s,9h),1.06(d,j＝6.6hz,3h)。
[0320]7‑6’
:ms(esi,m/z):418[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.08(s,1h),7.68
‑
7.58(m,2h),7.39
‑
7.28(m,2h),2.76
‑
2.64(m,1h),2.10
‑
1.50(m,14h),1.40(s,9h),1.05
(d,j＝6.7hz,3h)。
[0321]
步骤7
[0322][0323]
往化合物7
‑
6(900毫克,2.2毫摩尔,1当量)的二氯甲烷(9毫升)溶液中，加入三氟乙酸(9毫升)，所得混合物在常温下搅拌2小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去三氟乙酸，并加入甲苯(3
×
5毫升)进行减压旋蒸除去残留的三氟乙酸，得到白色固体产物7
‑
7(顺或反式，外消旋混合物，880毫克)。粗产品不经进一步纯化，直接用去下一步反应。ms(esi,m/z):362[m+1]
+
。
[0324]
步骤8.
[0325]
(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7a，(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7b
[0326]
在常温下和氮气保护下，往化合物7
‑
7(100毫克,0.28毫摩尔,1.0当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(158毫克,0.42毫摩尔,1.50当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(2毫升)溶液中，先后加入1
‑
苄胺(39毫克,0.36毫摩尔,1.3当量)和二异丙基乙基胺(107毫克,0.83毫摩尔,3.0当量)，随后在常温下搅拌过夜。反应结束后，通过反相快速色谱柱(c18柱)进行分离，在40分钟内用10
→
95％乙腈/水流动相梯度洗脱；检测器,紫外254纳米。得到白色固体产物(顺或反式，外消旋混合物，100毫克,产率80％)。该产物手性拆分使用手性制备用高压液相手性柱chiralpak ad,2.0x25cm,5μm；流动相a:正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液)82％,流动相b:异丙醇18％；流速:20毫升/分钟；18％b洗脱，15分钟；检测器，紫外254纳米；rt1:5.5分钟；rt2:7.9分钟。得到两个产品，较短保留时间(5.5分钟)的产品为对映体7a(20毫克)呈类白色固体；较长保留时间(7.9分钟)的产品为对映体7b(20毫克)，呈类白色固体。
[0327]
7a:ms(esi,m/z),451[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.08(s,1h),8.02(t,j＝6.0hz,1h),7.69
‑
7.58(m,2h),7.39
‑
7.27(m,4h),7.26
‑
7.18(m,3h),4.27(d,j＝5.9hz,2h),2.85
‑
2.72(m,1h),2.15
‑
1.90(m,3h),1.89
‑
1.57(m,11h),1.05(d,j＝6.6hz,3h)。
[0328]
7b:ms(esi,m/z),451[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.08(s,1h),8.02(t,j＝6.0hz,1h),7.69
‑
7.58(m,2h),7.40
‑
7.27(m,4h),7.26
‑
7.18(m,3h),4.27(d,j＝5.9hz,2h),2.85
‑
2.72(m,1h),2.15
‑
1.90(m,3h),1.89
‑
1.57(m,11h),1.05(d,j＝6.7hz,3h)。
[0329]
步骤9
[0330][0331]
往化合物7
‑6’
(700毫克,7.9毫摩尔,1.当量)的二氯甲烷(6毫升)溶液中，加入三氟乙酸(6毫升)，随后在常温搅拌2小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去三氟乙酸，并加入甲苯(3
×
5毫升)进行减压旋蒸除去残留的三氟乙酸，得到白色固体产物7
‑7’
(顺或反式，外消旋混合物，700毫克)。粗产品不经进一步纯化，直接用于下一步反应。ms(esi,m/z):362[m+1]
+
。
[0332]
步骤10.
[0333]
(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r,5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7c和(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r,5s，7s)
‑
n
‑
苄基
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺7d
[0334]
在常温下和氮气保护下，往化合物7
‑7’
(100毫克，0.28毫摩尔,1.0当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(158毫克,0.42毫摩尔,1.50当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(2毫升)溶液中，先后加入1
‑
苯甲胺(39毫克,0.36毫摩尔,1.3当量)和二异丙基乙基胺(107毫克,0.83毫摩尔,3.0当量)，随后在常温下搅拌过夜。反应结束后，通过反相快速色谱柱(c18柱)进行分离，在40分钟内用10
→
95％乙腈/水流动相梯度洗脱；检测器,紫外254纳米。得到白色固体产物(顺或反式，外消旋混合物，110毫克,产率88％)。所得到产物进行手性拆分使用手性制备用高压液相手性柱chiralpak ad,2.0x25cm,5μm；流动相a:正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液)60％,流动相b:乙醇40％；流速:20毫升/分钟；40％b洗脱，15分钟；检测器，紫外254纳米；rt1:6.51分钟；rt2:11.23分钟。得到两个产品，较短保留时间(6.51分钟)的产品7c(20毫克)，呈类白色是固体；较长保留时间(11.23分钟)的产品为7d(20毫克)，呈类白色固体。
[0335]
7c:ms(esi,m/z),451[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.07(s,1h),8.01(t,j＝6.0hz,1h),7.71
‑
7.60(m,2h),7.40
‑
7.25(m,4h),7.25
‑
7.16(m,3h),4.26(d,j＝5.9hz,2h),2.86
‑
2.72(m,1h),2.10
‑
1.90(m,4h),1.90
‑
1.65(m,8h),1.55
‑
1.35(m,2h),1.08(d,j＝6.7hz,3h)。
[0336]
7d:ms(esi,m/z),451[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.07(s,1h),8.01(t,j＝6.0hz,1h),7.71
‑
7.58(m,2h),7.40
‑
7.25(m,4h),7.25
‑
7.16(m,3h),4.26(d,j＝5.9hz,2h),2.86
‑
2.72(m,1h),2.12
‑
1.90(m,4h),1.90
‑
1.65(m,8h),1.55
‑
1.35(m,2h),1.08(d,j＝6.7hz,3h)。
[0337]
实施例8(合成方法viii)
[0338]
(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
羧酸苄酯8a，(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
羧酸苄酯8b，(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
羧酸苄酯8c和(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨
基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
羧酸苄酯8d
[0339][0340]
步骤1.
[0341]
在常温和在氮气保护下，往搅拌的化合物7
‑
7(60毫克,0.17毫摩尔,1当量)和碳酸钾(34毫克,0.25毫摩尔,1.5当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(3毫升)溶液中加入苄溴(43毫克,0.25毫摩尔,1.5当量)，随后在80℃下搅拌过夜。反应结束后，恢复至常温后加入10毫升水稀释，并用乙酸乙酯(3
×
10毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(10毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品用硅胶柱层析纯化，流动相用1/15
→
1/5的乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物(对映体混合物，70毫克,产率93％)。ms(esi,m/z):452[m+1]
+
。进一步手性拆分，使用高压液相手性柱chiralcel od
‑
h,2x25mm,5μm；流动相a:正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b:异丙醇；流速:20毫升/分钟；25％b洗脱，10分钟；检测器，紫外210/254纳米；rt1:4.5分钟；rt2:7.5分钟；得到两个产品：8a(保留时间4.5分钟，25毫克，呈白色固体)和8b(保留时间7.5分钟，25毫克，呈白色固体)。
[0342]
8a:ms(esi,m/z)452[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.52
‑
7.49(m,2h),7.42
‑
7.33(m,5h),7.31
‑
7.28(m,2h),7.23(br,1h),5.14(s,2h),2.61
‑
2.53(m,1h),2.10
‑
1.77(m,14h),1.21(d,j＝6.7hz,3h。
[0343]
8b:ms(esi,m/z)452[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.52
‑
7.49(m,2h),7.42
‑
7.33(m,5h),7.31
‑
7.28(m,2h),7.23(br,1h),5.14(s,2h),2.61
‑
2.53(m,1h),2.10
‑
1.77(m,14h),1.21(d,j＝6.7hz,3h)。
[0344]
步骤2.
[0345]
在常温和在氮气保护下，往搅拌的化合物7
‑7’
(70毫克,0.19毫摩尔,1当量)和碳酸钾(40毫克,0.29毫摩尔,1.5当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(2毫升)溶液中加入苄溴(50毫克,0.29毫摩尔,1.5当量)，随后在80℃下搅拌过夜。反应结束后，恢复至常温后加入10毫升水稀释，并用乙酸乙酯(3
×
10毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(10毫升)洗涤，用无水
硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品用硅胶柱层析纯化，流动相用1/15
→
1/5的乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物(外消旋混合物，80毫克,产率92％)。ms(esi,m/z):452[m+1]
+
。手性拆分使用高压液相手性柱chiralpak
‑
ad
‑
h
‑
sl002,2x25cm,5μm；流动相a:正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b:异丙醇；流速:20毫升/分钟；15％b洗脱16分钟；检测器，紫外210/254纳米；得到2个产品：8c(rt1＝11.2分钟，25毫克，呈白色固体)和8d(rt2＝13.8分钟，15毫克，呈白色固体)。
[0346]
8c:ms(esi,m/z)452[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.51
‑
7.48(m,2h),7.40
‑
7.27(m,7h),7.16(br,1h),5.12(s,2h),2.68
‑
2.60(m,1h),2.09
‑
1.90(m,11h),1.78
‑
1.75(m,1h),1.60
‑
1.54(m,2h),1.24(d,j＝6.7hz,3h。
[0347]
8d:ms(esi,m/z)452[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.51
‑
7.48(m,2h),7.40
‑
7.27(m,7h),7.13(br,1h),5.12(s,2h),2.68
‑
2.60(m,1h),2.09
‑
1.90(m,11h),1.78
‑
1.75(m,1h),1.60
‑
1.54(m,2h),1.24(d,j＝6.7hz,3h)。
[0348]
实施例9(合成方法ix)
[0349]
(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9a,(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9b,(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9c和(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9d
[0350][0351]
步骤1
[0352][0353]
在0℃和氮气保护下，往化合物1
‑
5(4个立体异构体混合物，429毫克,1.2毫摩尔，1当量)和n,n
‑
二甲基甲酰胺(0.9毫克,0.01毫摩尔)的二氯甲烷(5毫升)溶液中，滴加草酰氯(308毫克,2.4毫摩尔，2.0当量)，随后恢复常温搅拌1小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂，得到浅黄色固体产物9
‑
1(4个立体异构体混合物，粗产品)，不经进一步分离直接用于下一步反应。
[0354]
步骤2
[0355][0356]
在0℃和氮气保护下，往4
‑
氯苯
‑
1,2
‑
二胺(258毫克,1.8毫摩尔，1当量)和二异丙基乙基胺(441毫克,3.7毫摩尔,2当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液中滴加化合物9
‑
1(粗产品)的二氯甲烷(1毫升)溶液，随后恢复常温搅拌2小时。反应结束后，在0℃下加入水(20毫升)将反应液进行猝灭，用乙酸乙酯(3
×
20毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析进行纯化，流动相用0
→
20％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅黄色的固体9
‑
2(4个立体异构体混合物，385毫克,2步收率66％)。ms(esi,m/z):478[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ9.25(d,j＝8.4hz,1h),8.30(t,j＝9.5hz,1h),8.01(dt,j＝9.2,6.0hz,1h),7.80
‑
7.67(m,2h),7.67
‑
7.57(m,1h),7.21(dd,j＝16.9,8.5hz,1h),6.77(dd,j＝9.4,2.4hz,1h),6.59
‑
6.52(m,1h),5.15
‑
5.05(m,2h),4.10
‑
3.95(m,1h),2.98
‑
2.82(m,1h),2.41
‑
1.66(m,10h),1.64
‑
1.50(m,1h),1.21
‑
1.08(m,5h)；
19
f nmr(377mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
114.95,
‑
114.99。
[0357]
步骤3.
[0358]
(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9a,(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9b,(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9c和(s或r)
‑2‑
((1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
(5
‑
氯
‑
1h
‑
苯并[d]咪唑
‑2‑
基)乙基)金刚烷
‑1‑
基)
‑6‑
氟喹啉9d
[0359]
在常温和氮气保护下，往化合物9
‑
2(350毫克,0.8毫摩尔，1当量)的叔丁醇(12毫升)溶液中，加入磷酸钾(485毫克,2.3毫摩尔，2.9当量)，随后置于微波反应器中在140℃下反应5小时。反应结束后，恢复至常温，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶
柱层析进行纯化，流动相用0
→
35％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到2个顺反异构产物：9
‑
3(顺或反式，外消旋混合物，120毫克，产率33％)，呈浅黄色固体；9
‑3’
(顺或反式，外消旋混合物，180毫克，产率49％)，呈浅黄色固体。ms(esi,m/z):460[m+1]
+
。两个产物分别进行手性分离。9
‑
3(12毫克)的手性拆分：高压液相手性柱(r,r)
‑
whelk
‑
o1
‑
kromasil,5cm x 25cm,5μm；流动相a正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b异丙醇；流速20毫升/分钟；12b％洗脱22分钟；检测器，紫外210纳米；在rt1＝13.5分钟和rt2:＝17.1分钟得到2个产品：9a(rt1＝13.5分钟，33毫克,呈类白色固体)和9b(rt2＝17.1分钟，27毫克,呈类白色固体)。
[0360]
9a:ms(esi,m/z),460[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.20(d,j＝8.8hz,1h),8.06(dd,j＝8.8,5.4hz,1h),7.63(d,j＝8.8hz,1h),7.59
‑
7.40(m,4h),7.21(dd,j＝8.5,2.0hz,1h),3.59
‑
3.46(m,1h),2.42
‑
2.33(m,2h),2.28
‑
2.01(m,9h),1.79
‑
1.71(m,1h),1.61
‑
1.53(m,1h),1.46
‑
1.40(m,4h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.10。
[0361]
9b:ms(esi,m/z),460[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.20(d,j＝8.8hz,1h),8.06(dd,j＝8.7,5.4hz,1h),7.63(d,j＝8.8hz,1h),7.57
‑
7.46(m,4h),7.21(dd,j＝8.6,2.0hz,1h),3.59
‑
3.46(m,1h),2.42
‑
2.33(m,2h),2.28
‑
1.99(m,9h),1.78
‑
1.72(m,1h),1.61
‑
1.53(m,1h),1.46
‑
1.40(m,4h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.10。
[0362]9‑3’
(180毫克)的手性拆分:使用高压液相手性柱chiralpak adh,2x25cm,5μm；流动相a正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b异丙醇；流速20毫升/分钟；10b％洗脱14分钟；检测器，紫外220纳米；在rt1＝9.2分钟和rt2＝12分钟得到2个产品：9c(rt1＝9.2分钟，35毫克,呈类白色固体)和9d(rt2＝12分钟，28毫克,呈类白色固体)。
[0363]
9c:ms(esi,m/z),460[m+1]
+
.1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.24(d,j＝8.7hz,1h),8.10(dd,j＝8.8,5.3hz,1h),7.70(d,j＝8.7hz,1h),7.59
‑
7.46(m,4h),7.20(dd,j＝8.6,2.0hz,1h),3.56
‑
3.44(m,1h),2.49
‑
2.31(m,3h),2.21
‑
1.89(m,7h),1.90
‑
1.74(m,3h),1.47
‑
1.38(m,4h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.06。
[0364]
9d:ms(esi,m/z),460[m+1]
+
.1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.24(d,j＝8.7hz,1h),8.14
‑
8.06(m,1h),7.70(dd,j＝8.8,0.9hz,1h),7.60
‑
7.37(m,4h),7.21(dd,j＝8.6,2.0hz,1h),3.55
‑
3.45(m,1h),2.50
‑
2.29(m,3h),2.00
‑
1.90(m,7h),1.89
‑
1.76(m,3h),1.47
‑
1.39(m,4h)；
19
f nmr(377mhz,cd3od)δ
‑
117.07。
[0365]
实施例10(合成方法x)
[0366]
(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(萘
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺10a
[0367]
[0368]
步骤1.
[0369][0370]
手性中间体
[0371]
对7
‑
6(300毫克)进行手性拆分：使用手性制备用临界流体色谱柱chiralpak ig,2x25cm,5μm；流动相a为二氧化碳,流动相b为甲醇；流速为3毫升/分钟；以40％b洗脱；检测器，紫外220纳米；在rt1＝3.32分钟和rt2＝4.51分钟分别得到两个对映异构体产品：10
‑
1(s或r，顺或反，rt1＝3.32分钟，95毫克，呈白色固体)和10
‑1’
(s或r，顺或反，rt2＝4.51分钟，70毫克，呈白色固体)。
[0372]
10
‑
1:ms(esi,m/z),418[m+1]
+
；1hnmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.04(s,1h),7.68
‑
7.60(m,2h),7.38
‑
7.30(m,2h),2.83
‑
2.71(m,1h),2.08
‑
1.62(m,12h),1.50
‑
1.39(m,2h),1.38(s,9h),1.07(d,j＝6.7hz,3h)。
[0373]
10
‑1’
:ms(esi,m/z),418[m+1]
+
；1hnmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.05(s,1h),7.71
‑
7.58(m,2h),7.42
‑
7.26(m,2h),2.82
‑
2.72(m,1h),2.10
‑
1.62(m,12h),1.53
‑
1.39(m,2h),1.38(s,9h),1.07(d,j＝6.6hz,3h。
[0374]
步骤2.
[0375][0376]
化合物10
‑
1(95毫克,0.2毫摩尔,1.0当量)和2毫升三氟乙酸的混合物在常温下搅拌4小时，反应结束后，通过减压旋蒸除去三氟乙酸。所得到的粗产品10
‑
2(s或r，顺或反，74毫克,90％)不经进一步分离直接用于下一步反应。ms(esi,m/z):362[m+1]
+
。
[0377]
步骤3.
[0378]
(s或r)
‑
(1s，3r，4s或4r,5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(萘
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺10a
[0379]
化合物10
‑
2(60毫克,0.2毫摩尔,1.0当量)和2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(126毫克,0.3毫摩尔,2.0当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(1毫升)溶液在常温下搅拌0.25小时后，加入2
‑
胺基萘(43毫克,0.3毫摩尔,1.8当量)和二异丙基乙基胺(86毫克,0.7毫摩尔,4.0当量)，随后在常温搅拌16小时。反应结束后，反应混合物通过反相快速色谱柱(c18柱)纯化，在35分钟内用0％
→
95％乙腈/水流动相梯度洗脱，得到白色固体
产物10a(30毫克,产率37％)。ms(esi,m/z):488[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.14(d,j＝2.1hz,1h),7.85
‑
7.76(m,3h),7.66
‑
7.56(m,3h),7.49
‑
7.37(m,2h),7.37
‑
7.29(m,2h),2.98
‑
2.86(m,1h),2.25
‑
1.85(m,12h),1.70
‑
1.60(m,2h),1.23(d,j＝6.7hz,3h)。
[0380]
实施例11(合成方法xi)
[0381]
(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(苯并[d]恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺11a和(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(苯并[d]恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺11b
[0382][0383]
步骤1
[0384][0385]
往50毫升的圆底烧瓶中，加入7
‑7’
(400毫克,1.1毫摩尔,1.0当量)，二氯甲烷(4毫升)和n,n
‑
二甲基甲酰胺(10微升)，烧瓶置于冰浴下搅拌，随后滴加草酰氯(188微升,2.0当量)的二氯甲烷溶液。滴加完成后，恢复室温搅拌3小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂得到酰氯粗制品。与此同时，在常温下，在另一个50毫升schlenk管中加入2
‑
氨基苯酚(181毫克,1.6毫摩尔,1.5当量)，二异丙基乙基胺(580微升,3.0当量)和二氯甲烷(4毫升)。在室温下和在搅拌下，加入上面已制备好的酰氯的二氯甲烷溶液，并搅拌2小时。反应结束后，减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过反相快速色谱柱(c18柱)纯化，在10分钟内用10
→
50％的乙腈/水流动相梯度洗脱；检测器，紫外254纳米。得到浅黄色油状产物11
‑
1(顺或反式，外消旋混合物，187毫克,产率37％)。ms(esi,m/z):453[m+1]
+
。
[0386]
步骤2.
[0387]
(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(苯并[d]恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺11a和(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(苯并[d]恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺11b
[0388]
在常温下，往10毫升的封管中，加入化合物11
‑
1(180毫克,0.4毫摩尔,1.0当量)和乙酸(4毫升)，随后置于微波反应器中在150℃下反应5小时。反应结束后，恢复至常温，并在冰浴下用饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)进行猝灭，用二氯甲烷(3
×
30毫升)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过反相快速色谱柱(c18柱)纯化，在10分钟内用10
→
50％乙腈/水梯度洗脱，得到白色固体产物(100毫克,产率
57％)。然后进行手性拆分：高压液相手性柱为chiralpak ie,2x25cm,5μm；流动相a为正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b为异丙醇；流速为20毫升/分钟；用32％b洗脱16分钟；检测器，紫外244/220纳米；在rt1＝7.5分钟和rt2＝10.7分钟分别得到2个产品：11a(rt1＝7.5分钟，24毫克，呈类白色固体)和11b(rt2＝10.7分钟，27毫克，呈类白色固体)。
[0389]
11a:ms(esi,m/z),435[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ7.71
‑
7.52(m,4h),7.44
‑
7.27(m,4h),3.01
‑
2.88(m,1h),2.43
‑
2.10(m,9h),2.10
‑
1.90(m,3h),1.77
‑
1.62(m,2h),1.24(d,j＝6.8hz,3h。
[0390]
11b:ms(esi,m/z),435[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ7.70
‑
7.54(m,4h),7.41
‑
7.28(m,4h),3.00
‑
2.86(m,1h),2.41
‑
1.86(m,12h),1.76
‑
1.64(m,2h),1.24(d,j＝6.8hz,3h)。
[0391]
实施例12(合成方法xii)
[0392]
(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(5
‑
苯基恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺12a和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(5
‑
苯基恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺12b
[0393][0394]
步骤1
[0395][0396]
化合物7
‑
7(顺或反式，外消旋混合物，180毫克,0.5毫摩尔,1.0当量),2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(265毫克,0.7毫摩尔,1.4当量)和n,n
‑
二甲基甲酰胺(1.5毫升)的混合物在常温下搅拌15分钟后，依次加入2
‑
氨基
‑1‑
苯基乙烷
‑1‑
酮(87毫克,0.6毫摩尔,1.3当量)和二异丙基乙基胺(180毫克,1.4毫摩尔,2.8当量)，随后在常温下搅拌2.5小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品用反相快速色谱柱(c18柱)纯化；在10分钟内用0
→
10％乙腈/水梯度洗脱；检测器，紫外254纳米。得到黄色固体产物12
‑
1(顺或反式，外消旋混合物，190毫克,产率72％)。ms(esi,m/z):479[m+1]
+
。
[0397]
步骤2.
[0398]
(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(5
‑
苯基恶唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺12a和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(5
‑
苯基恶唑
‑
2
‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺12b
[0399]
在常温下，将化合物12
‑
1(190毫克,0.4毫摩尔,1.0当量)和三氯化磷(2毫升)混合，随后置于微波反应器中在110℃下反应2小时。反应结束后，冷却至室温，用水猝灭，然后用二氯甲烷(3
×
15毫升)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品用反相快速色谱柱(c18柱)纯化；在10分钟内用0
→
10％乙腈/水，15分钟内用10
→
80％乙腈/水，15分钟内用80
→
95％乙腈/水梯度洗脱，得到白色固体产物(顺或反式，外消旋混合物，190毫克,产率93％)。对此外消旋混合物进行手性拆分：使用高压液相手性柱chiralpak ic,2x25cm,5μm；流动相a用正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b用异丙醇；流速为20毫升/分钟；用20％b洗脱10分钟；检测器,紫外220纳米；在rt1＝5.6分钟和rt2＝7.7分钟处得到2个产品：12a(rt1＝5.6分钟，30毫克，呈白色固体)和12b(rt2＝7.7分钟，32毫克，呈白色固体)。
[0400]
12a:ms(esi,m/z),461[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.09(s,1h),7.72
‑
7.63(m,4h),7.53(s,1h),7.49
‑
7.43(m,2h),7.38
‑
7.32(m,3h),2.90
‑
2.79(m,1h),2.21
‑
1.72(m,12h),1.63
‑
1.47(m,2h),1.12(d,j＝6.6hz,3h)。
[0401]
12b:ms(esi,m/z),461[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.09(s,1h),7.72
‑
7.63(m,4h),7.53(s,1h),7.49
‑
7.42(m,2h),7.40
‑
7.30(m,3h),2.90
‑
2.79(m,1h),2.22
‑
1.71(m,12h),1.65
‑
1.45(m,2h),1.12(d,j＝6.6hz,3h)。
[0402]
实施例13(合成方法xiii)
[0403]
(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(1h
‑
吲哚
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺13a和(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(1h
‑
吲哚
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺13b
[0404][0405]
步骤1
[0406][0407]
在0℃下，往搅拌的化合物7
‑7’
(顺或反式，外消旋混合物，2.2克,6.0毫摩尔,1.0当量)的四氢呋喃(60毫升)溶液中加入硼烷二甲硫醚络合物(0.68克,8.9毫摩尔,1.5当量)，随后恢复常温搅拌2小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶
柱层析纯化，流动相用20
→
70％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物13
‑
1(顺或反式，外消旋混合物，1.85克,产率89％)。ms(esi,m/z):348[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.54
‑
7.48(m,2h),7.34
‑
7.27(m,2h),7.16(s,1h),3.25(s,2h),3.04(s,1h),2.60
‑
2.70(m,1h),2.10
‑
1.97(m,2h),1.97
‑
1.86(m,3h),1.83
‑
1.47(m,9h),1.24(d,j＝6.7hz,3h).
[0408]
步骤2
[0409][0410]
在常温下，往化合物13
‑
1(顺或反式，外消旋混合物，1.25克,3.6毫摩尔,1.0当量)的二氯甲烷(50毫升)溶液中加入水(65毫克,3.6毫摩尔,1.0当量)，碳酸氢钠(3克,35.9毫摩尔,10.0当量)和戴斯
‑
马丁氧化剂(2.3克,5.4毫摩尔,1.5当量)，随后在常温下搅拌2小时。反应结束后，在常温下用15毫升饱和碳酸氢钠水溶液和10毫升饱和硫代硫酸钠水溶液猝灭反应，并用乙酸乙酯(3
×
30毫升)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。粗产品通过硅胶柱层析纯化，流动相用20
→
60％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物13
‑
2(顺或反式，外消旋混合物，950毫克,产率76％)。ms(esi,m/z):346[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ9.36(s,1h),7.55
‑
7.46(m,2h),7.35
‑
7.30(m,2h),7.20(s,1h),2.75
‑
2.60(m,1h),2.22
‑
2.05(m,2h),2.03
‑
1.68(m,10h),1.67
‑
1.49(m,2h),1.26(d,j＝6.8,3h)。
[0411]
步骤3
[0412][0413]
在常温和氮气保护下，往化合物13
‑
2(顺或反式，外消旋混合物，865毫克,2.5毫摩尔,1.0当量)的甲醇/二氯甲烷＝5/1(9毫升)溶液中，加入(1
‑
重氮基
‑2‑
氧代丙基)磷酸二甲酯(672毫克,3.5毫摩尔,1.4当量)和碳酸铯(2.44克,7.5毫摩尔,3.0当量)，随后在常温下搅拌2小时。反应结束后，在0℃下加入水(10毫升)猝灭反应并用二氯甲烷(3
×
20毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析纯化，流动相用0
→
40％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物13
‑
3(顺或反式，外消旋混合物，780毫克,产率91％)。ms(esi,m/z):342[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.53
‑
7.46(m,2h),7.34
‑
7.30(m,2h),7.20(s,1h),2.70
‑
2.55(m,1h),2.12(s,1h),2.09
‑
1.65(m,12h),1.65
‑
1.45(m,2h),1.23(d,j＝6.7hz,3h)。
[0414]
步骤4
[0415][0416]
在常温和氮气保护下，往搅拌的化合物13
‑
3(顺或反式，外消旋混合物，154毫克,0.45毫摩尔,1.0当量)和2
‑
碘苯胺(108毫克,0.50毫摩尔,1.1当量)的哌啶(1.5毫升)溶液中，加入二(三苯基膦)二氯化钯(16毫克,0.02毫摩尔,0.05当量)和碘化亚铜(4毫克,0.023毫摩尔,0.05当量)，所得混合物在常温下搅拌3小时。反应结束后，过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析纯化，流动相用0
→
50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到棕色固体13
‑
4(顺或反式，外消旋混合物，180毫克,产率91％)。ms(esi,m/z):433[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.06(s,1h),7.70
‑
7.60(m,2h),7.39
‑
7.31(m,2h),7.09
‑
6.97(m,2h),6.72
‑
6.66(m,1h),6.52
‑
6.46(m,1h),5.14(br,2h),2.85
‑
2.75(m,1h),2.13
‑
1.35(m,14h),1.09(d,j＝6.7hz,3h)。
[0417]
步骤5
[0418]
(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(1h
‑
吲哚
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺13a和(s或r)
‑2‑
((1r，2s或2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(1h
‑
吲哚
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺13b
[0419]
在氮气保护下，将化合物13
‑
4(顺或反式，外消旋混合物，173毫克,0.40毫摩尔,1.0当量)和碘化亚铜(1毫克,0.004毫摩尔,0.01当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(2ml)溶液置于160℃下搅拌4小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去溶剂，所得残余物在常温下用水进行猝灭，并用二氯甲烷(3
×
15毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(15毫升)进行洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂，所得粗产品通过硅胶柱层析纯化，流动相用0
→
40％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到白色固体产物(顺或反式，外消旋混合物，129毫克,产率74％)。ms(esi,m/z):433[m+1]
+
。对其(100毫克)进行手性拆分：
[0420]
使用高压液相手性柱chiralpak id,2x25cm，5μm；流动相a用正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b用异丙醇；流速为20毫升/分钟；用15％b洗脱13分钟；检测器，紫外254纳米；在rt1＝7.5分钟和rt2＝10.5分钟分别得2个产品：13a(rt1＝7.5分钟，25毫克，呈白色固体)和13b(rt2＝10.5分钟，25毫克，呈白色固体)。
[0421]
13a:ms(esi,m/z):433[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.85(s,1h),10.10(s,1h),7.73
‑
7.62(m,2h),7.45
‑
7.31(m,3h),7.31
‑
7.24(m,1h),7.05
‑
6.85(m,2h),6.07(dd,j＝2.2,0.9hz,1h),2.95
‑
2.80(m,1h),2.21
‑
1.70(m,12h),1.65
‑
1.45(m,2h),1.12(d,j＝6.6hz,3h。
[0422]
13b:ms(esi,m/z):433[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.85(d,j＝2.2hz,1h),10.10(s,1h),7.73
‑
7.62(m,2h),7.45
‑
7.31(m,3h),7.31
‑
7.24(m,1h),7.05
‑
6.85(m,2h),6.07(d,j＝2.0hz,1h),2.95
‑
2.80(m,1h),2.21
‑
1.71(m,12h),1.66
‑
1.43(m,2h),1.12(d,j
＝6.6hz,3h)。
[0423]
实施例14(合成方法xiv)
[0424]
(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14a，(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14b，(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14c和(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14d
[0425][0426]
步骤1
[0427][0428]
在0℃下，将化合物7
‑
4(4个立体异构体混合物，3.0克,8.9毫摩尔,1.0当量)和三氟乙酸(15毫升,203毫摩尔,34当量)混合，撤除冰水浴，自然恢复常温搅拌1小时。反应结束后，通过减压旋蒸除去三氟乙酸。残留物用饱和碳酸氢钠水溶液分散，随后用乙酸乙酯(2
×
100毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
50毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂，得黄色液体产物14
‑
1(4个立体异构体混合物，2.3克,产率90％)。ms(esi,m/z):279[m
‑
1]
+
。
[0429]
步骤2
[0430][0431]
将化合物14
‑
1(2.0克,7.1毫摩尔,1.0当量),2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯(4.1克,10.7毫摩尔,1.5当量)和二异丙基乙基胺(2.7克,21.4毫摩尔,3.0当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(25毫升)溶液在常温下搅拌30分钟，随后加入2
‑
氨基
‑2‑
苯基丙烷(1.1克,8.5毫摩尔,1.2当量)。反应混合物在常温下搅拌16小时后，加入150毫升水猝灭，并用乙酸乙酯(2
×
100毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(3
×
100毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品用硅胶柱层析纯化，流动相用0
→
50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅黄色固体产物14
‑
2(4个立体异构体混合物，2.0克,产率71％)。ms(esi,m/z):398.3[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.40
‑
7.30(m,4h),7.29
‑
7.20(m,1h),6.58(s,1h),4.20
‑
4.09(m,2h),2.84
‑
2.69(m,1h),2.17
‑
1.73(m,12h),1.73
‑
1.59(m,7h),1.50(d,j＝12.7hz,1h),1.31
‑
1.24(m,3h),1.17
‑
1.10(dd,j＝9.4,6.9hz,3h)。
[0432]
步骤3
[0433][0434]
在0℃下，往化合物14
‑
2(1.0克,2.5毫摩尔,1.0当量)的n,n
‑
二甲基甲酰胺(10毫升)溶液中，分批加入氢化钠(121毫克,5.0毫摩尔,60％的矿物油混合物,2.0当量)，在0℃下搅拌30分钟后加入碘甲烷(3.5克,25毫摩尔,10当量)，随后恢复常温搅拌3小时。反应结束后，在0℃下加入饱和氯化铵水溶液(50毫升)猝灭，并用乙酸乙酯(2
×
100毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
100毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析分离，流动相用0
→
50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅黄色油状产物14
‑
3(4个立体异构体混合物，1.0克,产率97％)。ms(esi,m/z):412.5[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ7.26
‑
7.18(m,4h),7.15
‑
7.05(m,1h),4.12
‑
4.00(m,2h),3.12
‑
3.08(m,3h),2.76
‑
2.54(m,1h),2.07
‑
1.76(m,8h),1.76
‑
1.38(m,12h),1.21
‑
1.13(m,3h),1.08
‑
1.01(m,3h)。
[0435]
步骤4
[0436]
(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14a，(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14b，(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙
烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14c和(s或r)
‑
(1s，3r，4r或4s，5s，7s)
‑4‑
(1
‑
((4
‑
氯苯基)氨基)
‑1‑
氧丙烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
n
‑
(2
‑
苯丙烷
‑2‑
基)金刚烷
‑1‑
甲酰胺14d
[0437]
在氮气保护下，将对氯苯胺(372毫克,2.9毫摩尔,3.0当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液置于冰浴中冷却，随后滴加异丙基溴化镁(50毫克,3.4毫摩尔,3.5当量)。反应混合物在0℃搅拌30分钟后，滴加化合物14
‑
3(400毫克,0.97毫摩尔,1.0当量)的四氢呋喃(5毫升)溶液。滴加完成后，恢复常温搅拌3小时。反应结束后，在0℃下用饱和碳酸氢钠水溶液(15毫升)猝灭，用乙酸乙酯(2
×
50毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(2
×
50毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品通过硅胶柱层析纯化，流动相用20
→
50％乙酸乙酯的石油醚梯度洗脱，得到2个顺反异构体产物：14
‑
4(极性小，顺或反式，150毫克，产率31％)，呈类白色固体和14
‑4’
(极性大，顺或反式，220毫克，产率46％)，呈类白色固体。ms(esi,m/z):493[m+1]
+
。它们各自将进一步进行手性拆分。
[0438]
14
‑
4的手性制备使用高压液相手性柱chiral art cellulose
‑
sb,2x25cm,5μm；流动相a用正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b用异丙醇；流速为25毫升/分钟；用6％b洗脱7分钟；检测器，uv254纳米；在rt1＝4.7分钟和rt2＝5.5分钟处得到2个产品：14a(rt1＝4.7分钟，41毫克，呈白色固体)和14b(rt2＝5.5分钟，51毫克，呈白色固体)。
[0439]
14a:ms(esi,m/z),493[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.61
‑
7.52(m,2h),7.35
‑
7.23(m,6h),7.18
‑
7.10(m,1h),3.30(s,3h),2.80
‑
2.68(m,1h),2.20
‑
2.01(m,5h),2.00
‑
1.72(m,10h),1.63(s,3h),1.62(s,3h),1.17(d,j＝6.8hz,3h。
[0440]
14b:ms(esi,m/z),493[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ7.62
‑
7.51(m,2h),7.36
‑
7.21(m,6h),7.19
‑
7.10(m,1h),3.30(s,3h),2.81
‑
2.66(m,1h),2.20
‑
2.02(m,5h),2.01
‑
1.71(m,10h),1.63(s,3h),1.62(s,3h),1.17(d,j＝6.8hz,3h)。
[0441]
14
‑4’
产品手性制备使用高压液相手性柱chiralpak ia,2x25cm,5μm；流动相a用正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b用异丙醇；流速为20毫升/分钟；用20％b洗脱10.5分钟；检测器，紫外210纳米；在rt1＝4.9分钟和rt2＝8.8分钟处分别得到2个产品：14c(rt1＝4.9分钟，40毫克，呈白色固体)和14d(rt2＝8.8分钟，50毫克，呈白色固体)。
[0442]
14c:ms(esi,m/z),493[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.62
‑
7.54(m,2h),7.36
‑
7.21(m,6h),7.16
‑
7.08(m,1h),3.28(s,3h),2.92
‑
2.80(m,1h),2.20
‑
1.78(m,12h),1.64
‑
1.52(m,8h),1.19(d,j＝6.7hz,3h。
[0443]
14d:ms(esi,m/z),493[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.62
‑
7.54(m,2h),7.36
‑
7.21(m,6h),7.17
‑
7.08(m,1h),3.28(s,3h),2.92
‑
2.80(m,1h),2.20
‑
1.76(m,12h),1.66
‑
1.52(s,8h),1.19(d,j＝6.8hz,3h)。
[0444]
实施例15(合成方法xv)
[0445]
(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(苯并噻唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺15a和(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(苯并噻唑
‑2‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺15b
[0446][0447]
将化合物7
‑
7(顺或反式，外消旋混合物，180毫克,0.5毫摩尔,1.0当量)和2
‑
氨基苯硫酚(69毫克,0.5毫摩尔,1.1当量)的多聚磷酸(1.5毫升,27.4毫摩尔,55.0当量)溶液置于130℃下搅拌4小时。反应结束后，恢复至常温后用饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)猝灭，并用乙酸乙酯(3
×
50毫升)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(30毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗产品用反相快速色谱柱(c18柱)纯化；在40分钟内用10
→
95％的乙腈/水流动相梯度洗脱；检测器，紫外254纳米，得到白色固体产物(60毫克,产率27％)。ms(esi,m/z):451[m+1]
+
。
[0448]
上述白色固体产物(60毫克)的手性制备使用高压液相手性柱chiralpak if,2x25cm,5μm；流动相a用正己烷(0.1％二乙胺),流动相b用异丙醇；流速为20毫升/分钟；用25％b洗脱11分钟；检测器紫外254纳米；在rt1＝7.6分钟和rt2＝9分钟处得到2个产品：15a(rt1＝7.6分钟，10毫克，呈暗白色固体)和15b(rt2＝9分钟，10毫克，呈暗白色固体)。
[0449]
15a:ms(esi,m/z):451[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ7.97
‑
7.93(m,2h),7.63
‑
7.58(m,2h),7.52
‑
7.46(m,1h),7.42
‑
7.37(m,1h),7.35
‑
7.30(m,2h),2.99
‑
2.89(m,1h),2.36
‑
1.94(m,12h),1.73
‑
1.66(m,2h),1.24(d,j＝6.8hz,3h).
[0450]
15b:ms(esi,m/z):451[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ7.97
‑
7.93(m,2h),7.63
‑
7.58(m,2h),7.52
‑
7.46(m,1h),7.42
‑
7.37(m,1h),7.35
‑
7.30(m,2h),2.99
‑
2.89(m,1h),2.36
‑
1.94(m,12h),1.73
‑
1.66(m,2h),1.24(d,j＝6.8hz,3h).
[0451]
实施例16(合成方法xvi)
[0452]
(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16a，(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16b，(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16c,(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16d，
[0453]
(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16e，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16f，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16g和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16h
[0454][0455][0456]
步骤1
[0457][0458]
根据实施例1中步骤1的方法，将原料6
‑
氟喹啉替换为化合物2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉(5克，1当量)，得到白色固体产物16
‑
1(2.2克，产率25％)。ms(esi,m/z):330[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.14
‑
8.02(m,2h),7.55
‑
7.38(m,1h),7.33(s,1h),2.85
‑
2.79(m,2h),2.64
‑
2.32(m,7h),2.31
‑
2.05(m,4h)；
19
f nmr(377mhz,cdcl3):δ
‑
110.83。
[0459]
步骤2
[0460][0461]
根据实施例1中步骤2的方法，将原料1
‑
1替换为化合物16
‑
1(2.2克，6.7毫摩尔，1.0当量)，得到化合物16
‑
2(2.6克，产率97％)。ms(esi,m/z):400[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.15
‑
8.03(m,2h),7.53
‑
7.43(m,1h),7.31(s,1h),5.74(s,1h),4.26
‑
4.14(m,2h),2.78
‑
2.71(m,1h),2.57
‑
2.27(m,8h),2.20
‑
1.92(m,4h),1.37
‑
1.27(m,3h)；
19
f nmr(377mhz,cdcl3):δ
‑
111.49。
[0462]
步骤3
[0463][0464]
根据实施例1中步骤3的方法，将原料1
‑
2替换为化合物16
‑
2(2.6克，6.5毫摩尔，1.0当量)，并且将钯/碳替换成二氧化铂(536毫克，2.4毫摩尔，0.4当量)，得到浅黄色固体产物16
‑
3(顺反异构体混合物，2.4克，产率94％)。ms(esi,m/z):402[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.20
‑
8.02(m,2h),7.52
‑
7.44(m,1h),7.33(s,1h),4.24
‑
4.12(m,2h),2.63
‑
2.15(m,10h),2.13
‑
1.92(m,6h),1.34
‑
1.25(m,3h)；
19
f nmr(282mhz,cdcl3):δ
‑
111.85。
[0465]
步骤4
[0466][0467]
根据实施例1中步骤4的方法制备，将原料1
‑
3替换为化合物16
‑
3(2.4克，6.0毫摩尔，1.0当量)，得到类白色油状产物16
‑
4(4个立体异构体混合物，2克，产率81％)。ms(esi,m/z):416[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.21
‑
8.03(m,2h),7.54
‑
7.42(m,1h),7.33(s,1h),4.22
‑
4.12(m,2h),2.86
‑
2.70(m,1h),2.45
‑
1.80(m,14h),1.36
‑
1.16(m,6h)；
19
f nmr(377mhz,cdcl3):δ
‑
111.90。
[0468]
步骤5
[0469][0470]
在常温下，往化合物16
‑
4(2克，4.8毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(30毫升)和甲醇(10毫升)溶液中，加入氢氧化锂(1.4克，57.6毫摩尔，12.0当量)的水(10毫升)溶液。所得混合物在50℃下搅拌10个小时后通过减压旋蒸除去溶剂。所得残余物用水(30毫升)进行稀释，随后用1摩尔盐酸溶液调节ph值至6
‑
7。所得到的固体通过过滤收集，干燥后得到化合物16
‑
5和16
‑5’
的混合物(每个化合物为4个立体异构体的混合物，2.1克)。ms(esi,m/z)388[m+1]
+
(16
‑
5)，384[m+1]
+
(16
‑5’
)。所得混合物不经进一步分离直接用于下一步反应。
[0471]
步骤6
[0472][0473]
将步骤5得到的16
‑
5和16
‑5’
的混合物溶于二氯甲烷(10毫升)，然后在0℃下加入n,n
‑
二甲基甲酰胺(0.1毫升)和草酰氯(1.3克，1毫摩尔，2.0当量)。所得混合物在常温反应1小时后，通过减压旋蒸除去溶剂。所得残余物溶于二氯甲烷(10毫升)，随后在0℃下加入对氯苯胺(790毫克，6毫摩尔，1.2当量)和二异丙基乙基胺(1.0克，8毫摩尔，1.5当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液。所得混合物在常温下反应4小时后，通过减压旋蒸除去溶剂。粗品的分离通过高压液相柱xcelect csh f
‑
pheny obd,19x250mm,5μm；流动相a:水(10毫摩尔/升碳酸
氢铵),流动相b:乙醇；流速:25毫升/分钟；74
→
83％b洗脱15分钟；用uv254纳米检测；在rt1＝14.52分钟和rt2＝16.0分钟处得到2个产品：16
‑
6(4个立体异构体的混合物，rt1＝14.52分钟，800毫克)，呈白色固体，ms(esi,m/z):497[m+1]
+
和16
‑6’
(4个立体异构体的混合物，rt2＝16.0分钟，280毫克)，呈白色固体，ms(esi,m/z):493[m+1]
+
。它们将分别用于进一步的分离。
[0474]
步骤7
[0475]
(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16a，(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16b，(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16c,(s或r)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(2
‑
氯
‑6‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)丙酰胺16d
[0476]
将步骤6得到的16
‑
6(800毫克)使用高压液相柱进行分离。高压液相柱xbridge shield rp18 obd,19x150mm,5μm；流动相a:水(10毫摩尔/升碳酸氢铵),流动相b:乙腈；流速:25毫升/分钟；梯度:70
→
72％b，15分钟；检测：紫外254/220纳米。所得馏份通过减压旋蒸除去溶剂，分别得到16
‑
7(顺式或反式，外消旋混合物，140毫克，产率18％，白色固体)和16
‑7’
(顺式或反式，外消旋混合物，420毫克，产率52％，白色固体)。ms(esi,m/z):497[m+1]
+
。它们将进行手性分离。
[0477]
16
‑
7(140毫克)进行手性制备，高压液相手性柱chiralpak ia,2x25cm；5μm；流动相a:正己烷(0.1％甲酸),流动相b:乙醇；检测用uv254纳米；流速:18毫升/分钟；30％b洗脱，20分钟；在rt1＝4.4分钟和rt2＝6.3分钟处得到2个产品：16a(rt1＝4.4分钟，50毫克，呈白色固体)和16b(rt2＝6.3分钟，50毫克，呈白色固体)。
[0478]
16a:ms(esi,m/z)497[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.32(dd,j＝11.7,2.8hz,1h),8.03(dd,j＝9.3,6.0hz,1h),7.67
‑
7.54(m,3h),7.43(s,1h),7.38
‑
7.27(m,2h),3.07
‑
2.90(m,1h),2.49
‑
1.92(m,12h),1.85
‑
1.70(m,2h),1.27(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
113.35。
[0479]
16b:ms(esi,m/z)497[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.32(dd,j＝11.7,2.7hz,1h),8.03(dd,j＝9.3,6.0hz,1h),7.66
‑
7.54(m,3h),7.43(s,1h),7.38
‑
7.28(m,2h),3.07
‑
2.90(m,1h),2.49
‑
1.95(m,12h),1.84
‑
1.72(m,2h),1.27(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
113.37。
[0480]
将16
‑7’
(420毫克)进行手性制备，高压液相手性柱chiralpak ia,2x25cm；5μm；流动相a：正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b：异丙醇；检测用uv254纳米；流速:18毫升/分钟；20％b洗脱15分钟；在rt1＝6.1分钟和rt2＝7.6分钟处得到两个产品：16c(rt1＝6.1分钟，20毫克，呈白色固体)和16d(rt2＝7.6分钟，20毫克，呈白色固体)。
[0481]
16c：ms(esi,m/z)497[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.30(dd,j＝11.7,2.7hz,1h),8.03(dd,j＝9.3,5.9hz,1h),7.67
‑
7.55(m,3h),7.50(s,1h),7.35
‑
7.26(m,2h),2.88
‑
2.74(m,1h),2.47
‑
1.87(m,14h),1.23(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
113.21。
[0482]
16d：ms(esi,m/z)497[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.30(d,j＝11.2hz,1h),8.03(dd,j＝9.3,5.9hz,1h),7.65
‑
7.46(m,4h),7.35
‑
7.26(m,2h),2.90
‑
2.75(m,1h),2.49
‑
1.82(m,14h),1.23(d,j＝6.7hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
113.21。
[0483]
步骤8
[0484]
(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16e，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16f，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16g和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r或2s，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟
‑2‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺16h
[0485]
将步骤6得到的16
‑6’
(280毫克)使用高压液相柱进行分离。高压液相柱xbridge shield rp18 obd,19x150mm,5μm；流动相a:水(10毫摩尔/升碳酸氢铵),流动相b:乙腈；流速:25毫升/分钟；70
→
72％b洗脱15分钟；用uv254/220纳米检测。所得馏份通过减压旋蒸除去溶剂，分别得到16
‑
8(顺式或反式，外消旋混合物，50毫克，白色固体，产率18％)和16
‑8’
(顺式或反式，外消旋混合物，150毫克，白色固体，产率54％)。ms(esi,m/z):493[m+1]
+
。它们将用于手性分离。
[0486]
将16
‑
8(50毫克)进行手性制备，高压液相手性柱chiralpak id,2.0x25.0cm；5μm；流动相a:正己烷(0.1％二乙胺)；流动相b:异丙醇；用uv254纳米检测；用20％b洗脱15分钟；在rt1＝6.5分钟和rt2＝9.7分钟处得到2个产品：16e(rt1＝6.5分钟，20毫克，呈白色固体产物)和16f(rt2＝9.7分钟，20毫克，呈白色固体产物)。
[0487]
16e：ms(esi,m/z)493[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.18(dd,j＝11.9,2.8hz,1h),7.89(dd,j＝9.2,6.1hz,1h),7.66
‑
7.57(m,2h),7.47
‑
7.28(m,3h),6.91(s,1h),4.03(s,3h),3.05
‑
2.92(m,1h),2.49
‑
1.94(m,12h),1.83
‑
1.70(m,2h),1.27(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
119.01。
[0488]
16f：ms(esi,m/z)493[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,cd3od)δ8.18(dd,j＝12.0,2.8hz,1h),7.89(dd,j＝9.2,6.0hz,1h),7.67
‑
7.56(m,2h),7.47
‑
7.27(m,3h),6.91(s,1h),4.03(s,3h),3.07
‑
2.89(m,1h),2.49
‑
1.89(m,12h),1.82
‑
1.70(m,2h),1.27(d,j＝6.8hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,cd3od)δ
‑
119.01。
[0489]
将16
‑8’
(150毫克)进行手性制备,高压液相手性柱chiralpak if,2x25cm；5μm；流动相a:正己烷(0.5％(v/v)的2摩尔/升氨的甲醇溶液),流动相b:异丙醇；检测：uv220纳米；流速:20毫升/分钟,8％b洗脱，20分钟；rt1:8.7分钟；rt2:10.8分钟。得到2个产品：16g(rt1＝8.7分钟，20毫克，呈白色固体)和16h(rt2＝10.8分钟，20毫克，呈白色固体)。
[0490]
16g:ms(esi,m/z)493[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ9.97(s,1h),8.20
‑
8.10(m,1h),7.88(dd,j＝9.2,6.1hz,1h),7.69
‑
7.51(m,3h),7.37
‑
7.28(m,2h),6.93(s,1h),3.98(s,3h),2.82
‑
2.62(m,1h),2.33
‑
1.63(m,14h),1.09(d,j＝6.6hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
116.12。
[0491]
16h:ms(esi,m/z)493[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ9.97(s,1h),8.14(dd,j＝12.0,2.8hz,1h),7.88(dd,j＝9.2,6.1hz,1h),7.67
‑
7.49(m,3h),7.38
‑
7.27(m,2h),6.93(s,1h),3.98(s,3h),2.81
‑
2.69(m,1h),2.35
‑
1.67(m,14h),1.09(d,j＝6.5hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
116.12。
[0492]
实施例17(合成方法xvii)
[0493]
(s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺17a，(r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙
酰胺17b，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺17c和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺17d
[0494][0495]
步骤1
[0496][0497]
在常温下，往250毫升三颈圆底烧瓶中，加入化合物16
‑
2(2.0克,5.0毫摩尔,1.0当量),[1,1
‑
双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(408毫克，0.5毫摩尔，0.1当量)和n,n
‑
二甲基甲酰胺(30毫升)，随后在常温下滴加三乙基硅烷(5.8克,50.0毫摩尔,10.0当量)。所得混合物在氮气保护下置于70℃下搅拌4小时后，在常温下滴加水(300毫升)进行猝灭。猝灭后的混合物用乙酸乙酯(3x300毫升)进行萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗品用硅胶柱层析进行分离，流动相用0
→
20％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到浅棕色泡沫状固体产物17
‑
1(1.7克,产率93％)。ms(esi,m/z):366[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.82(d,j＝4.8hz,1h),8.248.08(m,2h),7.557.45(m,1h),7.32(d,j＝4.8hz,1h),5.74(s,1h),4.21(q,j＝7.1hz,2h),2.582.32(m,6h),2.192.07(m,2h),2.02(d,j＝10.5hz,2h),1.33(t,j＝7.1hz,6h)；
19
f nmr(377mhz,cdcl3)δ
‑
112.25。
[0498]
步骤2
[0499][0500]
根据实施例1中步骤3的方法，将原料1
‑
2替换为化合物17
‑
1(1.7克，4.6毫摩尔，1当量),并且将钯/碳替换为二氧化铂(340毫克，1.5毫摩尔，0.4当量)，得到浅黄色油状产物17
‑
2(顺反异构体混合物，1.4克，产率82％)。ms(esi,m/z):368[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ8.84
‑
8.80(m,1h),8.30
‑
8.10(m,2h),7.72
‑
7.62(m,1h),7.47
‑
7.41(m,1h),4.07(q,j＝6.9hz,2h),2.57
‑
2.52(m,2h),2.35
‑
2.05(m,8h),2.04
‑
1.78(m,6h),1.23
‑
1.15(m,3h)。
[0501]
步骤3
[0502][0503]
根据实施例1中步骤4的方法，将原料1
‑
3替换为化合物17
‑
2(1.4克，3.8毫摩尔，1.0当量)，得到浅棕色泡沫状固体产物17
‑
3(4个立体异构体混合物，1.3克，产率92％)。ms(esi,m/z):382[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ8.82(dd,j＝4.7,2.3hz,1h),8.30
‑
8.05(m,2h),7.75
‑
7.60(m,1h),7.50
‑
7.40(m,1h),4.15
‑
4.04(m,2h),2.91
‑
2.66(m,1h),2.45
‑
1.50(m,14h),1.25
‑
1.11(m,6h).
[0504]
步骤4
[0505][0506]
根据实施例1中步骤5的方法，将原料1
‑
4替换为化合物17
‑
3(1.3克，3.4毫摩尔，1.0当量)，得到浅黄色固体产物17
‑
4(4个立体异构体混合物，1.3克，粗品)。ms(esi,m/z):354[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ12.14(s,1h),8.82(d,j＝4.7hz,1h),8.31
‑
8.05(m,2h),7.74
‑
7.61(m,1h),7.50
‑
7.45(m,1h),2.79
‑
2.59(m,1h),2.45
‑
1.52(m,14h),1.11(dd,j＝6.8,4.9hz,3h)。
[0507]
步骤5
[0508]
(s)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺17a，(r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2s，3s，5r，7r)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙
酰胺17b，(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺17c和(s或r)
‑
n
‑
(4
‑
氯苯基)
‑2‑
((1r，2r，3s，5s，7s)
‑5‑
(6
‑
氟喹啉
‑4‑
基)金刚烷
‑2‑
基)丙酰胺17d
[0509]
在常温下，往50毫升的圆底烧瓶中加入化合物17
‑
4(1.3克，粗品)，n,n
‑
二甲基甲酰胺(10微升)和二氯甲烷(12毫升)，随后在0℃下滴加草酰氯(603微升，7.1毫摩尔，2.0当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。所得混合物在常温下搅拌2小时后，通过减压蒸馏除去溶剂得到相应的酰氯(粗品)。
[0510]
在氮气保护下，往对氯苯胺(682毫克，5.3毫摩尔，1.5当量)和二异丙基乙基胺(1.9毫升，3当量)的二氯甲烷(12毫升)溶液中，在0℃下滴加上面制备的酰氯二氯甲烷(5毫升)溶液。所得混合物在常温下搅拌2小时后，通过减压旋蒸除去溶剂。所得粗品通过高压液相柱分离，高压液相柱，xbridge shield rp18 obd,19x150mm，5μm；流动相a：水(10毫摩尔/升碳酸氢铵),流动相b：乙睛；流速：25毫升/分钟；70
→
72％b洗脱15分钟；检测：uv254/220纳米。所得馏份通过减压蒸馏除去溶剂，分别得到17
‑
5(顺式异构体，外消旋混合物，136毫克，产率8％，白色固体)和17
‑5’
(反式异构体，外消旋混合物，300毫克，产率18％)。ms(esi,m/z):463[m+1]
+
。将它们分别用于手性分离。
[0511]
将17
‑
5(136毫克)进行手性制备，高压液相手性柱chiralpak ig,20x250mm；5μm；流动相a：正己烷(0.1％二乙胺),流动相b：乙醇；检测：uv254纳米；流速：20毫升/分钟；30％b洗脱20分钟；rt1:5.8分钟；rt2:9.4分钟；得到2个产品：17a(rt1＝5.8分钟，5毫克，呈白色固体)和17b(rt2＝9.4分钟，5毫克，呈白色固体)。
[0512]
17a：ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.12(s,1h),8.82(d,j＝4.7hz,1h),8.32
‑
8.10(m,2h),7.79
‑
7.60(m,3h),7.47
‑
7.30(m,3h),2.95
‑
2.85(m,1h),2.41
‑
1.55(m,14h),1.15(d,j＝6.6hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
112.22。
[0513]
17b：ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(300mhz,dmso
‑
d6)δ10.13(s,1h),8.82(d,j＝4.7hz,1h),8.32
‑
8.04(m,2h),7.75
‑
7.60(m,3h),7.47
‑
7.31(m,3h),3.00
‑
2.80(m,1h),2.42
‑
1.57(m,14h),1.15(d,j＝6.5hz,3h)；
19
f nmr(282mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
112.22。
[0514]
将17
‑5’
(300毫克)进行手性制备，高压液相手性柱chiralpak ag,2.0x25.0cm；5μm；流动相a：正己烷(0.1％二乙胺)；流动相b：乙醇；检测：uv254纳米；流速：20毫升/分钟；15％b洗脱20分钟；rt1：7.6分钟；rt2：11.6分钟；得到两个产品：17c(rt1＝7.6分钟，20毫克，呈白色固体)和17d(rt2＝11.6分钟，20毫克，呈白色固体)。
[0515]
17c：ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.00(s,1h),8.86(d,j＝4.7hz,1h),8.25(dd,j＝11.9,2.8hz,1h),8.14(dd,j＝9.3,6.3hz,1h),7.72
‑
7.57(m,3h),7.50(d,j＝4.8hz,1h),7.37
‑
7.29(m,2h),2.80
‑
2.70(m,1h),2.36
‑
1.68(m,14h),1.10(d,j＝6.6hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
112.11。
[0516]
17d：ms(esi,m/z)463[m+1]
+
；1h nmr(400mhz,dmso
‑
d6)δ10.00(s,1h),8.86(d,j＝4.7hz,1h),8.25(dd,j＝12.2,2.8hz,1h),8.14(dd,j＝9.2,6.3hz,1h),7.71
‑
7.58(m,3h),7.50(d,j＝4.8hz,1h),7.37
‑
7.29(m,2h),2.80
‑
2.70(m,1h),2.36
‑
1.68(m,14h),1.10(d,j＝6.6hz,3h)；
19
f nmr(377mhz,dmso
‑
d6)δ
‑
112.11。
[0517]
通过单晶x
‑
射线衍射(仪器型号xtalab pro 007hf(mo)，制造商rigaku)分析确定化合物17a的立体构型。解析结果数据见表3；晶体结构见图3。
[0518]
表3：化合物17a的单晶解析数据
[0519][0520]
其他化合物可通过与上述实施例所示例的合成方法i
‑
xvii基本类似的方法制备。如下表4中是参照上述合成方法制备的部分化合物及其表征数据。
[0521]
表4
[0522]
[0523]
[0524]
[0525]
[0526]
[0527]
[0528]
[0529]
[0530]
[0531]
[0532]
[0533]
[0534]
[0535][0536]
生物学实施例
[0537]
hela细胞水平评价化合物对ido1的抑制活性
[0538]
hela细胞用emem完全培养基(90％emem，10％胎牛血清，1％pen/strep)进行培养。
[0539]
先将待测化合物用dmso稀释为10mm母液，接着继续用dmso进行3倍梯度倍比稀释，共稀释10个浓度。然后将5μl化合物加入到45μl培养基中作为中间稀释液。
[0540]
用细胞培养基收集hela细胞，将细胞接种于96孔细胞培养板，3000/孔/100μl。将稀释好的化合物加至细胞中，使dmso终浓度为0.1％。然后置37℃，5％co2培养箱中孵育30分钟。孵育结束后将ifn
‑
γ加入hela细胞中，ifn
‑
γ终浓度为10ng/ml。
[0541]
在37℃，5％co2培养箱中继续孵育48小时，孵育结束后每孔取140μl上清转移到新的96孔板中。然后每孔加入10μl的6.1n三氯乙酸并混匀，接着将板密封并在50℃条件下孵育30分钟。孵育结束后离心，2500rpm，10分钟。离心结束后每孔取100μl上清转移到一新的96孔测定板中，并与100μl 6％(w/v)的对二甲基氨基苯甲醛混合。犬尿氨酸生成量可以通过检测反应产物在480nm的吸光值确定。
[0542]
测定待测化合物各种浓度下的活性百分比且使用非线性回归评估ic
50
值。本发明实施例化合物的活性数据见下表5。
[0543]
hek293细胞水平评价化合物对ido1的抑制活性
[0544]
细胞为稳定表达人源ido1的flp
‑
in t
‑
rex
‑
293细胞，经过四环素诱导后可表达人源ido1。细胞用dmem完全培养基(90％dmem，10％胎牛血清，1％pen/strep,200μg/ml hygromycin b,15μg/ml blasticidin)进行培养。
[0545]
先将待测化合物用dmso稀释为10mm母液，接着继续用dmso进行3倍梯度倍比稀释，共稀释10个浓度。然后将5μl化合物加入到45μl培养基中作为中间稀释液。
[0546]
将细胞接种于96孔细胞培养板，25000/孔/100μl。将稀释好的化合物加至细胞中，使dmso终浓度为0.25％。然后置37℃，5％co2培养箱中孵育1小时。孵育结束后加入四环素诱导ido表达。
[0547]
在37℃，5％co2培养箱中继续孵育24小时，孵育结束后每孔取140μl上清转移到新的96孔板中。然后每孔加入10μl的6.1n三氯乙酸并混匀，接着将板密封并在50℃条件下孵育30分钟。孵育结束后离心，2500rpm，10分钟。离心结束后每孔取100μl上清转移到一新的96孔测定板中，并与100μl 6％(w/v)的对二甲基氨基苯甲醛混合。犬尿氨酸生成量可以通
过检测反应产物在480nm的吸光值确定。
[0548]
测定待测化合物各种浓度下的活性百分比且使用非线性回归评估ic50值。本发明实施例化合物的活性数据见下表5。
[0549]
表5
[0550]
[0551]
[0552]
[0553]