样本前处理的溶液及方法与流程

本发明属于医学检测，更具体地，本发明涉及一种样本前处理的溶液及方法。

背景技术：

1、临床上存在多种类型的病原微生物病原体样本，比如痰液、浓稠肺泡灌洗液、粪便、脓液分泌物、血液、干咽拭子、干生殖道样本、肛拭子等，这些样本类型粘性大或存在颗粒物，一般都需要进行前处理，才能进行下一步的常规核酸提取或微流控装置提取等实验操作。

2、现有对样本进行前处理的方法通常是，针对每一种具体的微生物病原体采用特定的处理方法。例如针对痰液，一般用液化剂如4%氢氧化钠进行处理，中间包含加热步骤，这种方法处理时间在30分钟左右，耗时久，且依然存在部分样本难以液化的问题，另有研究表明，用4%氢氧化钠处理后的样本，还会影响到后续实验如核酸提取等，使后续实验操作变得麻烦。针对粪便样本，因存在大量的颗粒物，常用的处理方法是进行低速离心或静置一段时间，取上清，这种方法需要严格控制离心速度或静置时间，因为病原体会沉降，取上清会影响检出结果的不准确。针对血液样本，因容易发生凝固，血液样本若不做处理，很可能会造成微流控通道的堵塞，使得仪器无法正常运行，通常用红细胞裂解液进行裂解。其余样本如浓稠肺泡灌洗液，脓液分泌物，生殖道样本等都存在粘性物质，实验过程难以吸取，且因为拉丝等，容易造成实验室污染，一般会使用相关试剂进行液化，或者是持续振荡后直接取样，效果不好，且容易产生取样误差。

3、现有对样本进行前处理的方法，只能针对每种特定的样本配制特定的溶液，进行特定的处理，操作复杂，且样本处理效果不好，处理后的样本也不能有效进行保存。因此，提供一种可以对多种样本进行处理的通用方法，非常有意义。

技术实现思路

1、基于此，本发明的目的在于提供一种样本前处理的溶液及其制备方法和样本前处理的方法，该样本前处理的溶液能实现对多种样本进行前处理。

2、实现上述发明目的的技术方案包括如下。

3、本发明的第一个方面，是提供了一种样本前处理的溶液，所述溶液包括以下组分：盐酸胍2wt%-5wt%、edta 2 mm~10mm、枸橼酸钠1%~5%、氢氧化钠0.5wt~4wt%、n-乙酰-l半胱氨酸0.5wt%~3wt%、海藻糖2wt%~10wt%。

4、本发明的第二个方面，是提供了上述样本前处理的溶液的制备方法，包括以下步骤：将各组分混合后，调节ph 8~11，即得。

5、本发明的第三个方面，是提供了一种样本前处理的方法，包括以下步骤：使用上述样本前处理的溶液浸泡样本后，静置，即可。

6、本发明的样本前处理的溶液，能实现对各种复杂样本进行前处理(灭活样本，防止血液凝固，液化粘性样本如痰液等)，且经前处理后，样本核酸提取不受影响，质量高；本发明的样本前处理方法，耗时短，处理后的样本可以有效保存，无需转管。

技术特征：

1.一种样本前处理的溶液，其特征在于，所述溶液包括以下组分：盐酸胍2wt%-5wt%、edta 2 mm~10mm、枸橼酸钠1%~5%、氢氧化钠0.5wt~4wt%、n-乙酰-l半胱氨酸0.5wt%~3wt%、海藻糖2wt%~10wt%。

2.根据权利要求1所述的样本前处理的溶液，其特征在于，所述溶液包括以下组分：盐酸胍 3wt%-4wt%、edta 4 mm~8 mm、枸橼酸钠 2%~4%、氢氧化钠 1wt~3wt%、n-乙酰-l半胱氨酸1wt%~2wt%、海藻糖 4wt%~8wt%。

3.根据权利要求2所述的样本前处理的溶液，其特征在于，所述溶液包括以下组分：盐酸胍 3.4wt%-3.6wt%、edta 5mm~6mm、枸橼酸钠 2.5%~3.5%、氢氧化钠 1.5wt~2.5wt%、n-乙酰-l半胱氨酸1.4wt%~1.6wt%、海藻糖5wt%~6wt%。

4.权利要求1~3任一项所述的样本前处理的溶液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将各组分混合后，调节ph 8~11，即得。

5.一种样本前处理的方法，其特征在于，包括以下步骤：使用权利要求1~3任一项所述的样本前处理的溶液浸泡样本后，静置，即可。

6.根据权利要求5所述的样本前处理的方法，其特征在于，所述样本包括液态样本或干样本。

7.根据权利要求6所述的样本前处理的方法，其特征在于，所述液态样本包括痰液、浓稠肺泡灌洗液、脓液分泌物、血液或粪便；所述干样本包括咽拭子、生殖道样本或肛拭子。

8.根据权利要求6所述的样本前处理的方法，其特征在于，所述液态样本的处理方法包括以下步骤：将液态样本与样本前处理的溶液按照1：1~4的体积比进行混合后，静置15 min~30 min，再将样本放于过滤装置中进行过滤、收集过滤液，即得。

9.根据权利要求6所述的样本前处理的方法，其特征在于，所述干样本的处理方法包括以下步骤：将样本前处理的溶液加入干样本中，至完全浸泡干样本，静置8 min~12 min，再将样本放于过滤装置中进行过滤、收集过滤液，即得。

10.根据权利要求8或9所述的样本前处理的方法，其特征在于，所述过滤装置包括收集管及置于收集管内的过滤器，所述收集管具有管盖，所述过滤器包括孔径为5-25μm的滤膜。

技术总结
本发明公开了一种样本前处理的溶液及方法，所述溶液包括以下组分：盐酸胍2wt%‑5wt%、EDTA 2 mM~10mM、枸橼酸钠1%~5%、氢氧化钠0.5wt~4wt%、N‑乙酰‑L半胱氨酸0.5wt%~3wt%、海藻糖2wt%~10wt%。本发明的样本前处理的溶液，能实现对各种复杂样本进行前处理，且经前处理后，样本核酸提取不受影响，质量高；本发明的样本前处理方法，耗时短，处理后的样本可以有效保存，无需转管。

技术研发人员：李改玲,刘二凯,王谷丰
受保护的技术使用者：深圳赛陆医疗科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13