一株蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株及其生产方法和应用

文档序号:34877334发布日期:2023-07-25 09:06阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一株蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株,其特征在于,所述菌株为解朊金黄杆菌chryseobacteriumproteolyticum 0326-509,保藏编号为cgmcc no.25600,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2022年8月26日,其16s rrna序列如seq id no.1所示,其为革兰氏阴性细菌,不产芽孢,不运动,菌落呈圆形,金黄色或橘黄色。

2.利用如权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株发酵制备蛋白质谷氨酰胺酶的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株的菌液量为80-120μl,活化温度为30-40℃,活化时间为15-18h。

4.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述接种环直径为2-4mm,菌体量为1-4环,摇床温度为28-37℃,摇床转速为180-250rpm,培养时间为6-10h。

5.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述种子培养基组成成分及其含量为:安琪酵母蛋白胨为8-12g/l,安琪酵母粉fm802为1.8-2.2g/l,七水硫酸镁为2-2.2g/l;所述种子培养基的ph=6.8-7.2。

6.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,所述活化后的种子液的接种量为5-10%(v/v),发酵培养基装液量为20-30ml,发酵温度为28-37℃,摇床转速为180-250rpm,培养时间为14-18h。

7.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,所述发酵培养基的组成成分及含量为:安琪酵母蛋白胨为18-22g/l,磷酸二氢钾为4.8-5.0g/l,磷酸氢二钠为0.15-0.18g/l,七水硫酸镁为6.7-6.8g/l,七水硫酸亚铁为0.04-0.06g/l。

8.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述方法制备得到的蛋白质谷氨酰胺酶为作用温和、特异性高、安全可食用的新型脱酰胺酶,其活性可达7.0u/ml。

9.一种按如权利要求2-8之任一项所述方案制备得到的蛋白质谷氨酰胺酶。

10.如权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株、或如权利要求2-8之任一项所述方法在制备蛋白质谷氨酰胺酶中的应用。


技术总结
本发明公开了一株蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株以及利用该菌株制备蛋白质谷氨酰胺酶的方法及其应用。本发明公开了一株蛋白质谷氨酰胺酶高产菌株,该菌株被命名为解朊金黄杆菌(Chryseobacteriumproteolyticum)0326‑509,该菌株于2022年8月26日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌株保藏编号为CGMCC No.25600,其菌落呈圆形,突起,边缘整齐,金黄色或橘黄色,表面光滑、有粘性。本发明公开的该菌株发酵制备蛋白质谷氨酰胺酶的方法,得到发酵上清液蛋白质谷氨酰胺酶活性可达7.0U/mL。采用本发明的菌株和生产方法及应用,可以实现蛋白质谷氨酰胺酶的工业规模化生产,具有广泛前景。

技术研发人员:高红亮,戴甜,吴佳婧,蒋德明,贾彩凤,邹春静,常忠义
受保护的技术使用者:华东师范大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/13
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