山新杨耐低磷基因PdPHT1-2及其编码蛋白和应用

本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及一种山新杨耐低磷基因pdpht1-2及其编码蛋白和应用。

背景技术：

1、山新杨是以山杨(p.davidiana)为母本、新疆杨(p.alba var.pyramidalis)为父本杂交得到的优良树种，生长速度较快，适应性强，抗逆性好，果序自然脱落不飞絮，具有较高的经济价值和观赏价值。

2、植物pht1磷转运蛋白家族成员在土壤pi(无机磷)吸收和植物体内pi动员中起着重要作用。由于大多数土壤的有效磷浓度为1-10um，远低于植物正常生长发育所需的浓度，因此，植物在有效磷浓度偏低条件下的磷素吸收能力会影响其对低磷胁迫的耐受性。磷酸盐的获取和转运在膜内外存在着较悬殊的pi浓度差，即使是胞内的pi浓度为胞外浓度的一千倍以上，植物仍然可以通过高亲和磷转运蛋白获得pi，从而缓解由于土壤有效磷浓度低而造成的植物缺磷情况，目前山新杨中对pht1家族基因探索较少。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本发明所要解决的第一技术问题在于提供一种山新杨耐低磷基因pdpht1-2；本发明所要解决的第二技术问题在于提供山新杨耐低磷基因pdpht1-2编码的蛋白质；本发明所要解决的第三技术问题在于提供山新杨耐低磷基因pdpht1-2在提高植物耐低磷性能中的应用。

2、为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：

3、一种山新杨耐低磷基因pdpht1-2，其核苷酸序列如seq id no.1所示，或者为编码seq id no.2的dna序列。

4、所述的山新杨耐低磷基因pdpht1-2编码的蛋白质，其氨基酸序列如seq id no.2所示。

5、在seq id no.2所示的蛋白质的n端或/和c端连接标签得到的融合蛋白质，也属于本发明的保护范围。

6、含有所述的山新杨耐低磷基因pdpht1-2的重组表达载体或重组菌株。

7、所述的山新杨耐低磷基因pdpht1-2在提高植物耐低磷性能中的应用。

8、进一步的，利用gateway技术将山新杨耐低磷基因pdpht1-2依次构建到入门载体和目的载体上，得到植物表达载体，然后通过农杆菌介导的遗传转化法转化植物，筛选并鉴定最终获得具有耐低磷性能的转基因植物。

9、进一步的，所述植物包括拟南芥和山新杨。

10、进一步的，植物表达载体为pbi121-pdpht1-2-3ha。

11、相比于现有技术，本发明的有益效果为：

12、本发明克隆了山新杨pdpht1家族基因成pdpht1-2基因，构建植物表达载体pbi121-pdpht1-2-3ha，通过花序浸染法转入拟南芥中，最终获得了过表达山新杨pdpht1-2基因的拟南芥转基因植株，并进行迭代筛选获得了纯合体株系并进行表型观测，发现在各磷浓度处理梯度下，转基因植株与野生型对照：地上部分长势均高于野生型，根系更长、密度更大，鲜重增加量明显，为杨树磷高效分子改良育种提供理论基础。

技术特征：

1.一种山新杨耐低磷基因pdpht1-2，其核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.权利要求1所述的山新杨耐低磷基因pdpht1-2编码的蛋白质，其特征在于，所述蛋白质的氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.含有权利要求1所述的山新杨耐低磷基因pdpht1-2的重组表达载体或重组菌株。

4.权利要求1所述的山新杨耐低磷基因pdpht1-2在提高植物耐低磷性能中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，利用gateway技术将山新杨耐低磷基因pdpht1-2依次构建到入门载体和目的载体上，得到植物表达载体，然后通过农杆菌介导的遗传转化法转化植物，筛选并鉴定最终获得具有耐低磷性能的转基因植物。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述植物包括拟南芥和山新杨。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，植物表达载体为pbi121-pdpht1-2-3ha。

技术总结
本发明公开了一种山新杨耐低磷基因PdPHT1‑2及其编码蛋白和应用，属于植物分子生物学领域。本发明克隆了山新杨PdPHT1家族基因成PdPHT1‑2基因，构建植物表达载体pBI121‑PdPHT1‑2‑3HA，通过花序浸染法转入拟南芥中，最终获得了过表达山新杨PdPHT1‑2基因的拟南芥转基因植株，并进行迭代筛选获得了纯合体株系并进行表型观测，发现在各磷浓度处理梯度下，转基因植株与野生型对照：地上部分长势均高于野生型，根系更长、密度更大，鲜重增加量明显，为杨树磷高效分子改良育种提供理论基础。

技术研发人员：陈英,王浩然,何青青,刘传强,张雪梨,王芝懿
受保护的技术使用者：南京林业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13