培养并使多能细胞分化为肌肉祖细胞或成熟肌肉细胞的方法和包含所述细胞的组合物

文档序号:36002458发布日期:2023-11-16 16:20阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于产生体节的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,还包括向步骤(a)的培养基中添加胰岛素、knock-out血清替代物、运铁蛋白-硒和bmp4中的一种或更多种。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法,其中所述wnt激活剂选自由以下组成的组:chir99021、wnt3a和rspo3。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其中所述向培养基中添加至少一种wnt激活剂在获得所述球形聚集体之后12至36小时内进行。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中所述去除所述wnt激活剂在8至36小时的范围内进行。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法,还包括在包含中胚层细胞和内胚层细胞的所述聚集体出现后,向所述培养基中添加至少一种nodal抑制剂。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其中所述细胞外基质或其组分的量在1%至15%vol/vol的范围内。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法,还包括在步骤(d)中添加选自由以下组成的组的至少一种化合物:wnt激活剂和bmp抑制剂。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,还包括在所述获得多于一个体节后去除细胞外基质或其组分。

10.一种用于产生肌源性祖细胞的方法,所述方法包括:

11.根据权利要求所述10的方法,其中所述一种或更多种生长因子包括hgf、igf和fgf2。

12.根据权利要求10-11中任一项所述的方法,其中步骤(a)在悬浮液中进行。

13.根据权利要求10-12中任一项所述的方法,还包括向步骤(d)的培养基中添加选自以下的化合物中的至少一种:bmp抑制剂和wnt激活剂。

14.根据权利要求10-13中任一项所述的方法,还包括在步骤(d)之前去除所述细胞外基质或其组分。

15.根据权利要求10-14中任一项所述的方法,其中每种生长因子的浓度在1ng/ml至25ng/ml的范围内。

16.根据权利要求15所述的方法,其中所述一种或更多种生长因子是igf,并且igf的浓度在1ng/ml至5ng/ml的范围内。

17.根据权利要求10-16中任一项所述的方法,其中所述肌源性祖细胞包括成肌细胞和肌细胞。

18.根据权利要求10-17中任一项所述的方法,还包括向步骤(a)的培养基中添加胰岛素、knock-out血清替代物、运铁蛋白-硒和bmp4中的一种或更多种。

19.根据权利要求10-18中任一项所述的方法,其中所述wnt激活剂选自:chir99021、rspo3和wnt3a。

20.根据权利要求10-19中任一项所述的方法,其中所述向培养基中添加至少一种wnt激活剂在获得所述球形聚集体之后12至36小时内进行。

21.根据权利要求10-20中任一项所述的方法,其中所述去除所述wnt激活剂在8至36小时的范围内进行。

22.根据权利要求10-21中任一项所述的方法,还包括在包含中胚层细胞和内胚层细胞的所述聚集体出现后,向所述培养基中添加至少一种nodal抑制剂。

23.根据权利要求10-22中任一项所述的方法,其中所述细胞外基质或其组分的量在1%至15%vol/vol的范围内。


技术总结
本文提供了包含成熟肌肉祖细胞和/或成熟肌肉细胞的人工培养体节、获得其的方法和用于快速、大规模生产包含成熟肌肉细胞的培养肉类的方法。

技术研发人员:伊夫塔赫·纳赫曼,加亚·萨维安
受保护的技术使用者:特拉维夫大学拉莫特有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/16
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