技术特征：
1.一种澄清溶瘤痘苗病毒收获液的方法，该方法包括：采用核酸酶和胰酶在tris-hcl缓冲液体系中对溶瘤痘苗病毒细胞进行裂解和酶解处理，释放病毒，得到裂解和酶解处理后的样品；裂解和酶解处理后的样品经过微滤，得到澄清后的溶瘤痘苗病毒收获液。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述溶瘤痘苗病毒细胞为感染溶瘤痘苗病毒的宿主细胞；优选地，所述宿主细胞为hela s3；优选地，所述痘苗病毒为痘苗病毒lister。3.根据权利要求1或2所述的方法，该方法还包括：采用离心或深层过滤方法，从培养溶瘤痘苗病毒细胞的培养液中去除培养基，收集得到溶瘤痘苗病毒细胞。4.根据权利要求1所述的方法，其中，进行裂解和酶解处理的过程选自以下方式之一：方式一：(1)用含有核酸酶的tris-hcl缓冲液重悬溶瘤痘苗病毒细胞，进行裂解处理，释放病毒，得到裂解样品；(2)向所述裂解样品中加入胰酶，继续酶解处理，得到裂解和酶解处理后的样品；方式二：用含有核酸酶和胰酶的tris-hcl缓冲液重悬溶瘤痘苗病毒细胞，同时进行裂解和酶解处理，得到裂解和酶解处理后的样品。5.根据权利要求1或4所述的方法，其中，核酸酶在所述缓冲液中的含量为5-40u/ml，优选10-20u/ml；优选地，所述核酸酶为benzonase。6.根据权利要求1或4所述的方法，其中，所述tris-hcl在缓冲液中的含量为1-50mm，优选为10mm。7.根据权利要求1或6所述的方法，其中，所述缓冲液的ph为7.0-10.0，优选ph为8.0-10.0，更优选ph为9.0-10.0。8.根据权利要求1或4所述的方法，其中，进行裂解处理的条件为：常温处理1-2h。9.根据权利要求1或4所述的方法，其中，进行酶解处理的条件为：胰酶浓度为0.05％-2.5％trypsin-edta；胰酶加入体积为样品体积的1/10-1/320，优选1/20-1/160，更优选1/40-1/80；常温处理1-3h。10.根据权利要求1所述的方法，其中，微滤条件为：0.45微米滤膜过滤。
技术总结
本发明提供了一种澄清溶瘤痘苗病毒收获液的方法，该方法包括：采用核酸酶和胰酶在Tris-HCl缓冲液体系中对溶瘤痘苗病毒细胞进行裂解和酶解处理，释放病毒，得到裂解和酶解处理后的样品；裂解和酶解处理后的样品经过微滤，得到澄清后的溶瘤痘苗病毒收获液。本发明操作简单，条件温和，不仅能澄清痘苗病毒收获液，显著提高病毒过滤回收率，还能提高核酸酶的酶切效果，大幅降低宿主DNA残留。大幅降低宿主DNA残留。大幅降低宿主DNA残留。
技术研发人员：曾宇明 段清
受保护的技术使用者：东曜药业有限公司
技术研发日：2022.09.05
技术公布日：2022/11/2