克服着床前和着床后表观遗传障碍的体细胞核移植技术

文档序号:37300141发布日期:2024-03-13 20:48阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种体细胞克隆非人哺乳动物制备方法,其特征在于,包括步骤:

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的激活为使用激活处理剂进行激活,所述的激活剂包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的组蛋白去乙酰化酶抑制剂包括:tsa、scriptaid、或其组合。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的重编程处理使用重编程处理剂进行,所述的重编程处理剂包括:

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的h3k9me3组蛋白去甲基化酶包括:kdm4d、kdm4b、或其组合。

6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的h3k4me3组蛋白去甲基化酶包括:kdm5b。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(iii)中所述的四倍体胚胎细胞来源于正常受精细胞。

8.一种试剂盒,其特征在于,包括:

9.一种如权利要求8所述的试剂组合的用途,其特征在于,用于制备一试剂盒,所述试剂盒用于制备体细胞克隆非人哺乳动物。

10.一种体细胞克隆非人哺乳动物,其特征在于,所述体细胞克隆非人哺乳动物使用如权利要求1-7中任一项所述的方法制备。


技术总结
本发明提供了一种高效且简便的体细胞核移植技术体系。本发明通过添加TSA药物处理克隆胚胎,同时共注射H3K9me3组蛋白去甲基化酶Kdm4d和H3K4me3组蛋白去甲基化酶Kdm5b提升核移植胚胎的囊胚率。同时采用四倍体补偿技术克服了母源印记丢失。本发明的方法现了克隆小鼠30%的体细胞核移植胚胎出生率,具有在体细胞克隆领域广泛应用的前景。

技术研发人员:李雅梅,陆发隆,孙强,刘真
受保护的技术使用者:中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心
技术研发日:
技术公布日:2024/3/12
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