1.一种重组蛋白,所述重组蛋白包含(i)结合部分和(ii)药物分子;
2.根据权利要求1所述的重组蛋白,其中所述结合部分包含抗体、替代性支架或多肽。
3.根据权利要求1或2所述的重组蛋白,其中所述结合部分包含免疫球蛋白分子或其片段。
4.根据权利要求1或2所述的重组蛋白,其中所述结合部分包含非免疫球蛋白分子。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的重组蛋白,其中所述结合部分包含衍生自单克隆抗体、多克隆抗体、重组抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化抗体、单结构域抗体、重链可变结构域(vh)、轻链可变结构域(vl)或可变结构域(vhh)的抗原结合结构域。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的重组蛋白,其中所述结合部分包含抗原结合结构域,所述抗原结合结构域衍生自以下项或与以下项相关:阿德耐汀、单抗体、亲和体、阿菲林、阿菲默、适体、阿非汀、α抗体、抗运载蛋白、重复蛋白结构域、犰狳重复结构域、阿去默、阿维默、锚蛋白重复结构域、非诺莫、打结素、库尼兹结构域或t细胞受体(tcr)。
7.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子的所述生物活性是所述药物分子与生物靶标的结合。
8.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子的所述生物活性是酶活性。
9.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中当将所述重组蛋白施用于哺乳动物时,所述肽接头在所述蛋白酶切割位点处的切割允许所述药物分子从所述结合部分释放。
10.根据权利要求9所述的重组蛋白,其中所述哺乳动物是人。
11.根据权利要求9和10中任一项所述的重组蛋白,其中所述肽接头的所述切割发生在肿瘤组织中。
12.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述蛋白酶切割位点是被肿瘤组织中存在的蛋白酶识别的位点。
13.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述结合部分以小于约1μm,诸如小于约1μm、小于约500nm、小于约250nm、小于约100nm或小于约50nm的解离常数(kd)结合所述药物分子。
14.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述结合部分以约1μm与约10pm之间,诸如约1μm与约10pm之间、约1μm与约20pm之间、约1μm与约50pm之间或约1μm与约100pm之间的离解常数(kd)结合所述药物分子。
15.根据权利要求13或14所述的重组蛋白,其中所述解离常数(kd)是在磷酸盐缓冲盐水(pbs)中测量的。
16.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述结合部分包含经设计的锚蛋白重复结构域。
17.根据权利要求16所述的重组蛋白,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域包含锚蛋白重复模块,所述锚蛋白重复模块包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:(1)seq id no:45至64,以及(2)其中seq id no:45至64中的任一者中的至多9个氨基酸被其他氨基酸取代的序列。
18.根据权利要求16和17中任一项所述的重组蛋白,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:(1)seqid no:1至12,以及(2)与seq id no:1至12中的任一者具有至少85%氨基酸序列同一性的序列。
19.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含抗体、替代性支架或多肽。
20.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含免疫球蛋白分子或其片段。
21.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含非免疫球蛋白分子。
22.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含衍生自单克隆抗体、多克隆抗体、重组抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化抗体、单结构域抗体、重链可变结构域(vh)、轻链可变结构域(vl)或可变结构域(vhh)的抗原结合结构域。
23.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含抗原结合结构域,所述抗原结合结构域衍生自以下项或与以下项相关:阿德耐汀、单抗体、亲和体、阿菲林、阿菲默、适体、阿非汀、α抗体、抗运载蛋白、重复蛋白结构域、犰狳重复结构域、阿去默、阿维默、锚蛋白重复结构域、非诺莫、打结素、库尼兹结构域或t细胞受体(tcr)。
24.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子对cd3具有结合特异性。
25.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含至少一个对肿瘤相关抗原(taa)具有结合特异性的结合结构域。
26.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含经设计的锚蛋白重复结构域。
27.根据权利要求26所述的重组蛋白,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域对cd3具有结合特异性。
28.根据权利要求26和27中任一项所述的重组蛋白,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:(1)seqid no:13至17,以及(2)与seq id no:13至17中的任一者具有至少85%氨基酸序列同一性的序列。
29.根据权利要求27和28中任一项所述的重组蛋白,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域以小于约100nm的解离常数(kd)结合至cd3。
30.根据权利要求1至25中任一项所述的重组蛋白,其中所述药物分子包含抗体。
31.根据权利要求30所述的重组蛋白,其中所述抗体对cd3具有结合特异性。
32.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述药物分子是t细胞接合剂药物分子(tce)。
33.根据权利要求32所述的重组蛋白,其中所述tce包含结合至cd3的结合结构域并且还包含结合肿瘤相关抗原(taa)的结合结构域。
34.根据权利要求32和33中任一项所述的重组蛋白,其中所述结合部分与所述tce药物分子的结合抑制所述tce药物分子与t细胞的结合和/或t细胞的活化。
35.根据权利要求32至34中任一项所述的重组蛋白,其中所述tce是双特异性或多特异性抗体。
36.根据权利要求32至34中任一项所述的重组蛋白,其中所述tce是双特异性或多特异性锚蛋白重复蛋白。
37.根据权利要求33至36中任一项所述的重组蛋白,其中所述结合至cd3的结合结构域位于所述结合肿瘤相关抗原(taa)的结合结构域的c-末端侧。
38.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述结合部分是所述药物分子的抗独特型结合物。
39.根据权利要求书38所述的重组蛋白,其中所述结合部分是对cd3具有结合特异性的所述经设计的锚蛋白重复结构域的抗独特型结合物。
40.根据权利要求书38所述的重组蛋白,其中所述结合部分是对cd3具有结合特异性的所述抗体的抗独特型结合物。
41.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,其中所述结合部分、所述药物分子和所述肽接头从n-末端至c-末端按以下格式排列:药物分子–肽接头–结合部分。
42.根据权利要求1至41中任一项所述的重组蛋白,其中所述结合部分、所述结合至cd3的结合结构域、所述结合肿瘤相关抗原(taa)的结合结构域和所述肽接头从n-末端至c-末端按以下格式排列:结合肿瘤相关抗原(taa)的结合结构域–结合至cd3的结合结构域–肽接头–结合部分。
43.根据任一前述权利要求所述的重组蛋白,所述重组蛋白还包含延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂。
44.根据权利要求43所述的重组蛋白,其中所述延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂具有对血清白蛋白的结合特异性。
45.根据权利要求44所述的重组蛋白,其中所述延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂包含对血清白蛋白具有结合特异性的经设计的锚蛋白重复结构域。
46.根据权利要求45所述的重组蛋白,其中所述对血清白蛋白具有结合特异性的经设计的锚蛋白重复结构域包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:(1)seq id no:65至67,以及(2)与seq id no:65至67中的任一者具有至少85%氨基酸序列同一性的序列。
47.根据权利要求43至46中任一项所述的重组蛋白,其中所述延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂与所述结合部分位于所述肽接头的同一侧。
48.根据权利要求47所述的重组蛋白,其中所述结合部分和所述延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂均位于所述肽接头的c-末端侧。
49.根据权利要求43至47中任一项所述的重组蛋白,其中所述延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂位于所述结合部分的c-末端侧。
50.根据权利要求43至49中任一项所述的重组蛋白,其中所述结合部分、所述结合至cd3的结合结构域、所述结合肿瘤相关抗原(taa)的结合结构域、所述肽接头和所述延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂从n-末端至c-末端按以下格式排列:结合肿瘤相关抗原(taa)的结合结构域–结合至cd3的结合结构域–肽接头–结合部分–延长所述重组蛋白在哺乳动物中的血清半衰期的药剂。
51.一种核酸,所述核酸编码根据前述权利要求中任一项所述的重组蛋白。
52.一种宿主细胞,所述宿主细胞包含根据权利要求51所述的核酸分子。
53.一种制备根据权利要求1至50中任一项所述的重组蛋白的方法,所述方法包括在其中表达所述重组蛋白的条件下培养根据权利要求52所述的宿主细胞。
54.根据权利要求53所述的方法,其中所述宿主细胞是原核宿主细胞。
55.根据权利要求53所述的方法,其中所述宿主细胞是真核宿主细胞。
56.一种药物组合物,所述药物组合物包含根据权利要求1至50中任一项所述的重组蛋白或根据权利要求51所述的核酸,并且另外包含药学上可接受的载剂或赋形剂。
57.根据权利要求1至50中任一项所述的重组蛋白、根据权利要求51所述的核酸或根据权利要求56所述的药物组合物,所述重组蛋白、所述核酸或所述药物组合物在疗法中使用。
58.根据权利要求57所述使用的重组蛋白、核酸或药物组合物,所述使用的重组蛋白、核酸或药物组合物在治疗增殖性疾病中使用,任选地其中所述增殖性疾病是癌症。
59.一种治疗方法,所述方法包括向有需要的受试者施用根据权利要求1至50中任一项所述的重组蛋白、根据权利要求51所述的核酸或根据权利要求56所述的药物组合物的步骤。
60.根据权利要求59所述的方法,其中所述方法是治疗增殖性疾病的方法,任选地其中所述增殖性疾病是癌症。
61.一种在有需要的受试者中活化t细胞的方法,所述方法包括向所述受试者施用根据权利要求1至50中任一项所述的重组蛋白、根据权利要求51所述的核酸或根据权利要求56所述的药物组合物的步骤。
62.一种控制体内活性药物分子释放的方法,所述方法包括将根据权利要求1至50中任一项所述的重组蛋白、根据权利要求51所述的核酸或根据权利要求56所述的药物组合物施用于有需要的受试者。
63.根据权利要求59至62中任一项所述的方法,其中所述受试者是人。
64.一种控制药物分子的生物活性的方法,所述方法包括将根据权利要求1至6、13至18和38至40中任一项所述的结合部分与根据权利要求19至37中任一项所述的药物分子用包含蛋白酶切割位点的肽接头连接起来,以形成重组蛋白,并将所述重组蛋白施用于有需要的患者,其中所述蛋白酶切割位点被肿瘤组织中存在的蛋白酶识别。
65.根据权利要求64所述的方法,其中所述药物分子的所述生物活性是所述药物分子与生物靶标的结合。
66.根据权利要求64所述的方法,其中所述药物分子的所述生物活性是酶活性。
67.一种对药物分子具有结合特异性的结合部分,其中当通过肽接头与所述药物分子连接时,所述结合部分抑制所述药物分子的生物活性。
68.根据权利要求67所述的结合部分,其中所述结合部分与所述药物分子的结合形成可逆地抑制所述药物分子的生物活性的复合物。
69.根据权利要求67或68中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分是所述药物分子的抗独特型结合物。
70.根据权利要求67或69中任一项所述的结合部分,其中所述药物分子的所述生物活性是所述药物分子与生物靶标的结合。
71.根据权利要求67至69中任一项所述的结合部分,其中所述药物分子的所述生物活性是酶活性。
72.根据权利要求67至71中任一项所述的结合部分,所述结合部分对所述药物分子具有小于约1μm,诸如小于约1μm、小于约500nm、小于约250nm、小于约100nm或小于约50nm的结合亲和力(kd)。
73.根据权利要求67至72中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分以约1μm与约10pm之间,诸如约1μm与约10pm之间、约1μm与约20pm之间、约1μm与约50pm之间或约1μm与约100pm之间的离解常数(kd)结合所述药物分子。
74.根据权利要求72或73所述的结合部分,其中所述解离常数(kd)是在磷酸盐缓冲盐水(pbs)中测量的。
75.根据权利要求67至74中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分包含抗体、替代性支架或多肽。
76.根据权利要求67至75中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分包含免疫球蛋白分子或其片段。
77.根据权利要求67至76中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分包含非免疫球蛋白分子。
78.根据权利要求67至77中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分包含衍生自单克隆抗体、多克隆抗体、重组抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化抗体、单结构域抗体、重链可变结构域(vh)、轻链可变结构域(vl)或可变结构域(vhh)的抗原结合结构域。
79.根据权利要求67至78中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分包含抗原结合结构域,所述抗原结合结构域衍生自以下项或与以下项相关:阿德耐汀、单抗体、亲和体、阿菲林、阿菲默、适体、阿非汀、α抗体、抗运载蛋白、重复蛋白结构域、犰狳重复结构域、阿去默、阿维默、锚蛋白重复结构域、非诺莫、打结素、库尼兹结构域或t细胞受体(tcr)。
80.根据权利要求67至79中任一项所述的结合部分,其中所述结合部分包含经设计的锚蛋白重复结构域。
81.根据权利要求80所述的结合部分,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域包含锚蛋白重复模块,所述锚蛋白重复模块包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:(1)seq id no:45至64,以及(2)其中seq id no:45至64中的任一者中的至多9个氨基酸被其他氨基酸取代的序列。
82.根据权利要求80或81中任一项所述的结合部分,其中所述经设计的锚蛋白重复结构域包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:(1)seqid no:1至12,以及(2)与seq id no:1至12中的任一者具有至少85%氨基酸序列同一性的序列。
83.一种核酸,所述核酸编码根据权利要求67至82中任一项所述的结合部分。
84.一种核酸,所述核酸编码根据权利要求80至82中任一项所述的经设计的锚蛋白重复结构域。
85.一种宿主细胞,所述宿主细胞包含根据权利要求83或84所述的核酸分子。
86.一种制备根据权利要求67至82中任一项所述的结合部分的方法,所述方法包括在其中表达所述结合部分的条件下培养根据权利要求85所述的宿主细胞。
87.根据权利要求86所述的方法,其中所述宿主细胞是原核宿主细胞。
88.根据权利要求86所述的方法,其中所述宿主细胞是真核宿主细胞。
89.一种药物组合物,所述药物组合物包含根据权利要求67至82中任一项所述的结合部分或根据权利要求83和84中任一项所述的核酸,并且另外包含药学上可接受的载剂或赋形剂。
90.根据权利要求67至82中任一项所述的结合部分、根据权利要求83和84中任一项所述的核酸或根据权利要求89所述的药物组合物,所述结合部分、所述核酸或所述药物组合物在疗法中使用。
91.一种治疗方法,所述方法包括向有需要的受试者施用根据权利要求67至82中任一项所述的结合部分、根据权利要求83和84中任一项所述的核酸或根据权利要求89所述的药物组合物的步骤。