一种甲基化位点在子宫内膜异位症诊断和分型中的应用的制作方法

本发明属于分子诊断，具体涉及一种甲基化位点在子宫内膜异位症诊断和分型中的应用。

背景技术：

1、子宫内膜异位症表现为子宫内膜组织存活于宫腔外组织器官、并受激素调节呈月经周期性的生长和脱落，往往伴随局部炎症、疼痛、并导致不孕不育等并发症，患者生育率会降低至健康妇女的10％以下。子宫内膜病变可分为三种类型：浅表腹膜病变、卵巢子宫内膜异位症或深部浸润性子宫内膜异位症。然而，现有的检查手段例如超声扫描、腹腔镜检和核磁共振(mri)等对微小病灶检出率有限，对于复杂部位的子宫内膜异位，例如回盲子宫内膜异位和卵巢植入物，诊断的金标准mri也会出现漏诊和误诊。腹腔镜检对于深部组织异位的诊断有局限性且费用昂贵，从而限制了该方法的使用。目前已报道子宫内膜异位症相关标记物有多种，如血清学标记物ca125和il-6、子宫内膜神经元免疫组化标志物pgp9.5、尿液vdbp和nne、内膜组织标记物p450以及相关的循环microrna等。由于缺乏高特异性和/或高灵敏度，上述标记物均不能作有效诊断的分子标记物，且尚缺乏同时能够对子宫内膜异位症进行分型的分子标记物。因此，寻找高特异性、高灵敏度的子宫内膜异位症检测和分型标记物，完善针对子宫内膜异位症的诊断方法显得尤为重要。

技术实现思路

1、基于此，本发明的目的在于提供一种甲基化位点在子宫内膜异位症诊断和分型中的应用，所述甲基化位点为chr21：21632839，其在作为子宫内膜异位症诊断和分型的分子标记物时具有较好的灵敏度和特异性，准确率高。

2、为达到上述目的，本发明采用如下技术方案。

3、甲基化位点chr21：21632839作为分子标记物在制备和/或筛选检测腺肌症的试剂中的应用；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

4、本发明还提供了甲基化位点chr21：21632839作为分子标记物在制备和/或筛选检测卵巢子宫内膜异位症的试剂中的应用；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seqid no.1所示的序列中的第75位。

5、本发明还提供了甲基化位点chr21：21632839作为分子标记物在制备和/或筛选鉴别腺肌症和卵巢子宫内膜异位症的试剂中的应用；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

6、本发明还提供了检测甲基化位点chr21：21632839的甲基化水平的试剂在制备腺肌症检测产品中的应用；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

7、本发明还提供了检测甲基化位点chr21：21632839的甲基化水平的试剂在制备卵巢子宫内膜异位症检测产品中的应用；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seqid no.1所示的序列中的第75位。

8、本发明还提供了检测甲基化位点chr21：21632839的甲基化水平的试剂在制备鉴别腺肌症和卵巢子宫内膜异位症的产品中的应用；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

9、本发明还提供了一种子宫内膜异位症检测或分型试剂盒，所述试剂盒包含检测甲基化位点chr21：21632839在生物样本中的甲基化水平的试剂；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

10、在一些实施例中，所述试剂是应用于以下检测方法中的至少一种的试剂：ddpcr法、甲基化测序法、甲基化芯片法、qpcr法、甲基化特异pcr。

11、在一些实施例中，所述试剂是应用于ddpcr法的检测试剂，包括：如seq id no.2所示的上游引物、如seq id no.3所示的下游引物、如seq id no.4所示的甲基化探针和如seqid no.5所示的非甲基化探针。

12、在一些实施例中，所述生物样本为组织样本。

13、本发明首次通过研究证实，与在位子宫内膜组织相比，甲基化位点chr21：21632839在腺肌症组织和卵巢子宫内膜异位组织中的甲基化水平显著降低，且在腺肌症组织中的甲基化水平显著显著高于卵巢子宫内膜异位组织。进一步地，roc曲线分析结果显示甲基化位点chr21：21632839在用于诊断腺肌症时，auc为0.913，灵敏度为83.3％，特异性为91.7％；在用于鉴别卵巢子宫内膜异位症和腺肌症时，auc为0.981，灵敏度为100％，特异性为89.6％；在用于诊断卵巢子宫内膜异位症时，auc为0.991，灵敏度为95.8％，特异性为100％。说明甲基化位点chr21：21632839可作为子宫内膜异位症诊断和分型的特异性分子标记物，诊断灵敏度和特异性好，准确率高。本发明为子宫内膜异位症的诊断和分型提供了新的特异性甲基化标记物，完善了子宫内膜异位症的诊断方法，应用前景广阔。

技术特征：

1.甲基化位点chr21：21632839作为分子标记物在制备和/或筛选检测腺肌症的试剂中的应用，其特征在于，所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

2.甲基化位点chr21：21632839作为分子标记物在制备和/或筛选检测卵巢子宫内膜异位症的试剂中的应用，其特征在于，所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq idno.1所示的序列中的第75位。

3.甲基化位点chr21：21632839作为分子标记物在制备和/或筛选鉴别腺肌症和卵巢子宫内膜异位症的试剂中的应用，其特征在于，所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

4.检测甲基化位点chr21：21632839的甲基化水平的试剂在制备腺肌症检测产品中的应用，其特征在于，所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

5.检测甲基化位点chr21：21632839的甲基化水平的试剂在制备卵巢子宫内膜异位症检测产品中的应用，其特征在于，所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq idno.1所示的序列中的第75位。

6.检测甲基化位点chr21：21632839的甲基化水平的试剂在制备鉴别腺肌症和卵巢子宫内膜异位症的产品中的应用，其特征在于，所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

7.一种子宫内膜异位症检测或分型试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含检测甲基化位点chr21：21632839在生物样本中的甲基化水平的试剂；所述甲基化位点chr21：21632839为chr21上如seq id no.1所示的序列中的第75位。

8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂是应用于以下检测方法中的至少一种的试剂：ddpcr法、甲基化测序法、甲基化芯片法、qpcr法、甲基化特异pcr。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂是应用于ddpcr法的检测试剂，包括：如seq id no.2所示的上游引物、如seq id no.3所示的下游引物、如seq id no.4所示的甲基化探针和如seq id no.5所示的非甲基化探针。

10.如权利要求7～9任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述生物样本为组织样本。

技术总结
本发明提供了一种甲基化位点在子宫内膜异位症诊断和分型中的应用。本发明首次通过研究证实，与在位子宫内膜组织相比，甲基化位点chr21：21632839在腺肌症组织和卵巢子宫内膜异位组织中的甲基化水平显著降低，且在腺肌症组织中的甲基化水平显著显著高于卵巢子宫内膜异位组织。进一步地，ROC曲线分析结果显示，甲基化位点chr21：21632839在用于诊断腺肌症，卵巢子宫内膜异位症，鉴别腺肌症和卵巢子宫内膜异位症时，AUC均高达0.9以上。说明甲基化位点chr21：21632839可作为子宫内膜异位症诊断和分型的特异性分子标记物，诊断灵敏度和特异性好，准确率高。

技术研发人员：全庆丽
受保护的技术使用者：广东省生殖科学研究所（广东省生殖医院）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13