1.一种高产酸型槐糖脂的补料发酵方法,步骤如下:
(1)取槐糖脂生产菌株接种于培养基上,进行二次活化培养;
(2)取活化的单菌落接种至种子培养基培养得到种子液;
(3)将种子液接种至发酵培养基中,发酵培养基以酵母提取物为氮源,葡萄糖、菜籽油为碳源,无机盐组分为kh2po4、na2hpo4,cacl2和mgso4,葡萄糖、菜籽油初始浓度为30~90g/l;
在发酵罐中加入发酵培养基,进行发酵反应;
发酵反应时控制溶氧20%以上,葡萄糖自然消耗或补加葡萄糖维持浓度在30g/l以上;监控菜籽油浓度,在菜籽油浓度≤30g/l时补加60g菜籽油;
(4)发酵完成后,发酵液经高温处理后分离、纯化,得到槐糖脂。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,槐糖脂生产菌株为熊蜂生假丝酵母candidabombicolaatcc22214。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,将菌株在ypd琼脂平板上划线,平板在恒温培养箱中倒置培养24~48h后,挑取单菌落转接到ypd琼脂平板上进行二次活化,倒置培养24~48h至平板上长出清晰的单菌落。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,活化培养条件为:28~30℃,200rpm。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,按照体积比2~4%的接种量将步骤(2)制得的种子液接种到发酵培养基中。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,发酵培养基初始ph值为5.6~5.8,72h后ph控制为2.7~3.0。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,发酵罐搅拌速率为400~600rpm。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,发酵温度为25℃。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,发酵时间为144~192h。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,发酵结束后将发酵液经115℃高压灭菌处理后倒入分液漏斗中,静置使未利用油脂、发酵液、槐糖脂分层。